温阳化浊通络方含药血清对硬皮病成纤维细胞 胶原分泌和TGF-β1表达的影响

目的:运用血清药理学方法,探讨温阳化浊通络方对系统性硬皮病(SSc)皮肤成纤维细胞胶原分泌和转化生长因子β1(TGF-β1)的影响。方法:对SSc患者分别采用强的松(每日20 mg)和青霉胺(每日0.25 g)(西药组),温阳化浊通络方每日1剂,分早晚2次服用(中药组),西药加中药(中西药结合组)治疗1个月后,制备含药血清,加入皮肤成纤维细胞培养体系中。培养72 h后,采用比色法和ELISA法分别测定成纤维细胞培养基中羟脯氨酸(Hyp)和TGF-β1含量。结果:与对照组相比,浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清均能明显抑制正常人和SSc皮肤成纤维细胞胶原分泌(P<0.05或P<0.01);与西药组相比,中西药结合组抑制作用更加明显(P<0.01)。浓度为5%,10%,20%的西药组、中药组、中西药结合组含药血清能显著抑制SSc皮肤成纤维细胞TGF-β1的表达(P<0.01),且中西药结合组比西药组的抑制作用更强(P<0.01)。同时,对照组SSc皮肤成纤维细胞培养基中胶原含量与TGF-β1呈直线正相关性(r=0.895,P<0.05)。结论:温阳化浊通络方能有效减少体外培养的SSc皮肤成纤维细胞胶原和TGF-β1的分泌,可能是其治疗SSc的药理作用机制之一。     

温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病皮肤成纤维细胞TGF-β1/Smad 信号通路的影响

目的探讨温阳化浊通络方含药血清对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)皮肤成纤维细胞TGF-β_1/Srnad信号通路的影响。方法将36例SSc患者按随机数字表分为中药组、西药组和中西药纽,每组12例,中药组予口服温阳化浊通络方汤剂(每日1剂),西药组予口服青霉胺片(每次0.125 g,每日2次)和醋酸泼尼松片(每次20 mg,每日1次),中西医组予口服青霉胺片、醋酸泼尼松片及温阳化浊通络方汤剂,治疗1个月制备含药血清;另取10例未治疗的SSc患者血清作为对照组。健康皮肤成纤维细胞来源于2例女性整形外科患者上臂外侧健康皮肤组织。各组血清分别加入SSc患者和健康皮肤成纤维细胞培养体系中。Western blot法测定皮肤成纤维细胞转化生长因子-β_1Ⅰ型受体(transforming growth factorβ_1 receptor typeⅠ,TGF-β_1 RⅠ)、TGF-β_1Ⅱ型受体(TGF-β_1 RⅡ)、p-Smad2/3及Smad7蛋白表达,RT-PCR法检测SSc皮肤成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原(Col-Ⅰ、Col-Ⅱ)mRNA的表达,E LISA法测定SSc皮肤成纤维细胞培养上清液中MMP-9及TIMP-1含量。结果与对照组比较,西药组、中药组和中西药组SSc患者和健康皮肤成纤维细胞TGF-β_1 RⅠ、p-Smad2/3蛋白水平降低,Smad7蛋白水平升高(P0.05,P0.01),同时中西药组TGF-β_1RⅡ蛋白表达降低(P0.05,P0.01);与西药组比较,中药组和中西药组TGF-β_1 RⅠ、p-Smad2/3表达降低,中西药组Smad7蛋白表达升高(P0.01)。SSc患者皮肤成纤维细胞中,与对照组比较,西药组、中药组和中西药组Col-Ⅰ、Col-ⅢmRNA表达水平降低(P0.05,P0.01),且中西药组Col-ⅢmRNA表达水平明显低于西药组(P0.01)。与对照组比较,西药组、中药组和中西药组MMP-9水平及MMP-g/TIMP-1比值明显升高(P0.05,P0.01),而中药组和中西药组TIMP-1表达水平降低(P0.01);与西药组比较,中西药组MMP-g水平和MMP-9/TIMP-1比值升高,中药组和中西药组TIMP-1水平降低(均P0.01)。结论温阳化浊通络方含药血清可能通过调控SSc皮肤成纤维细胞TGF-β_1/Smad信号通路中关键分子TGF-β_1 RⅠ、pSmad2/3及Smad7的表达,抑制rGF-β_1/Smad信号通路传导,减少Col-Ⅰ、Col-Ⅲ表达。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨温阳化浊通络方干预系统性硬化病纤维化的作用机制

