几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

目的：增生性瘢痕的成因来源于成纤维细胞的生物学特性异常，观察几丁糖对增生性瘢痕成纤维细胞生物学活性的影响。 方法：正常皮肤、增生性瘢痕各3例，供者均系第二军医大学长海医院整形科门诊患者，均知情同意。以增生性瘢痕成纤维细胞为观察对象，正常皮肤成纤维细胞为对照，用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。根据成纤维细胞来源不同，分为正常皮肤，增生性瘢痕2组，每组再按添加几丁糖的浓度不同，分为0，0，1，0．2，0．4，0．8，1．6，2．4，4．8r,／L8组。四唑盐比色检测几丁糖对两组成纤维细胞生长增殖的影响（吸光度值变化率）；光镜与透射电镜观察几丁糖对两组成纤维细胞的形态结构的影响；^3H-脯氨酸掺人法检测几丁糖对两组成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响。 结果：①几丁糖对两组成纤维细胞生长增殖的影响：几丁糖能减少增生性瘢痕成纤维细胞的吸光度值；几丁糖的浓度和吸光度值改变之间存在剂量一效应关系。相同条件下增生性瘢痕组的成纤维细胞的吸光度值大于正常皮肤组（P〈0．05）；几丁糖对2组吸光度值变化率影响无显著差异（P〉0．05）。②几丁糖对两组成纤维细胞形态结构的影响：光学显微镜下，各组细胞均呈梭型，胞体较大，界限清楚，呈放射状行走。两组无明显细胞形态区别。透射电镜下，随几丁糖浓度增加，细胞内胶原，核糖体，高尔基体等减少，线粒体脊低、少。细胞功能明显受抑制，凋亡细胞增加，两组细胞形态上差异不明显。③几丁糖对两组成纤维细胞合成及分泌胶原功能的影响：随几丁糖质量浓度的增加，各组^3H-脯氨酸掺人量均逐渐减少；几丁糖相同浓度下增生性瘢痕组与正常皮肤组有非常显著性差异（P〈0．01）。增生性瘢痕组的减少率与正常皮肤组的减少率有显著性差异（P〈0．05）。 结论：几丁糖可以抑制增生性瘢痕成纤维细胞的生长、增殖、合成及分泌功能，有望在增生性瘢痕的防治中发挥重要作用。     

碱性成纤维细胞生长因子对增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响

目的:研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞基因表现型的差异,以及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其的影响。方法:测定细胞生长曲线;应用液闪计数测定成纤维细胞胶原蛋白的合成。结果:增生性瘢痕成纤维细胞增殖速度比正常皮肤成纤维细胞慢;胶原蛋白的合成高于正常皮肤成纤维细胞。bFGF对两种成纤维细胞的增殖具有强烈的刺激作用,对增生性瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用。结论:增生性瘢痕成纤维细胞是一种特殊基因表现型的成纤维细胞,它具有自己特殊的生物学特性。bFGF可以使增生性瘢痕成纤维细胞的生物学特性趋于正常皮肤成纤维细胞。     

碱性成纤维细胞生长因子对增生性瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响

目的：研究增生性瘢痕成纤维细胞与正常皮肤成纤维细胞基因表现型的差异，以及碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对其的影响。方法：测定细胞生长曲线；应用液闪计数测定成纤维细胞胶原蛋白的合成。结果：增生性瘢痕成纤维细胞增殖速度比正常皮肤成纤维细胞慢；胶原蛋白的合成高于正常皮肤成纤维细胞。bFGF对两种成纤维细胞的增殖具有强烈的刺激作用，对增生性瘢痕成纤维细胞胶原蛋白的合成具有抑制作用。结论：增生性瘢痕成纤维细胞是一种特殊基因表现型的成纤维细胞，它具有自己特殊的生物学特性。bFGF可以使增生性瘢痕成纤维细胞的生物学特性趋于正常皮肤成纤维细胞。     

转化生长因子β1Ⅱ型受体对增生性瘢痕成纤维细胞的影响

目的：探讨转化生长因子β1(TGFβ1)Ⅱ型受体同源序列多肽的生物学功能及其对增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的影响。方法：根据TGFβ1Ⅱ型受体的氨基酸序列人工合成一段短肽，以增生性瘢痕成纤维细胞为靶细胞，分别于蛋白水平和mRNA水平检测该短肽对TGFβ1所诱导的细胞胶原合成的拮抗作用。结果：该短肽可以明显抑制TGFβ1所诱导的增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成量及细胞内Ⅰ型前胶原mRNA的表达。结论：该短肽可能作为TGFβ1Ⅱ型受体的竞争性拮抗剂，抑制或降低了该生长因子对细胞的刺激作用。     

汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期的影响

目的观察汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞细胞周期的作用及探讨治疗增生性瘢痕的可能。方法取第6～11代体外培养的增生性瘢痕成纤维细胞,经不同浓度的汉防己甲素作用后,用流式细胞仪观察对细胞周期的影响,同时应用3H-TdR掺入法测定对细胞DNA合成的影响。结果汉防己甲素在细胞S期细胞改变明显,细胞DNA合成明显受到抑制,随药物浓度的增高,抑制作用逐渐增强。结论汉防己甲素影响细胞周期和抑制细胞DNA合成,可能对增生性瘢痕的防治有一定作用。     

转化生长因子-β3对增生性瘢痕成纤维细胞的生物学作用

背景：哺乳类动物有3种TGF-β异构体即TGF-β1，β2，β3，这3种异构体各自具有独特而不同的生物学作用，TGF-β1是明显的促瘢痕形成因子，而TGF-β3可减少TGF-β1，β2的产生，从而减少细胞外基质(ECM)合成，因此，TGF-β3有可能是人体内天然的抗瘢痕形成因子。目的：通过外源性TGF-β3对增生性瘢痕成纤维细胞(HSFB)生长增殖及Ⅰ，Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响，了解其生物学行为，为临床治疗提供理论依据。设计：随机对照实验研究。地点和对象：汕头大学医学院第二附属医院整形烧伤外科完成，对象为新鲜无菌增生性瘢痕组织，来源于本科收治及门诊手术的增生性瘢痕患者6例，男3例，女3例；年龄5～45岁。干预：6例增生性瘢痕成纤维细胞体外培养，分为4组，实验组又分为5，10，50mg／L组分别加TGF-β3 5，10及50mg／L，对照组加入FBM 1．5mL，采用MTT比色法测定TGF-β3对HSFB增殖活性的影响，^3H-脯氨酸掺入法测定其胶原合成，免疫组化检测Ⅰ，Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达情况。主要观察指标：TGF-β3，对HSFB体外增殖，HSFB I，Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白表达的影响，TGF-β3作用后HSFB胶原合成情况。结果：转化生长因子胁可抑制HSFB细胞增殖，作用120h后实验组细胞密度分别为(6．34&;#177;0．51)，(6．01&;#177;0．38)，(5．24&;#177;0．65)&;#215;10^5／瓶，明显低于对照组(10．69&;#177;0．76)&;#215;10^5／瓶(F=102．432～163．024．P&;lt;0．01)；转化生长因子β3可抑制胶原蛋白合成，实验组(10，50mg／L组)脯氨酸含量分别为(164．01&;#177;70．27)，(151．02&;#177;49．85)min^-1明显低于对照组9231．56&;#177;67．83)min^-1(q=32．124，31．021，P&;lt;0．01)；下调TGFβ1蛋白及Ⅰ型胶原蛋白表达；而对Ⅲ型胶原影响较小。结论：TGF-β1可抑制HSFB细胞增殖，下调TGF-β1蛋白表达，减少胶原合成，显示其具有抗组织纤维化的作用，具有临床应用价值。     

转化生长因子β1Ⅱ型受体对增生性瘢痕成纤维细胞的影响

目的探讨转化生长因子β1(TGFβ1)Ⅱ型受体同源序列多肽的生物学功能及其对增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的影响.方法根据TGFβ1Ⅱ型受体的氨基酸序列人工合成一段短肽,以增生性瘢痕成纤维细胞为靶细胞,分别于蛋白水平和mRNA水平检测该短肽对TGFβ1所诱导的细胞胶原合成的拮抗作用.结果该短肽可以明显抑制TGFβ1所诱导的增生性瘢痕成纤维细胞的胶原合成量及细胞内Ⅰ型前胶原mRNA的表达.结论该短肽可能作为TGFβ1 Ⅱ型受体的竞争性拮抗剂,抑制或降低了该生长因子对细胞的刺激作用.     

