糖基化反应条件对鲢鱼鱼肉碱性蛋白酶解产物清除DPPH自由基的影响

为提高鲢鱼鱼肉蛋白酶解产物抗氧化活性,本研究将葡萄糖和低聚异麦芽糖通过糖基化反应分别引入到鲢鱼鱼肉蛋白碱性蛋白酶酶解产物中,利用分光光度计测定其清除DPPH自由基能力。研究结果表明碱性蛋白酶酶解产物与葡萄糖比例为2:1,在60℃时反应得到的产物清除DPPH能力显著高于50℃条件下的反应产物。鲢鱼鱼肉蛋白的碱性蛋白酶酶解物在一定条件下与葡萄糖反应可以提高其清除DPPH自由基能力。     

脱脂对鲢鱼肉蛋白酶解产物的品质和抗氧化活性的影响

研究了脱脂对鲢鱼肉酶解产物的品质和抗氧化活性的影响。与未脱脂的水解产物相比,脱脂鲢鱼肉的酶解产物的水解度略有下降;胰蛋白酶酶解产物(简称DSH)的脂肪、灰分含量显著下降。鱼肉脱脂后,其蛋白水解产物的腥味大大下降。未脱脂鱼肉的胰蛋白酶水解产物(简称SH)的L*值下降,a*值、b*值增加;经过7个月保藏后发现,SH呈现黄褐色,而DSH基本保持乳黄色的外观。DSH具有较高的抑制脂肪酸氧化和清除羟基自由基活性。     

几种酶对鲢鱼蛋白水解条件的比较

通过比较胰蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶以及木瓜蛋白酶在不同条件下对鲢鱼蛋白进行酶解发现，胰蛋白酶对鲢鱼蛋白的酶解效果最好，在最佳条件下水解度可达到35％左右。     

鲢鱼酶解产物对酵母菌的抗冻保护作用

优选酵母抗冻剂对改善冷冻面团品质具有重要意义。通过酶法制备了系列鲢鱼酶解产物,分析其基本组成和电泳图谱变化,并考察酶解时间及其浓度对面包酵母冻融过程中存活率的影响。结果表明:面包酵母耐冻性差,1个冻融循环后存活率仅为0.69%;不同酶解时间的鲢鱼酶解产物基本组成相差不大,但酶解15,30min的酶解产物对酵母菌的抗冻保护效果最好;添加4%的30min酶解产物使酵母菌的冷冻存活率提高到90.73%,较8%的甘油提高了42.88%。Tricine-SDS-PAGE分析发现,酶解产物的蛋白条带分布基本相似,但信号随着酶解时间的延长逐渐减弱,其中新增约13kDa的蛋白可能与酶解产物的抗冻保护活性有重要关系。     

糖基化及限制性酶解对大豆蛋白结构和抗氧化活性的影响

采用转谷氨酰胺酶催化大豆蛋白与壳寡糖发生糖基化反应,制备糖基化大豆蛋白,随后用胰蛋白酶对其进行限制性酶解,制得水解度为1%、5%、10%和15%的酶解物。分析糖基化及限制性酶解对大豆蛋白的二级结构及抗氧化活性的影响。结果表明:糖基化大豆蛋白的分子发生了交联,酶解物的相对分子质量显著变小,而且分布更加广泛;糖基化大豆蛋白的结构变得无序,酶解导致大豆蛋白的无规则卷曲结构增加;两种修饰技术均能够改善大豆蛋白的抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、还原力及亚铁离子螯合能力);糖基化及随后的酶解作用显著改变了大豆蛋白的表观黏度和黏弹特性。     

鲢鱼肉蛋白酶解产物功能特性的研究

以鲢鱼鱼肉为原料,利用响应面分析法对鲢鱼鱼肉酶解产物的酶解工艺进行优化,系统考察了木瓜蛋白酶、风味蛋白酶添加量和酶解时间对鱼肉酶解产物得率的影响,并对酶解产物的溶解性、热稳定性和感官评价进行了分析。结果表明,鱼肉酶解产物的较理想酶解工艺条件为：风味蛋白酶添加量0．6％、木瓜蛋白酶添加量0．6％和酶解时间55min,此时制备出的鲢鱼鱼肉酶解产物具有良好的溶解性、热稳定性和感官值。     

