雷丸蛋白酶的发酵、提取及对猪囊尾蚴体外活性作用的初步研究

 目的:探索雷丸菌发酵产物中是否含有和天然雷丸中相同分子量的而且具有体外杀灭猪囊尾蚴活性的雷丸蛋白酶。方法:对雷九菌发酵所产生的蛋白酶进行提取、检测和体外杀灭猪囊尾蚴的实验，并和天然雷九蛋白酶进行比较。结果:从雷九菌发酵产物中分离出来的雷九蛋白酶经测定，分子量为16 800，等电点为4.4，末端氨基酸为缬氨酸，具有水解蛋白的活力及休外杀灭猪囊尾蚴的活性。结论:采用雷九菌发酵方法所获得的雷九蛋白酶与天 然雷九蛋白酶之间没有明显差别。     

雷丸蛋白酶提纯及其化学成分的研究

作者对雷丸菌成分进行了研究,从中提纯了一种蛋白酶。经测定雷丸蛋白酶为一条多肽链的糖蛋白,总糖含量约为16.7%,蛋白酶分子量约为16,800,末端氨基酸为缬氨酸.氨基酸组成分析表明它含有较多的酸性氨基酸和蛋氨酸。     

中药全蝎醇提取物体外抑制猪囊尾蚴活性的作用

将全蝎醇提取物置于15%猪胆汁常水溶液中在37℃进行体外培养,并以化学药物丙硫咪唑作对照,首次证实了全蝎体外具有显著的杀灭猪囊尾蚴的作用,其不同的加工品和药用部位的灭囊活性无显著差异。     

补骨脂,仙鹤草对猪囊尾蚴作用的体外实验

囊尾蚴病简称囊虫病在我省分布较广,寄生干皮下肌肉的囊虫引起的症状不重,但脑囊虫病较严重。西药吡喹酮治疗效果有明显提高,然而能引起颅内压升高发生脑疝。因此研究中草药治疗囊虫病,特别是脑囊虫病减轻毒副作用很有必要。目前我组对补骨脂、仙鹤草进行实验研究,其结果报告如下。     

灭囊灵对体外猪囊尾蚴作用的电镜观察

目的：观察灭囊灵在体外对猪囊尾蚴的治疗作用，方法：用扫描电镜和透射电镜观察灭囊灵醇提物、吡喹酮和现硫咪唑体外作用于猪囊尾蚴后的病变。结果扫描电镜下见灭囊灵和吡喹酮组头节均未翻出，囊壁萎缩，皮层外质膜受损，微毛细胞不清或脱落，表面布满颗粒状物；丙硫咪唑组４６．７％已脱囊，顶突头钩发育正常，４个吸血表面凹陷，颈部糜烂，体节正常沟条消失。透射电镜下见灭囊灵和吡喹酮组虫体皮层、基底膜、肌层和实质层均明显受     

囊立消对体外猪囊尾蚴抑制作用的实验研究

目的:观察中药囊立消在体外对猪囊尾蚴的抑制作用。方法:通过猪胆汁体外培养法观察不同剂量囊立消对猪囊尾蚴的杀灭效果。结果:囊立消在体外对猪囊尾蚴具有明显杀灭作用。     

灭囊灵对体外猪囊尾蚴的抑制作用和毒理学研究

目的 :观察中药灭囊灵在体外对猪囊尾蚴的抑制作用和本药的毒理试验结果。方法 :用猪胆汁体外培养法观察不同剂量灭囊灵对猪囊尾蚴的杀灭效果 ,小白鼠急性和大白鼠长期毒性试验采用常规灌胃方法。结果 :灭囊灵醇提物在体外对猪囊尾蚴具有明显的杀灭作用 ,16 7%浓度杀灭率达 10 0 % ,其ED50 为 5 18% ,LD50 大于小鼠灌胃 8g kg ,为临床人用量的 5 0倍以上。长期毒性试验证明 ,对大鼠无毒副作用 ,其最大用量为人体用量的 4 0倍以上。结论 :灭囊灵在体外对猪囊尾蚴具有明显的杀灭作用 ,急性和长期毒性试验证明本品安全无毒     