目的:实验通过温阳化浊通络方含药血清处理皮肤成纤维细胞研究其抗纤维化机制,进而探讨其在治疗系统性硬化病纤维化的作用机制。方法:采用血清药理学方法以不同浓度的温阳化浊通络方含药血清与人系统性硬化病皮肤成纤维细胞共同孵育,并与空白血清对照。研究温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物的影响。结果:与空白血清组相比,温阳化浊通络方含药血清能够显著抑制β-catenin、c-myc、Fn1、Collagen I和CTGF的mRNA和蛋白表达水平,以及TOP/FOP flash双荧光素酶报告基因活性,并且随着温阳化浊通络方含药血清浓度的提高,其抑制作用增强。更加重要的是,温阳化浊通络方含药血清能够抑制β-catenin/TCF4转录调控复合物的形成,其抑制作用与温阳化浊通络方含药血清浓度呈正相关。结论:温阳化浊通络方含药血清对体外皮肤成纤维细胞中Wnt/β-catenin信号通路及纤维化相关标志物有明显的抑制作用,为温阳化浊通络方抗系统性硬化病纤维化提供了科学依据。     

温阳化浊通络方治疗系统性硬化病41例

目的:观察温阳化浊通络方对系统性硬化病(systemic sclerosis,SSc)患者B细胞激活因子(B cell activating factor,BAFF)、Ⅲ型胶原氨基末端前肽(type III collagen amino terminal propeptide,PIIINP)水平及生存质量的影响。方法:将82例SSc患者随机分为对照组和治疗组,每组各41例。对照组予甲氨喋呤、强的松口服治疗,治疗组在对照组的基础上予自拟温阳化浊通络方治疗。分别采取酶联免疫吸附法和免疫散射比浊法检测血清BAFF、PIIINP、Ig G和Ig M水平,采用中文版SF-36评价生存质量,同时观察皮肤积分和疾病活动指数。结果:两组患者治疗后BAFF、Ig G、Ig M和PIIINP水平均较治疗前明显降低,且治疗组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后SSc皮肤积分、疾病活动指数亦较治疗前降低,且治疗组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗前后BAFF水平与皮肤积分、疾病活动指数、PⅢNP水平呈正相关性(P0.01)。治疗组在生理职能、精神健康等方面维度分数的改善优于对照组(P0.05)。结论:温阳化浊通络方能够降低SSc患者血清BAFF水平,减少PⅢNP含量,进而降低皮肤积分、疾病活动指数,改善患者生存质量。     

基于STAT3信号通路调节Th17细胞增殖探讨温阳化浊通络方治疗系统性硬化病机制

目的:研究温阳化浊通络方对Th17细胞增殖的影响,探讨其对STAT3信号通路的调控作用,明确该方治疗系统性硬化病(SSc)的免疫调控机制。方法:收集SSc患者外周血,采用密度梯度离心法分离外周血单核细胞,人Th17分选试剂盒分选Th17细胞,同时制备温阳化浊通络方含药血清。荧光染料CFSE标记Th17细胞后,流式细胞术检测含药血清对Th17细胞增殖的影响。采用RT-qPCR和细胞免疫荧光技术检测含药血清对Th17细胞中JAK2、STAT3/p-STAT3 mRNA和蛋白表达的影响。结果:与空白组比较,各剂量含药血清组可剂量依赖性地抑制Th17细胞的增殖(P<0.01);阳性对照组对Th17细胞的增殖抑制作用介于含药血清低剂量和高剂量组之间(P<0.01,P<0.05);各含药血清组可剂量依赖性地降低JAK2和STAT3 mRNA和蛋白的表达,并可剂量依赖性地降低p-STAT3的表达(P<0.05,P<0.01);阳性对照组抑制JAK2和STAT3/p-STAT3表达的作用强于各含药血清组(P<0.01)。结论:温阳化浊通络方可抑制Th17细胞的增殖,其机制可能与抑制STAT3信号通路有关。     