裸鼠模型增生瘢痕与人增生性瘢痕成纤维细胞的比较：

目的：将体外培养的模型瘢痕(analog of hypertrophic scsr，AHS)成纤维细胞与人的增生性瘢痕(human hypertrophicscar，HHS)成纤维细胞进行对比，进一步研究该模型作为HS动物模型的可行性。方法：将人全厚皮肤移植于裸鼠，建立HS动物模型，切取皮片移植后3个月时的瘢痕标本，进行成纤维细胞培养，以相应时期的HHS成纤维细胞为对照，光镜下观察成纤维细胞的形态，并分别用MTT比色法和^3H-脯氨酸掺入法测定其增殖及胶原合成活性。结果：AHS成纤维细胞与HHS成纤维细胞形态上非常相似，细胞增殖及胶原合成活性差异亦无显著性意义。结论：AHS成纤维细胞和HHS成纤维细胞非常相似，人皮肤移植增生性瘢痕裸鼠模型是一种较理想的增生性瘢痕动物模型。     

几丁糖对不同来源成纤维细胞分泌细胞因子的影响

目的观察几丁糖对增生性瘢痕和瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞分泌转化生长因子β1(TGF-β1),碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),白细胞介素8(IL-8)的影响,探讨几丁糖对异常瘢痕成纤维细胞生物学活性的作用。方法以瘢痕疙瘩及增生性瘢痕成纤维细胞为研究对象,正常皮肤成纤维细胞为对照,用组织块法进行不同标本成纤维细胞体外培养。用定量酶联检测试剂盒测定TGF-β1、bFGF、IL-8等。结果几丁糖对不同来源成纤维细胞分泌TGF-β1、bFGF、IL-8的能力作用不同。不同含量几丁糖作用后,TGF-β1、bFGF分泌量逐渐减少,IL-8分泌量逐渐增加。无几丁糖和相同含量下,TGF-β1、bFGF分泌量,瘢痕疙瘩组与增生性瘢痕组无显著差别(t=0.7,Р>0.05),两组与正常皮肤组差别显著(t=2.8,Р<0.05),3组的减少率无显著差异(t=0.5,Р>0.05)。IL-8的分泌量,无几丁糖时3组无显著差异(t=1.2,Р>0.05);不同含量几丁糖作用下,IL-8分泌量逐渐增加率无显著差异(t=0.8,Р>0.05)。结论几丁糖可抑制瘢痕疙瘩和增生性瘢痕成纤维细胞分泌TGF-β1、bFGF,促进其分泌IL-8,进而调节成纤维细胞的生长、增殖、合成及分泌胶原的功能。     

P物质在增生性瘢痕成纤维细胞内的表达和意义

目的了解P物质在增生性瘢痕成纤维细胞内的表达情况,探讨P物质在增生性瘢痕发生发展中的作用机制,为增生性瘢痕的治疗提供帮助。方法采用细胞培养技术,建立成纤维细胞系,应用免疫组化方法检测P物质在增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞中的表达情况。结果P物质在增生性瘢痕成纤维细胞中阳性率为(75±4)%,在正常皮肤P物质阳性率为(46±5)%,明显高于在正常皮肤成纤维细胞中的表达。结论P物质在增生性瘢痕的发生发展中有着重要的作用。     

汉防己甲素对增生性瘢痕中成纤维细胞增殖和活力的影响

目的 :观察汉防己甲素对成纤维细胞的生物学作用。方法 :通过对增生性瘢痕中的成纤维细胞进行培养 ,然后加入不同浓度的汉防己甲素 ,继续培养后观察成纤维细胞增殖和活力的变化。结果 :当汉防已甲素的浓度达到100mg/L时 ,抑制率达到了89.4 % ,细胞的活力也下降到对照组的38.5%。结论 :汉防己甲素可能对增生性瘢痕具有预防和治疗作用     

Altered interleukin-6 expression in fibroblasts from hypertrophic burn scars

Hypertrophic burn scars (HBSs) are characterized by a net accumulation of collagen. The role of growth factors and various cytokines in the pathogenesis of these lesions has not been fully characterized. Interleukin-6 (IL-6) is an important immunoregulatory cytokine that can affect fibroblast function. This study showed increased expression of the IL-6 gene in fibroblasts isolated from patients with HBSs compared with control fibroblasts when the ribonuclease protection assay was used. A subsequent increase in unstimulated and stimulated IL-6 secretion was noted in HBS fibroblasts compared with normal control fibroblasts (unstimulated, 0.3627+/-0.2017 pg/cell vs 0.0662+/-0.0786 pg/cell, P = .0054; serum, 0.770+/-0.523 pg/cell vs 0.233+/-0.231 pg/cell, P = .0381; serum and interferon-gamma, 0.912+/-0.650 pg/cell and 0.244+/-0.199 pg/cell, P = .0327). These results are further evidence of the role of inflammatory cytokines in the development of HBSs.     

