小鼠白血病模型的建立及应用

利用实验动物白血病进行白血病的病因学、发病学和实验治疗研究,是白血病研究的一个重要方面,通过比较研究为揭示人类白血病的病因、发病机制以及指导临床治疗发挥了很大的作用。小鼠与人类在遗传学、病理学、生物学许多特性方面相似,是白血病研究的理想动物模型,这主要因为小鼠具备     

小鼠白血病模型的建立及应用

利用实验动物白血病进行自血病的病因学、发病学和实验治疗研究，是白血病研究的一个重要方面，通过比较研究为揭示人类白血病的病因、发病机制以及指导临床治疗发挥了很大的作用。小鼠与人类在遗传学、病理学、生物学许多特性方面相似，是白血病研究的理想动物模型，这主要因为小鼠具备与人类相似的造血特点，人类血液系统的髓系、淋巴系等恶性肿瘤均可在小鼠身上获得相应的模型供研究。用小鼠做实验有许多优点，如小鼠易饲养，     

替尼泊苷为主的联合方案治疗难治性复发性急性白血病的疗效及多药耐药基因的表达

用替尼泊苷（威猛，ＶＭ－２６）为主的联合方案治疗了３０例难治性复发性急性白血病并用链亲和素胶体金原位杂交（ＩＳＨ－ＳＡＧ）研究了多药耐药基因（ｍｄｒ－１）表达对疗效的影响。３０例病人中完全缓解１５例（ＣＲ），部分缓解（ＰＲ）５例，ＣＲ率５０．０％，有效率６６．７％。２１例检测了ｍｄｒ－１基因表达，其中ｍｄｒ－１阳性者７１．４％，阴性者２８．６％。ｍｄｒ－１阳性组ＣＲ率２６．７％，阴性组ＣＲ率８３．３％（Ｐ＜０．０５）。１５例ｍｄｒ－１基因阳性病人中，加用环孢素Ａ逆转治疗者的ＣＲ率５０％，未用逆转治疗者的ＣＲ率１２．５％。     

昆明-无毛小鼠生物学特性的研究

目的 观察新品系昆明-无毛小鼠在正常、照射及接种肿瘤情况下的生物学指标。 方法 ① 测定正常昆明小鼠和正常昆明-无毛小鼠的各项生理指标;②将昆明小鼠和昆明-无毛小鼠同时接种上肿瘤（肝癌H22、白血病L1210）,观察其生长情况;③昆明小鼠和昆明-无毛小鼠接受137Cs源γ射线照射后,观察白细胞、胸腺系数、脾系数等各项生理指标。 结果 昆明小鼠与昆明-无毛小鼠正常指标之间无显著差异,只是昆明-无毛小鼠的胸腺略小一些;昆明-无毛小鼠和昆明小鼠接种上两种肿瘤后,肿瘤生长情况均较好;昆明小鼠和昆明-无毛小鼠接受137Cs源γ射线照射后,白细胞计数、胸腺系数、脾系数等各项生理指标均明显下降。 结论 作为纯系小鼠的昆明-无毛小鼠具备昆明小鼠的生物学特性,可应用于科学实验研究。     

半月板纤维软骨细胞接种脱钙松质骨支架构建组织工程半月板的方法选择

目的:探讨半月板纤维软骨细胞(MFCs)接种脱钙松质骨(DCB)支架的最佳接种方法。方法:实验分静滴法、注射法、离心法、负压法等4组。取兔MFCs,采用上述4种方法对孔隙率为80%、平均孔径为268μm的DCB支架进行细胞接种。Live/Dead染色检测其细胞活性,并通过软件分析其细胞分布情况。CCK-8法和Hoechst 33258法检测支架内MFCs增殖情况和支架内DNA含量。结果:通过Live/Dead染色显示,离心法接种细胞后其存活率优于其他3组(P<0.05);细胞分布均匀,由浅至深各层细胞比例无明显统计学差异(P>0.05);1~5天细胞增殖能力优于其他3组(P<0.05),14~21天支架DNA含量亦优于其他3组(P<0.05)。结论:离心法可以明显提高MFCs在DCB上的细胞分布和细胞增殖能力,是一种简单、高效的,利于组织工程半月板(TEM)构建的接种方法。     

