B-TG影响血管内皮细胞生成PGI_2吗?

β—血小板球蛋白(β—TG)是由血小板α——颗粒释放出来的一种特异性蛋白质。迄今,对于它是否抑制血管内皮细胞生成前列环素(PGI_2)这一问题尚无定论。本文应用本室纯化的β—TG进行实验,结果未能证实它对牛和猪主动脉内皮细胞生成PGI_2有任何影响。同时,在本实验条件下也尚未证实牛主动脉内皮细胞上β—TG特异结合部位的存在。     

猪主动脉内皮细胞培养及内毒素对其形态影响的初步观察

内毒素对血管内皮细胞的直接损伤效应报道不一。本文应用酶消化和机械刮取法在体外成功地培养了猪主动脉内皮细胞。在此基础上,我们发现1～100ng/ml E.Coli 内毒素对培养细胞无明显损伤效应(根据形态学观察,LDH 的释放和有无细胞分离判断),无论血清存在与否(1～20%)和作用时间(2～24h)长短。     

一次静脉注射内毒素对兔主动脉内皮细胞的影响 Ⅱ、内毒素损伤兔主动脉内皮细胞的机制

本文观察了一次静脉注射内毒素对LPO及SOD活性的影响。结果表明,内毒素注射后,兔丘浆LPO含量(以MDA浓度表示)及红细胞中SOD活性均同步升高,于注射后30分钟达高峰,随后下降,于第5小时,MDA水平基本恢复,SOD活性仍显著高于内毒素注射前(P<0.001)。分析认为,内毒素引起的血管内皮细胞损伤与氧自由基的作用有关。     

内毒素与血管内皮细胞结合特性初探

目的 探讨无血清因素参与下血管内皮细胞(Vasvular endothelial cell，EC)与细菌内毒素(Lipopolysacchrides，LPS)的结合特点。方法 用激光共聚焦显微镜观察异硫氰酸荧光素标记的内毒素(Fluorescein isothiocyanate labelled LPS，FITC-LPS)与EC的结合情况，并提取荧光标记内毒素与内皮细胞结合后细胞膜性成分观察其中的荧光物质强度。结果 EC与FITC-LPS的结合存在浓度依赖性，结合的荧光主要集中于细胞浆，尤其是胞浆近核周区，核仁也可染色，结合的内毒素同细胞膜性成分关系密切。结论 EC可与LPS直接结合，并可能进入细胞内部而发挥作用。     

内毒素激活内皮细胞的信号机制的研究进展

目前,尽管抗生素被广泛应用,并且有重症监护的支持,感染和中毒性休克（ｓｅｐｔｉｃｓｈｏｃｋ）仍然是住院病人,特别是创伤、烧伤和术后病人面临的一个严重问题,其死亡率高达３５％～６０％［１］。其中革兰阴性（Ｇ－）菌感染导致的中毒性休克是这类病人死亡的主要...     

内毒素诱导的血管内皮细胞凋亡

目的 从内毒素(LPS)所致血管内皮细胞(VEC)凋亡的角度进行了实验研究，为进一步探讨血瘀证实质及药物保护VEC作用机理，建立可靠的细胞凋亡模型。方法 以不同剂量内毒素作用于人脐静脉内皮细胞(HUVEC)24h，通过荧光显微镜与流式细胞仪观察细胞凋亡程度，并测定上清液中乳酸脱氢酶(LDH)含量。结果 不同浓度LPS作用HUVEC 24h后，与对照组相比，HUVEC有较典型的细胞凋亡，且LDH显著升高。结论1μg/mL LPS可用于建立HUVEC凋亡模型，对研究方药治疗血瘀证的作用机理奠定了基础。     

内毒素刺激猪主动脉内皮细胞有赖于血清成分的参与

我们曾发现在不明显损伤培养的猪主动脉内皮细胞的情况下,内毒素以剂量和时间依赖的方式显著刺激其前列环素(PGI_2)的生成。Suttorp 等报道内毒素对猪肺动脉内皮细胞 PGI_2生成的刺激作用至少有赖于1%血清的存在。由于不同种类和不同血管的内皮细胞对内毒素的敏感性不同,我们对     

蒲黄对猪动脉内皮细胞产生PGI_2和tPA的影响

将中药蒲黄用化学方法提取出四种组份,观察其对培养的猪主动脉内皮细胞产生PGI_2、tPA以及血小板聚集的影响,结果表明含黄酮类的蒲黄组份F.Ⅳ有强烈的刺激内皮细胞产生PGI_2和tPA活性作用,同时还可抑制ADP诱导的血小板聚集。     

