进口优质肉羊胚胎的移植试验

对从澳大利亚进口的304枚德克赛尔肉羊冷冻胚胎进行移植,产羔178只,产羔率为5855%.并对冷冻胚胎解冻、移植过程中的主要环节进行研究,其结果如下①解冻后的A、B级孵化囊胚所占比例为(43.75%)、桑椹胚--扩张囊胚解冻后的A、B级胚胎所占比例为(84.02%),两者有显著差异;②解冻后的A、B级桑椹胚--扩张囊胚移植产羔率(64.88%)显著高于解冻后的A、B级孵化囊胚移植产羔率(42.85%);解冻后的C级胚胎移植后也能得到一定的产羔率;③经产母羊胚胎移植产羔率(68.62%),显著高于育成母羊产羔率(51.85%).     

进口优质肉羊胚胎的移植试验

对从澳大利亚进口的304枚德克赛尔肉羊冷冻胚胎进行移植，产羔178只，产羔率为58.55%，并对冷冻胚胎解冻，移植过程中的主要环节进行研究。其结果如下：（1）解冻后的A、B级孵化囊胚所占比例为（43.75%)，桑椹胚-扩张囊胚解冻后的A、B级胚胎所占比例为（84.02%)，两者有显著差异；（2）解冻后的A、B级桑椹胚-扩张囊胚移植产羔率（64.88%)显著高于解冻后的A、B级孵化囊胚移植产羔率（42.85%)；解冻后的C级胚胎移植后也能得到一定的产羔率；（3）经产母羊胚胎移植产羔率（68.62%)，显著高于育成母羊产羔率（51.85%)。     

黑头萨福克绵羊胚胎玻璃化快速冻胚移植效果分析

本试验应用玻璃化胚胎冷冻方法进行黑头萨福克绵羊胚胎冷冻和移植,比较了受体羊卵巢上黄体数量、受体羊的体况、移植胚胎的数量对受体受胎率的影响。受体羊卵巢上有一个黄体的移植受胎率42.7%与有2~3个黄体受体羊移植受胎率44.4%无显著差异;受体的体况对受胎率有显著影响,中上等(含中等)体况水平的受体的受胎率47.2%显著高于中下等的受体的受胎率43.0%(P0.05);使用玻璃化胚胎冷冻法的冷冻解冻胚胎移植受胎率54.2%显著高于常规胚胎冷冻法的冻胚移植受胎率44.0%(P0.05);移植1枚桑葚胚(1M)的受胎率47.5%略高于移植1枚囊胚(1B)的受胎率44.3%(P0.05)。因此,受体羊黄体数、冷冻桑葚胚和囊胚对胚胎移植受胎率没有显著影响,而受体中上等(含中等)体况水平和玻璃化胚胎冷冻法冷冻解冻胚胎移植受胎率显著提高。     

影响绵羊胚胎移植妊娠率的因素分析

试验旨在研究影响绵羊胚胎移植妊娠率的关键因素。试验选取64只供体绵羊,对其进行超数排卵处理,同时选取370只受体绵羊,进行同期发情处理。采集胚胎分析其质量、数量及发育阶段,观察受体卵巢黄体数对妊娠率的影响。对试验数据进行卡方检验分析。结果表明,A级桑葚胚妊娠率(72.3%)显著高于B级桑葚胚的妊娠率(60.0%),P0.05;移植1枚A级桑葚胚妊娠率(71.8%)显著低于移植2枚A级桑葚胚妊娠率(82.4%),P0.05;移植1枚B级桑葚胚妊娠率(48.2%)显著低于移植2枚B级桑葚胚妊娠率(58.3%),P0.05;胚胎发育阶段和黄体数对妊娠率无显著性影响(P0.05)。综上所述,胚胎等级、移植胚胎数是影响绵羊胚胎移植妊娠率的主要因素。     

