MicroRNA-124抑制实验性自身免疫性脑脊髓炎

目的： Micro-RNAs可以调节很多生理功能,包括免疫系统中的细胞分化和活化。MicroRNA-124在中枢神经系统小胶质细胞中特异表达,本文检测MicroRNA-124对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用。方法本文通过给小鼠的实验性自身免疫性脑脊髓炎模型评分。结果发现静脉注射miR-124可以完全的阻止病症发展过程。结论这些发现明确了miR-124可以作为单核细胞和巨噬细胞活化中的未知调控者,对实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的作用。     

小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎性别差异研究

目的探讨小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)性别差异的原因。方法应用髓鞘脂质蛋白139 151 (PLP139 151)免疫诱导建立EAE模型,观察雌雄小鼠病情的差异,采用MTT、ELISA法,检测外周淋巴细胞对自身抗原反应的性别差异。结果雌性小鼠的平均发病时间(15±2.1)d,早于雄性的(22±4.3)d,病程有复发-缓解的特点,而雄性则多呈一过性发病;EAE雌雄小鼠的特异性淋巴细胞增殖反应和γ-干扰素分泌无显著性差异( P >0.05),雄性小鼠白细胞介素4(IL- 4)分泌明显高于雌性小鼠( P <0.01)。结论PLP139 151诱发小鼠EAE性别差异可能与雄性小鼠外周淋巴细胞分泌IL- 4水平较高,具有保护作用有关。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型成功建立的影响因素

多发性硬化(mutiple sclerosis,MS)是一种以中枢神经系统白质脱髓鞘为主要病理特点的自身免疫性疾病,动物模型在其研究中应用广泛,而国际标准化的动物模型是研究得以公认的基础。目前用于该病研究的动物模型很多,主要分为免疫诱导和病毒诱导2种,而应用最广泛的是免疫诱导的实验     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎治疗作用的研究

目的观察阿托伐他汀对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用并初步探讨其治疗机制。方法将大鼠分为正常组、模型组、阿托伐他汀组,每组6只。正常组不做任何处理;以豚鼠脑、脊髓为原料提取髓鞘碱性蛋白(MBP),免疫Lewis大鼠建立EAE模型。模型组注射抗原后以蒸馏水灌胃,阿托伐他汀组给予阿托伐他汀灌胃。建模后每日对大鼠神经症状进行评分,采用MTT法检测T淋巴细胞增殖,ELISA法检测大鼠脾细胞培养上清液中IFN-γ和IL-4水平。结果 (1)与模型组相比,阿托伐他汀组大鼠神经系统症状有不同程度减轻;(2)MTT法显示:与模型组大鼠相比,阿托伐他汀组大鼠的T细胞增殖被显著抑制(P<0.01);(3)与正常组相比,模型组大鼠13d时IL-4水平无明显变化,17、21d时,IL-4水平明显升高(P<0.01),与模型组相比,阿托伐他汀组13、17d时IL-4水平明显升高(P<0.01),IFN-γ水平在13、17、21d时均显著低于模型组(P<0.05)。结论阿托伐他汀能改善EAE大鼠的症状,其机制可能与抑制T淋巴细胞增殖,纠正Th1/Th2失衡有关。     

超顺磁性氧化铁在实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型中的价值

目的 在实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE）模型中,比较常规T2加权成像（T2 weighted imaging,T2WI）、钆 二乙三胺五醋酸（gadolinium diethylenetriamine pentaacetic acid,Gd DTPA）和超顺磁性氧化铁（superparamagnetic iron oxide,SPIO）增强图像之间的差异,探讨巨噬细胞在多发性硬化（multiple sclerosis,MS）炎性活动病灶中的细胞学标志。方法 在EAE模型临床症状的亚临床期、初发期、高峰期,13只复发缓解（relapsing remitting,R R）EAE大鼠模型组和13只正常对照组大鼠在注入对比剂之前均行常规T2WI扫描,接着分别在其尾静脉注入Gd DTPA后5 min行T1加权成像（T1 weighted imaging,T1WI）,再注入SPIO,24 h后行T2＊WI扫描。扫描完毕后立即处死大鼠取脑,行脑组织切片的ED1免疫组织化学染色和Prussian blue染色。结果 EAE模型组大鼠在第11天出现临床症状（初发期）,第14天达到高峰期;MRI检查：SPIO增强图像对EAE病灶的显示较常规T2WI和Gd DTPA增强图像好。病理学检查：ED1染色,在SPIO显示为低信号的区域内出现了炎症细胞（以巨噬细胞为主）浸润;Prussian blue染色示病灶内巨噬细胞胞质内出现了蓝染颗粒,沉积部位与T2＊WI上低信号区对应。对照组大鼠均无异常。结论 SPIO较Gd DTPA更好地显示EAE模型中炎性活动性病灶内血管周围以巨噬细胞为主的浸润。     