雷丸的鉴定及药用经验

本品为白蘑科真菌雷丸Omphalia lap idescens schroet.的干燥菌核。秋季采挖,洗净,晒干。别名竹苓、竹林子、竹铃子、竹铃芝、木莲子、雷实、雷矢。腐生菌类,子实体寿命很短,常见者为菌核。菌核体坚硬,呈不规则的球形或块状,直径0.8~3.5 cm,表面黑棕色,有细密皱纹,内面为紧密交织的菌丝体,蜡白色,半透明而略带黏性,有同色纹理。越冬后,由菌核体发出新的子实体,一般不易见到。常腐生于竹林根,棕榈根下。分布于我省郧阳,恩施,宜昌,襄阳等地,国内还分布于河南,甘肃、陕西、安徽、浙江、福建、湖南、广东、广西、云南、贵州、四川等省。1药材鉴…     

槟榔与白胡椒对猪囊尾蚴形态学改变的影响

目的　观察研究中药槟榔、白胡椒对体外培养的猪囊尾蚴形态学改变的影响。方法　取经槟榔、白胡椒药液作用不同时间的囊尾蚴进行大体形态及扫描电镜观察。结果　经槟榔、白胡椒分别作用 3 0min ,1h后所有虫体蠕动均停止。槟榔、白胡椒对囊尾蚴分别作用 2 0min ,40min ,虫体表面开始出现部分剥蚀区 ,且随时间延长 ,其剥蚀区增大。结论　两种药物作用于囊尾蚴的效果均好 ,可以作为人或猪囊虫病的治疗药物     

雷公散抑制猪囊尾蚴生长有效部位的研究

雷公散是临床用于治疗囊虫病的有效方剂,我们采用溶剂提取法,将其各提取物混悬于猪胆汁常水溶液中,然后对猪囊尾蚴进行活性培养,确定出了有效部位及主要有效药物。     

Inhibition of venom serine proteinase and metalloproteinase activities by Renealmia alpinia (Zingiberaceae) extracts: Comparison of wild and in vitro propagated plants

Ethnopharmacological relevance

The plant Renealmia alpinia has been used in folk medicine to treat snakebites in the northwest region of Colombia. In addition, it has been shown to neutralize edema-forming, hemorrhagic, lethal, and defibrin(ogen)ating activities of Bothrops asper venom. In this work, extracts of Renealmia alpinia obtained by micropropagation (in vitro) and from specimens collected in the wild were tested and compared in their capacity to inhibit enzymatic and toxic activities of a snake venom metalloproteinase isolated from Bothrops atrox (Batx-I) venom and a serine proteinase (Cdc SII) from Crotalus durissus cumanensis venom.

Materials and methods

We have investigated the inhibition capacity of Renealmia alpinia extracts on enzymatic and toxic actions of isolated toxins, a metalloproteinase and a serine proteinase. The protocols investigated included inhibition of proteolytic activity on azocasein, inhibition of proteolytic activity on fibrinogen, inhibition of pro-coagulant activity, inhibition of hemorrhagic activity and inhibition of edema-forming activity.

Results

Colorimetric assays detected the presence of terpenoids, flavonoids, tannins and coumarins in Renealmia alpinia extracts. Renealmia alpinia extracts inhibited the enzymatic, hemorrhagic and fibrinogenolytic activities of Batx-I. Extracts also inhibited coagulant, defibrin(ogen)ating and edema-forming activities of Cdc SII. Results highlight that Renealmia alpinia in vitro extract displayed comparable inhibitory capacity on venom proteinases that Renealmia alpinia wild extract. No alteration was observed in the electrophoretic pattern of venom proteinases after incubation with Renealmia alpinia extracts, thus excluding proteolytic degradation or protein denaturation/precipitation as a mechanism of inhibition.

Conclusions

Our results showed that Renealmia alpinia wild and in vitro extracts contain compounds that neutralize metallo- and serine proteinases present in snake venoms. The mechanism of inhibition is not related to proteolytic degradation of the enzymes nor protein aggregation, but is likely to depend on molecular interactions of secondary metabolites in the plant with these venom proteinases.     

3-脱氧一枝蒿酮酸的合成及体外抗流感病毒活性研究

目的 研究一枝蒿酮酸的构效关系,为一枝蒿酮酸衍生物的合成提供依据.方法 采用经典的克莱门森还原制备了3-脱氧一枝蒿酮酸,通过IR,1H NMR,15C NMR,ESI-MS进行了表征,同时采用量子化学在DFT-B3LYP/6-31G(d,p)水平上对还原产物进行了单点计算,并对还原产物进行了初步的体外抗流感病毒活性研究.结果 与结论1HNMR,13CNMR和量子化学计算表明还原产物为4,5双键(R.A.1)和5,6双键(R.A.2)的异构体混合物,活性测试结果表明该混合物对B型流感病毒具有较强的抑制活性(TC50=1 424.4μmol/L,IC50=417.3μmol/L,SI=3.4),但和一枝蒿酮酸抗B型流感病毒的活性结果相比,将一枝蒿酮酸的3位羰基还原后降低了其对B型流感病毒的抑制活性.     