鲢鱼酶解产物在冷冻鱼糜中的抗冻性能研究

分别利用复合蛋白酶和碱性蛋白酶酶解鲢鱼,获得复合蛋白酶酶解产物(protamex hydrolysates,PH)和碱性蛋白酶酶解产物(alcalase hydrolysates,AH),将PH和AH分别加入冷冻鲢鱼鱼糜中,研究其对鱼糜色泽和凝胶结构的影响,并与工业上常用的抗冻剂(蔗糖—山梨醇)进行比较。结果表明:PH相比AH具有较高含量的天冬氨酸、赖氨酸及游离氨基酸(P0.05);PH比AH中包含较多的较大分子质量的组分;在-20℃冻藏4周的情况下,2%PH添加组和蔗糖—山梨醇添加组的凝胶强度和硬度有一定提高;各组样品的弹性均略有降低;冻藏条件对各鱼糜样品的色泽影响较小;各组样品均出现了鱼蛋白分子聚集现象,而2%PH添加组和蔗糖—山梨醇添加组的鱼糜样品表面较为均匀、鱼糜孔隙较小。该研究表明PH有助于稳定鱼糜在冷冻过程中的凝胶结构,为鲢鱼酶解产物作为一种可能的新型鱼糜抗冻剂提供了依据。     

分步酶解制备鲢鱼抗氧化肽的工艺研究

用分步酶解法制备鲢鱼抗氧化肽,首先从碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶中筛选出碱性蛋白酶作为第一步酶解用酶,以水解度作评价指标,并得到酶解工艺条件:底物浓度15%,pH9.0,温度50℃,加酶量为24AU/kg。再从剩下的三种酶中筛选出胰蛋白酶与碱性蛋白酶复配,作为第二步酶解用酶,用响应面法进一步优化酶解工艺,考虑到成本和工艺的要求,最终确定的酶解工艺为:碱性蛋白酶水解时间为59.12min,胰蛋白酶水解时间为82.24min,两种酶的添加比例为1:1.48,即碱性蛋白酶添加量为24AU/kg,胰蛋白酶的添加量为35.5AU/kg。最终得到的鲢鱼抗氧化肽可溶性氮70.84%,多肽69.38%,水分4.21%,灰分25.67%;多肽浓度为2mg/mL时对DPPH自由基清除率为19.33%。      

海马骨粉酶解条件优化及清除DPPH自由基能力测定

以海马骨粉为原料,采用碱性蛋白酶对其水解,对水解物功效测定,以DPPH自由基清除的能力作为评定指标,在单因素的基础上,利用响应面设计方法进行酶解条件优化。单因素结果表明:酶解最佳时间为3 h,最佳温度为50℃,最佳p H为8;再采用Central Composite Design法,研究各因子及其交互作用对海马骨粉酶解液清除DPPH自由基能力的影响。利用Design Expert.8.0.5b软件得到回归方程的模型,并进行响应面分析,得出最佳条件为:酶解温度为48.60℃、酶解时间为4 h、酶解p H为7.04,此时的DPPH自由基清除率为63.89%。      

鲢鱼酶解产物和鱼胶原肽对冷冻面团品质的影响

通过对比分析经0～6次冻融循环处理后面团的酵母菌存活率、发酵力保存率、醒发时间以及焙烤性质研究了鲢鱼酶解产物和鱼胶原肽对冷冻面团品质的影响。结果表明:添加鲢鱼酶解产物和鱼胶原肽的面团经6次冻融循环后,酵母菌的存活率分别为78.95%和61.80%,发酵力保存率分别为59.06%和46.67%,面团醒发时间分别为330 min和318min,均明显优于空白组;冻融后的面团与新鲜面团相比,焙烤的面包比容和弹性减小,添加了鲢鱼酶解产物和胶原肽不仅可缓解冷冻面团这一缺陷,还可改善面包色泽。结果证明了鲢鱼酶解产物和鱼胶原肽具有良好的酵母菌抗冻保护活性。     

鲢鱼头及骨中蛋白质的酶解条件优化

采用木瓜蛋白酶对鲢鱼头及骨中蛋白质进行水解,研究了酶用量、料液比(底物浓度)、酶解温度及时间对水解度的影响,采用正交试验对酶解条件进行了优化。结果显示,水解度随酶用量、酶解温度和时间的增加而增大,底物浓度过低或过高均不利于原料中蛋白质的提取。鲢鱼头及骨中蛋白质提取的最佳条件为木瓜蛋白酶用量2%(w/w,以蛋白质质量计)、料液比1∶1.4(w/v)、酶解温度55℃、酶解时间7h。该条件下蛋白质的水解度为12.07%,所得水解物色泽较浅,且无苦味。     

