CXCR3阳性自然杀伤细胞在MHV-3诱导暴发性肝炎小鼠组织分布动态变化

目的检测CXC趋化因子受体3(CXCR3)阳性自然杀伤(NK)细胞在3型鼠肝炎病毒诱导的暴发性肝炎小鼠肝脏、脾脏、骨髓及外周血中百分比的动态变化。方法腹腔注射3型鼠肝炎病毒诱导BALB/cJ小鼠暴发性肝炎,利用流式细胞术检测小鼠肝脏、骨髓、外周血及脾脏CXCR3阳性NK细胞百分比的变化。结果肝脏CX-CR3阳性NK细胞百分比在感染后12小时(20.47±1.54%)和24小时(31.53±2.53%)较感染前(14.0±0.25%)均显著升高(P均<0.05),至感染48小时下降至感染前水平;骨髓CXCR3阳性NK细胞百分比随感染时间延长而逐渐减少,由初始水平(25.53±3.50%)的高点至72小时时降至较低水平(1.2±0.17%,P<0.05);脾脏CXCR3阳性NK细胞的百分比在感染后12小时增高(13.63±3.167%),随后下降,至72小时达到较低水平(2.20±0.53%,P<0.05);外周血CXCR3阳性NK细胞的百分比在24小时增高,在72小时下降至感染前水平。结论在MHV-3感染后,CXCR3阳性NK细胞可能逐渐迁移至肝脏,从而在小鼠暴发性肝炎发生发展中发挥重要作用。     

MHV-3诱导暴发性肝炎小鼠肝组织KCNJ15的表达变化

目的研究病毒感染所致的急性肝衰竭模型中离子通道基因KCNJ15表达水平,探讨该疾病模型中KCNJ15的变化及其与疾病进程的关系。方法利用MHV-3病毒诱导的Balb/cJ小鼠暴发型肝炎模型,采用定量PCR和免疫组化技术分别从基因及蛋白水平检测肝脏KCNJ15表达水平,并应用流式细胞术检测肝脏淋巴细胞亚群KCNJ15表达。结果随着MHV-3感染时间的延长,肝组织中KCNJ15表达水平逐渐增高,以感染后72小时最为显著。在肝脏CD4+T细胞,KCNJ15蛋白表达水平于48小时显著升高,达到25.17±7.68%,与0h(3.92±1.33%)相比差异具有统计学意义(P<0.001),随后于72小时回落;肝脏表达KCNJ15的CD8+T细胞比例变化与CD4+T细胞趋势一致,于48h达到37.08±8.73%,与0h(6.98±3.48%)相比有显著差异(P<0.001);而表达KCNJ15的肝脏NK细胞比例则从7.72±1.34%上升到感染后24小时的峰值19.80±4.25%(P<0.001),随后回落。结论肝组织及肝脏淋巴细胞过表达KCNJ15可能参与了MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠免疫诱导的肝脏损伤过程。     

HBV相关慢加急性肝衰竭患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化及其与预后的关系

[目的]探讨HBV相关慢加急性（亚急性）肝衰竭（HBV-ACLF）患者外周血T细胞亚群、NK细胞的变化趋势及其与预后的关系。[方法]选取HBV-ACLF患者46例,慢性乙型肝炎（CHB）患者40例,健康志愿者20例,采用流式细胞仪检测外周血CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数,用SPSS 18.0软件对其进行统计学分析。[结果]HBV-ACLF组外周血CD3＋、CD4＋T细胞、NK细胞计数与慢性乙肝组、健康对照组比较,差异均有统计学意义（P〈0.01）;HBV-ACLF组外周血CD8＋T细胞与健康对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）。HBVACLF患者死亡组中CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞及NK细胞计数均低于存活组,2组CD3＋、CD4＋、CD8＋T细胞比较差异有统计学意义（P〈0.01）。[结论]HBV-ACLF患者存在T细胞亚群失衡和细胞免疫紊乱,提示细胞免疫参与了HBV-ACLF的发病和进展。     

98例HBV相关慢加急性肝衰竭患者的临床特征与分析

目的观察98例乙型肝炎病毒(HBV)相关慢加急性肝衰竭(ACLF)患者不同临床转归的血清生化、凝血指标以及MELD评分的差异。方法回顾性分析2017年1月至2018年12月兰州市第二人民医院收治的HBV-ACLF患者98例,观察其临床特征,分析其不同临床转归与血清生化、凝血指标以及MELD评分的关系。结果好转组与死亡组之间血清前白蛋白(pre-albumin,p-Alb)、CRE、INR与MELD评分差异有统计学意义(t=3.199,P=0.002;t=6.826,P=0.000;t=2.121,P=0.039;t=3.426,P=0.0401)。结论血清p-Alb、CRE、INR、MELD评分与HBV相关慢加急性肝衰竭患者不同临床转归有一定关系。     

