小柴胡汤逆转人肝癌细胞BEL-7402／5-FU 的多药耐药作用

目的:研究小柴胡汤对BEL-7402/5-FU细胞多药耐药的逆转作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同化疗药物以及小柴胡汤对BEL-7402/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50),计算耐药指数和小柴胡汤的逆转倍数;流式细胞仪检测细胞内阿霉素的荧光强度;RT-PCR检测mdr1基因表达;western blot检测p-gp蛋白表达。结果:BEL-7402/5-FU耐药株对5-FU和阿霉素顺铂均具有耐药性,耐药指数分别是6 501.99和31.73;0.5 mg/ml小柴胡汤和5-FU、阿霉素联合应用,其逆转倍数分别是1.66、1.50;1.0 mg/ml小柴胡汤和5-FU、阿霉素联合应用,其逆转倍数分别是3.44、5.58;小柴胡汤增强阿霉素的荧光强度;小柴胡汤降低mdr1基因表达和p-gp蛋白表达,各个浓度均具有统计学意义。结论:小柴胡汤可以抑制mdr1基因编码蛋白产物p-gp的表达,增加细胞内化疗药物的浓度,从而逆转了肝癌细胞的多药耐药性。     

微小RNA在乳腺癌干细胞中的表达

微小RNA作为生物体正常生长发育的调控分子,不仅在多种恶性肿瘤中表达异常,而且在维持胚胎干细胞以及成体干细胞自我更新及多向分化潜能中起重要作用.因此,筛选乳腺癌干细胞相关微小RNA表达谱,探讨微小RNA参与肿瘤干细胞形成的分子机制,具有重要的理论意义.文章综合分析相关文献,对乳腺癌干细胞和微小RNA方面的研究情况予以综述分析和展望.乳腺癌叶干细胞具有自身特征性微小RNA,随着微小RNA在乳腺癌干细胞研究的不断进展,对乳腺癌干细胞的生物学特征会不断得以揭示,为进一步从干细胞层面研究乳腺癌发病机制及靶向治疗打下基础.     

微小RNA在肝癌的早期诊断、预后监测及治疗中的研究进展

肝癌是临床上常见的恶性肿瘤之一,目前缺乏有效的分子标志物对肝癌进行早期诊断以及预后监测。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类约19~25个碱基长度的内源性非编码单链小分子RNA,可在转录后水平影响基因的表达。已有的研究表明,miRNA与肝癌的发生、发展密切关联,提示miRNA可作为肝癌早期诊断、预后监测的新型分子标志物以及分子治疗的新靶点。本文主要从这3方面系统地阐明miRNA与肝癌相关的机制,并展望其在临床的应用。     

微小RNA和肿瘤

微小RNA(miRNA)是内源性的干扰RNA。它通过抑制基因转录后的表达调控基因功能,从而影响细胞的生理过程。其中有些miRNA如mir-155,mir-15、mir-16等可能和肿瘤有关。     

微小RNA在胰腺癌中的研究进展

胰腺癌是临床常见的恶性肿瘤之一,其具有高度侵袭性,由于早期胰腺癌患者临床症状较为隐匿,导致大部分患者确诊时已处于进展期或晚期,术后患者5年生存率较低[1]。目前胰腺癌的发生及发展的分子机制尚未阐明,因而寻找新型分子标志物对胰腺癌早期诊断及治疗具有重要意义。微小RNA(microRNA,miRNA)是一类由21~25个核苷酸组成的非编码单链小RNA分子,近年来。     

微小RNA与多发性骨髓瘤

微小RNA(microRNA,miRNA)是一类对基因具有调控功能的内源性非编码小分子RNA,通过与靶mRNA完全或不完全互补配对,引起mRNA降解或翻译抑制,从而对基因转录后水平进行调控。研究表明,miRNA对细胞增殖、代谢、凋亡、分化等细胞发育的生理和病理过程有重要调控作用,其失调有助于肿瘤的形成。本文就miRNA的生物学特征、功能作用及与多发性骨髓瘤的发生发展、染色体核型异常及药物耐药等方面的研究进展作一综述。     

微小RNA在骨髓增生异常综合征中的表达异常及意义

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类长约22个核苷酸左右的非编码RNA,广泛存在于真核生物体内,参与转录后基因的表达调控.miRNA在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes,MDS)患者中表达异常.本文就MDS中miRNA表达及调控的研究进展进行综述.     

