口腔白斑患者血清白介素-18水平表达的分析

目的:探讨口腔白斑(leukoplakia)患者血清白介素- 18 (inteleakin- 18,IL-18)的水平及其临床意义.方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定48例白斑患者、1例癌变患者和48例健康志愿者的血清IL-18水平.结果:白斑组血清IL-18表达水平为(4.27±2.73) pg/mL,正常对照组为(2.06±0.39) pg/mL,白斑组血清IL-18水平均较正常对照组明显增高(P＜0.05).癌变患者血清IL-18手术治疗后明显降低.结论:IL-18在口腔白斑的发生发展过程中起重要作用；白斑患者的血清检测是诊断口腔白斑的敏感手段.     

血脂康胶囊对高脂血症的疗效及对白介素-6和白介素-18的影响研究

目的观察血脂康胶囊佐治高脂血症的疗效及对血清中白介素-6(IL-6)和白介素-18(IL-18)的影响,探讨其临床意义。方法选取120例高脂血症的患者,随机分为观察组和对照组。对照组(60例)应用常规治疗;观察组(60例)在对照组治疗的基础上加用和血脂康胶囊进行治疗,共观察16周。观察两组患者的疗效及对血清中IL-6和IL-18的影响。结果观察组的疗效明显优于对照组,观察组与对照组患者在治疗后血清中IL-6和IL-18的减少值明显大于对照组。结论血脂康胶囊对高脂血症患者的疗效明显,并能对血清中IL-6和IL-18的含量有显著的降低作用,临床可以应用。     

哮喘患者血浆白细胞介素-18水平测定及其临床意义的研究

目的探讨白细胞介素(IL)-18在支气管哮喘发病机制中的作用。方法收集30例哮喘患者和15名健康对照者的血浆,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IL-18、IL-12和IL-13的水平。结果哮喘组血浆IL-18、IL-13水平明显高于对照组,IL-12水平则显著低于对照组,差异有显著性(P<0.01)。哮喘组IL-18和IL-13呈显著正相关(P<0.05)。结论IL-18可能参与了哮喘的发病过程,它通过调节Th1/Th2的活性及细胞因子的产生,在哮喘的发病过程中发挥作用。     

急性胰腺炎患者白细胞介素18和白细胞介素15的变化意义

目的探讨白细胞介素18(IL-18)和白细胞介素15(IL-15)在急性胰腺炎(AP)发病机制中的作用。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测19例轻型急性胰腺炎(MAP)患者和7例重症急性胰腺炎(SAP)患者血清IL-18和IL-15的浓度,分析它们之间的相关性。结果血清IL-18和IL-15的表达在SAP组明显高于MAP组,两组中存在显著差异[IL-18(78.32±15.45)ng/L vs(28.21±13.18)ng/L,P<0.01;IL-15(42.17±19.15)ng/L vs(5.88±2.01)ng/L,P<0.01]。血清IL-15和IL-18在MAP组及SAP组均呈显著正相关(P<0.01)。结论血清IL-18和IL-15参与了急性胰腺炎的炎症反应过程,可能是预测急性胰腺炎严重程度的指标。     

脉炎消口服液对人脐动脉平滑肌细胞增殖的影响及其机制

目的:探讨脉炎消口服液在体外对人脐动脉平滑肌细胞(HUASMCs)增殖的影响及其作用机制。方法:体外组织贴块培养HUASMCs,并传2³代,免疫组化法进行鉴定;采用MTT法观察不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞增殖的抑制作用;采用RT-PCR法检测不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞IL-6 mRNA表达水平的影响。结果:组织块贴壁法原代培养HUASMCs,传3代后,阳性细胞率为90%;脉炎消口服液对HUASMCs的增殖具有明显的抑制作用,且体积分数在一定范围内(0.4%3代,免疫组化法进行鉴定;采用MTT法观察不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞增殖的抑制作用;采用RT-PCR法检测不同体积分数脉炎消口服液(0.4%、4%、40%)对HUASMCs细胞IL-6 mRNA表达水平的影响。结果:组织块贴壁法原代培养HUASMCs,传3代后,阳性细胞率为90%;脉炎消口服液对HUASMCs的增殖具有明显的抑制作用,且体积分数在一定范围内(0.4%⁴0%)呈浓度依赖性。结论:脉炎消口服液抑制HUASMCs增殖的作用是通过下调细胞IL-6mRNA的表达水平而实现的。     