温阳化浊通络方对系统性硬化病患者外周血Th17/Treg细胞平衡的影响

目的观察温阳化浊通络方对系统性硬化病(systemic scierosis,SSc)阳气亏虚、浊邪阻络证患者外周血辅助性T细胞17(T helper 17 cells,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)及其细胞因子IL-17、IL-10水平的影响。方法将82例SSc患者按随机数字表分为西医组(对照组)和中西医结合组(治疗组),每组各41例。两组均予甲氨蝶呤片、泼尼松片口服治疗,治疗组加温阳化浊通络方口服,两组均连续治疗6个月。另选择70名健康志愿者作为健康对照组(健康组)。采用流式细胞术检测外周血Th17和Treg细胞数量,采取双抗体夹心E LISA法检测血清IL-17、IL-10、血管性血友病因子(von Willebrand factor,vWF)、Ⅲ型前胶原氨基端原肽(aminoterminal propeptide of typeⅢprocollagen,PⅢNP)、Ⅰ型胶原羧基交联末肽(cross-linked carboxyterminal telopeptide of typeⅠcollagen,ⅠCTP)水平,采用Pearson相关分析观察Th17/Treg与vWF、PⅢNP、ⅠCTP水平及皮肤积分、疾病活动指数相关性。结果 SSc患者外周血Th17比例、Th17/Treg及血清IL-17含量高于健康组,而Treg比例及血清IL-10含量低于健康组,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。两组治疗后Th17比例、Th17/Treg、IL-17含量、vWF及PⅢNP水平均较治疗前降低(P0.05,P0.01),Treg比例、IL-10含量升高(P0.05,P0.01),治疗组ⅠCTP水平较治疗前升高(P0.05)。除Th17比例外,治疗组各指标水平改善优于对照组(P0.05,P0.01)。SSc患者治疗前后Th17/Treg与vWF、PⅢNP水平及皮肤积分、疾病活动指数呈正相关性(P0.01),与ⅠCTP水平无明显相关性(P0.05)。结论温阳化浊通络方能够通过调节SSc患者外周血Th17/Treg细胞失衡、降低vWF和PⅢNP水平、升高ⅠCTP水平而发挥治疗作用。     

温阳化浊通络方对系统性硬化症模型小鼠TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨温阳化浊通络方治疗系统性硬化症(SSc)的可能作用机制。方法将60只C3H/He小鼠随机分为正常组、模型组、西药组和中药低、中、高剂量组,每组10只。除正常组外其余各组给予皮下注射博莱霉素3周建立SSc小鼠模型。西药组小鼠灌服青霉胺片65 mg/(kg·d),中药低、中、高剂量组分别灌服温阳化浊通络方水煎剂11.75、23.50、47.00 g/(kg·d),模型组和正常组给予等体积的生理盐水,共干预8周。采用HE染色观察皮肤组织病理变化,采用RT-PCR法检测皮肤转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad2、Smad7 mRNA表达,采用Western blot法检测皮肤Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白(COL-Ⅰ、COL-Ⅲ)表达。结果模型组较正常组皮肤真皮变厚,胶原增加、变粗,真皮小血管周围炎症细胞浸润,西药组和中药低、中、高各剂量组与模型组比较真皮变薄、胶原含量减少,血管周围炎症细胞浸润减轻。与正常组比较,模型组TGF-β1、Smad2 mRNA及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达升高,Smad7 mRNA表达降低(P0.01);与模型组比较,西药组和中药低、中、高剂量组TGF-β1、Smad2 mRNA及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达减少,Smad7 mRNA表达增加(P0.05或P0.01);中药高剂量组TGF-β1、Smad2、Smad7 mRNA及COL-Ⅰ、COL-Ⅲ蛋白表达改善优于西药组和中药低剂量组(P0.05或P0.01)。结论温阳化浊通络方可拮抗SSc纤维化,可能与干预TGF-β1/Smad信号通路、降低皮肤胶原蛋白含量有关,且高剂量效果更佳。     