不同冷冻和解冻方法对小鼠桑椹胚发育的影响

本试验以2种程序化冷冻液和2种玻璃化冷冻液对昆明白系小鼠的桑椹胚进行细管法冷冻保存,比较程序化冷冻-管外解冻和玻璃化冷冻-管内解冻对胚胎体内、外发育的影响。胚胎体外培养结果表明:玻璃化冷冻组及程序化冷冻组胚胎发育率(95.3%￣95.8%,98.9%)无显著(P>0.05)差异。将程序化冷冻、EFS30玻璃化冷冻以及新鲜的胚胎各168枚移植给假孕受体鼠,妊娠受体产活仔率各组间相比(50.8%,58.3%,54.9%)无显著性(P>0.05)差异。结果证明,玻璃化冷冻保存的胚胎管内解冻效果好,为生产中家畜的胚胎移植提供了理论和技术参考。     

Ops法玻璃化冷冻兔胚胎的试验报告

采集中国大白兔的桑椹胚共545枚,采用OPS法,配制VSⅠ和VSⅡ两种冷冻液,分别冷冻兔的桑椹胚265枚和280枚,解冻后胚胎回收率分别为93.6%(248/265)和92.8%(260/280),两者差异不显著(P>0.05);解冻后胚胎形态良好率分别为95.2%(236/248)和94.2%(245/260),两者差异显著(P<0.05)。将解冻后形态良好的210枚桑椹胚分别移植到15只受体母兔体内,结果有8只母兔妊娠,妊娠率为53.3%(8/15),妊娠受体内移植胚胎数为110枚,产仔数占移植胚胎数的33.6%(37/110)。用VSⅠ冷冻的100枚桑椹胚移植到7只受体母兔体内,妊娠率为57.1%(4/7),产仔率为35.7%(20/56);用VSⅡ冷冻的110枚桑椹胚移植到8只受体母兔体内,妊娠率为50.0%(4/8),产仔率为31.5%(17/54)。无论妊娠率还是产仔率,VSⅠ都高于VSⅡ,但差异均不显著(P>0.05)。     

进口绵羊冷冻胚胎在非繁殖季节的移植试验

在非繁殖季节 5～ 7月份利用从澳大利亚进口的三个品种Dorset、Texel、Suffork绵羊冷冻胚胎对 419只东北半细毛羊进行手术法移植 ,同年 10～ 12月份共得三个品种羔羊 2 0 7只 ,受胎率达 43 2 %,产羔率达 114 3 6%。同时得出以下研究成果 :①移植双胚受体羊的受胎率 ( 5 5 1%)和产羔率 ( 196 3 %)明显高于移植单胚的受胎率 ( 4 2 16%)和产羔率 ( 92 3 1%) (P<0 0 5 ) ;②移植A级胚胎与B级胚胎受体羊的受胎率 ( 4 4 5 6%vs10 1 164 %)与产羔率 ( 4 3 85 %vs13 2 %)之间差异不显著 (P>0 0 5 )。     

澳洲波尔山羊胚胎3种冷冻方法对其胚胎移植效果的影响

在25℃室温下,采用细管法(一步法、二步法)和OPS法,以不同浓度的EFS、EDFS为玻璃化冷冻液,对澳洲波尔山羊致密桑椹胚和囊胚进行玻璃化冷冻保存。同时利用1.5mol/LEG为抗冻保护剂对胚胎进行常规法冷冻保存。分别将上述3种方法冷冻解冻后的胚胎移植于同期发情后6~7d的云南黑山羊受体。结果表明,细管法胚胎玻璃化冷冻保存效果均以EFS40组为佳,解冻后胚胎移植产羔率分别为40.54%(15/37;一步法)和51.35%(19/37;二步法)。与新鲜胚胎移植产羔率(52.50%,21/40)和常规法冷冻保存的胚胎移植产羔率(45.16%,14/31)相比无显著性差异(P>0.05)。另外,用EDFS30玻璃化溶液,OPS法冷冻解冻后的胚胎移植产羔率高达51.43%(18/35),为整个玻璃化冷冻试验的最佳值。玻璃化冷冻方法简便、迅速,无论是细管法还是OPS法均获得了比较理想的胚胎移植效果。     