五步蛇毒蛋白C激活物对人脐静脉血管内皮细胞组织因子表达的影响

目的观察五步蛇毒蛋白C激活物(PCA)对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的保护作用,并分析其对组织因子(TF)表达的影响。方法常规培养HUVEC,实验分为空白对照组、脂多糖(LPS)组、PCA(0.625、1.25、2.50μg·mL~(-1))组和PCA+LPS组。MTT法检测HUVEC活性,ELISA检测HUVEC培养上清中TF分泌量,免疫荧光染色检测核转录因子(NF)-κB是否被激活-核转运。结果 PCA对HUVEC活性和形态无显著影响(P>0.05)。与空白对照组,LPS组细胞活性显著下降(P<0.01);而LPS+PCA组细胞活性显著高于LPS组(P<0.05)。LPS组TF表达量和NF-κB表达均显著高于空白对照组(P<0.01);LPS+PCA组与LPS组比较TF表达量和NF-κB表达降低(P<0.01)。结论 PCA可降低HUVEC分泌TF,减少LPS对HUVEC的损伤作用,其可能与抑制NF-κB通路的活化有关。     

IL-6、GATA6在大鼠肺动脉平滑肌细胞中的表达及对 细胞增殖的影响

目的　探讨白细胞介素（IL）-6、转录因子GATA6在血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）诱导大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖中的表达及作用。方法　从8周龄SD大鼠中分离肺动脉,采用Ⅰ型胶原酶消化法原代培养PASMCs;采用倒置显微镜观察和免疫荧光染色鉴定细胞;采用CCK-8检测不同剂量（0、15、30、45、60、75 μg/L）PDGF-BB分别作用12、24、48 h对PASMCs增殖能力的影响;采用流式细胞术检测30 μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖48 h的细胞周期;应用qPCR和Western blot技术检测30 μg/L PDGF-BB诱导细胞增殖12、24、48 h后IL-6和GATA6 mRNA及蛋白的表达水平。结果　15~60 μg/L的PDGF-BB诱导24 h、48 h后PASMCs增殖显著,其中以30 μg/L诱导48 h效果最佳（P＜0.05）;流式周期结果表明,PDGF-BB组G1期的百分比较对照组降低,而S期和G2期百分比增高（P＜0.01）。PDGF-BB能够诱导细胞增加IL-6 mRNA和蛋白的分泌并降低GATA6 mRNA和蛋白表达水平。相关性分析提示PASMCs的增殖与IL-6 mRNA表达呈正相关,与GATA6 mRNA表达呈负相关（r分别为0.538和-0.647,均P＜0.05）;IL-6与GATA6的表达呈负相关（r=-0.705,P＜0.01）。结论　PDGF-BB诱导体外培养的PASMCs增殖;IL-6、GATA6参与了PDGF-BB诱导PASMCs增殖的发生和发展;PASMC增殖与IL-6 mRNA表达上调和GATA6 mRNA表达下调有关。     

重组人白细胞介素-18表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

目的克隆人白细胞介素 18(IL 18)基因 ,构建重组表达质粒 ,在大肠杆菌中表达重组人白细胞介素 18(rhIL 18) ,并对其生物学活性进行初步鉴定。方法利用RT PCR方法从人外周血单个核细胞中扩增出成熟肽编码区cDNA(496bp) ,克隆到表达载体pBV2 2 0质粒中 ,Western印迹证实rhIL 18在大肠杆菌DH5α中获得表达。经分子筛层析法初步纯化后 ,用溴化四唑蓝 (MTT)比色法测定复性的rhIL 18的体外活性。结果rhIL 18表达量占总菌体蛋白的 2 7%左右 ,经纯化得到纯度达 96 %以上的rhIL 18。实验显示rhIL 18协同IL 2 (10U/ml)诱导NK细胞细胞毒活性。结论rhIL 18具有较好的生物学功能 ,应予进一步的研究     

糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞MMP-2表达的影响

目的：探讨糖基化终产物对大鼠主动脉平滑肌细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）表达的影响。方法：采用组织块贴壁法培养大鼠主动脉平滑肌细胞。将50mmol／L葡萄糖孵育的糖基化终产物修饰牛血清白蛋白稀释成不同浓度分别干预24h和用同一浓度的糖基化终产物修饰牛血清白蛋白（浓度为200mg／L）分别干预0、4、8、16、24、48、72h，逆转录聚合酶链反应检测细胞中的MMP-2 mRNA表达水平，明胶酶图分析方法观察培养上清液中MMP-2活性。结果：随糖基化终产物修饰牛血清白蛋白干预浓度升高，MMP-2 mRNA表达增加（P〈0．01），以糖基化终产物修饰牛血清白蛋白（200mg／L）对平滑肌细胞干预4h时MMP-2 mRNA表达已升高，24h时最高，以后仍维持较高水平，与未干预组相比差异有统计学意义（P〈0．01），MMP-2降解明胶活性随着糖基化终产物修饰牛血清白蛋白干预浓度升高而增强（P〈0．05）。结论：糖基化终产物可促进大鼠主动脉平滑肌细胞MMP-2的表达。     

血清白细胞介素及肿瘤坏死因子水平与急性脑梗死关系的研究

目的 探讨急性脑梗死患者血清白细胞介素6(IL-6)、IL-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平的变化及与急性脑梗死的关系.方法 选择急性脑梗死患者90例,按梗死体积及神经功能缺损程度进行分组,采用酶联免疫吸附法检测血清IL-6、IL-8和TNF-α水平并与30例对照组比较.结果 脑梗死组IL-6、IL-8和TNF-α水平[(158.4±25.8)ng/L、(168.3±18.8)ng/L、(2.9±1.0)μg/L]明显高于对照组[(68.8±5.8)ng/L、(62.3±7.5)ng/L、(0.8±0.2)μg/L],2组比较差异有统计学意义(P＜0.05).小梗死组、中梗死组、大梗死组患者血清IL-6、IL-8和TNF-α水平依次逐级升高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05);轻型组、中型组、重型组患者血清IL-6、IL-8和TNF-α水平逐渐升高,组间比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论 血清IL-6、IL-8和TNF-α水平与脑梗死体积及临床神经功能缺损程度密切相关,检测IL-6、IL-8和TNF-α有助于急性脑梗死患者病情及预后的判断.

Abstract：

Objective To investigate the relationship among the serum levels of IL-6,IL-8,TNF-α and acute cerebral infarction (ACI). Methods Ninty patients with ACI were divided into different groups according to the size of infarction and clinical neurologic impairment degree score. The serum level of IL-6,IL-8 and TNF-αwere detected by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). Results The serum IL-6,IL-8 and TNF-α levels in the patients with ACI within 72 hours after the onset were significantly higher than those in the healthy subjects (P＜0.05). The serum levels of IL-6,IL-8 and TNF-α increased with the volume of infarction and the differences between the groups were significant (all P＜0.05). The serum levels of IL-6,IL-8 and TNF-α increased with the clinical neurologic impairment degree score and the differences among the groups were significant (all P＜0.05).Conclusions The serum levels of IL-6,IL-8 and TNF-α increase closely with the volume of infarction and the clinical neurologic impairment degree score,which suggests that IL-6,IL-8 and TNF-α may play an important role in the pathogenesis of ACI,and probably be a prognostic factor of ACI.     