HBV感染失代偿期肝硬化并发慢加急性肝衰竭患者的临床特点及预后

目的 探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染失代偿期肝硬化并发慢加急性肝衰竭患者的临床特点及预后影响因素.方法 回顾性分析98例HBV感染失代偿期肝硬化并发慢加急性肝衰竭患者的临床资料,将好转的44例患者分为预后良好组,未愈及恶化的54例患者分为预后不良组.分析慢加急性乙型肝炎肝衰竭发病诱因的构成情况;比较预后良好组和预后不良...     

MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠肝脏表达IL-9免疫细胞的变化

目的研究MHV-3病毒感染所致的暴发性肝炎小鼠肝脏T淋巴细胞亚群胞内细胞因子IL-9表达的变化,以探讨IL-9在该疾病模型中的作用。方法利用MHV-3病毒诱导Balb/cJ小鼠暴发性肝炎模型,采用流式细胞术检测肝脏分泌IL-9的淋巴细胞亚群比例的变化。结果随着MHV-3感染时间的延长,肝脏分泌IL-9的CD4＋T细胞比例由感染前的1.87±1.36%于48小时升高到4.77±0.42%,差异显著（P〈0.05）;而分泌IL-9的CD4-CD8（-DN）T细胞比例则于感染后72小时达峰值7.83±3.30%,显著高于感染前（3.57±1.82,P〈0.05）和24小时时（3.60±0.85,P〈0.05）。结论随着感染时间延长,肝脏分泌IL-9的CD4＋T和CD4-CD8（-DN）T淋巴细胞显著升高,说明IL-9可能参与了MHV-3诱导的暴发性肝炎小鼠免疫诱导的肝脏损伤发病过程。     

乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭患者IL-6的表达及其对预后的影响

目的 分析乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭人群中白细胞介素6(IL-6)的表达及其对于疾病转归的影响.方法 以"十二五"重大专项课题入组的乙型肝炎病毒相关慢加急性肝衰竭754例患者为研究对象,分析IL-6与肝损伤的相关性及其对于4周、48周病死率的影响.结果 IL-6与国际标准化比值、总胆红素、MELD评分呈正相关,相关...     

慢加急性肝衰竭患者凝血功能检测及临床意义

目的探讨凝血功能检测对慢加急性肝衰竭患者肝功能状况及预后判断的价值。方法常规检测慢性肝炎45例,肝硬化45例和慢加急性肝衰竭生存患者32例和死亡患者18例凝血酶原时间（PT）、部分凝血活酶时间（APTT）、凝血酶时间（TI）和纤维蛋白原（Fbg）水平,并与正常对照人群40例进行比较。结果肝硬化和肝衰竭患者PT、APTT、TT和Fbg水平与正常对照比,差异均有显著性（P〈0.01）;肝衰竭所处病期越晚,凝血功能越差。结论肝衰竭患者存在明显的凝血功能障碍,并与肝功能的损害程度密切相关。随着肝功能损害程度的加重,其凝血障碍越来越明显。     

乳酸水平对HBV相关慢加急性肝衰竭患者短期预后的预测价值

目的 本研究旨在评估乳酸对HBV相关慢加急性肝衰竭（HBV-ALCF）患者90 d预后的预测价值。方法 回顾性纳入2017年1月—2021年6月新疆医科大学第一附属医院感染病·肝病中心收治的117例HBV-ACLF患者,根据90 d随访结果分为生存组（n=43）和死亡组（n=74）;收集患者于本院诊断HBV-ACLF后24 h内的血常规、肝肾功能、凝血功能、动脉血气、肝性脑病等并发症,计算ALBI、MELD、MELD-Na、MESO、iMELD、CLIF-C ACLF评分。计量资料符合正态分布的组间比较采用t检验,非正态分布的组间比较采用Mann-Whitney U检验,计数资料组间比较采用χ²检验。采用二元logistic分析乳酸是否为HBV-ACLF患者90 d预后的独立危险因素,Pearson相关分析检验乳酸与感染情况及临床并发症的相关性。绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线）分析乳酸相加于各评分后能否提高现有模型的预测价值,两两比较采用Z检验。结果 死亡组WBC、INR、乳酸均大于生存组,Na小于生存组,差异均有统计学意义（Z值分别为-2.813、-2.85...     