一种新的建立烫伤模型的简易方法

建立标准的烧／烫伤动物模型是现代烧伤外科领域从事科学研究所必需的实验手段，有关烧／烫伤动物模型的文献报道很多，但常存在烧／烫伤面积与深度不易控制，方法复杂而不规范及重复性差等不足。这些问题长期影响着烧／烫伤的研究结果。为了解决上述缺陷，寻求较为理想的...     

儿童急性淋巴细胞性白血病治疗后骨密度的变化

骨病是急性淋巴细胞白血病(ALL)治疗后并发症之一.本研究对32例ALL治疗前和治疗6月后骨密度变化和放射学改变进行了观察,现报告如下. 1 方法 从2004年开始连续收集ALL初治病例,并随访6月.此前接受7d以上化疗的患儿或复发患儿不纳入本试验.     

CD40／CD40L在慢性淋巴细胞白血病治疗中的生物学意义

慢性淋巴细胞白血病（chronic lymphocytic leukemia．CLL）是一种主要源于B淋巴细胞的低度恶性小淋巴细胞疾病，其特征是成熟的小淋巴细胞在外周血、骨髓、淋巴结和脾脏中累积。大量研究表明．CLL细胞和其他B细胞恶性肿瘤一样．不能表达或弱表达共刺激分子，以致不能有效地递呈抗原及激发T细胞抗肿瘤的免疫反应，使得肿瘤细胞逃避免疫监视并不断增殖。     

小鼠胚胎成纤维细胞复制性衰老模型的构建及衰老溶酶体功能检测

目的 构建小鼠胚胎成纤维细胞（MEF）复制性衰老模型,检测衰老溶酶体相关功能改变,为衰老相关溶酶体疾病提供有效的细胞模型。方法 通过酶消化法分离提取MEF,体外连续传代培养构建MEF复制性衰老模型,实时定量PCR(qPCR)检测衰老标志物p16和p21,衰老相关β-半乳糖苷酶（SA-β-gal）染色方法进一步验证衰老状态;通过溶酶体探针类染料LysoTracker Red DND-99探针及LysoSensor Yellow/Blue DND-160双激发探针追踪酸性溶酶体定性检测溶酶体酸碱性及定量检测溶酶体pH值;通过偶联自淬BODIPY?染料的牛血清白蛋白（DQ-BSA）检测衰老溶酶体的降解能力。结果 qPCR和SA-β-gal染色结果显示,MEF复制性衰老模型构建成功。与年轻P3代MEF相比,衰老P9代MEF溶酶体的酸性明显丧失,差异有统计学意义（P<0.0001）,衰老P9代MEF溶酶体的降解能力明显降低（P<0.05）。结论 成功构建MEF复制性衰老细胞模型,并证明衰老MEF溶酶体的酸性丧失以及降解能力下降。     

顺铂诱发L1210亲本细胞株和耐药细胞株DNA链间交联效应

目的肿瘤细胞的耐药性是临床肿瘤化疗失败的主要原因之一,本研究的主要目的是探索肿瘤细胞的耐药机制.方法应用微孔滤膜碱洗脱技术检测顺铂诱发小鼠淋巴细胞白血病L1210亲本(Parental,Par)细胞株和耐顺铂(Resistant,Res)细胞株DNA链间交联效应.结果顺铂是细胞DNA交联剂,将顺铂40μmol·L-1与Par细胞作用1h后去除药物,然后间隔不同时间检测所诱发的DNA链间交联,交联高峰为去除药物后12h,随后DNA链间交联逐步下降.选择去除药物后12h,观察Par和Res细胞与顺铂20、30、40、60和100μmol·L-1作用1h后所诱发DNA链间交联指数(DNA-Interstrand Crosslink Index,ISCI),发现Par和Res细胞ISCI与顺铂均具有剂量依赖性,且剂量大于40μmol·L-1时,二者之间的ISCI差异显著.结论 Res细胞耐药的主要原因是ISC降低.     