益肾达络饮对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠ICAM-1的影响

目的:研究益肾达络饮对PLP139-151诱导的实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中枢神经系统内趋化因子ICAM-1的影响,探讨益肾达络饮在神经系统炎性脱髓鞘疾病中的作用机制。方法:采用免疫组化、地高辛标记的寡核苷酸探针原位杂交技术,测定各组小鼠中枢神经组织中ICAM-1蛋白及mRNA的含量。结果:ICAM-1蛋白及mRNA表达一致性较好,模型组、激素组、中药组与正常组相比较均有极显著性差异(P值均<0.01),模型组与中药组比较有极显著性差异(P值均<0.01),模型组与激素组比较有显著性差异(P值均<0.05),激素组与中药组比较没有差异(P值均>0.05)。结论:益肾达络饮在蛋白、分子水平能降低ICAM-1含量,其对自身免疫性脑脊髓炎小鼠保护作用可能与下调ICAM-1,抑制抑制内皮细胞与白细胞的黏附,干扰自身反应性T细胞及活化巨噬细胞的迁移有关。     

不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓内NF-κB表达的影响研究

目的 探究不同剂量硫辛酸对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓内核转录因子-κB(NF-κB)的表达的影响.方法 将50％豚鼠全脊髓匀浆诱导的80只Wistar大鼠EAE模型采用随机数字表法分为4组,每组20只,A组为EAE模型组,B、C、D组为硫辛酸干预组,同时选取20只健康Wistar大鼠作为健康对照组(E组...     

米诺环素治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的初步研究

目的探讨米诺环素对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的治疗作用。方法以豚鼠全脊髓匀浆为抗原,免疫Wistar大鼠建立急性EAE模型。免疫后,米诺环素治疗组大鼠每天给予米诺环素50 mg/kg灌胃治疗,对照组和EAE组大鼠每天给予10 ml/kg的生理盐水灌胃,同时对各组大鼠的临床症状、脑部病理改变及外周血T细胞相关细胞因子IFN-γ、IL-4进行观察,评估米诺环素的治疗效果。结果米诺环素治疗组大鼠临床症状减轻,脑部特异性淋巴细胞浸润减少,IFN-γ表达降低。结论米诺环素治疗大鼠EAE有较为明显的效果,为治疗人的多发性硬化提供有益的借鉴。     

康复预处理对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠IL-23/IL-17轴的影响

目的：探讨康复预处理对实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠白介素23（IL-23）／白介素17（IL-17）轴的影响。方法：对C57BL／6小鼠进行为期8周的康复预处理（跑台训练）,复制C57BI．／6小鼠EAE模型,建立模型组和预处理加模型组（预加模组）,并设立空白对照组,观察各组小鼠临床评分,用ELISA法检测各组小鼠血清IL-23和1L--17的表达。结果：预加模组小鼠临床评分明显低于模型组（1．44土0．56、2．75±1．13,P〈o．05）。模型组IL-23及IL-17的表达均较空白对照组高（P〈0．05）,预加模组较模型组低（P〈0．05）,预加模组和空白对照组比较差异无统计学意义。结论：康复预处理能够延迟EAE发生,这一作用可以通过抑制IL-23／IL-17轴而实现。     

荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的控制作用和机制

目的:探讨荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗(DC/sp)对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病的控制作用及其机制。方法:用MOG35-55肽段免疫C57/BL6小鼠,建立EAE动物模型后,用DC/sp免疫EAE小鼠,对照组注射PBS,每天观察小鼠临床症状;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠血清中的细胞因子含量,3H掺入法检测MOG35-55特异性淋巴细胞增殖,流式细胞仪检测中枢神经系统中Th1和Th17细胞数量。结果:荷Hsp60sp的树突状细胞疫苗能显著减轻EAE发病,而抗CD8抗体可阻断DC/sp的这种作用;DC/sp免疫减少了EAE小鼠血清中IFN-γ(558 pg/mL降至187 pg/mL)(P     

