苋菜红—蛋白质体系的共振光散射光谱研究及其分析应用

研究了染色剂苋菜红与蛋白质的结合反应,在ＰＨ３．８７的Ｃｌａｒｋ－Ｌｕｂｓ缓冲介质中,苋菜红与蛋白质通过分子间作用力形成复合物。使最大波长约为３６４ｎｍ的共振光散射光谱得到加强。以苋菜红为标记物根据其共振光散射的增强程度。可用于蛋白质的定量测定,其线性响应范围为０－５．０ｍｇ／Ｌ。方法的稳定性及选择性良好,用于人血清试样中总蛋白的测定,结果与经典的考马斯亮兰法一致。     

简易荧光仪共振光散射光谱法测定蛋白质的研究

光散射是指一束光通过介质时 ,在入射光方向以外的各个方向观察到的一种光辐射现象。瑞利散射是散射光波长等于入射光波长 ,而且散射粒子又远小于入射光波长产生的弹性散射 ,其散射强度与波长四次方成反比[1 ] 。如果这种瑞利散射位于吸收带附近 ,则可引起散射强度的急剧增加 ,这种现象被称为共振瑞利散射 (ＲＲＳ) ,或称共振光散射 (ＲＬＳ) [2 ] 。 1 993年 ,Ｐａｓｔｅｒｎａｃｋ等首次用共振光散射技术研究了卟啉类化合物在核酸上的聚集 ,从而首次将该技术与化学过程联系起来。黄承志等利用卟啉在蛋白质或核酸上聚合组装时产生的增强的…     

全氟辛烷磺酸与蛋白质体系的共振光散射光谱及其分析应用

研究了牛血清白蛋白(BSA)与全氟辛烷磺酸(PFOS)相互作用的共振光散射(RLS)光谱,建立了PFOS的共振光散射分析方法。 在pH值为4.1的BR缓冲溶液中,全氟辛烷磺酸根阴离子与质子化的BSA通过静电引力和疏水作用形成离子缔合物,引起共振光散射强度(IRLS)显著增强,最大散射波长位于285.0 nm处,增强的散射信号强度与PFOS浓度在0.2～25.0 μmol/L范围内呈线性关系,据此建立了测定PFOS的光散射分析方法,检出限为20.0 nmol/L。 讨论了体系的最佳反应条件及外来物质的干扰,并探讨了反应机理。 建立的共振光散射法用于环境水样中PFOS的测定,RSD≤4.4%。     

蛋白质-SDS-罗丹明B体系的共振光散射光谱及其分析应用

研究了阴离子表面活性剂十二烷基硫酸钠(SDS),阳离子染料罗丹明B,与蛋白质相互作用的共振光散射(RLS)光谱及用于蛋白质的测定.实验表明,在pH 4.35的酸性介质中,SDS的共振光散射强度较小,它与蛋白质结合后,共振光散射强度能得到增强,但加入阳离子染料罗丹明B后,共振光散射强度显著增强.在λ=332.0 nm处,ΔIRLS最大,并且增强的共振光散射信号与蛋白质的浓度成正比.据此建立了一种测定蛋白质的新方法,该方法灵敏度高,对HSA的检出限达到1.9 ng/mL,线性范围为0.01～5.0 μg/mL.用于人血清样品中蛋白质的测定,回收率为94.0%～105.5%.     

共振光散射光谱研究噻嗪红R与牛血清白蛋白的作用及其分析应用

研究了噻嗪红R(Thiazine red R,TR)与牛血清蛋白(BSA)作用的共振光散射(RLS)光谱特征。考察了各种影响因素,并计算出了BSA与TR的结合比(质量之比)为1.25。结果表明,在优化条件下体系的RLS强度与蛋白质浓度在一定范围内具有良好的线性关系,据此建立了一种蛋白质测定的新方法。在最佳实验条件(TR,2.0×10-5mol/L;pH2.36)下,BSA的线性范围是0.01~5.0μg/mL,检出限为1.4ng/mL。该方法已用于合成样品及尿液的测定。     

共振光散射光谱的校正

以罗丹明6G在pH7.40时的共振光散射光谱（RLS）为例,引进仪器特性因子和分子吸收因子讨论荧光分光光度计的检测灵敏度和体系分子吸收对RLS光谱的影响,提出光谱校正方程。在吸收体系中,吸收带附近的散射光强度降低,并导致散射光谱发生畸变。通过光谱校正,除消除了不同仪器因光源和检测系统的差异对RLS光谱特性影响外,有效地消除了分子吸收的影响,提高了测定灵敏度。     