益肾通络方对体外大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用

目的:观察益肾通络方对体外大鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖的抑制作用.方法:制备益肾通络方大鼠血清,以脂多糖(LPS)为刺激因子,将体外大鼠肾小球系膜细胞分为5组,即空白组、脂多糖组(模型组)、益肾通络方低、中、高剂量组(含药血清各组).以甲基偶氮唑盐法检测系膜细胞增殖情况.结果:24h后,含药血清各组对增殖有明显的抑制作用(P<0.05,P<0.01);48h后含药血清各组对增殖的抑制作用持续;24h和48h均以高剂量含药血清抑制效果最为明显(P<0.01).结论:益肾通络方大鼠血清对LPS诱导的MC增殖有明显的抑制作用,且存在量效关系和时效关系.     

温阳化浊通络方对系统性硬化病患者血清BAFF,PⅢNP等指标的影响

目的:观察温阳化浊通络方治疗系统性硬化病(systemic sclerosis, SSc)的临床疗效及其可能作用机制。方法:82例SSc患者随机分为两组,对照组(41例)予甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,治疗组(41例)予温阳化浊通络方联合甲氨蝶呤、泼尼松口服治疗,均连续6个月。分别采取酶联免疫吸附法和免疫散射比浊法检测血清B细胞激活因子(B-cell activating factor, BAFF),Ⅲ型前胶原氨基端原肽(aminoterminal propeptide of type Ⅲ procollagen,PⅢNP),IgG和IgM水平,同时观察皮肤积分和疾病活动指数等。结果:治疗组疗效优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后BAFF,IgG,IgM和PⅢNP水平均较治疗前明显降低(P<0.05,P<0.01),但治疗组对上述指标的改善优于对照组(P<0.05)。同时两组治疗后SSc患者皮肤积分、疾病活动指数亦较治疗前降低(P<0.05,P<0.01),且治疗组改善更明显(P<0.05)。SSc患者治疗前、后BAFF水平与皮肤积分,疾病活动指数,PⅢNP水平呈正相关性(P<0.01)。结论:温阳化浊通络方可以降低皮肤积分、疾病活动指数,改善临床症状,其机制可能与降低SSc患者血清BAFF水平,抑制免疫反应,减少PⅢNP含量有关。     

温阳化浊通络汤治疗早期系统性硬化病临床观察

目的:观察温阳化浊通络汤联合西药治疗早期系统性硬化病的临床疗效.方法:61例早期系统性硬化病患者随机分为两组:对照组(31例)予强的松、青霉胺治疗,治疗组(30例)予温阳化浊通络汤联合强的松,青霉胺治疗,均治疗6个月.观察近期疗效、临床症状和体征变化、肺功能、血浆内皮素及不良反应等.结果:治疗组疗效优于对照组,差异具有显著性(x2=10.72,P<0.05);治疗后两组在皮肤积分、雷诺现象、血浆内皮素水平、FVC、DLco方面比较差异具有统计学意义(P<0.05或P<0.01);不良反应治疗组发生低于对照组(x2=8.85,P<0.01).结论:温阳化浊通络汤联合西药治疗早期系统性硬化病疗效显著,不良反应少.     