反义寡核苷酸抑制血管平滑肌细胞bFGF基因表达

目的：探讨转染反义脱氧寡核苷酸（AODN）对血管平滑肌细胞（VSMCs）碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）基因表达的影响机制。方法：使用原位杂交和免疫组化技术检测体外培养的VSMCs中bFGF mRNA和蛋白表达；利用脂质体分别将设计合成浓度为5μmol／L反义（反义组）、正义（正义组）及随机（随机组）脱氧寡核苷酸导入体外培养的VSMCs；应用逆转录PCR和Western Blot半定量测定及计算机图像分析的方法．观测寡核苷酸对bFGF基因表达的影响。结果：体外培养的大鼠VSMCs均有bFGF mRNA和蛋白表达，反义bFGF寡核苷酸作用于VSMCs后1-5d，bFGF mRNA表达和蛋白表达均明显减弱，反义组与对照组比较。mRNA、蛋白表达在第1～5d表达差异均有统计学意义；而正义、随机组无此效应，与单纯脂质体和空白对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：反义bFGF寡核苷酸对血管平滑肌细胞bFGF基因表达的抑制作用具有序列特异性。     

胰岛素对平滑肌细胞产生一氧化氮的影响

目的：探讨胰岛素和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）对人脐动脉平滑肌细胞产生一氧化氮（NO）和超氧阴离子（O^-2）的影响.方法：不同浓度的AngⅡ和胰岛素加入体外培养的人脐动脉平滑肌细胞,分别测定细胞培养液中一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）活性,NO、环鸟苷磷酸（cGMP）和O^-2浓度.结果：胰岛素（10,100,1 000mU/L）使平滑肌细胞NOS活性升高,NO、cGMP产生增加,对SOD活性和O^-2无影响;1.0 nmol/LAngⅡ使NOS活性下降,NO、cGMP产生减少;0.1,0.5,1.0 nmol/L AngⅡ使SOD活性下降,O^-2水平升高;胰岛素和AngⅡ同时存在时NOS活性下降,NO和cGMP产生减少,SOD活性下降,O^-2水平升高;氯沙坦（losartan）可以改善AngⅡ引起的NOS、SOD活性下降,NO、cGMP产生减少,O^-2水平升高.结论：胰岛素使平滑肌细胞NO产生增加,高浓度AngⅡ使NO产生减少,O^-2水平升高,且可以被Losartan阻断,胰岛素和AngⅡ同时存在时平滑肌细胞NO产生减少,O^-2水平升高.     

甲基莲心碱对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖及表型调节的影响

目的研究甲基莲心碱对人脐静脉平滑肌细胞增殖及表型调节的影响。方法以0.1,0.5,1.0,5.0μmol·L-1甲基莲心碱处理平滑肌细胞,采用MTT法和流式细胞术观察甲基莲心碱对人脐静脉血管平滑肌细胞增殖的影响。用免疫印迹法检测收缩型平滑肌细胞特异性标志物SM1,calponin 1和α-actin蛋白的表达。结果甲基莲心碱（0.1~5.0μmol·L-1）处理12,24,48 h后,人脐静脉血管平滑肌细胞的增殖具有明显的抑制作用,并具有剂量依赖关系和时间依赖关系。在缺乏甲基莲心碱的干预下,血管平滑肌细胞SM1,calponin 1和α-actin蛋白表达减少,在用0.5,5.0μmol·L-1甲基莲心碱处理48 h后,可显著逆转SM1,calponin 1和α-actin蛋白表达的减少,且具有剂量依赖性。结论甲基莲心碱具有抑制血管平滑肌细胞增殖及表型转化的作用,可用于防治动脉粥样硬化和再狭窄。     