钙试剂-蛋白质体系的共振光散射光谱研究

基于蛋白质对钙试剂共振光散射的增强作用,拟定了一种测定蛋白质的共振光散射法。在pH 4.00的水溶液中,钙试剂在595 nm处的共振光散射增强与蛋白质浓度呈线性关系。此方法对人血清白蛋白、牛血清白蛋白的检出限分别可达0.068和0.085μg/mL。同时得到钙试剂与人血清白蛋白和牛血清白蛋白的结合常数(K)以及结合位点数(n)分别为8.15×104mol/L,0.18和7.67×104mol/L,1.5。     

大肠杆菌的共振散射光谱研究

研究了大肠杆菌的共振散射光谱.它在470nm、510nm和730nm产生三个瑞利散射峰.当激发波长为470nm(6.38×1014Hz)时,大肠杆菌溶液在470nm(6.38×1014Hz)和940nm(1/2×6.38×1014Hz)分别产生一个瑞利散射峰和一个1/2分频散射峰;当激发波长为510nm(5.88×1014Hz)时,在510nm产生一个共振散射峰;当激发波长为730nm(4.11×1014Hz)时在365nm(2×4.11×1014Hz)和730nm(4.11×1014Hz)分别产生一个2倍频散射峰和一个共振散射峰.分频散射和倍频散峰与共振散射峰具有相似的散射行为.大肠杆菌的浓度在0.074～38×108个/mL范围内与共振光散射强度I470nm、I510nm、I730nm成良好线性关系.     

荧光素的共振光散射光谱研究

研究了荧光素(nu)的共振光散射(RLS)光谱的形成机理与影响因素.在中性和碱性条件下,Flu溶液的共振散射光显著增强.实验发现,随着溶液pH的增加,Flu溶液的RLS光谱与其荧光光谱、吸收光谱在强度大小、最大吸收峰位移上变化趋势一致.荧光素的荧光激发光谱与发射光谱有部分重叠,共振散射峰处于荧光激发峰与荧光发射峰之间.在光偏振实验中,测得共振散射光的偏振度P≈0.020.碱性环境中,随Flu溶液浓度的增加,其RLS光谱和荧光光谱的变化情况,同样表明两者之间有密切联系.上述实验结果揭示Flu的共振散射光就是共振荧光.     

乙醇敏化钛黄与蛋白质作用的共振光散射光谱研究及其分析应用

研究了在乙醇存在下钛黄（TY）与蛋白质作用的共振光散射（RLS）光谱特征 。基于RLS的增强,建立了一种测定蛋白质的新方法。考察了各种影响因素,在优 化条件下确定了RLS强度与蛋白质浓度之间的关系。当TY浓度为4 * 10~(-5)mol· L~(-1)时,牛血清白蛋白（BSA）、人血清白蛋白（HSA）和溶菌酶(lysozyme)的线 性响应范围分别为0.1～6.0 μg·mL~(-1), 0.1～5.0 μg·mL~(-1), 0.2～3.0 μg·mL~(-1),检出限分别为12.7 ng·mL~(-1), 11.6 ng·mL~(-1)和18.8 ng· mL~(-1)。三种合成样品五次平行测定的回收率和相对标准偏差（RSD）分别为96. 0%～102.3%和0.8%～3.2%。将该方法与经典的Bradford方法分别用于人血清试样中 蛋白的测定,两种方法的分析结果经F-检验和双总体T-检验证明无显著性差异。     

Determination of Trace Proteins by Rayleigh Light Scattering Technique with Indophenol Blue

The interaction of indophenol blue (IPB) with proteins in aqueous solution has been studied by optical absorption and Rayleigh light scattering (RLS) spectroscopy. At pH 3.8, the weak RLS of IPB is enhanced by proteins. Based on this phenomenon, a novel method for the determination of proteins at nanogram levels using the RLS technique is developed. The method is simple, practical and sensitive. The linear range is 0.25–20.9µgmL^–1 for BSA, and 0.25–17.6µgmL^–1 for HSA. The detection limits (S/N=3) are 23ngmL^–1 for BSA and 22ngmL^–1 for HAS. The results for the determination of proteins in human serum samples are very close to those obtained by an established clinical method. There is very little interference from amino acids, metal ions or other coexisting compounds.     