阶跃切应力对内皮细胞释放前列环素的影响

采用流室定量研究阶跃切应力对内皮细胞释放前列环素（ｐＧＩ＿２）的影响。对流室中的内皮细胞连续１００分钟施加１、１０、２０ｄｙｎｅ／ｃｍ￣２的阶跃剪切应力，用放免法测流室的８个时间段流出液的６－ｋｅｔｏ－ＰＧＦｉ＿（１ａ）。绘出切应力刺激内皮细胞释放ＰＧＩ＿２的曲线。结果表明：未施加切应力时，内皮细胞释放ＰＧＩ＿２的量在检测限以下，施加切应力后，ＰＧＩ＿２释放速率很快达极大值，且又在数分钟内减小．施加阶跃切应力越大，ＰＧＩ＿２释放速率曲线峰值越高，但衰减也越快，在８０～１００分钟时间内的前列环素释放速率平均值也越大。由此提示，在活体中血液流变学因素一血流切应力对血管内皮细胞释放前列环素有促进作用。     

缺氧复氧对内皮细胞间隙连接通讯功能的影响初探

目的　观察缺氧复氧刺激对内皮细胞间隙连接通讯功能的影响 ,初步探讨缺氧复氧引起内皮细胞损伤的机制。方法　将人脐静脉内皮细胞株 ECV30 4分为两组 ,常氧对照组在常氧状态下培养 12～ 18小时 ;缺氧复氧组先在氧浓度低于 1%状态下培养 12～ 14小时 ,再置于常氧状态复氧 0～ 6小时。应用荧光漂白回复技术对细胞间隙连接通讯功能进行分析 ,结果用荧光回复率表示。结果　常氧对照组内皮细胞荧光回复率为 34 .4%±16 .5 %;缺氧复氧组经缺氧处理以及复氧 4小时和复氧 6小时处理后 ,其内皮细胞荧光回复率分别为 42 .7%±2 2 .7%、37.8%± 13.2 %和 43.0 %± 16 .2 %,与常氧对照组相比差异无显著性 (P>0 .0 5 ) ;经复氧 2小时处理后 ,内皮细胞的荧光回复率为 2 5 .0± 7.4%,与常氧对照组和经缺氧、复氧 4小时、复氧 6小时处理组相比 ,差异十分显著(P<0 .0 1)。结论　在本实验条件下 ,单独缺氧 12～ 14小时不影响内皮细胞间隙连接通讯功能 ,而复氧 2小时则能显著抑制间隙连接通讯功能。由此提示 ,间隙连接通讯功能改变参与了内皮细胞缺氧复氧损伤的早期反应。     

不同还原性巯基氨基酸对人脐静脉内皮细胞的损伤作用研究

目的　探讨三种还原性巯基氨基酸对培养人脐静脉内皮细胞的损伤效应。方法　将人脐静脉内皮细胞暴露于三种还原性巯基氨基酸 2 4小时后 ,测定细胞的乳酸脱氢酶释放率、总蛋白含量、凋亡及脂质过氧化的程度。结果　 1同型半胱氨酸 (Hcy)不仅促进脂质过氧化 ,而且可诱导细胞凋亡并可致细胞坏死。 2谷胱甘肽(GSH)呈还原性 ,对细胞有全面的保护作用。 3Hcy的氧化性最强 ,GSH则呈现出完全的还原性 ,半胱氨酸 (Cys)可能处于二者之间。结论　同型半胱氨酸可能是通过特异的抑制谷光甘肽过氧化物酶并减弱了细胞内的还原缓冲能力等机制 ,发挥与 Cys和 GSH不同的生物学效应 ,从而导致内皮细胞出现坏死和凋亡等损伤性的改变。     

西红花苷对培养的牛内皮细胞内钙的调节作用

目的 观察西红花苷对不同刺激因子5－羟色胺（5－HT）、组胺（His）、过氧化氮（H2O2）所致内皮细胞内钙升高的影响。方法 彩和Fluo-3/AM荧光染色剂负载细胞,在激光共聚焦扫描显微镜上测定培养的单个牛内皮细胞内激离钙的浓度。结果 在含钙的Hank′s液中,5－羟色胺、组胺、过氧化氢能明显升高静息状态的细胞内钙,增幅分别为280％、320％、285％。西红花苷1、10μmol/L对5－羟色胺、组胺、过氧化氢引起的钙增高有显著的抑制作用,并呈一定的剂量依赖性。0.1μmol/L西红花苷对细胞内钙升高无显著影响。结论 西红花苷抗动脉粥样硬化、高血压及炎症作用可能与其内皮细胞保护作用有关。     