肿瘤的多药耐药与RNA干扰技术

肿瘤的多药耐药是化疗失败的主要原因，而RNA干扰技术则是针对肿瘤多药耐药的划时代基因工程研究方法，它可在肿瘤的发现、诊断、治疗等多个方面发挥巨大作用，本文主要介绍肿瘤治疗过程中产生多药耐药现象的机制，以及逆转该现象的RNA干扰方法。     

多药耐药基因在白血病细胞中的表达

用ＭＤＲ１基因探针及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交技术检测６３例白血病细胞ＭＤＲ１ｍＲＮＡ表达水平，发现３５例未治急性白血病阳性表达率为４５％。急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）组ＭＤＲ１表达与免疫分型相关。在２２例可做预后评价的病例中发现ＭＤＲ１基因表达与化疗反应显著相关，化疗缓解率在阳性表达组仅为２５％，而阴性表达组为９０％，这种现象不仅见于急性非淋巴细胞白血病，也见于ＡＬＬ。认为可将ＭＤＲ１ｍＲＮＡ中、高度表达作为化疗耐药指标，检测白血病细胞ＭＤＲ１基因表达可为化疗方案个体化提供依据。     

微小RNA：一类新的调控性非编码RNA

微小RNA（miRNA）是一种长度约为18-25nt的非编码RNA。在线虫、拟南芥、果蝇、人类等动植物细胞中已发现了近400个miRNA，这些miRNA可在转录后水平或翻译水平调节基因表达。miRNA可在无脊椎动物的发育、神经分化、细胞增殖、凋亡和脂肪代谢过程中发挥调节作用。由于与siRNA的相关性及相似的功能，miRNA已引起人们的广泛关注。     

基于TCGA数据的肝癌预后相关miRNA筛选

目的通过TCGA数据库中肝癌高通量测序数据的分析,寻找新的肝癌预后相关的miRNA,为后续研究提供数据支持。方法下载TCGA数据库中miRNA表达数据及肝癌患者相关临床病理参数,基于R语言进行数据的整理、合并及标准化;分别采用单因素Cox生存分析模型及Bh GLM R软件包中指数先验分布模型对miRNA表达数据进行分析,并选择两种方法筛选结果的交集。结果单因素Cox生存分析模型共筛选出63个预后相关miRNA(P0.05),指数先验分布模型筛选出77个miRNA,两种方法共筛选出包括miR-188、miR-576、miR-887及miR-91等18个与肝癌患者预后密切相关的miRNA。结论单因素Cox模型联合指数先验分布模型筛选出的肝癌预后相关miRNA具有较高的可信度,或可成为肝癌预后判断的新指标。     

Exosomal miRNA in early-stage hepatocellular carcinoma

The incidence and mortality of hepatic carcinoma (HCC) remain high, and early diagnosis of HCC is seen as a key approach in improving clinical outcomes. However, the sensitivity and specificity of current early screening methods for HCC are not satisfactory. In recent years, research around exosomal miRNA has gradually increased, and these molecules have emerged as attractive candidates for early diagnosis and treatment of HCC. This review summarizes the feasibility of using miRNAs in peripheral blood exosomes as early diagnostic tools for HCC.     