镉(Ⅱ)-邻菲罗啉-溴酚蓝体系的共振光散射光谱研究及分析应用

本文建立了一种测定镉(Ⅱ)含量的共振光散射(RLS)光谱法。在pH=9.60的Tris-HCl介质中,镉(Ⅱ)与邻菲罗啉(Phen)形成螯合物后,再与溴酚蓝(BPB)形成离子缔合物,可使溶液的共振光散射显著增强;在波长638 nm处,RLS的增强程度与镉(Ⅱ)浓度呈线性关系。线性范围为0~3.20 mg/L,检出限为4.50μg/L。该方法简便、快速、灵敏度高,用于合成样和水样中镉(Ⅱ)的测定,结果令人满意。     

溴酚蓝共振光散射探针测定敦煌壁画胶结材料中蛋白质含量

溴酚蓝共振光散射探针测定敦煌壁画胶结材料中蛋白质含量;敦煌壁画; 颜料胶结剂; 共振光散射; 蛋白质; 溴酚蓝     

Interactions of Night Blue with Nucleic Acids and Determination of Nucleic Acids Using Resonance Light Scattering Technique

The noncovalent interactions of night blue (NB) with several nucleic acids in buffer medium of Britton‐Robinson at pH 4.1 have been studied by spectroscopic methods. It is shown that the binding of NB with nucleic acids involves the J‐aggregation of NB molecules on the surface of nucleic acids. The aggregation was encouraged by polyanions nucleic acids, in which nucleic acids served for acting templates. In this connection, a new method of nucleic acids with sensitivity at nanogram level is proposed based on the measurement of enhanced resonance light scattering (RLS). The linear range of ctDNA, fsDNA and yRNA is 0.01—2.5, 0.03—2.5 and 0.04—1.0 μg/mL, respectively, and the corresponding detection limits (3s?) are 9.4, 7.3 and 5.7 ng/mL at 2.5 × 10–⁵mol/L of NB. Synthetic and real samples were analyzed with satisfactory results.     

共振散射光谱法测定多巴胺的分析应用研究

研究了I3-与孔雀石绿(MG)间的相互作用,并用于共振散射光谱法测定痕量多巴胺。在pH 4.5的柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液中,在聚乙烯醇(PVA)与聚乙二醇辛基苯基醚(OP)存在的条件下,孔雀石绿与I3-通过静电作用力生成络合比为1∶2的离子缔合物MG(I3)2,而多巴胺具有还原性,可将I3-还原成I-,从而导致I3--孔雀石绿体系的共振散射强度下降。据此建立了一种灵敏度高、重现性好、快速测定多巴胺的共振散射光谱新方法。在优化的实验条件下,多巴胺的线性范围为2.0×10-7～4.5×10-6mol.L-1,相关系数(r)为0.999 1;检出限(3S/k)为9.5×10-8mol.L-1。将方法应用于针剂和人血清中多巴胺含量的测定,其加标回收率为100.1%～102.4%,相对标准偏差为0.41%～4.8%。     

流动注射-共振光散射联用技术测定注射液中肝素的含量

在近中性介质中,亚甲基兰与肝素作用产生共振光散射（BLS）增强信号,最大散射峰位于365．0nm处,增强的共振光散射强度（DIRLS）与肝素浓度具有线性关系,据此建立了流动注射．共振光散射联用技术测定痕量肝素的新方法。在pH为7．96,离子强度为0．0275mol／L的载流中加入肝素后,在365．0nm处产生增强的RLS信号。采用时间扫描测定该增强RLS强度,在最佳实验条件下,可检测1～20mg／L肝素,检出限为8．41mg／L。对浓度为4．0mg／L的肝素钠标准液平行测定11次的相对标准偏差为3．2％。用于注射液中肝素含量的测定,RsD小于2．3％。     

Determination of Yttrium by Resonance Light Scattering Technique

 Yttrium was determined by means of the resonance light scattering (RLS) technique. The characteristics of resonance light scattering spectra of yttrium-1, 6-bi(1′-phenyl-3′-methyl-5′-pyrazolone-4′-) hexanedione (BPMPHD), the effective factors and optimum conditions were studied. In the pH range of 5.0–6.1, yttrium-BPMPHD complex produces three characteristic peaks of RLS at 365, 402 and 467 nm. The enhanced intensity of RLS is proportional to the concentration of yttrium in the range of 1.0×10⁻⁸ to 1.0×10⁻⁵ mol · L⁻¹. The limit of detection is 5.9×10⁻⁹ mol · L⁻¹. The method has been used for the determination of Y³⁺ in mixed rare earths. Correspondence: Key Lab for Colloid and Interface Chemistry of Education Ministry, School of Chemistry and Chemical Engineering, Shandong University, Jinan 250100, People’s Republic of China. e-mail: wux@sdu.edu.cn Received July 3, 2002; accepted October 20, 2002