兔肝癌改良接种模型的生长特性研究

目的通过改良接种方式建立兔肝癌模型,分析并观察该肿瘤的生长特性。方法经肝包膜植入瘤组织块(约106～108个瘤细胞)接种于20只兔的肝左叶,建立兔肝癌模型。观察:①肿瘤在实验兔中生长7、10、14、17和21d时的体积(B超测),并计算肿瘤生长率。②大体及光镜下观察瘤组织形态特征。结果瘤体呈指数性生长,在接种17d后生长迅速。组织病理表明该瘤在肝组织中浸润式生长,肿瘤体积增长快于直径增长,其性状与VX2鳞状细胞癌特征相似。结论瘤块种植是建立兔肝癌模型的首选方式,该模型是肝癌的基础及临床的理想动物模型。     

兔VX2肺癌模型的建立及评价

目的 探讨肺内注入组织块悬液建立兔VX2肺癌模型的方法 ,并与细胞悬液注入法建立的模型进行比较.方法 50只新西兰白兔随机分为组织块悬液组和细胞悬液组,每组25只,分别将VX2肿瘤组织块悬液和细胞悬液注入兔右肺下叶内.利用CT扫描观察肿瘤生长和胸腔内转移情况,同时观察动物的一般情况.结果 两种方法 建立的兔VX2肺癌模型组织学表现与荷瘤种兔相同.组织块悬液组和细胞悬液组的接种成功率分别为100%和48%(P＜0.01),胸壁种植率分别为4%和20%(P＜0.01),从发现肿瘤生长到出现转移征象的时间间隔分别为9.0±1.8天和4.0±2.0天(P＜0.01),动物自然存活时间分别为32.0±3.4天和30.0±6.5天(P＞0.05).结论 采用组织块悬液肺内注入法建立兔VX2肺癌模型方法 简便,接种成功率高,胸壁种植率低,出现转移晚,是建立兔VX2肺癌模型的理想方法 .     

CB6F1小鼠急性粒单核细胞白血病M4(AML-M4)模型的建立及鉴定

目的 建立CB6F1小鼠急性粒单核细胞白血病M4(AML-M4)模型并进行鉴定.方法 取CB6F1小鼠,经静脉注射小鼠粒单核细胞白血病WEHI-3细胞,观察不同数量(1×106、2×106、5×106、1×107个)细胞接种与小鼠生存时间的相关性.取接种1×106个细胞的小鼠为研究对象,动态观察其发病情况并在接种后每周...     

人肝原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位移植模型的建立及生物学特性的研究

目的为探讨肝原发性恶性淋巴瘤发病机制和为实验治疗提供动物模型。方法采用人肝原发性恶性淋巴瘤术中新鲜组织块植入裸小鼠肝实质内，观察原位移植成瘤率和移植瘤的侵袭、转移，并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、血清学（AFP、乙型肝炎HBsAg、LDH）、染色体核型和流式细胞仪分析。结果在裸小鼠体内建成了一株人肝原发性恶性淋巴瘤原位移植模型（命名为HLBL-0102）。移植瘤的病理组织学为肝原发性（非霍奇金B细胞性）恶性淋巴瘤，免疫组织化学显示，CD19、CD20、CIN5RO、CD79a阳性，CD3、CD7阴性，血清学AFP阴性，HBsAg、HBsAb、HBeAb及HBcAb均为阳性，LDH 1267．5U／L。染色体众数范围55-59条；移植瘤细胞DI值1．57～1．61，均为异倍体。目前该瘤株在裸鼠体内生长3年，已经传至37代，共移植裸鼠283只；肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%。人肝原发性恶性淋巴瘤在裸鼠肝内自主侵袭性生长，瘤细胞侵入并破坏临近肝组织和门脉区内胆管及静脉．无其他组织、器官侵犯及远处淋巴结累及。原位移植瘤组织经病理学和超微结构观察，流式细胞仪DNA含量测定及染色体核型的分析，结果表明与来源人肝原发性恶性淋巴瘤细胞相一致。结论HLBL-0102是首次建立成功的人肝原发性恶性淋巴瘤裸鼠原位移植模型，完整地模拟了人肝原发性恶性淋巴瘤患者的临床过程，为研究肝原发性恶性淋巴瘤生物学和实验治疗提供了理想的动物模型。     

