注射用辛芍（冻干粉针）安全性实验研究

目的 对注射用辛芍(冻干粉针)进行肌肉刺激性、血管刺激性、过敏性及溶血性实验,为其临床应用提供安全性实验依据.方法 肌肉刺激性实验,观察3只家兔注射辛芍(冻干粉针)后48 h的变化;血管刺激性实验,观察单次用药和连续用药5 d注射用辛芍(冻干粉针)及生理盐水,恢复4 d后的注射局部血管和周围组织反应情况;在全身过敏实验中,分辛芍组与阳性药物组,对豚鼠第1次腹腔注射给药后(辛芍或阳性药)14 d及21 d,分别静脉注射用辛芍 (冻干粉针)及阳性药,观察注射后15 min动物的过敏症状;大鼠被动皮肤过敏实验,采用0.5%伊文思兰溶液分析法;体外溶血实验,观察该品在3 h内有无溶血和聚集现象.结果 注射用辛芍(冻干粉针)对家兔股四头肌、耳缘静脉未见明显刺激作用,对豚鼠主动全身过敏反应及大鼠被动皮肤过敏反应均未见明显过敏反应;未见明显体外溶血作用.结论 注射用辛芍(冻干粉针)的安全性实验结果提示其安全可靠.     

注射用辛芍冻干粉针药味配伍作用研究

目的：研究注射用辛芍冻干粉针组方中灯盏细辛与赤芍的配伍关系,以阐明该复方药对配伍的合理性。方法：采用小鼠急性全脑缺血、缺氧模型,以动物呼吸维持时间和张口喘息时间为指标。以Scott比值法求得各单组分和配伍条件下的“半效作用量”（D50）,应用Finney调和平均数法及Loewe等效线法评价药物的配伍作用。结果：赤芍与灯盏细辛以四种不同比例的配伍用药,对急性脑缺血小鼠呼吸维持时间及急性脑缺氧小鼠喘息时间指标的调和平均数值Q50均小于1,合并用药的等效曲线均为凹形。综合指标表明灯盏细辛与赤芍最佳组方配比1∶1.5。结论：复方药对灯盏细辛与赤芍配伍用药存在协同作用,注射用辛芍冻干粉针组方配伍合理。     

注射用辛芍(冻干粉针)指纹图谱研究

目的：采用RP-HPLC建立注射用辛芍(冻干粉针)的指纹图谱测定方法。方法：采用Diamonsil C₁₈色谱柱,80%乙腈-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0 mL·min^-1,柱温40 ℃,检测波长为230 nm。结果：在相同色谱条件下获得药材、中间体和制剂的各色谱峰分离较好,建立了注射用辛芍的HPLC对照指纹图谱,标注了制剂中的8个共有指纹峰,制剂与药材、中间体的指纹图谱有良好的相关性,10批样品相似度大于0.97,达到指纹图谱的技术要求。结论：该方法准确、重复性好,可作为注射用辛芍(冻干粉针)质量控制的重要依据之一。     

注射用复方荭草冻干粉针除鞣质工艺研究

近年来中药注射剂有了较快的发展,为临床治疗疾病提供了更多的用药选择,但是,中药注射剂在临床使用中的安全性问题也越来越受到关注和重视。中药注射剂中的鞣质是引起不良反应的重要诱因,中药注射剂中鞣质的存在不但影响中药注射剂的质量,而且还能与肌体组织蛋白结合形成硬结,多次局部注射还有可能导致肌体组织坏死,造成无菌炎症[1],故中药注射剂中要求除去鞣质。目前常用的除鞣质方法多为明胶沉淀法、酸性及碱性醇沉法,而聚酰     

气相色谱法测定注射用辛芍冻干粉针有机溶剂残留量

目的 建立以气相色谱法测定注射用辛芍冻干粉针中的有机溶剂乙醇、正丁醇残留量的方法.方法 采用内标法顶空进样,以FFAP毛细管柱(30 m×0.53 mm,1 μm)为色谱柱,柱温为60℃,载气为氮气,柱前压20 kPa,进样口温度为220℃,FID检测器,检测器温度为250℃,空气流速500 ml·min-1,氢气流速50 ml·min-1.结果 乙醇、正丁醇分别在2.5～240 μg·ml-1(r =0.999 6),0.5～48 μg·ml-1(r =0.999 9)的浓度范围内呈良好的线性关系.平均回收率分别为乙醇100.6% (RSD=2.7%),正丁醇102.2%(RSD=3.3%).结论 该方法 重复性好,定量准确,便于操作.     