《老老恒言》论老年养生

简要论述了《老老恒言》中有关老年养生的思想和方法 ,认为饮食以调理脾胃为要 ,应注意饮食有节、五味调和、清淡为补 ;起居以养静为要 ,应注意调顺四时、起居有常、静养与导引相结合 ;养性以安命为要 ,应注意清心寡欲、修心养性     

珍珠母超微粉蛋白及寡肽对小鼠镇静安眠作用比较

目的比较珍珠母超微粉蛋白、寡肽对小鼠镇静安眠作用。方法利用PCPA制造小鼠失眠模型,观察小鼠的自主活动情况,ELISA法测小鼠血中ATCH含量并计算脑及脑系数。结果阳性对照组、寡肽组小鼠的自主活动次数显著降低,小鼠血中ACTH的含量增加,但脑干系数无影响。结论超微粉寡肽类成分(MCP)镇静安眠活性最强,为镇静安眠主要活性部位,调节ACTH可能是其镇静安眠机制。     

耳鸣(肾精亏损型)临床资料研究

[目的]对2007年11月至2008年11月就诊的主观性耳鸣患者246例,排除其他中医证型,主要研究肾精亏损型耳鸣患者耳鸣的临床特征,变化规律及耳鸣产生的影响等.[方法]选择肾精亏损型耳鸣患者,记录临床症状及体征,采用电测听及耳鸣匹配、听觉脑干诱发电位(ABR)等方法检查,并将资料进行统计分析.[结果]患者年龄以51～60岁最多见,其次为61～70岁.耳鸣响度的自我评分与响度匹配值之间无关联.大多数病例的耳鸣病程在一年之内.大部分患者受耳鸣困扰的程度在中度以下.ABR测试结果听力正常者占25%,右侧和左侧听神经传导至脑干功能障碍患者分别占13%和19%,双侧听神经传导功能障碍占16%.[结论]临床耳鸣患者多数为肾精亏损型,年龄以51～60岁最多见,男女比例相当,大部分患者听神经传导障碍和脑干功能障碍,高音调耳鸣患者居多.     

针灸治疗椎动脉型颈椎病的取穴规律分析

目的:探寻椎动脉型颈椎病针灸取穴规律。方法:检索CNKI、VIP,建立椎动脉型颈椎病针灸取穴数据库,采用SPSS17.0统计软件统计描述。结果:治疗椎动脉型颈椎病的针灸穴位共计72个,使用频次为1005次;所用腧穴归属为督脉、足少阳胆经、经外奇穴、足太阳膀胱经及足阳明胃经频次最多,其累积频率达82.29%;其中风池穴的频率为19.11%;夹脊穴的频率为17.13%;百会穴的频率为12.3%,三穴累积频率达64.28%。结论:针灸治疗本病,以疏通局部经络,调节阴阳气血,临床选取督脉、足少阳胆经、奇穴以及风池、夹脊、百会三穴治疗最多。     