硝普钠对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

内皮细胞损伤和血管平滑肌细胞增殖在动脉粥样硬化发生发展过程中起关键作用，本工作用离体冠状动脉实验证明硝普钠呈剂量依赖性松弛冠状动脉，且与内皮去除与否无关。用噻唑蓝比色法观察到硝普钠也能剂量依赖性抑制主动脉平滑肌细胞增殖。结果表明，ＮＯ对平滑肌细胞增殖具有调节作用。提示在临床上对于动脉粥样硬化及冠心病病人，长期使用硝普钠等与ＮＯ合成及释放有关的硝基化合物不仅可以缓解冠状动脉痉挛，而且还可抑制平滑肌细胞增殖，可能有助于延缓动脉粥样硬化的进一步发展。     

腺相关病毒rAAV-LacZ转导体外培养的骨髓内皮祖细胞

目的:研究表达β-半乳糖苷酶的重组腺相关病毒(rAAV-LacZ)对于体外培养的骨髓内皮祖细胞(EPCs)的转导效率。方法:将pAAV-LacZ、pAAV-helper、pAAV-RC用磷酸钙法共转染HEK293细胞,得到rAAV-LacZ;用氯仿处理-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提法浓缩纯化病毒;用AVSachTMELISA法rAAV2颗粒滴度测定试剂盒测定rAAV-LacZ的滴度;用不同MOI值(1.0×104~1.0×106v.g/cell)的病毒感染EPCs,48 h后,用β-Gal ELISA试剂盒测定β-半乳糖苷酶的表达,原位-βgal染色试剂盒染色,根据蓝染的阳性细胞占细胞总数的比率来估计rAAV-LacZ对于EPCs的转导效率。结果:rAAV-LacZ的滴度为9.6×1012v.g.ml-1;rAAV-LacZ对于EPCs的转导率约为60%,当MOI增加到106v.g/cell时,-βGal的表达量增至(31.40±2.51)ng.mg.protein-1。结论:rAAV-LacZ能够有效的转导EPCs,这为AAV载体应用于细胞生长因子与EPCs联合治疗缺血性血管疾病提供实验基础。     

OxLDL－induced Cytotoxicity and Its Inhibition by API_（0134） in Cultured Porcine Aortic Endothelial Cells

ＯｘＬＤＬ－ｉｎｄｕｃｅｄＣｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄＩｔｓＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｂｙＡＰＩ_（０１３４）ｉｎＣｕｌｔｕｒｅｄＰｏｒｃｉｎｅＡｏｒｔｉｃＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓＷＡＮＧＨｏｎｇｗｅｉ（王宏伟）；ＺＨＡＯＨｕａｙｕｅ（赵华月）；?..     

胰岛素对内皮细胞分泌前列环素和内皮素的影响

目的 研究胰岛素对内皮细胞分泌前列素和内皮素的影响,探讨高胰岛素血症与动脉粥样硬化（ＡＳ）的关系及机理。方法 不同梯度浓度的胰岛素（１０＾１０,１０＾＿９,１０＾－９,１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ）干预等量同源的第二代人脐静脉内皮细胞（ＥＣ）,６,１２,２４和４８ｈ后,测定上清液中前列环素（ＰＧＩ２）的稳定代谢产物６－ｋｅｔｏ＝－ＰＧＦ１α和内皮素－１（ＥＴ－１）,并设对照组。结果四组浓度的胰岛素（与对照     

脑血栓形成患者红细胞与损伤内皮细胞的粘附

采用流室系统，通过显微观察和计数，定量地研究了脑血栓形成患者红细胞与损伤内皮细胞的粘附情况。结果表明：内皮细胞的损伤有利于脑血栓形成患者红细胞与内皮细胞的粘附。由于内皮细胞的损伤在脑血栓形成的发病过程中始终存在，而且红细胞与内皮细胞的粘附又可促进血管阻塞和血管损害，因而内皮细胞损伤所致的脑血栓形成患者红细胞与内皮细胞粘附增强在脑血栓形成的发生及其发展过程中起着重要的作用。