注射用辛芍(冻干粉针)与常用输液配伍稳定性研究

目的研究注射用辛芍(冻干粉针)在5%葡萄糖和0.9%氯化钠两种输液中的配伍稳定性.方法采用高效液相色谱法测定芍药苷和野黄芩苷在输液中含量及指纹图谱,同时观察输液的外观性状和pH值.结果注射用辛芍(冻于粉针)与5%葡萄糖注射液和0.9%氯化钠注射液配伍后,在室温10 h内,其色泽、pH值、不溶性微粒、芍药苷和野黄芩苷含量、指纹图谱稳定.结论在室温条件下10 h内,注射用辛芍(冻干粉针)可与上述两种输液配伍使用.     

赤芍注射液除鞣质工艺的研究

赤芍为毛莨科植物芍药Paeonia Lactiflora Pall.的干燥根，具有凉血活血，通经止痛，清肝消痈之功效。水溶性有效成分芍药苷为药理作用的主要成分。其注射液临床主要应用于治疗冠心病，心绞痛，心悸不宁。我们在研究制备赤芍注射液的工艺过程中发现，按照传统除鞣质的工艺，其效果非常不理想。于是我们将大孔吸附树脂和现行工艺相结合，进行优化，其除鞣质的效果比现行工艺好，澄明度也得以改善。在此基础之上，我们考察了树脂明胶过滤法和树脂改良明胶法，进行优化。结果发现：树脂明胶过滤法对鞣质的去除较完全，且稳定性好于树脂改良明胶法，可以作为中药注射液除鞣质的一种新方法。     

通脉冻干粉针成型工艺研究

目的：制备通脉冻干粉针。方法：用冷冻干燥方法制备粉针，试验筛选了冻干前药液的浓度、支架剂的种类和浓度，并对冻干粉针的稳定性进行了初步考察。结果：以5％的甘露醇为支架剂。结论：制备的通脉冻干粉针成型性、水溶性均较好，制剂稳定。     

甘草酸二铵冻干粉针处方及工艺研究

目的通过实验确定甘草酸二铵粉针的处方和制备工艺。方法选择甘露醇用量,优选注射用粉针最佳处方。调节活性炭用量,考察滤过灭菌效果,确定制备工艺。结果在光照、高温、低温条件下,5 d、10 d样本同初始样本比较,含量、有关物质、pΗ值等无显著变化。结论甘草酸二铵粉针的处方合理,制备工艺可行,质量稳定。     

参麦冻干粉针的工艺实验研究及质量考察

参麦注射水针剂制成冻干粉针,选用适量葡萄糖作支架剂,冻干液调整值至pH7.5取得满意结果,药品成型性好、速溶、澄明、使用方便.粉针与水针质量比较检查,两者质量一致.经稳定性加速破坏实验,从外观、澄明度、药液pH值及人参总甙含量与相应水针比较,粉针比水针稳定,本品室温可存放两年.     

辛芍提取物中5种成分在Caco-2细胞中的吸收特性

研究辛芍提取物在Caco-2细胞中的吸收特性。该文建立人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞模型,采用UPLC-MS测定辛芍提取物中芍药内酯苷、没食子酸、咖啡酸、灯盏乙素、灯盏甲素5个活性成分在细胞裂解液中的含量。并用此模型分别研究p H,时间,温度以及药物浓度对辛芍提取物中芍药内酯苷等5种成分的吸收影响,并且考察在P-糖蛋白抑制剂存在与否时5种成分的转运情况,预测这5种成分在Caco-2细胞中的吸收机制。实验结果表明,在37℃下,辛芍组方提取物中5种成分的摄取具有一定的时间依赖性;在0.5~12.5 g·L~(-1),摄取呈浓度依赖性,符合被动扩散过程;在pH 4.0~7.4,咖啡酸、灯盏乙素、灯盏甲素3个成分的细胞吸收量随p H增加而显著降低(P0.05);在4~37℃,咖啡酸的细胞吸收量随温度升高而降低,而其余4个成分随着温度升高而增加;加入P-糖蛋白抑制剂维拉帕米和环孢菌素A,咖啡酸与灯盏乙素的细胞摄取量显著增加(P0.05)。说明辛芍提取物中芍药内酯苷等5种成分的吸收机制可能为被动扩散,且灯盏乙素和咖啡酸可能是P-糖蛋的底物。     

蟾酥固体脂质纳米粒冻干针剂体内药代动力学研究

目的:进行了蟾酥固体脂质纳米粒冻干针剂大鼠体内的药代动力学研究。方法:采用RP-HPLC测定了大鼠体内不同时间的华蟾酥毒基、脂蟾毒配基浓度。结果:统计结果显示蟾酥固体脂质纳米粒冻干针剂与蟾酥水溶液的Cm ax、AUCextra、MRT均有显著性差异。结论:蟾酥固体脂质纳米粒冻干针剂能显著地延长蟾酥中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基的体内滞留时间,固体脂质纳米粒有望成为改善水难溶性药物体内释放的新型制剂。     

