晚期糖化终产物受体在食管鳞癌组织中的表达及其意义

目的 探讨食管鳞癌组织中晚期糖化终产物受体(RAGE)的表达及意义.方法 采用免疫组化S-P法对50例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织以及50例正常食管黏膜组织中RAGE蛋白表达进行检测;运用原位杂交方法对50例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织以及50例正常食管黏膜组织中RAGE mRNA表达进行检测.结果食管鳞癌组织中RAGE蛋白、mRNA阳性表达率明显高于癌旁不典型增生组织及正常食管黏膜组织,三者两两比较差异均有统计学意义(P均＜0.05);食管鳞癌组织中RAGE蛋白、mRNA阳性表达率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移有关(P均＜0.05).结论RAGE高表达可能与食管鳞癌发生和发展有关.     

PFTK1在食管鳞癌组织中的表达及意义

目的 探讨PFTK1在食管鳞癌组织中的表达及意义.方法 采用免疫组化S-P法检测53例食管鳞癌组织、21例癌旁不典型增生组织和25例正常食管黏膜组织中PFTK1蛋白的表达;应用原位杂交技术检测53例食管鳞癌组织、21例癌旁不典型增生组织和25例正常食管黏膜组织中PFTK1 mRNA的表达.结果 食管鳞癌组织中PFTK1蛋白、mRNA表达明显高于癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织,差异均有统计学意义(P均<0.05).食管鳞癌组织中PFTK1蛋白、mRNA的阳性表达率与食管鳞癌分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄无关(P均>0.5).结论 PFTK1的表达与食管鳞癌的发生、发展有关,其表达的升高可能促进食管鳞癌的发生、发展.     

食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2的表达及其相关性研究

目的 检测食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1和MMP-2蛋白的表达及其相关性,探讨二者与食管鳞状细胞癌浸润转移的关系.方法 应用免疫组织化学S-P法检测62例食管鳞状细胞癌、31例癌旁不典型增生及62例正常食管黏膜组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达.结果 食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中KiSS-1蛋白的阳性表达率分别为56.5%、67.7%和90.3%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1蛋白阳性表达率与患者的性别、年龄及肿瘤的组织学分级无关(P>0.05),而与浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05).食管鳞状细胞癌、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达率分别为71.0%、54.8%和22.6%(P<0.05);食管鳞状细胞癌组织中MMP-2蛋白的阳性表达率与肿瘤的分化程度、浸润深度及有无淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者的性别、年龄无关(P>0.05).食管鳞状细胞癌组织中KiSS-1及MMP-2蛋白的表达呈负相关(rs=-0.418).结论 KiSS-1对食管鳞状细胞癌的浸润及转移有抑制作用;MMP-2则对食管鳞状细胞癌的转移有促进作用,联合检测KiSS-1和MMP-2蛋白的表达有望成为判定食管鳞状细胞癌浸润及转移能力的重要指标之一.     

食管鳞癌组织中 GRIM-19的表达及意义

目的：探讨干扰素/维甲酸联合应用诱导细胞凋亡相关基因（GRIM-19）在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化 S-P 法检测50例食管鳞癌组织、50例正常食管黏膜组织、30例癌旁不典型增生组织中 GRIM-19蛋白表达;应用原位杂交法检测50例食管鳞癌组织、50例正常的食管黏膜组织、30例癌旁不典型增生的组织中 GRIM-19 mRNA 的表达。结果 GRIM-19蛋白、mRNA 在食管鳞癌组织中阳性表达率明显低于癌旁不典型增生组织以及正常的食管黏膜组织,三者比较差异均有统计学意义（ P 均﹤0.05）。GRIM-19蛋白、mRNA 的阳性表达率与肿瘤浸润深度、淋巴结转移均有关（P 均﹤0.05）,而与患者的性别、年龄均无关（P 均﹥0.05）。结论 GRIM-19表达与食管鳞癌发生、发展有关,其表达的降低可能促进食管鳞癌的发生、发展。     