股骨头坏死病因的相关因素分析

目的:基于中国股骨头坏死数据库(China osteonecrosis of the femoral head database,CONFHD)资料分析股骨头坏死(Osteonecrosis of the femoral head,ONFH)病因的相关因素。方法:纳入CONFHD中2016年7月至2018年12月收录的病例资料,由数据库工程师从数据库中导出资料,包括患者的性别、年龄、病因、受伤类型、饮酒史(饮酒年限、饮酒频率、饮酒量)、激素应用史(激素应用时间、原发病类型、激素应用途径、激素种类)。结果:本研究共纳入病因资料完整的ONFH患者1290例。创伤性239例(18.53%),酒精性692例(53.64%),激素性359例(27.83%)。男1011例(78.37%),女279例(21.63%)。男性患者中创伤性138例(13.65%)、酒精性653例(64.59%)、激素性220例(21.79%),女性患者中创伤性101例(36.20%)、酒精性39例(13.98%)、激素性139例(49.82%);男性中酒精性比例最高,女性中激素性比例最高。1290例中,年龄≤30岁169例,激素性71例(42.01%);年龄31~40岁254例,酒精性146例(57.48%);年龄41~50岁324例,酒精性202例(62.35%);年龄51~60岁319例,酒精性185例(58.00%);年龄61~70岁158例,酒精性67例(42.41%);年龄≥71岁66例,创伤性和酒精性均为25例(各占37.88%)。受伤类型资料完整的创伤性ONFH患者144例,股骨颈骨折126例(87.50%)。饮酒史资料完整的酒精性ONFH患者544例,男性537例(98.71%),年龄41~50岁者172例(31.62%),饮酒年限6~10年149例(27.39%),饮酒次数5次≤每周饮酒<6次与每周饮酒≥7次均为127例(各占23.35%),每周饮酒量3001~3500 mL 222例(40.81%)。激素应用史资料完整的激素性ONFH患者210例,男112例(53.33%)、女98例(46.67%);激素应用时间14~10950 d,中位数365 d;原发病中免疫系统疾病50例(23.81%),比例最高,其余依次为皮肤、泌尿及血液系统等疾病;激素应用途径,口服125例(59.50%);激素应用种类,强的松68例(32.38%),比例最高,其余依次为地塞米松、甲强龙、泼尼松龙等。结论:酒精、激素、创伤仍是排在前3位的ONFH发病诱因;酒精性ONFH患者,多数饮酒时间>5年,每周饮酒次数>5次;激素性ONFH患者,激素应用时间中位数为365 d,应用途径主要是口服,排在前3位的药物为强的松、地塞米松、甲强龙,原发病主要为免疫、皮肤、泌尿、血液系统疾病;创伤性ONFH患者受伤类型以股骨颈骨折为主。     

辨证与辨病相结合辨治乳腺增生病

探讨乳腺增生病中医辨证分型的客观依据,泌免疫变化与中医辨证分型的相关性进行了总结和研究,医药辨治乳腺增生病的新思路。对乳腺增生病的红外光扫描诊断、病理分类、内分以期能够使微观医学与宏观辨证相结合,以开拓中医药辨治乳腺增生病的新思路。     

老年股骨颈骨折术后的护理

股骨颈骨折是发生于老年人的常见骨科病，以女性多见。因老年人骨质疏松，有机质少，应变力差，所以只需较小扭转暴力就能引起骨折。骨折后，由于骨折部位血供差，骨折不愈合的可能性大，加之患者年老体弱、长期卧床，易发生危及生命的并发症，因此恰当的护理非常重要，现将护理体会介绍如下。     

《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变

目的:探讨《中华人民共和国药典》(一部)中石斛药材的演变。结果:1963年版《中华人民共和国药典》中石斛来源为兰科石斛属Dendrobium植物的新鲜或干燥茎;1977—2000年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、环草石斛、马鞭石斛、黄草石斛或铁皮石斛;2005年版《中华人民共和国药典》石斛来源为金钗石斛、铁皮石斛或马鞭石斛;2010年版《中华人民共和国药典》石斛的来源为金钗石斛、鼓槌石斛或流苏石斛,铁皮石斛也从石斛项下都单列出来。讨论:石斛药材基源的变化、铁皮石斛的单列体现出石斛用药的科学性。但铁皮石斛与石斛的性味、功效一致,值得商榷;DNA条形码、分子标记技术等新方法可以应用到石斛药材的鉴别中。     

中药产业竞争力提升战略研究

本文运用了竞争力理论与战略理论，分析了中药产业竞争力提升的环境与条件，提出了提升中药产业竞争力的三大战略目标、三大总体战略、四条战略举措及三个实施阶段与重点任务。     

往来寒热证58例辨证论治探讨

收集我院门诊自2000年10月至2003年9月接诊的往来寒热证患者58例,实验室检查排除疟疾(血涂片均未找见疟原虫),分别从少阳辨证论治33例,从膜原辨证论治25例,疗效满意。