灯盏细辛和赤芍配伍组方对小鼠部分肝细胞色素P450亚型活性的影响及其机制分析

目的:探讨灯盏细辛和赤芍配伍组方(辛芍组方)对小鼠细胞色素P450酶(CYP450s)主要亚型CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11代谢活性的影响以及相关机制。方法:小鼠分为5组,分别为正常组、苯巴比妥组(70 mg·kg-1)和辛芍组方低、中、高剂量组(0.31,0.62,1.25 g·kg-1)。给药结束后,取各组小鼠肝脏制备微粒体,考察CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1和CYP3a11的代谢活性;并提取肝组织总RNA和蛋白,实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)考察辛芍组方对CYP1a2,CYP2d22,CYP2e1,CYP3a11和孕烷X受体(PXR)mRNA及蛋白表达的影响;利用报告基因法考察辛芍组方对PXR的激活作用。结果:与正常组比较,辛芍组方可诱导CYP3a11酶活性,上调CYP3a11,PXR mRNA和蛋白水平,并具有PXR激活作用(P0.05,P0.01);与模型组比较,辛芍中、高剂量组方能抑制CYP1a2酶活性(P0.05),但对CYP1a2的mRNA水平和蛋白水平无明显影响;而辛芍组方对CYP2e1,CYP2d22的酶活性,mRNA水平和蛋白水平无明显影响。结论:辛芍组方具有CYP3a11活性诱导作用,该作用很可能与辛芍组方上调PXR表达并激活PXR从而促进CYP3a11表达有关;而其CYP1a2活性抑制作用机制与CYP1a2的表达调控无关,需要进一步研究。     

辛芍组方中5个指标成分在大鼠体内的组织分布情况

目的:研究大鼠灌胃辛芍组方后其5个指标成分在体内的组织分布情况。方法:建立同时测定大鼠组织中灯盏甲素、灯盏乙素、灯盏乙素苷元、芍药苷、芍药内酯苷的UPLC-MS/MS,将辛芍组方灌胃给予SD大鼠(剂量25 g·kg~(-1)),分别于给药后20,90 min和12,24 h取其主要脏器和组织,采用UPLC-MS/MS测定各个时间点下5个指标成分在脏器和组织中的分布情况。结果:大鼠灌胃辛芍组方后,5个指标成分可广泛分布于大鼠各组织器官中。对于灯盏甲素,其质量浓度20 min时在肺和心中达到峰值,分别为48.2,59.8μg·L~(-1);90 min时在脑和小肠中达到峰值,分别为138.7,292.7μg·L~(-1);12 h时在肾和肌肉中达到峰值,为517.3,56.5μg·L~(-1);24 h时在肝脏中达到峰值,为352.9μg·L~(-1)。对于灯盏乙素,其质量浓度20 min时在心中达到峰值,为38.3μg·L~(-1);90 min时在肺、脑、小肠和肾中达到峰值,分别为30.6,220.0,1 644.2,859.9μg·L~(-1);12 h时在肌肉中达到峰值,为86.9μg·L~(-1);24 h时在肝脏中达到峰值,为344.8μg·L~(-1)。对于灯盏乙素苷元,其质量浓度90 min时在脑、小肠和肌肉中达到峰值,分别为875.4,52 468.0,5 114.7μg·L~(-1);12 h时在肺、心和肾中达到峰值,分别为609.7,1 718.6,1 736.5μg·L~(-1);24 h时在肝脏中达到峰值,为1 366.5μg·L~(-1)。对于芍药苷,其质量浓度20 min时在肺、肝、肾和肌肉中达到峰值,分别为10 634.1,13 889.0,16 672.0,7 750.4μg·L~(-1);在90 min时,在心、小肠和脑中达到峰值,分别为6 851.1,870 563.9,7 474.0μg·L~(-1)。对于芍药内酯苷,其质量浓度20 min时在肝和肾中达到峰值,分别为15 249.7,56 817.0μg·L~(-1),在90 min时,在肺、心、脑、小肠和肌肉中达到峰值,分别为4 211.5,4 425.3,4 631.3,631 871.5,5 673.6μg·L~(-1)。结论:大鼠灌胃辛芍组方后,5个指标成分可迅速、广泛地分布在各组织器官中,但5个指标成分在各组织脏器中的达峰时间和分布存在一定差异,在肾脏和小肠中的分布最高,其次为肝和肌肉,同时在脑组织中也有分布,并且随着给药时间的延长,灯盏甲素、灯盏乙素和灯盏乙素苷元可能在大鼠的肝脏中会发生蓄积。     