腹腔镜技术与传统手术方法在绵羊胚胎移植中的应用对比

为探究腹腔镜技术在绵羊胚胎移植中的应用效果,在陕西省榆林市靖边县某种羊场进行胚胎移植试验。试验分两组进行,每组各选取10头经产健康黑头萨福克羊为供体和100头健康经产小尾寒羊为受体,两组受体一致使用常规胚胎移植药物和程序处理,分别进行腹腔镜和传统手术方法移植。现将结果汇报如下:腹腔镜组(A组)供体有效胚胎102枚,受体发情90头全部移植(12头双胚,其余单胚),受胎率68.9%(62/90),产羔率64.4%(58/90),受体术后创口感染0例;传统手术组供体有效胚胎98枚,受体发情92头全部移植(6头双胚,其余单胚),受胎率61.9%(57/92),产羔率56.5%(52/92),受体术后创口感染2例。利用SPSS分析表明两组受胎率、产羔率均差异不显著(p﹥0.05)。     

绵羊玻璃化冷冻胚胎直接移植试验研究

应用EFS40玻璃化液对6.5～7日龄的绵羊胚胎进行玻璃化冷冻及解冻后直接移植试验.结果:桑椹胚、囊胚冷冻解冻后移植的妊娠率分别为37.50%(3/8)和54.55%(6/11),胚胎存活率分别为33.33%(3/9)和50.00%(6/12),差异均不显著(P＞0.05);胚胎解冻后用0.5 mol/L蔗糖脱防冻剂与直接用胚胎存放液脱除防冻剂的妊娠率分别为44.44%(4/9)和50.00%(5/10),胚胎存活率分别为40.00%(4/10)、45.45%(5/11)差异不显著(P＞0.05);10枚解冻后的胚胎细管内脱防冻剂后,直接装管移植给8只受体,妊娠率为50.00%(4/8),胚胎成活率为40.00%(4/10),与同期常规冷冻解冻组相比无显著差异(P＞0.05).     

Vitrification of Boer Goat Morulae and Early Blastocysts by Straw and Open-Pulled Straw Method

The aim of this study was to investigate the effects of different vitrification solutions [EFS30 or EFS40 contains 30% (v/v) ethylene glycol (EG), 40% (v/v) EG; EDFS30 or EDFS40 contains 15% (v/v) EG and 15% (v/v) dimethyl sulfoxide (DMSO), 20% (v/v) EG and 20% (v/v) DMSO], equilibrium time during vitrification (0.5-2.5 min) and vitrification protocols [one-step straw, two-step straw and open-pulled straw (OPS)] on in vivo development of vitrified Boer goat morulae and blastocysts after embryo transfer. In the one-step straw method, the lambing rates of vitrified embryos in EFS30 (37.5%), EFS40 (40.5%) or EDFS30 (38.2%) group were similar to that of fresh embryos (57.5%) and conventional freezing method (46.7%) when the equilibrium time was 2 min. In the two-step straw method, the highest lambing rate was obtained when embryos were pretreated with 10% EG for 5 min and then exposed to EFS40 for 2 min (51.4%), showing similar lambing rates compared with fresh embryos (56.1%) or the embryos cryopreserved by conventional freezing method (45.2%). In the OPS method, the lambing rate in EFS40, EDFS30 or EDFS40 groups were similar to that (57.1%) of fresh embryos, or to that (46.0%) of embryos cryopreserved by conventional freezing method. The highest lambing rate (51.4%) of the group of OPS was obtained when the embryos were vitrified with EDFS30. In conclusion, either the two-step straw method in which embryos were pretreated in 10% EG for 5 min and then exposed to EFS40 for 2 min, or the OPS method in which embryos were pretreated in 10% EG + 10% DMSO for 30 s and then exposed to EDFS30 for 25 s was a simple and efficient method for the vitrification of Boer goat morulae and blastocysts.     

胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响

[目的]为了评估胚胎质量和发育阶段对奶牛胚胎移植妊娠率的影响。[方法]使用63头青年奶牛作为供体进行超数排卵,评估回收胚胎质量和发育阶段。选择334头青年奶牛作为受体鲜胚移植不同质量和发育阶段胚胎。对胚胎质量分布、发育阶段分布、不同质量胚胎和不同发育阶段胚胎移植30 d妊娠率进行统计分析。[结果]可用胚胎中A级胚胎比例(60.78%)显著高于B级和C级胚胎比例(36.70%和2.52%)(P<0.05);致密桑椹胚比例(54.36%)显著高于早期囊胚,囊胚和扩张囊胚比例(18.35%,25.0%和2.29%)(P<0.05)。A级和B级胚胎移植30 d妊娠率(63.55%和64.35%)显著高于C级胚胎移植30 d妊娠率(44.44%)(P<0.05);致密桑椹胚、早期囊胚、囊胚和扩张囊胚移植30 d妊娠率差异不显著(P<0.05),早期囊胚、囊胚移植30 d妊娠率高于致密桑椹胚、扩张囊胚移植30 d妊娠率(P<0.05)。[结论]选择不同发育阶段的A级和B级胚胎能够获得较高胚胎移植妊娠率,增加早期囊胚和囊胚阶段胚胎移植数量能够提高胚胎移植妊娠率。     