软枣固态发酵工艺筛选及发酵产物药效学研究

目的:筛选软枣固态发酵的最佳发酵工艺及比较软枣发酵前后的抗癌效果。方法:采用纳豆芽孢杆菌对软枣进行固态发酵,以总黄酮含量和活菌数为考察指标,首先对发酵温度进行单因素考察,再采用正交设计进行优选,最终筛选出软枣发酵的最佳发酵工艺。采用MTT法,考察软枣发酵前后对人肝癌细胞SMMC-7721的作用效果。结果:软枣固态发酵最佳工艺为发酵温度为37℃,软枣与大豆配比为5:3,发酵时间为4天,初始含水量为100%,接种量为15%。软枣发酵后产物的抗癌作用强于发酵前软枣。结论:验证试验表明,筛选的软枣固态发酵最佳发酵工艺稳定、可行,发酵后抗癌效果增强,本试验为充分利用此药材提供了基础资料。     

地西泮-聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物缓释微球制备与性质

目的 :探索以新型生物可降解材料聚羟基丁酸酯 羟基戊酸酯共聚物 (PHBV)为载体的地西泮药物中长期缓释微球制备工艺 ;方法 :以溶剂蒸发法制备微球 ,用扫描电镜SEM观察微球表面及内部横断面形态结构 ;结果 :微球的平均粒径为 3 0 .5μm ,平均载药量 (1 8.66± 0 .2 3 ) % ,包封率 (80 .85± 1 .0 1 ) %。体外释放第一天呈突释效应 ,而后药物释放基本符合零级动力学过程 .其释放曲线方程为 Q =2 0 .55 2 .3 99t,r=0 .9569;结论 :开发与研制PHBV为载体的中长期缓释微球具有较好应用前景。     

北苍术多糖的酶法辅助超声提取工艺的优化及其体外抗肿瘤活性研究

目的通过生物酶解技术优化北苍术多糖的酶辅助超声提取方法,并考察其体外抗肿瘤活性。方法选用纤维素酶和果胶酶水解北苍术药材,酶解后采用超声法提取北苍术药材中多糖。以多糖得率为指标,在单因素试验的基础上采用4个因素（酶用量、酶解时间、酶解pH值、酶解温度）3个水平L9（34）正交设计法对酶解条件进行优选,并选用苯酚–浓硫酸法测定多糖,采用MTS、台盼蓝法对北苍术粗多糖体外抗肿瘤活性进行初探。结果最佳酶解条件为酶用量为药材1.2%、在60℃、pH 5条件下酶解50 min,再以超声提取40 min,北苍术多糖的得率为32.29%,所提粗多糖对HeLa细胞增殖的抑制率为64.42%。结论酶解辅助超声提取北苍术中多糖简便易行,可以提高多糖得率,多糖活性较好。     

地西洋聚羟基丁酸酯-羟基戊酸共聚物缓释微球制备与性质

 目的：探索以新型生物可降解材料聚羟基丁酸酯-羟基戊酸酯共聚物(PHBV)为载体的地西浮药物中长期缓释微球制备工艺;方法：以溶剂蒸发法制备微球,用扫描电镜SEM观察徽球表面及内部横断面形态结构;结果：微球的平均拉径为30.5μm,平均载药量(18.66土0.23)%,包封率(80.85士1.01)%。体外释放第一天呈突释效应,而后药物释放基本符合零级动力学过程.其释放曲线方程为Q= 20.55十2.399t,r=0.9569;结论：开发与研制PHBV为载体的中长期缓释徽球具有较好应用前景。     

泻心汤及其拆方抗内毒素作用研究

目的∶研究泻心汤及其各拆方的抗内毒素活性。方法:采用试管凝胶法和动态浊度法分别测定泻心汤及其拆方和含药血清体外抗内毒素活性;采用内毒素发热大鼠模型观察体内抗内毒素作用强度。结果:单味药中大黄的抗内毒素活性最强,药对中大黄-黄芩的活性最强,二者的活性均优于泻心汤全方。结论:泻心汤组方中发挥抗内毒素作用的关键药味是大黄,其次是黄芩,大黄-黄芩为泻心汤抗内毒素有效药对。