Effect of glycation on protein structure,amino acid composition and digestibility of silver carp mince

This study was to investigate the effects of glycation on the quality of silver carp mince (SCM) proteins. The browning index (BI), sodium dodecyl sulfate–polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR), total amino acid composition, chemical score, protein digestibility and reductive power of digested products were determined. The correlation between the degree of glycation, protein structure and protein nutritional quality was analysed. The results showed that the BI value of SCM-G increased with the increase in heating time. Myosin heavy chain (MHC), myosin light chain (MLC), tropomyosin and actin were the main protein reactants for glycation. Glycation led to the expansion of the secondary structure of SCM proteins. Glycation reduced lysine and cysteine content but did not change the first limiting amino acid (Val) in SCM. The essential amino acid content of glycated SCM remained consistent with the amino acid nutritional requirements for children and above recommended by FAO/WHO. In addition, glycation did not change protein digestibility but significantly increased the reducing power of digested products with increasing degree of glycation. These results provided a theoretical basis for the application of glycation in food processing industry and the development of aquatic products with high nutritional value.     

鲢肉蛋白酶水解工艺优化的研究

以鲢肉为研究对象,研究采用不同蛋白酶水解白鲢鱼肉对酶解产物的氮收率、水解度、平均肽链长度的影响,并对酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶可以获得较高的氮收率、水解度和平均肽链长度,是最合适的酶;碱性蛋白酶的最佳酶解条件为温度55℃、酶浓度2000U/g、pH7.5、料液比1∶4。酶解3h时,鲢肉蛋白酶解液的平均肽链长度为3.87,水解度为24.12%,氮收率为91.85%。      

Effect of silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) muscle hydrolysates and fish skin hydrolysates on the quality of common carp (Cyprinus carpio) during 4 °C storage

Silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) skin and muscle were hydrolysed, respectively, and then used as part of an edible coating to preserve fish. The effects of muscle and skin hydrolysates as edible coatings for shelf life extension of common carp (Cyprinus carpio) were evaluated over 18 days at 4 °C, by comparing these two treatments, a chitosan coating with muscle hydrolysate, chitosan alone, and an untreated control. All coatings were made up with 5% glycerol. The quality of the carp was assessed by using total volatile basic nitrogen (TVB‐N), total viable counts (TVC), thiobarbituric acid (TBA) and K value. Compared with the control group, the rate of increase in TVB‐N, TVC, TBA and K value of carp coated with fish skin hydrolysates, fish muscle hydrolysates and chitosan added to fish muscle hydrolysates were lower. According to the total viable counts, the storage life of fish with fish skin hydrolysates coatings and chitosan added fish muscle hydrolysates coatings were 16 days, 2 days longer than those with the chitosan coatings and twice as long as the control group.     

鳙鱼肉酶解物清除羟自由基的研究

采用优化酶法从鳙鱼肉蛋白中制备具有清除Fenton体系产生的羟自由基(·OH)活性的抗氧化肽.应用响应面分析法以酶解液对Fenton体系产生的羟自由基(·OH)的清除率为指标优化最佳酶解工艺;酶解液相对分子质量分布采用凝胶层析法测定.复合蛋白酶是水解鳙鱼肉制备具有清除羟自由基活性酶解物的适合酶,最佳酶解条件为:温度40℃、酶解时间30 min、PH=7.0、酶加量为600 U/g底物、底物:水=1:2;活性肤相对分子质量范围为519～1088.响应面分析法是优化酶解工艺可行的方法;具有清除羟自由基活性的肽是一些寡肽.     

酶法制备白鲢鱼蛋白粉的研究

对白鲢鱼肉进行酶水解经喷雾干燥以制备水溶性高的鱼蛋白粉。研究了木瓜蛋白酶的添加量、温度、时间、底物浓度和pH水解条件对鱼蛋白水解度的影响以及喷雾干燥条件对蛋白粉物性和水溶性的影响。结果表明:木瓜蛋白酶对鲢鱼蛋白的最适水解条件是温度50℃、加酶量4000U/g蛋白质、底物浓度为5.5%、pH6.5、时间4h,水解度达到29.82%;该水解液经浓缩至浓度25%～30%时,通过控制进风温度170～180℃、出风温度80～90℃用喷雾干燥得到鱼蛋白水解产物,相对分子量在1000以下组分占90.90%,溶解度达98.52%,是一种营养价值高和溶解好的蛋白质功能性食品配料。