A Programme for Oestrus Synchronization and Embryo Transfer in Sheep

Eighty-five animals were used to develop an embryo transfer programme including a study on how oestrus synchronization influenced the ovulation rate. The animals, both ewes and ewe lambs, were divided into three groups: donors, recipients and controls. Oestrus was synchronized in donors and recipients by the use of progesterone-impregnated vaginal pessaries. The donors also received one injection of 600 IU PMSG. Samples for microbiological investigation of the vaginal flora were taken in connection with synchronization. The ovulation rate was determined by laparoscopy in the control animals and by laparotomy in the donors and recipients. The embryos were surgically recovered from the donors by flushing of the uterine horns seven days after pessary removal. The embryos were classified according to developmental stage and quality. At transfer each recipient received 2–4 embryos (moruhs or blastocysts) by a surgical method. A ± 1 day asynchrony in oestrus between donors and recipients was tolerated. All synchronized animals came into oestrus within 2.5 days after pessary removal. The interval was shorter if the animals had been injected with PMSG. The largest number of ovulations occuwed in the synchronized and PMSG-treated animals (mean 4.5 ± 2.1). Synchronized animals that did not receive PMSG had almost the same ovulation rate as the control animals (2.6 ± 0.9 versus 2.5 ± 0.7). The pessary treatment influenced the bacterial flora of the vagina. The number of ewes with bacterial growth in the vagina increased. The number of isolated organisms also increased. The embryo recovery rate was 80.8% and 3.7 ± 2.7 ovas was recovered on average. Eighty-eight percent of all donors yielded transferable embryos. Morulas and blastocysts comprised 84.4% of the recovered oocytes/embryos. Only 5.2% of these were of poor quality. Of the transferred embryos, 65.1% developed into lambs and 91.3% of the recipients lambed. The ewe lambs were as suitable as donors and recipients as the older ewes.     

小鼠胚胎的玻璃化冷冻研究

用不同冷冻载体(玻璃管、塑料管和0.25 mL细管)及不同冷冻方法(程序化冷冻和玻璃化冷冻)对小鼠3.5 d~4 d桑椹胚和囊胚进行冷冻保存,并与不做任何冷冻保存处理直接培养进行对比。结果表明,使用玻璃管、塑料管和0.25 mL细管作为胚胎的承载材料进行玻璃化冷冻,效果差异不显著;采用程序化冷冻与OPS玻璃化冷冻法,对小鼠胚胎进行冷冻保存可以取得较好的结果。从而得出,用不同材质的冷冻载体进行玻璃化冷冻,可以获得与程序化冷冻相同的良好效果。     

牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究

本文进行了牛胚胎冷冻与移植受胎技术研究。摸索出了提高牛冷冻胚胎成活率和移植受胎率的综合配套技术。牛冷冻胚胎解冻成活率达８４．４％（５７／１２２）。其中１９９６年移植受胎率达到５５．６％（２０／３６）。Ａ级胚胎达以７７．８％（２１／２７），并在我国首次获得中国荷斯坦牛冷冻胚胎的二分胚的同孵孪生牛犊。且达到４２．９％（３／７）移植受胎率。     