磷酸化p38MAPK在实验性自身免疫性脑脊髓炎轴索损伤中的作用

目的 观察p38MAPK在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE )中的活化及其与早期神经元轴索损伤的关系和变化规律,以及p38MAPK阻滞剂SB203580对轴索损伤的调节作用.方法 使用SJL雌性小鼠建立EAE模型,分别对模型组、SB203580组和对照组各时间点取脑和脊髓,行HE和Luxol Fast Blue(LFB)染色,并行磷酸化p38MAPK抗体染色;对相邻脑组织切片同时行淀粉样前体蛋白(APP)免疫组化检测.用图像分析系统对脑白质病灶内神经元胞浆阳性信号数目、覆盖面积及阳性信号平均密度值进行测量.结果 PLP肽段免疫的小鼠发病具有缓解-复发的特点,局部白质区域出现脱髓鞘改变.与模型组比较,SB203580组改变较轻,符合其行为学观测结果,且小鼠的体重增加明显高于模型组( P<0.01).除对照组,其余各组在各时间点均有APP蛋白表达.与模型组相比,SB203580组干预后APP蛋白表达较轻,阳性细胞数目与强度均明显下降( P<0.01);磷酸化p38MAPK在EAE小鼠免疫后第7天就有明显表达.与模型组相比,SB203580组p38MAPK表达较轻,阳性数目与强度均明显下降( P<0.01).结论 p38MAPK阻滞剂SB203580不仅能够抑制EAE中p38MAPK活化,而且可以有效下调EAE轴索损伤的标志性指标APP的表达;p38MAPK可能参与了EAE的轴索损伤过程.     

吲哚美辛对实验性变态反应性脑脊髓炎模型干预研究

目的:观察吲哚美辛对SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的治疗效果,初步探讨其治疗机制。方法:采用同种脑脊髓匀浆诱导实验性变态反应性脑脊髓炎模型,给予吲哚美辛进行实验性干预治疗,观察和比较动物的神经症状和病理改变。用免疫组化法观察各组动物小胶质细胞反应。结果:吲哚美辛可以缓解临床症状、缩短病程、降低实验性变态反应性脑脊髓炎的缓解率、复发率,减轻炎症反应及脱髓鞘(P<0.05)。治疗组大鼠脑组织中小胶质细胞的阳性细胞数在高峰期和未治疗组相比,有统计学意义。结论:吲哚美辛抑制小胶质细胞活性,下调细胞因子TNF-α的水平;从而对实验性变态反应性脑脊髓炎具有保护作用。     

MRI监测不典型发病的实验性自身免疫性脑脊髓炎

目的 利用MRI监测实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病进程,判断MRI对不典型发病的实验性自身免疫性脑脊髓炎的监测价值.方法 应用MOG35-55诱导Lewis大鼠建立EAE模型.对所有EAE大鼠进行急性期、慢性期的神经功能评分、MR常规成像及USPIO强化成像,比较MRI与临床状态的关系.处死部分EAE大鼠进行病理分析,并与MRI进行对照.结果 MOG35-55诱导的EAE模型症状复杂多样,神经功能评分与MRI对病情的判断存在差异,MRI可以发现、但神经评分不易判断的EAE病灶.结论 MRI可提高对不典型发病的EAE病灶的检出率,能更加客观、全面地评估EAE模型.     

Src抑制的蛋白激酶C底物在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脊髓中的表达及其意义

目的 研究Src抑制的蛋白激酶C底物(Src-suppressed C kinase substrate,SSeCKS)在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)进程中的表达情况,探讨其在EAE病理过程中可能的功能及意义,为多发性硬化(mul...     

口服耐受防治大鼠实验性自身免疫性脑脊髓膜炎的实验研究

目的:观察不同时期口服耐受对Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓膜炎(EAE)的保护作用.方法:预防组分别在抗原免疫前后以豚鼠脊髓匀浆灌胃;治疗组在免疫后1周以豚鼠脊髓匀浆灌胃,空白组未作任何处理,其余各组均同日按照EAE模型制作方法进行免疫,免疫后连续观察16天后处死.结果:空白对照组体萤增长明显,大鼠无发病,大鼠脊髓实质未见炎性浸润及神经细胞的变性坏死;EAE组、预防对照组、治疗对照组体莺明显下降,发病率分别为83.3%、80%、75%,大鼠脊髓实质有大量单个核细胞浸润,主要以淋巴细胞为主,浸润细胞在血管周围形成典型的袖套状改变;治疗组体重明显下降,大鼠发病率为81.8%,最大神经功能评分降低,病理改变减轻;预防组大鼠体重稍增长,大鼠发病率33.3%,最大神经功能评分为降低,病理改变减轻.结论:口服耐受能对EAE动物起到预防作用,也有可能有治疗作用.     

1例自身免疫性GFAP脑膜炎/脑脊髓炎合并HIV感染患者的分析

自身免疫性胶质纤维酸性蛋白(GFAP)脑膜炎/脑脊髓炎是2016年梅奥医学中心神经免疫实验室率先发现的一种疾病,皮质类固醇反应性脑膜炎或脑炎是其主要临床表现,对皮质类固醇治疗有效,具有复发性,有时与自身免疫性疾病如视神经脊髓炎谱系病共存,34％～38％的GFAP-免疫球蛋白G(IgG)阳性患者合并肿瘤[1].GFAP-IgG血清学阳性是自身免疫性GFAP脑膜炎/脑脊髓炎的特异性指标,可与其他疾病如血管炎、感染、炎性脱髓鞘疾病、淋巴瘤、胶质瘤、转移瘤等进行鉴别.现将本科收治的1例GFAP血清学阳性合并人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者的诊治过程报道如下.     

SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型的建立

目的：探索SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型制作的试验方法与技术。方法：采用完全福氏佐剂一脑脊髓匀浆，并辅以注射百日咳疫苗诱导SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型，比较不同的免疫原（同种或异种），注射方法（一次或多次注射）以及性别差异对模型制作的影响。观察和比较动物的神经症状和病理改变。结果：使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的模型，其发病持续时间分别为16～20d，10～14d；发病率为85％；复发率为46．67％，而致死率仅有5．88％；明显优于其他组别。病理学证实发病大鼠具有典型的脱髓鞘改变和胶质结节形成。结论：使用同种脑脊髓匀浆，多次注射雌性SD大鼠诱导的动物模型其临床表现、病理特征、病程特点与人类的多发性硬化具有很大的相似性，适用于多发性硬化的研究。     

阿托伐他汀在实验性变态反应性脑脊髓炎中的作用机制研究

目的:观察阿托伐他汀对SD大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗效果,初步探讨其治疗机制。方法:采用同种脑脊髓匀浆诱导EAE模型,给予阿托伐他汀进行实验性干预治疗,观察和比较动物的神经症状和病理改变。用免疫组化法观察各组动物小胶质细胞反应,用免疫组化法、ELISA法观察脑组织及外周血中TNF-α的表达。结果:阿托伐他汀可以缓解临床症状、缩短病程、降低EAE的缓解率、复发率,减轻炎症反应及脱髓鞘(P<0.05)。治疗组大鼠脑组织中小胶质细胞的阳性细胞数、TNF-α的阳性细胞数及外周血中TNF-α的含量在高峰期与未治疗组相比,差异有统计学意义。结论:阿托伐他汀抑制小胶质细胞活性,下调细胞因子TNF-α的水平,从而对EAE具有保护作用。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型视神经炎发病机制：与辅助性T细胞亚群的关系

背景：视神经炎的病因多为自身免疫引起的炎性脱髓鞘,很多的视神经炎为多发性硬化的早期表现。在外周CD4+T细胞中,有5%-10%为调节性T细胞,其免疫抑制能力很强。自身免疫性脑脊髓炎所引起的视神经炎发病机制是否与辅助性T细胞亚群的有关呢？目的：分析实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型视神经炎发病机制与辅助性T细胞亚群的关系。方法：将小鼠腹腔注射百日咳菌液建立实验性自身免疫性脑脊髓炎模型,分别免疫11,15,19 d,并设腹腔注射生理盐水的佐剂组小鼠作对照。
　　结果与结论：酶联免疫吸附检测显示,与佐剂组相比,免疫后19 d组视神经白细胞介素4蛋白含量降低(P<0.05);免疫后11,15 d组视神经白细胞介素17蛋白含量升高(P<0.05);免疫后15,19 d组视神经干扰素γ蛋白含量升高(P <0.05);免疫后11,15,19 d组视神经Foxp3蛋白含量显著降低(P <0.05)。实时PCR检测显示,与佐剂组相比,免疫后11,15,19 d组视神经中干扰素γ、Foxp3 mRNA表达降低(P<0.05), RORt mRNA表达升高;免疫后15,19 d组视神经中白细胞介素4,白细胞介素17,T-beat mRNA表达升高(P<0.05)。免疫后19 d组GATA3 mRNA表达降低(P<0.05)。结果证实,实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠模型视神经炎的发生发展可能受到Foxp3和调节性T细胞表达减少的影响,免疫后早期白细胞介素17可能介导对炎症损伤,发病高峰期干扰素γ可能使炎症损伤程度加重。     

咪唑克生对Lewis大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用

目的:探讨咪唑克生(idazoxan,Ida)对Lewis大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的干预作用,观察其对大鼠脊髓组织内小胶质细胞、星形胶质细胞的变化和血清IFN-γ、IL-10表达的影响。方法:采用豚鼠脊髓匀浆免疫诱发Lewis大鼠EAE模型,免疫当日开始给予Ida10mg/kg对其进行实验性干预,连续10d,然后对其神经症状加以评分。用免疫组化法测定腰髓中表达GFAP和CD11b的阳性细胞数;用ELISA法测定血清IFN-γ和IL-10水平。结果:与EAE模型组相比,Ida干预组大鼠的临床症状显著改善(P<0.05),而其生病率与EAE模型组差异无显著性;免疫组化结果显示,Ida干预组活化的小胶质细胞数量减少,但活化的星形胶质细胞数量增多(P<0.05)。Ida对血清中IFN-γ和IL-10的水平没有明显影响。结论:Ida对EAE大鼠具有保护作用,其作用机制可能为Ida对中枢神经系统的免疫机制有一定影响。