RNA干扰抑制人肝癌细胞N-ras基因表达的研究

目的研究RNA干扰(RNAi)对BEL7402细胞的N-ras基因表达的干扰效应。方法建立装载靶向N-ras基因小干扰性RNA(siRNA)的表达载体;用脂质体法将此表达载体转染BEL7402细胞株,以转染空载细胞作为对照;采用RT-PCR和Western blot检测N-ras基因的表达;流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果转染siRNA的表达载体可以抑制内源N-ras基因在转录和转译上的表达。N-ras基因的表达抑制与BEL7402细胞的凋亡相关联。结论转染siR-NA的表达载体可明显抑制肝癌细胞株BEL7402N-ras基因的表达,并伴有细胞的凋亡。其工作的开展将为RNAi治疗、肝癌N-ras基因功能研究、新药开发提供研究基础。     

药物洗脱微球经导管动脉化疗栓塞术治疗肝细胞癌进展

肝细胞癌(HCC)是最常见的原发性肝癌之一。经导管动脉化疗栓塞术(TACE)一直被用为中期HCC患者的一线治疗方法,而药物洗脱微球TACE(DEB-TACE)的临床应用近年来亦不断增加。本文对DEB-TACE的药物代谢动力学、微球选择、适应证和禁忌证及疗效评估进展进行综述。     

原发性肝癌GPC3基因异常表达和相关miRNA与lncRNA预测

目的分析GPC3对原发性肝细胞癌(HCC)的诊断价值,并预测其非编码RNA调控机制。方法用组织芯片和免疫组化方法检测GPC3蛋白表达,并用在线工具和TCGA数据库分析、预测GPC3相关的mi RNA和lnc RNA。结果 HCC中GPC3 m RNA和蛋白表达均高于癌旁组织,且和HCC肿瘤病理分级相关,GPC3蛋白表达和患者临床分期相关。预测到和GPC3存在调控关系的mi RNA 10个、lnc RNA 2个。结论 GPC3 m RNA和蛋白可作为HCC的诊断标志物,预测到与GPC3相互作用的非编码RNA。     

Research progress of gut microbiota in hepatocellular carcinoma

BackgroundHepatocellular carcinoma (HCC) is the sixth most common cancer and the fourth leading cause of cancer‐related death in the world. A number of challenges remain for the early detection and effective treatment of HCC. In recent years, microbiota have been proven to be associated with the development of HCC. Many studies have explored the pathogenesis, diagnostic marker, and therapeutic target potential of microbiota in hepatocellular carcinoma. Therefore, we aimed to introduce the research methods and achievements of gut microbiota in hepatocellular carcinoma and discuss the value of gut microbiota in the pathogenesis, diagnosis, and treatment of hepatocellular carcinoma.MethodsKeywords are used to search relevant articles which were mainly published from 2010 to 2021, and we further selected targeted articles and read the full text.ResultsGut microbiota involved in promoting the formation and development of hepatocellular carcinoma, and differential gut microbiota and microbial metabolites have the potential to be the biomarkers of hepatocellular carcinoma. Purposefully regulated gut microbiota can improve the prognosis of patients, which is expected to be used in hepatocellular carcinoma.ConclusionThe study of gut microbiota in hepatocellular carcinoma is definitely worthy of study. In‐depth and elaborate research design is crucial for the study of the mechanism of gut microbiota involved in hepatocellular carcinoma, which can provide new directions and targets for the diagnosis, treatment, and prognosis of hepatocellular carcinoma.     