食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子蛋白和mRNA的半定量表达

目的 探讨食管鳞状细胞癌组织中核干细胞因子(NS)蛋白和mRNA的半定量表达情况.方法 应用免疫组化SABC法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测62例食管鳞状细胞癌组织及其相对应的31例癌旁不典型增生组织和62例正常食管黏膜组织中NS蛋白和mRNA的半定量表达情况.结果 正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织和食管鳞状细胞癌组织中,NS蛋白阳性表达率分别为17.7%(11/62)、41.9%(13/31)和69.4%(43/62),组间比较,差异有统计学意义(χ2=33.676,P＜0.01).食管鳞状细胞癌组织中,NS蛋白阳性表达率与其组织学分级、侵袭程度及淋巴结转移密切相关(均为P＜0.05),而与年龄、性别和病理分型无关(均为P＞0.05).食管鳞状细胞癌组织中,NS mRNA的相对含量(0.971±0.121)高于癌旁不典型增生组织(0.913±0.085)和正常食管黏膜组织(0.866±0.103),组间比较,差异有统计学意义(F=14.829,P＜0.01).不同组织学分级、不同侵袭程度及有无淋巴结转移的食管鳞状细胞癌组织之间,NS mRNA的相对含量差异均有统计学意义(均为P＜0.05),NSmRNA的相对含量与年龄、性别和病理分型无关(均为P＞0.05).结论 食管鳞状细胞癌组织中,NS mRNA的表达升高,其高表达与食管鳞状细胞癌的发生发展有关.     

RUNX3与OPN在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义

目的研究RUNX3与OPN在食管鳞癌发生、发展、浸润和转移中的作用以及临床意义。方法免疫组化检测60例食管鳞癌病人的食管正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及鳞癌组织中RUNX3蛋白和OPN蛋白的表达情况。结果RUNX3在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为78．33％（47／60）、43．48％（10／23）、31．67％（19／60）。RUNX3的表达与食管鳞癌浸润深度和分期均明显相关（P〈0．05）。OPN在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增生组织及食管癌组织中分别为0％（0／60）、34．78％（8／23）及76．67％（46／60）,OPN的表达与食管鳞癌浸润深度、淋巴结转移和分期均明显相关（P〈0．05）。RUNX3和OPN在食管鳞癌组织、癌旁不典型增生及正常食管黏膜组织中的表达呈明显的负相关（P〈0．05）。结论两者联合检测对探讨食管鳞癌的发生、发展、浸润、淋巴结转移及预后判断可能会有更大的意义。     

MIM在食管鳞癌组织中的表达

目的：探讨肿瘤转移消失蛋白（ MIM）在食管鳞癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化S-P法检测65例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及65例正常食管黏膜组织中MIM表达。结果 MIM在食管鳞癌组织中的阳性表达率为75.4%、癌旁不典型增生组织中的阳性表达率为43.3%、正常食管黏膜组织中的阳性表达率为13.8%,三者两两相比差异均有有统计学意义（P〈0.05）。MIM在食管鳞癌组织中的表达与浸润程度、淋巴结转移有关（ P〈0.05）。结论食管鳞癌组织中MIM的异常表达可能是导致食管鳞癌发生、发展的原因之一。     

食管鳞癌组织中骨桥蛋白的表达及其临床意义

目的 研究骨桥蛋白（osteopontin,OPN）在食管鳞癌患者组织中的表达及临床意义。方法 分别选取120例食管鳞癌癌组织、46例癌旁不典型增生组织和120例正常食管黏膜组织,分别用免疫组化法检测各种组织中OPN蛋白的表达情况,并分析其临床意义。结果 在食管鳞癌癌组织、癌旁不典型增生组织和正常食管黏膜组织中,OPN的阳性表达率分别为76.67%（92/120）、34.78%（16/46）和0（0/120）。食管鳞癌的临床分期、淋巴结转移、癌组织的浸润深度均与OPN蛋白的阳性表达明显相关（P均〈0.05）。食管鳞癌组织中OPN蛋白阳性表达组与阴性表达组患者的5年生存率分别为10.7%及28.6%（P〈0.05）。结论 OPN蛋白在食管鳞癌的发生、发展中起到十分重要的作用,检测OPN蛋白的表达具有重要临床意义。     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的:探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法:应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果:在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05):不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(x2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论:食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达及意义

