样品固相萃取及高效液相色谱法测定血浆中去甲肾上腺素

去甲肾上腺素（noradrenaline,NE）是重要的单胺类递质,原发性高血压患者的血浆NE通常增高,故测定其血浆浓度可为高血压的诊治、嗜铬细胞瘤诊断定位提供依据.国内外有不少测定人血浆中去甲肾上腺素含量方法的报道,如气质联用、高效液相色谱-荧光检测器和放射酶标分析等,由于它们存在灵敏度低和选择范围窄、费时、成本高等问题,近年来,又出现了高效液相色谱-电化学检测法（HPLC-ECD）.该法对不同样品处理的方法各异,但大都步骤烦琐或特异性差,不够理想.本实验采用酸洗氧化铝吸附及高氯酸洗脱的方法萃取血浆中的NE,用HPLC-ECD法测定血浆NE的质量浓度.该方法与其他方法相比更加简便,而且灵敏度高、特异性强、数据重现性好、测定结果可靠,是临床诊断和基础研究较为实用的方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中甲苯咪唑含量

目的建立固相萃取、反相高效液相色谱测定人血浆中甲苯咪唑的方法。方法血浆加入阿苯哒唑为内标,以0.5mol/L的硼砂NaOH缓冲液3ml碱化后经乙醚提取,固相萃取,进行HPLC测定,采用HypersilBDSC18(4.6mm×200mm5μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.1mmol/L(NH4)2SO4溶液(60∶40,V/V);流速1.0ml/min;检测波长310nm。结果甲苯咪唑血药浓度为0.05～1.6μg/ml,峰面积与血药浓度呈线性关系,方法平均回收率为97.21%。平均RSD为3.56%;最低检测限为0.02μg/ml。结论该方法符合生物样品分析要求,为甲苯咪唑的体内含量测定提供了一种简便、准确、灵敏度高的分析方法。     

固相萃取-高效液相色谱法测定人血清中奥美拉唑的含量

目的 建立人血清中奥美拉唑含量测定的固相萃取-高效液相色谱法.方法 血清样品经C18固相萃取小柱提取后进样测定,色谱柱为Agilent TC-C18柱(4.6×150 mm,5 μm),流动相为0.1 mol·L-1醋酸铵溶液(用氨水调节pH=7.0)乙腈=6931,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为302nm.结果 血清中奥美拉唑在0.005～2 μg·mL-1浓度范围内线性关系良好,高、中、低浓度的方法回收率分别为104.8%、104.2%和102.4%,RSD均小于10%.日内和日间精密度均小于8.27%.结论 本方法 专属性强,灵敏度高,操作简便,适用于奥美拉唑的人体药代动力学及生物利用度研究.     

固相萃取结合高效液相色谱法测定人体血浆中氟罗沙星的含量

建立固相萃取结合HPLC高效液相色谱法对人体血浆中的氟罗沙星含量进行检测,为氟罗沙星的体内血药浓度监测和人体药代动力学研究提供测定方法。血样经固相萃取法处理,HPLC－高效液相色谱紫外检测法测定,外标法定量。结果发现：本文建立的方法血样处理简单、杂质少、干扰小。高、中、低浓度的平均回收率平均为92．78％,在氟罗沙星体内治疗浓度范围内,检测线性关系良好。日内误差与日间误差均低于10％,精密度和准确度都能满足药动学研究及血药浓度监测的要求。结果提示：固相萃取结合HPLC高效液相色谱法测定血浆氟罗沙星浓度重复性好、干扰小,是一种较为理想的测量方法。     

固相萃取结合HPLC法快速测定紫杉醇的含量

采用γ－Ａｌ２Ｏ３固相萃取和ＨＰＬＣ法对云南红豆杉和东北红豆杉培养细胞中的紫杉醇进行了定量分析,工豆杉浸膏粗品经γ－Ａｌ２Ｏ３固相萃取柱后,可直接上高效液相色谱柱,Ｃ１８ＨＰＬＣ的最佳条件,甲醇－乙腈－水（２５：４５：３０）为流动相,２２７ｎｍ紫外检测。该法简单、快速、准确、适应性强,对紫杉醇的检测范围在０．４－１９．２μｇ。     

固相萃取-高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮

目的 建立固相萃取-高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮的分析方法。方法 采用高效液相色谱法测定。色谱柱为Dikma Kromasil C₁₈（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相：乙腈-水（75∶25）；检测波长：242 nm；柱温：30 ℃；体积流量：0.8 mL/min；进样量：10 μL。供试品溶液的制备采用C₁₈固相萃取小柱（甲醇10 mL活化，水10 mL平衡），用50％甲醇洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱。结果 蒿酮在0.220 5～3.527 2 μg具有良好的线性关系（r＝0.999 9），平均回收率为98.28％，RSD为0.35％。结论 该方法简便、快速、准确，具有良好的重复性和回收率，可作为青银注射液中蒿酮的定量分析方法。     