大鼠广泛肝切除术后门静脉高压所致肝衰竭模型的建立

 目的 建立广泛肝切除术后门静脉高压所致急性肝衰竭的动物模型.方法 雄性SD大鼠60只,随机分为假手术组、70%肝切除组、85%肝切除组和90%肝切除组.观察各组术后肝功能衰竭、生存率、门静脉压力和组织学改变.结果 肝切除各组在肝功能衰竭发生率、生存率及门静脉压力改变上差异有统计学意义.结论 85%肝切除组具有的肝功能衰竭的高发病率、高病死率以及一定的自愈率,使其成为合适的外科急性肝功能衰竭模型.     

放射性肠损伤模型及其评价研究进展

辐射诱导的肠损伤是放疗造成的严重不良影响之一,可导致肠道局部缺血、纤维化、溃疡、肠狭窄和下消化道出血等。放疗引起的肠损伤的复杂性导致放射性肠损伤模型和研究评价指标也多种多样。笔者综述了近年来的放射性肠损伤模型及对放射性肠损伤的评价标准和研究方案,为今后的科学研究提供可靠的参考依据。     

颈动脉分叉部动脉瘤模型的建立

目的探讨建立犬颈动脉分叉部动脉瘤模型的可行性。方法建立18只犬新的颈总动脉(CCA)分叉部动脉瘤模型,随机分为分叉部顶端弹性蛋白酶处理组(实验组,n=9)和生理盐水处理组(对照组,n=9)。术后即刻、12周和24周分别行血管造影观察动脉瘤顶端形态变化,术后12周和24周分别行组织病理学分析。结果血管造影显示实验组中5只模型动脉分叉顶部观察到新生动脉瘤形成,平均直径(3.2±0.4)mm,对照组中所有模型分叉部顶端均未观察到有新生动脉瘤形成。实验组中新生动脉瘤在随访过程中未见到动脉瘤破裂。组织病理学分析显示实验组中分叉部顶端动脉瘤表现为内弹力膜不连续、弹力纤维断裂、肌层变薄、平滑肌细胞减少(与对照组相比,P<0.001)。结论犬重建颈动脉分叉顶端经弹力酶消化所致动脉壁退化可引起新生动脉瘤形成。     

大鼠食管支架置入术后再狭窄模型构建及观察

目的 探讨大鼠食管支架置入及术后食管良性增生性狭窄模型构建的可行性和安全性.方法 实验使用定制的自膨式金属直筒支架(直径5 mm,长15 mm),其中部两侧各有一外突倒刺用作固定,防止滑脱移位.12只健康Sprague-Dawley大鼠随机分成A组(空白对照组)和B组(支架置入组),每组6只;B组大鼠食管内置入支架,分别于置入即刻、1周、4周作食管造影.4周后处死所有大鼠,取A组正常食管组织及B组支架部位食管组织作大体形态、光镜等病理学分析.结果 B组食管内支架置人均获成功,术后即刻、1周、4周复查造影均未发现食管内支架移位,手术及随访期间无严重并发症发生.与A组相比,4周后B组复查造影显示支架段食管增生导致食管狭窄,取出支架部位食管段肉眼见管腔明显狭窄,光镜下呈典型良性增生样表现.结论 采用大鼠构建食管支架置入后再狭窄模型安全、可行,带倒刺食管支架能够明显降低支架置人后移位发生率.