目的探讨食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白的表达情况及其与临床病理因素的关系.方法应用RT-PCR和免疫组化SP法检测62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管粘膜组织中mRNA和蛋白的表达.结果在食管鳞癌癌变过程中RECK在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常粘膜组织中mRNA的含量依次增高,分别为1.052±0.078、1.274±0.235、1.306±0.121,组间比较有明显差异(F=49.936,P＜0.05);不同分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移的食管鳞癌组织之间RECK mRNA相对含量差异均有统计学意义(F=5.081,F=26.084,U=24.011,P均＜0.05).食管鳞癌组织及癌旁不典型增生组织中RECK蛋白表达均低于正常粘膜组织,表达量分别为59.7%(37/62)、71.0%(22/31)、85.5%(53/62),组间比较有明显差异(X2=10.331,P＜0.01);食管鳞癌组织中RECK蛋白表达与癌组织的分化程度、不同浸润深度及有无淋巴结转移密切相关(P＜0.05).结论食管鳞癌组织中RECK mRNA和蛋白表达均降低,其低表达可能与食管鳞癌发生有关.检测RECK mRNA及蛋白的表达可望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一.     

间隙连接蛋白 43在舌鳞状细胞癌中的表达及意义

目的：探讨间隙连接蛋白43（connexin43,Cx43) 在舌癌中的表达及意义。方法：对6例正常舌上皮、24例不同分化程度舌癌的石蜡包埋切片用定量免疫组化检测Cx43蛋白的表达,同时应用流式细胞仪和免疫细胞化学对舌癌细胞株（Tca8113)Cx-43蛋白的表达进行检测。结果：正常 舌上皮中Cx43蛋白定位于棘细胞层的胞膜上,Cx-43阳性表达的 面积和灰度值在正常舌上皮和高分化舌癌之间无显著性差异（P＞0．05）,但Cx43阳性表达的面积随着舌癌细胞分化程度的下降显著降低（P＜0．01）,而且在舌癌组织中Cx－43异常表达于细胞浆。流式细胞仪 和免疫细胞化学检测可见舌癌细胞中Cx43弱表达,细胞阳性率仅为4．8％,而正常舌上皮则为92．3％。结论：该结果提示Cx43表达的改变与舌癌的进展和分化相关。     

连接蛋白43、Kai1和PTEN蛋白在皮肤基底细胞癌中的表达及意义

 目的 探讨皮肤基底细胞癌（basal cell carcinoma,BCC）发生发展及其特殊生物学行为的相关因素。方法 免疫组织化学SP法分别检测35例皮肤BCC、10例正常皮肤和18例皮肤鳞状细胞癌（squamous cell cacinoma,SCC）组织中Cx43、Kai1、PTEN蛋白的表达;核酸分子原位杂交法检测Cx43 mRNA的表达。应用计算机图像分析系统分别检测各组中各种检测指标的阳性面积和表达强度; SPSS（13.0）软件包进行统计分析。结果 （1）Cx43蛋白、Cx43 mRNA在皮肤表皮中的表达呈强阳性,在BCC组呈阳性或弱阳性,在SCC组呈阴性或弱阳性。Cx43及其 mRNA在BCC组的表达与正常皮肤组及SCC组比较,差异均有统计学意义（P<0.01）。（2）Kai1、PTEN蛋白在皮肤表皮中的表达呈强阳性,在BCC组呈阳性或弱阳性,在SCC组呈阴性或弱阳性。Kai1、PTEN蛋白在BCC组的表达与正常皮肤组及SCC组比较,差异均有统计学意义（P<0.05）。（3）相关分析显示,BCC组织中,PTEN蛋白的表达与Kai1蛋白呈正相关(r=0.629,P<0.01),与Cx43蛋白(r=0.519,P＜0.01)也呈正相关;Cx43蛋白的表达与Cx43 mRNA呈正相关(r=0.732,P<0.01)。结论 （1）与正常皮肤组织比较,BCC中Cx43、Kai1、PTEN蛋白和Cx43mRNA低表达,可能在BCC发生发展的过程中发挥重要作用;（2）与SCC组织相比较,BCC中Cx43、Kai1、PTEN蛋白和Cx43mRNA高表达,可能与BCC生长缓慢及极少转移的生物学特性有关。     

Aberrant expression of gap junction proteins (connexins) is associated with tumor progression during multistage mouse skin carcinogenesis in vivo