固相萃取-反相高效液相色谱法测定大鼠血浆中羟基积雪草苷的浓度

目的:建立大鼠血浆中羟基积雪草苷测定的高效液相色谱法.方法:固相萃取法对样品进行纯化处后,选用Welchrom-C18柱(250mm×4.6mm,5μm),水-乙腈(24:76)为流动相测定药物含量;流速:1.0ml/min;紫外检测波长:225 nm;柱温:30℃;内标:葫芦素B.结果:在此色谱条件下,羟基积雪草苷和内标葫芦素B的保留时间分别为5.11 min和8.14min.线性范围为5μg/ml～1.5 mg/ml(r=0.9998),最低检测浓度为1μg/ml.方法回收率在90.21%～95.65%,提取回收率在80.65%～87.04%.日内与日间精密度的RSD在1.31%～3.07%(n=5).结论:该检测方法简便可靠,选择性和重现性好,符合常规生物样品检验的要求,可用于羟基积雪草苷在大鼠体内的药代动力学研究.     

固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱测定人血浆中肌苷浓度的方法学建立

目的·建立一种使用固相萃取联合高效液相色谱-串联质谱(solid-phase extraction-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,SPE-HPLC-MS/MS)测定人血浆中肌苷浓度的方法.方法·采用电喷雾离子化正离子模式和...     

固相萃取结合高效液相色谱法测定人体血浆中氟罗沙星的含量

建立固相萃取结合HPLC高效液相色谱法对人体血浆中的氟罗沙星含量进行检测,为氟罗沙星的体内血药浓度监测和人体药代动力学研究提供测定方法.血样经固相萃取法处理,HPLC-高效液相色谱紫外检测法测定,外标法定量.结果发现本文建立的方法血样处理简单、杂质少、干扰小.高、中、低浓度的平均回收率平均为92.78%,在氟罗沙星体内治疗浓度范围内,检测线性关系良好.日内误差与日间误差均低于10%,精密度和准确度都能满足药动学研究及血药浓度监测的要求.结果提示固相萃取结合HPLC高效液相色谱法测定血浆氟罗沙星浓度重复性好、干扰小,是一种较为理想的测量方法.     

高效液相色谱法测定人血浆中比阿培南浓度

目的 建立测定人血浆中比阿培南浓度的反相高效液相色谱法.方法 采用YMC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)柱,以0.1 mol/L醋酸钠(醋酸调pH4.5):乙腈=98:2(V:V)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,紫外检测波长为300 nm,直接沉淀蛋白后用二氯甲烷反洗,进样0.03mL.结...     

固相萃取-高效液相色谱法测定拟缺香茶菜中3个二萜类成分的含量

目的建立测定拟缺香茶菜药材中二萜类成分Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素的方法。方法采用固相萃取-高效液相色谱法(SPE-HPLC)测定3个二萜类成分的含量。使用Venusil C18(4.6 mm×250 mm,5μm)反相色谱柱;流动相:乙腈(A)-水(B)梯度洗脱;流速:1 m L/min;柱温:30℃;检测波长230 nm。结果拟缺香茶菜中Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素分别在0.056~0.448 g/L(r=0.999 2),0.002 6~0.020 8 g/L(r=0.999 4),0.016~0.128 g/L(r=0.999 7)内与峰面积成良好的线性关系;平均回收率分别为97.53%(RSD=2.16%),96.02%(RSD=2.01%),98.23%(RSD=2.10%)。结论所建立的方法灵敏、准确、稳定,可用于拟缺香茶菜中Kamebacetal-A、Kamebacetal-B、肾形香茶菜丙素的含量测定,为拟缺香茶菜抗肿瘤谱效关系的研究奠定基础。     

高效液相色谱法测定人血浆中的烟酸

目的　建立人血浆中烟酸的高效液相色谱 (highperformanceliquidchromatography ,HPLC)测定方法。方法　以替硝唑为内标物 ,用乙腈直接沉淀人血浆中蛋白质 ,上清液在sphersorb色谱柱上 ,以乙腈 水 10 %四丁基氢氧化铵 (5 5∶4 5∶1)为流动相进行分离 ,流速 1ml·mim-1;柱温 30°C ;检测波长为 2 5 4nm。结果　烟酸与内标分离完全且无其他干扰 ,保留时间分别为 5 5 4、4 15min。线性范围 0 18～ 11 0 μg·ml-1,r=0 9999.日内RSD为 1 70～ 3 33% ,日间RSD为 1 75 %～ 4 11% ,回收率为 94 2 %～10 6 6 % ,血浆中烟酸的最低检测浓度为 0 0 9μg·ml-1。结论　所用方法简便、准确、重复性好 ,可用于口服烟酸缓释片后的血药浓度检测。     