465例HBV感染所致慢加急性肝功能衰竭的临床分析

目的：探讨HBV所致慢加急性肝衰竭（acute-on-chronic-liver failure，ACLF）的诱因和预后。方法将我院1996至2012年收治的465例HBV所致慢加急性肝衰竭患者的临床资料进行比较分析。结果2003至2012年收治HBV-ACLF患者194例，低于1996至2002年收治的271例，而且HBV-ACLF早期患者增多，晚期患者减少；2003至2012年比1996至2002年间内毒素血症、劳累、上消化道出血诱发的HBV-ACLF患者减少，而酒精、药物和HBV变异、再激活、不合理停用核苷类似物等HBV因素诱发的HBV-ACLF患者增多，两组相比差异有统计学意义（P＜0．05）。HBV-ACLF早期患者治愈为47．00％，而晚期为20．41％，差异有统计意义（P＜0．05）。应用拉米夫定治疗HBV-ACLF98例，10^4≤HBVDNA≤10^5拷贝/mL和HBVDNA＞10^5拷贝/mL患者的治愈率分别为68．96％和45．00％，非应用核苷类似物治疗HBV-ACLF179例，其相应治愈率分别为25．44％和18．46％，两组相比差异有统计学意义（P＜0．001）。结论近年来酒精、药物和HBV变异、再激活等病毒因素诱发的HBV-ACLF患者增多，拉米夫定抗病毒治疗可显著改善HBV-ACLF患者的预后，提高其生存率。     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者外周血巨噬细胞极化和TXNIP/NLRP3水平与预后的关系探讨

目的 探讨慢加急性乙型肝炎肝衰竭(HBV-ACLF)患者外周血巨噬细胞极化和外周血单个核细胞(PBMCs)硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平变化。方法 2019年6年～2020年6月我院收治的HBV-ACLF患者57例和慢性乙型肝炎(CHB)患者43例,使用流式细胞仪检测外周血M1/M2型巨噬细胞比率,分离PBMCs,采用实时荧光定量RT-PCR法检测TXNIP、NLRP3和半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)mRNA水平,采用ELISA法检测血清白介素-6(IL)-6、IL-10和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)。结果 HBV-ACLF组M1型巨噬细胞比率和M1/M2细胞比值分别为(3.5±0.4)%和(1.2±0.2),显著高于CHB组【分别为(2.1±0.2)%和(0.6±0.1),P<0.05】,而M2型巨噬细胞比率为(2.5±0.3)%,显著低于CHB组【(4.1±0.4)%,P<0.05】;HBV-ACLF组血清IL-6和TNF-α水平分别为(37.9±4.2)ng/L和(2.3±0.2)pg/mL,显著...     

Hypermethylation of the galectin-3 promoter is associated with poor prognosis of acute-on-chronic hepatitis B liver failure

Background and aimsThe possible role of galectin-3 in acute-on-chronic hepatitis B liver failure (ACHBLF) remains unknown. This study aimed to determine the methylation status of the galectin-3 promoter in patients with ACHBLF and analyze its prognostic value.MethodsThe methylation status of the galectin-3 promoter in patients with ACHBLF, chronic hepatitis B (CHB) and healthy controls (HCs) was determined by methylation-specific polymerase chain reaction (MSP). The galectin-3 mRNA level in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) was detected using real-time polymerase chain reaction (RT-PCR).ResultsThe methylation frequency of the galectin-3 promoter was significantly higher while galectin-3 mRNA was lower in ACHBLF than in CHB and HCs. Galectin-3 promoter methylation was negatively correlated with the mRNA level in ACHBLF. In addition, ACHBLF patients carrying the methylated promoter showed shorter survival time, higher 3-month mortality, and higher model for end-stage liver disease (MELD) score when compared to ACHBLF patients carrying the unmethylated promoter. Moreover, promoter methylation was a better predictor of 3-week mortality than the MELD score in ACHBLF patients.ConclusionOur results suggest that hypermethylation of the galectin-3 promoter might be an early biomarker for predicting disease severity and prognosis in patients with ACHBLF.     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者肝组织树突状细胞特点研究