To elucidate what changes in the expression of gap junctionproteins (connexins) occur at what stages during multistagemouse skin carcinogenesis in vivo, we immunohistochemicallyand morphometrically analyzed the expression of connexin 26(Cx26) and connexin 43 (Cx43) in papillomas, well-, moderately-and poorly-differentiated squamous cell carcinomas, as wellas in squamous cell carcinomas at invasion sites and those metastasizedinto lymph nodes in female CD-I mice as a result of treatmentwith dimethylbenz[a]anthracene and 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate.In papillomas, no clear reduction of the two connexins was observed;however, Cx26 and Cx43 were frequently co-localized in the samegap junction plaques, whereas the two kinds of Cxs were differentiallyexpressed in normal and surrounding non-tumorous epidermis.In squamous cell carcinomas, the expression of both Cx26 andCx43 significantly decreased compared with surrounding non-tumorousepidermis and papillomas. The Western blot analysis confirmedthat both Cx26 and Cx43 proteins were reduced in squamous cellcarcinomas compared with papillomas. Furthermore, the expressionof Cx26 was reduced as cancer cells became morphologically lessdifferentiated, while that of Cx43 did not change. Squamouscell carcinomas at invasive sites showed clear reduction ofCx26 and Cx43. In squamous cell carcinomas metastasized intolymph nodes, Cx26 was expressed, but few carcinoma cells expressedCx43. The localization of E-cadherin on the plasma membranebetween cancer cells was maintained even at invasive and metastaticsites. Our data suggest that quantitative and qualitative changesin connexin expression are associated with tumor progression,including the loss of differentiation, and invasion and metastasis,during multistage mouse skin carcinogenesis.     

细胞间隙连接基因connexin32、connexin43及其蛋白在肝癌细胞系中的表达

为了探讨细胞间隙连接ｃｏｎｎｅｘｉｎ（ｃｘ）基因及其蛋白产物在肝癌细胞系的表达及意义,应用核酸分子原位杂交和流式细胞仪分析技术,研究肝癌细胞系ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和正常肝细胞系ＱＺＧ中,间隙连接基因ｃｘ３２、ｃｘ４３ｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达规律。原位杂交显示,ｃｘ３２、ｃｘ４３ｍＲＮＡ在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和ＱＺＧ中均呈强阳性。流式细胞仪分析,Ｃｘ３２蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１和ＱＺＧ中阳性细胞计数率分别为１．９％、１．７％和９９．０％,Ｃｘ４３蛋白阳性细胞计数率分别为７．３％、２．３％和９９．１％。Ｃｘ３２、Ｃｘ４３蛋白在ＨＨＣＣ、ＳＭＭＣ７７２１中阳性细胞计数率与ＱＺＧ相比,有非常显著性差异（Ｐ＜０．０１）。ｃｘ３２、ｃｘ４３基因在转录后水平的调控异常所导致的蛋白表达降低与ＨＣＣ的发生密切相关。     

Connexin 43 transfection in basaloid squamous cell carcinoma cells

To investigate the relationship between the expression of connexin in basaloid squamous cell carcinomas (BSCC) and their rapid proliferation and invasive potential, we examined the effect of overexpression of connexin 43 (Cx43) in a BSCC-derived cell line (BSC-OF). BSC-OF was transfected with Cx43 to obtain 15 clones with a stable expression of Cx43. In these cells, although Cx43 was distributed throughout the cytoplasm, it did not form connexon plaque. In almost all of the clones, cell proliferation was clearly suppressed. Furthermore, we investigated cell migration and invasion in three clones that showed a remarkable down-regulation in cell growth, and found that Cx43 transfection showed no significant effect on either. These results suggest that Cx43 plays a role as a tumor suppressor in the cytoplasm of Cx43-transfected BSC-OF cells. However, no definite correlation was found between Cx43 and cell migration and invasion.     