人血浆中头孢克洛高效液相色谱法与微生物法测定

目的:比较高效液相色谱法(HPLC)和微生物法测定头孢克洛血药浓度的差异。方法:10名健康受试者单剂量口服头孢克洛胶囊500mg,分别用HPLC法和微生物法测定血浆中药物浓度。结果:HPLC法线性范围为0.125~16mg·L-1,回收率为(93.34±5.94)%~(96.80±4.38)%,日内、日间相对偏差(RSD)分别为4.17%~6.36%和5.64%~9.09%;微生物法线性范围为0.125~16mg·L-1,回收率为(93.21±5.80)%~(95.62±4.23)%,日内、日间RSD分别为4.17%~6.03%和6.57%~8.70%;2种方法测定的受试者平均血药浓度和主要药动学参数差异无统计学意义。结论:2种方法精密度和回收率基本一致,均可用于头孢克洛血药浓度的测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中氨苄西林、丙磺舒的血药浓度的价值

目的建立测定氨苄西林、丙磺舒血药浓度的高效液相色谱法.方法色谱柱:Symmetry ShieldTMRP18柱(5μm,150 mm×3.9 mm);流动相氨苄西林:0.068 mol/L的磷酸二氢钾溶液(pH3.0)-乙腈(92:8,V/V),丙磺舒:水-乙腈-1mol/L的磷酸二氢钾溶液-1 mol/L冰醋酸(59.5:39.8:0.62:0.08,V/V,加入0.15%的三乙胺调至pH 2.76).流速均为1.4 ml/min;检测波长氨苄西林为210 nm,丙磺舒为254 nm.结果氨苄西林的浓度在1.25～40μg/ml范围内线性关系良好(r=0.9999),丙磺舒的浓度在0.625～20μg/ml范围内线性关系良好(r=0.999 9).结论本法操作简便,灵敏,快速,重现性好,适用于人体药动学研究.     

人血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性高效液相色谱测定法

目的 :建立血浆中普罗帕酮对映体浓度的立体选择性高效液相色谱测定法。　 方法 :血浆标本经碱化以正己烷 /异戊醇 ( 99∶ 1)提取、吹干后与 GITC柱前衍生化 ,形成非对映体。以乙腈∶水∶冰醋酸 ( 60∶ 4 0∶ 0 .0 1)为流动相 ,经 C18ODS柱分离后在紫外 2 0 8nm处检测。　 结果 :对映体曲线范围 2 5～ 80 0μg/ L ;最低检出限 <2 0μg/ L ;批内、批间平均 RSD均 <6% ;平均回收率 :10 2 .16% ;临床大多数常用药物对本法无干扰。　 结论 :本法为普罗帕酮临床药动 -药效学研究提供了一种简便、可行的检测方法     

高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的改进

对反相高效液相色谱法测定血浆美托洛尔浓度的方法进行了改进，选用色谱柱带预柱，溶酶为四氢呋喃。本法的最低检测限为５ｎｇ。血浆中最低测定浓度为２０ｎｇ／ｍｌ，平均回收率为９９．６％。日内回收率为９９．８％，日间回收率为９９．４％。方法简便，灵敏度高，毒性较低，适于临床药理研究及临床治疗监测。     

高效液相色谱法测定人血浆中氨溴素及药物动力学研究

目的：通过建立高效液相色谱法测定正常人口服盐酸氨溴素缓释胶囊后的血药浓度，以了解氨溴素的药物动力学行为。方法：血样经碱化后乙醚提取，盐酸反提后进样，以甲醇－０．０１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．３）－四氢呋喃（７０∶２７．５∶２．５，ｖ／ｖ）为流动相，利多卡因作为内标，在２４８ｎｍ处定量检测。结果：本法线性范围宽（１０～２００μｇ／Ｌ，ｒ＝０．９９９４），回收率稳定（８７．２±２．８）％，精确度高（日内ＲＳＤ≤４．１％，日间ＲＳＤ≤８．１％）。测定了健康受试者口服盐酸氨溴素缓释胶囊的血药浓度，并计算了相关的药物动力学参数。结论：应用本法可测定氨溴素血药浓度，可用作生物利用度研究，为临床合理用药提供参考。     

高效液相色谱-电化学检测法测定人血浆中维生素C的浓度

目的 :建立人血浆中维生素C浓度的高效液相色谱(HPLC)测定方法。方法 :用直接萃取的方法 ,除去内源性物质的干扰 ,并对维生素C给以保护 ,应用高效液相色谱仪分离 ,采用电化学检测器检测。流动相为磷酸二氢胺溶液 :甲醇 :磷酸 (v/v/v,3000:50:7 ,pH2.7) ;流速 :1ml/min ;进样量 :20μl。内标为左旋多巴(L -dopa,32μg/ml)。色谱柱为YWG -C18(4.6mm×250mm,10μm)。结果 :1.维生素C血药浓度标准曲线在1.5～40.0ng/ml间呈线性相关,y=2.1023X -0.2366(r=0.9995)。2.最低检出限为1.5ng/ml。3.准确度及精密度测定 :方法的平均回收率为(101.10±4.44) % ;日内及日间相对标准偏差均小于8%。结论 :预处理用直接萃取的方法纯化样品 ,应用电化学检测器建立了血浆中维生素C浓度的测定方法。为该药的药代动力学研究与药物评价提供了一个优良的分析方法