目的观察慢加急性乙型肝炎肝衰竭（Acute-on-chronic hepatitis B liver failure,ACHBLF）患者外周血和肝组织树突状细胞及其亚群的分布特征。方法选择11例进行肝移植的ACHBLF、10例慢性乙型肝炎患者和5例健康人,取外周血和肝组织,使用流式细胞仪计数外周血单个核细胞（PBMCs）和肝内浸润淋巴细胞（LILs）中浆样树突细胞（plasmacytoid DC,DCs）和髓样树突细胞（myeloid DC,mDCs）的频率,应用polyI：C和CpG2216刺激培养PBMCs和LILs,采用ELISA法检测上清IFN-α、IL-12和IL-10水平;采用免疫组化技术检测肝内pDC和mDC的分布。结果 ACHBLF患者肝内pDCs与外周血pDCs频率具有显著性差异（P〈0.05）,而肝内mDC的频率与外周血之间差异无统计学意义（P〉0.05）;ACLF患者经刺激的PBMCs和LILs能够分泌IFN-α和IL-12,但LILs分泌细胞因子的水平较PBMCs明显降低,而分泌IL-10却较PBMCs明显升高;ACHBLF患者肝组织浸润了大量的pDCs和mDCs。结论 ACHBLF患者肝内浸润大量的DC亚群细胞,并优先分泌IL-10,在发病机制中可能具有局部的免疫调节作用。     

恩替卡韦治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭近期疗效评价

目的探讨恩替卡韦治疗慢加急性乙型肝炎肝衰竭近期疗效。方法 68例慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者被分成治疗组(42例)和对照组(26例),对照组采用常规内科治疗,治疗组在常规内科治疗基础上加用恩替卡韦0.5mg/d,比较两组治疗后血生化指标、凝血酶原活动度、HBV DNA水平、MELD分值变化及病死率。结果在治疗后12周,治疗组总胆红素和HBV DNA分别为89.7±42.5μmol/L和3.16±2.04log10copies/mL,显著低于对照组患者(145.6±64.2μmol/L和6.28±3.95log10copies/mL,P<0.01),凝血酶原活动度和白蛋白分别为48.5±15.6%和34.8±4.8g/L,显著高于对照组(40.5±12.4%和30.2±4.1g/L,P<0.05或P<0.01);治疗组早中期患者MELD分值和病死率分别为17.6±3.5和20.0%,显著低于对照组(22.4±4.1和52.9%,P<0.05或P<0.01),两组晚期患者MELD分值和病死率差异无统计学意义(P>0.05);治疗组有1例HBeAg阴转,1例HBeAg血清学转换,对照组HBVM无变化。结论恩替卡韦能有效抑制HBV复制,改善慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者肝功能,降低早中期患者MELD分值和病死率。尽早抗病毒治疗可提高慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者的生存率。     

“慢加急”乙型肝炎肝功能衰竭患者外周血树突状细胞亚群的特点及其临床意义

目的慢性乙型肝炎患者体内树突状细胞（DC）功能缺陷是导致宿主特异性免疫反应低下和病毒感染慢性化的主要因素。然而,目前还不清楚＂慢加急＂乙型肝炎肝功能衰竭患者体内的DC特点及其临床意义。方法在知情同意的基础上,本研究入组40例＂慢加急＂乙型肝炎肝功能衰竭患者,同时入组20例健康人和20例慢性乙型肝炎患者作为对照,调查上述人群外周血DC亚群的频率、功能及其临床意义。结果相对于健康人和慢性肝炎患者,＂慢加急＂乙型肝炎肝功能衰竭患者外周血浆样树突细胞（pDCs）频率明显降低,并且pDCs产生α干扰素（IFNα-）的能力也显著下降。进一步分析表明,pDC分泌IFNα-的能力在＂慢加急＂乙型肝炎肝功能衰竭死亡患者明显低于存活患者,并与肝功能衰竭严重程度呈显著负相关。结论 ＂慢加急＂乙型肝炎肝功能衰竭患者外周血DC数量和功能明显降低,可作为疾病严重性的预测指标。     

慢加急性乙型肝炎肝衰竭患者外周血IFN-γ基因多态性分析及其临床意义探讨*

目的 探讨乙型肝炎病毒感染引起的慢加急性肝衰竭患者血IFN-γ基因多态性。方法 采用单核苷酸多态性（SNP）技术检测51例ACLF患者和50例健康人血IFN-γ基因内含子+874 位点T/A 和+2109位点A/G单核苷酸多态性。结果 ACLF患者+874位点TA+AA基因型频率（54.9%）显著高于健康人（24.0%）,A等位基因频率（38.2%）显著高于健康人（22.0%,P<0.05）;ACLF组+2109位点AG+GG型基因型频率（51.0%）显著高于健康人（26.0%）,G等位基因（32.4%）显著高于健康人（16.0%,P<0.05）;在3 m末,28例生存与23例死亡的ACLF患者+874、+2109位点等位基因和基因型频率分布无显著性差异（P>0.05）。结论 IFN-γ基因+874 位点A等位基因和基因型、+2109位点G等位基因和基因型是ACLF的遗传易感基因。