Overexpression of connexin 26 in carcinoma of the pancreas

Contrary to the previously purported role of gap junction (GJ) associated-protein connexin 26 (Cx26) as a tumor suppressor, increased expression of Cx26 has recently been demonstrated in several human malignancies. Surprisingly, this high expression is reportedly related to poor prognosis in squamous cell lung carcinoma and breast cancer. In this study, we examined levels of Cx26 in various human gastrointestinal (GI) carcinomas, with a focus on pancreatic carcinomas, using immunohistochemistry. Many GI carcinomas displayed abundant Cx26 expression, predominantly in the cytoplasm. Cx26 was detected in 5/8 gastric cancers (62.5%), 6/8 squamous cell carcinomas of the esophagus (75.0%), 7/8 pancreatic cancers (87.5%) and 7/8 colon cancer cases (87.5%). However, Cx26 expression was not present in hepatocellular carcinoma (HCC, 0/8). Extensive immunohistochemical examination was performed on pancreatic carcinomas, revealing strong expression of Cx26 protein in 30/43 cases (70%), weak expression in 6/43 (14%) and no expression in 7/43 (16%). The present study demonstrated up-regulated Cx26 expression in a considerable percentage of GI carcinomas, with the exception of HCC. Our findings suggest that Cx26 may be involved in some of the malignant processes of GI cancers, and especially in pancreatic carcinomas.     

The expression of gap junctional proteins during different stages of mouse skin carcinogenesis

The loss or alteration of gap junctional intercellular communication(GJIC) has long been proposed to play an important role in theprocess of carcinogenesis. In this study we examined the expressionof three gap junction proteins, connexins (Cx)26, 43 and 31.1,in mouse hyperplastic skin, papillomas and squamous cell carcinomas(SCC). Tumors were induced in SENCAR mice by either of two initiation/promotionprotocols: 7,12-dimethylbenz-[a]anthracene (DMBA)/12Otetradecanoyl-phorbol-13-acetate(TPA) or DMBA/benzoyl-peroxide (BzPo). Keratinocytes in adultmouse skin expressed Cx31.1 and Cx43 but did not express Cx26.Skin hyperplasia induced by one topical application of TPA wasaccompanied by hyper-expression of both Cx26 and Cx43. In addition,TPA significantly inhibited the expression of Cx31.1. Afterrepetitive application of TPA for 3 weeks to initiated mouseskin, a similar Cx profile was found to that after a singleTPA application. Connexin 26 and Cx43 were hyper-expressed inmost of the papillomas studied (20–40 weeks after initiation).However, in some late papillomas, immunostaining revealed afocal loss of Cx26. Immunostaining of mouse skin SCC revealeddecreased Cx43 and Cx26 levels in 65% and 85% of cases respectively.The high levels of Cx26 and Cx43 mRNA in most of the SCC didnot correlate with the decreased abundance or disappearanceof Cx26 and Cx43 immunoreactive spots from tumor plasma membranes.Thus, the expression of these two connexins in SCC was impairedat the post-translation level. Cx31.1 expression was stronglyinhibited during all stages of carcinogenesis. Taken together,our results suggest that three different connexin genes aredifferentially regulated during mouse skin carcinogenesis andthe decrease of connexin expression may be an important markerof skin tumor progression.     

SMO蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 探讨SMO蛋白及mRNA在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义.方法 分别应用免疫组织化学及原位杂交方法检测68例食管鳞状细胞癌组织、35例癌旁不典型增生组织及68例正常食管黏膜组织中SMO蛋白及mRNA的表达,并分析其与食管鳞状细胞癌各临床病理特征的关系.结果 SMO蛋白的阳性表达率在正常食管黏膜组织、癌旁不典型增...     

Connexin43在肝细胞癌组织中的表达

目的 探讨缝隙连接蛋白（connexin, Cx）43在肝细胞癌（hepatocellular carcinoma, HCC）中的表达和功能。方法 采用免疫组织化学法检测Cx43在20例正常肝脏组织及76例HCC组织中的表达及分布。采用RT-PCR和Western blot法检测正常肝细胞LO2和肝癌细胞SMMC-7721中Cx43的表达,免疫荧光法观察Cx43的分布,细胞接种荧光示踪法测定细胞缝隙连接（gap junction, GJ）功能。结果 Cx43在HCC组织中的阳性表达率较正常肝脏组织明显下调,且从细胞膜向细胞质定位的“内化”现象明显。体外实验进一步证实与LO2细胞相比,Cx43在SMMC-7721细胞上存在表达及分布的异常,并且功能性GJ明显下调。结论 Cx43蛋白数量改变及分布异常与HCC发生密切相关,Cx43有望成为治疗HCC新靶点。