小檗胺对血管平滑肌细胞钙动力学影响

本文以Fluo-3/AM 荧光技术和激光扫描共聚焦显微镜检查法, 研究小檗胺 (Ber) 对培养家兔胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMC)内游离钙 ([Ca 2 ]i ) 的影响结果表明：在胞外钙 ([Ca 2 ]o ) 为?.0 mmol·L -1 条件下，Ber 抑制60 mmol·L -1 KCL1 mmol·L -1 哇巴因Ouabain 30 mmol·L -1 去甲肾上腺素 ( NE ) 1 mmol·L -1 5-羟色胺5-HT 和30 mmol·L -1 三磷酸腺苷 (ATP)引起的 [Ca 2 ]i 升高，而且荧光强度达峰时间亦延长。在无胞外钙条件下，Ber 对咖啡因 (Caffeine)引起的[Ca 2 ]i 升高没有作用。结论：Ber 抑制电压依赖性钙通道 (VDCC) 和受体调控性钙通道 (ROCC) 激活引起的外钙内流，对Caffeine 引起的内钙释放没有影响。Ber 可抑制Ouabain 诱导的细胞内钙升高。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠气道平滑肌细胞SERCA表达的影响

目的:探讨吸入布地奈德混悬液对哮喘大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)肌浆网钙-ATP酶(SERCA)表达的影响。方法:按照随机数字分组的方法将大鼠分为正常组、哮喘组及布地奈德干预组,每组8只。哮喘组用卵蛋白雾化吸入法制作哮喘大鼠模型;正常组用PBS代替卵蛋白吸入;布地奈德干预组在卵蛋白吸入后用布地奈德混悬液泵吸干预。各组大鼠ASMC原代培养;实时定量PCR检测SERCA2 mRNA于ASMC中的表达;Western blot检测SERCA2于ASMC中表达。结果:SERCA2 mRNA表达及蛋白水平在哮喘组ASMC中较在正常组中降低,差异有统计学意义(P<0.05)。SERCA2 mRNA表达及蛋白水平在布地奈德干预组ASMC中均较在哮喘组ASMC中增高,差异有统计学意义(P<0.05);而与在正常组ASMC中表达相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:布地奈德有可能通过增加SERCA2表达促进细胞内钙离子储备,从而改善哮喘气道高反应性。     

菟丝子黄酮对去势雌性大鼠血清雌激素水平和血管平滑肌细胞的影响

目的：观察补肾中药菟丝子的有效成分菟丝子黄酮对老年血管的保护作用，并探讨其作用机制。方法：菟丝子经溶剂提取、聚酰胺柱分离得黄酮提取物。SD雌性大鼠随机分成正常对照组，模型对照组，菟丝子黄酮高、低剂量组及阳性对照组。实验动物按分组造模、给药42d后，观察血清中的雌激素水平和主动脉平滑肌细胞凋亡率的变化。结果：菟丝子黄酮能上调去势雌性大鼠血清雌激素水平（P〈0．01），提高其主动脉平滑肌细胞早期凋亡率（P〈0．01）。结论：菟丝子黄酮通过升高雌激素水平和促进主动脉平滑肌细胞凋亡发挥其对老年血管的保护作用。     

PKA和PKG信号通道对平滑肌细胞 Kv亚型1.5表达的影响

目的 研究PKA(蛋白激酶A)和PKG(蛋白激酶G)信号通道对人气道平滑肌细胞(HASMCs)电压依赖延迟整流钾通道(Kv)亚型Kv1.5表达的影响.方法 采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术,观察PKA激活剂8-brom-cAMP和阻断剂Rp-cAMP及PKG激活剂8-brom-cGMP对HASMCsKv1.5 mRNA和蛋白质表达的影响.结果 PKA激活剂8-brom-cAMP显著增强Kv1.5亚型的表达,该效应可被PKA阻断剂Rp-cAMP显著逆转.PKG激活剂8-brom-cGMP显著增强Kv1.5亚型的表达.结论 活化PKA和PKG促进Kv1.5亚型的表达,抑制HASMCs兴奋性.推测可能为这两条信号通道引起HASMCs舒张反应的作用机制之一.