高产奶牛性控雌性冻胚规模化移植试验

从美国引进高产奶牛性控雌性胚胎，在农村条件下，选择自然发情的黄牛作受体，移植合格受体牛648头。结果显示，自然发情黄牛924头中，经直肠检查合格受体牛648头，使用合格率为70．13％（648／924）；氯前列烯醇同期处理476头，使用合格率为36．13％（172／476），差异极显著（P〈0．01）。80～100d怀孕检查，自然发情移植成功率41．98％（272／648），同期发情移植成功率40．12％（69／172），差异不显著（P〉0．05）。自然发情黄牛不同黄体级别的移植成功率分别为：A级44．09％（41／93），B级42．43％（199／469），C级37．21％（32／86），差异不显著（P〉0．05）。单胚移植580头，移植成功率42．41％（242／580），双胚移植68头，移植成功率44．12％（30／68），差异不显著（P〉0．05）。正常胚胎单枚移植541头，移植成功率42．51％（230／541），裸胚单枚移植39头，移植成功率30．77％（12／39），裸胚比正常胚移植成功率低11．74％。怀孕牛已出生犊牛83头。其中母犊79头．公犊4头，母犊占95．18％，与自然发情的性比例（50％）相比较，差异极显著（P〈0．01）。     

高寒牧区无角陶赛特羊胚胎移植试验及其后裔的生长发育指标测定

在环青海湖地区的共和县引进澳大利亚无角陶赛特羊胚胎,以当地青海半细毛羊为受体,进行胚胎移植,结果移植冻胚60枚,产羔28只,移植妊娠率为46.67%,羔羊成活率为100%。羔羊生长发育指标测定结果表明,胚胎移植羔羊平均出生重3.25kg,4月龄前生长发育最为迅速,平均日增重达205.96g,6月龄平均体重32.47kg。     

高寒牧区陶赛特绵羊鲜胚移植试验

选取兰州信合牧业34只陶赛特绵羊为供体,采用递减法注射FSH进行超排,采用人工授精配种,30只长途运输到青海省海北州西海镇手术法回收胚胎,鉴定后移植。155只藏系绵羊作为受体,采用两次PG注射进行同期发情,119只受体在西海镇移植,32只长途运输到甘肃兰州信合牧业进行移植。结果表明:34只供体获得胚胎共168枚,、每只供体平均获得4.94枚,合格率89.88%,151只受体表现发情,发情率为97.42%。其中,在西海镇移植的119只产羔73只,产羔率为61.34%,在兰州移植的32只产羔21只,产羔率为65.6%。     

小鼠卵母细胞和胚胎不同冷冻方法的比较研究

探讨程序化冷冻与玻璃化冷冻对小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎的复苏率及其发育潜能的影响。通过小鼠的卵母细胞与早期胚胎的不同冷冻方法的比较,为后续阿旺绵羊的胚胎冷冻保存提供参考。采用程序化冷冻与玻璃化冷冻技术,分别冷冻小鼠GV期卵母细胞及二细胞期胚胎,复苏后培养,比较不同冷冻处理后的复苏率、成熟率与囊胚率。小鼠GV期卵母细胞程序化冷冻复苏率(48.00%±5.29%)显著低于玻璃化冷冻复苏率(65.00%±5.00%),有统计学差异(P=0.0147<0.05);而程序化冷冻后复苏卵母细胞的发育成熟率略高于玻璃化冷冻组,但无统计学意义。小鼠二细胞期胚胎程序化冷冻组复苏率(76.00%±2.00%)显著高于玻璃化冷冻组复苏率(70.00%±2.00%),有统计学差异(P=0.0213<0.05);冷冻后复苏胚胎发育的囊胚率程序化冷冻略低于玻璃化冷冻及对照组,但无统计学意义。     

猪微注射基因导入系统影响受体受孕率及产仔率的几个因素

在应用显微注射、胚胎移植系统技术，进行猪ＯＭＴ／ＰＧＨ基因导入的研究中，对移入受体的胚数，ＰＭＳＧ处理受体以及不同的移植方法（自体移植与异体移植）等影响受体受孕率及产仔率的因素，进行了试验分析，结果表明：（１）移入受体的注射胚数分别为１０—１９枚、２０—２９枚、３０枚以上时，其受孕率为４５．５％、６４．７％和７１．４％，产仔率为８．０％、１９．６％和１４．５％，以移入２０—２９枚效率最高；（２）用ＰＭＳＧ对受体母猪做同期发情处理，其受孕率和产仔率比选择自然发情的受体分别下降２５％和８．５％；（３）采用自体移植的方式，在移入胚数基本相同的情况下（１５枚左右），比异体移植的受孕率和产仔率分别提高１４．３％和６．４％。