汉防己甲素对瘢痕成纤维细胞增殖的抑制作用

目的观察汉防己甲素对瘢痕成纤维细胞生长的作用.方法取第6～11代体外培养增生性瘢痕的成纤维细胞,经不同浓度的汉防己甲素作用后,用MTT法测定对瘢痕成纤维细胞增殖能力的影响,用LDH法测定药物对细胞的毒性作用.结果经汉防己甲素作用后,细胞的增殖活力下降,而且随药物浓度的增高,细胞活力逐渐下降,药物浓度在80mg/L的情况下,对细胞没有毒性作用.结论汉防己甲素可以抑制成纤维细胞的增殖,可能对增生性瘢痕有预防和治疗的作用.     

氦氖激光抑制培养瘢痕成纤维细胞生长的实验研究

目的　探讨氦氖激光体外照射对培养的瘢痕成纤维细胞生长的抑制作用。方法　以6 32 .8nm波长氦氖激光 (功率密度 5 0mW /cm2 ) ,3J/cm2 ,30J/cm2 ,90J/cm2 ,180J/cm2 剂量 ,分别照射培养的人瘢痕成纤维细胞 1次 ,3次和 5次 ,每日 1次 ,然后进行细胞计数和细胞周期分析。结果180J/cm2 重复照射 3次和 5次 ,细胞总数都明显少于同期对照组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 5 )。细胞周期分析表明 ,180J/cm2 照射细胞 3次和 5次后 ,S期细胞数从 5 1%降低到 2 0 %和 14% ,G0 /G1期细胞从 2 8%分别上升到 5 5 %和 6 0 % ,Sub -G2 期细胞百分比分别为 6 .7%和 9.8%。结论　一定剂量 (180J/cm2 )氦氖激光重复照射能抑制培养的瘢痕成纤维细胞生长 ,原因可能是由于氦氖激光引起G0 /G1期细胞停滞和细胞凋亡所致     

瘢痕疙瘩及周围皮肤成纤维细胞生长差异的生物学研究

目的探讨正常皮肤、增生性瘢痕、瘢痕疙瘩周边部和中央部及瘢痕疙瘩周围皮肤(距瘢痕疙瘩边缘0.5cm范围内)的成纤维细胞呈现不同生物学性状的细胞生物学机理。方法取手术切除的正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织及周围皮肤各6例为标本,通过细胞培养6～10代后,应用流式细胞仪不同来源的成纤维细胞细胞周期的分布,同时比较它们在无血清培养条件下和在不同浓度FasMcAb作用下的细胞凋亡率。MTT比色法比较其细胞增殖活性。结果正常皮肤成纤维细胞增殖及凋亡正常。增生性瘢痕增殖活跃且细胞凋亡状况不良,瘢痕疙瘩中央部成纤维细胞处于低增殖—不凋亡状况;瘢痕疙瘩周边部成纤维细胞处于高增殖—无凋亡状况;瘢痕疙瘩周围正常皮肤大量细胞也处于高增殖及低凋亡状况。结论病理性瘢痕成纤维细胞增殖凋亡状况的异常可能是导致其不同生长特性的细胞生物学机理之一。     

汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞基质金属蛋白酶Ⅰ合成的影响

目的基质金属蛋白酶Ⅰ(matrix metalloproteinase Ⅰ,MMP-1)在增生性瘢痕的形成过程中起重要作用,观察汉防己甲素对成纤维细胞MMP-1合成的影响,探讨汉防己甲素对增生性瘢痕的治疗作用.方法实验于2003-03/12在沈阳军区总医院医学实验科完成.培养增生性瘢痕来源的成纤维细胞,然后分别加入浓度为1,5,10 mg/L汉防己甲素,继续培养24 h,通过ELISA方法检测培养细胞的上清夜中MMP-1的含量.结果在汉防己甲素的作用下,成纤维细胞合成MMP-1的量增加,其中对照组是(11.34±1.15)μg/L,加入1,5,10 mg/L的汉防己甲素后MMP-1分别为(23.65±1.41),(29.74±1.92)及(37.12±1.75)μg/L.结论汉防己甲素可以促进增生性瘢痕来源的成纤维细胞合成MMP-1,因此其可能对增生性瘢痕具有预防及治疗作用.