蛋白质精氨酸甲基化转移酶5在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义

目的:探讨蛋白质精氨酸甲基化转移酶5(protein arginine methyltransferase 5,PRMT5)在肝细胞肝癌中的表达及其临床意义。方法:对323例肝细胞肝癌组织及对应正常肝脏组织进行免疫组化染色,分析PRMT5在肝癌组织中的表达以及在细胞内的分布情况。分析PRMT5表达及分布与肝癌患者临床特征及预后之间的关系,以及与异黏蛋白(metadherin,MTDH)联合预测肝癌患者预后的价值。结果:免疫组化染色结果显示,PRMT5在肝癌组织中表达明显高于对应的正常肝脏组织,其中核内表达占优势者为36.8%(119/323)。PRMT5表达及分布情况与MTDH表达相关(P0.01)。PRMT5表达水平不影响患者的生存率及复发率;PRMT5核内表达组患者的生存率和复发率优于核外表达组(P0.05)。PRMT5表达分布是影响患者生存率和复发率的独立预后因素(P0.05);PRMT5表达分布联合MTDH表达量的预测价值更优(P0.001)。结论:PRMT5表达在肝癌细胞核外分布占优势提示预后不佳;PRMT5核表达模式联合MTDH表达量可作为肝癌预后的潜在预测指标。     

The role of AURKA/miR‐199b‐3p in hepatocellular carcinoma cells

BackgroundPrevious studies proved that AURKA functions as an oncogene in several cancers. This article aimed to probe the miRNA‐induced regulatory mechanism of AURKA in hepatocellular carcinoma (HCC).MethodsDifferentially expressed genes in TCGA‐LIHC dataset were screened by bioinformatics methods. Levels of miR‐199b‐3p and AURKA mRNA were examined by qRT‐PCR. Western blot was utilized to evaluate protein levels of AURKA, p‐AKT, and AKT. Dual‐luciferase assay was introduced to explore their interaction. MTT, colony formation, scratch healing, transwell, and flow cytometry assays were introduced into cell proliferation, migration, invasion, and apoptosis assessment. The impact of miR‐199b‐3p/AURKA axis on HCC tumor growth was determined in a tumor xenograft model.ResultsWe found that AURKA was highly expressed in HCC and was coupled to poor prognosis of HCC. As manifested by cellular assays, compared to the normal cells HL‐7702, AURKA presented notably high expression in HCC cell lines. Overexpressed AURKA evidently impelled the proliferation, colony formation, migration, and invasion of HCC cells while suppressing apoptosis. The regulatory gene upstream of AURKA was predicted to be miR‐199b‐3p by bioinformatics method, and there was a markedly negative correlation between the two. Overexpressed miR‐199b‐3p constrained HCC cell proliferation, migration, and invasion while fostering apoptosis, which could be counteracted by upregulating AURKA. MiR‐199b‐3p repressed the tumor growth in vivo by targeting AURKA and affected PI3K/AKT signaling pathway.ConclusionTo summarize, this study implied the regulatory mechanism of miR‐199b‐3p/AURKA axis in HCC, and supplied optional therapeutic targets for HCC patients.     

辐射诱导多药耐药肝癌细胞HepG2/ADM凋亡的实验研究

目的研究联合应用放、化疗对多药耐药肝癌细胞HepG2/ADM凋亡的影响并探讨诱导凋的机制。方法比较放化疗、单纯放疗、单纯化疗的诱导凋亡作用,将HepG2/ADM分为6组,比较各组凋亡率;应用RT-PCR法检测各组HepG2/ADM细胞p53、bcl-2和bax的表达。结果经处理因素作用后,组1~6HepG2/ADM细胞凋亡率分别为2.8±0·3%,5·2±0·5%,10·9±2·3%,31·7±4·1%,11·7±2·8%,35·2±4·5%。放化疗与单纯化疗相比诱导HepG2/ADM凋亡率明显增高(P<0·05)。RT-PCR检测组1~6p53表达分别为:0·22±0·04、0·23±0·02、0·31±0·04、0·55±0·02、0·35±0·04、0·57±0·05;bcl-2表达分别为:0·34±0·03、0·31±0·04、0·25±0·02、0·14±0·02、0·26±0·03、0·10±0·03;bax表达分别为:0·21±0·02、0·25±0·02、0·29±0·03、0·38±0·03、0·29±0·03、0·41±0·06。结论放化疗联合应用能够显著增加耐药细胞HepG2/ADM凋亡率,这种作用与p53、bax、bcl-2表达调节有关。