基于大鼠脑缺血再灌注损伤模型建立辛芍组方中灯盏乙素和芍药苷的PK-PD结合模型

目的:建立辛芍组方中灯盏乙素和芍药苷的药代动力学-药效动力学(PK-PD)结合模型,为该组方的作用机制分析提供参考。方法:采用液质联用法测定大鼠脑缺血再灌注损伤模型给药后的不同时间点所得血浆样本中灯盏乙素和芍药苷的血药浓度,获得药时曲线;采用试剂盒测定不同时间点所得血浆样本中的2种药效指标超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)的浓度,获得时效曲线。采用Win Nonlin 6.4软件中的房室模型法对2种代表成分的药代动力学参数进行拟合,获得PK参数。在此基础之上,固定相关的药代动力学参数,对时效关系进行拟合,得PD参数;根据PD参数,建立辛芍组方中灯盏乙素和芍药苷的PK-PD结合模型。结果:当分别以SOD,LDH为药效指标时,得灯盏乙素的PK-PD模型分别为E=21.08+5.49Ce/(Ce+7 368.24),E=211.98-89.13Ce/(Ce+2 013.2),芍药苷的PK-PD模型分别为E=20.02+1.58Ce/(Ce+0.02),E=216.83-37.31Ce/(Ce+0.04),式中E为效应值,Ce为药物在效应室中的质量浓度。结论:SOD和LDH的浓度与灯盏乙素、芍药苷的质量浓度存在一定的相关性。辛芍组方及其主要活性成分灯盏乙素和芍药苷可通过提高SOD浓度和降低LDH浓度来发挥抗氧化作用,进而达到保护脑缺血再灌注损伤的目的。     

核桃仁可水解丹宁成分研究Ⅱ

目的：研究胡桃科植物核桃Juglans regia果仁的可水解丹宁成分。方法：利用Diaion HP-20，Toyopaerl HW-40，MCI gel CHP-20P等反复柱色谱分离，经理化和波谱分析确定化学结构。结果：从核桃仁70%乙醇提取物中分离得到6个可水解丹宁成分，分别鉴定为1,2,3,4,6-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β-D-glucose,1)，皱褶菌素C(rugosin C,2)，1,2,3,6-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1,2,3,6-tetra-O-galloyl-β-D-glugose,3)，特里马素(tellimagrandin Ⅱ,4)，木麻黄亭(casuarictin,5)及皱褶菌素F(1-degalloylrugosin F,6)。结论：以上成分均为首次从该植物种子中分得。     

辛芍组方效应成分在正常和脑缺血再灌注损伤大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学分析

目的:研究辛芍组方中效应成分灯盏乙素、灯盏甲素和芍药苷在正常大鼠和大脑中动脉闭塞(MCAO)局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠肝微粒体中的酶促反应动力学,比较上述成分在不同状态大鼠肝微粒体中的体外酶代谢动力学差异。方法:制备不同状态大鼠的肝微粒体,将辛芍组方与大鼠肝微粒体进行孵育,选择UPLC-MS为分析手段,采用底物消除法,计算各成分在正常大鼠和MCAO大鼠肝微粒体中的酶反应动力学米氏常数(Km),最大反应速率(Vmax)及体外肝微粒体对药物的固有清除率(CLint),将各参数进行组间统计学分析。结果:灯盏乙素、灯盏甲素和芍药苷在正常大鼠体外肝微粒体中的Km[(0. 597±0. 065),(0. 166±0. 012),(0. 640±0. 046)μmol·L~(-1)]与MCAO大鼠中的Km[(0. 798±0. 031),(0. 213±0. 017),(0. 499±0. 029)μmol·L-1]均明显不同;与正常组相比,MCAO大鼠体内的灯盏乙素和芍药苷的Vmax和CLint均明显减少(P 0. 05,P 0. 01),灯盏甲素的Vmax也显著降低(P 0. 05)。结论:辛芍组方的效应成分在脑缺血再灌注损伤大鼠肝微粒体中的代谢速率降低、消除减慢。     

核桃仁可水解丹宁成分研究Ⅰ

目的：研究胡桃科植物核桃Juglans regia果仁的可水解丹宁成分。方法：利用Diaion HP-20,Toyopaerl HW-40,MCI gel CHP-20P等反复柱色谱分离,经理化和波谱分析确定化学结构。结果：从核桃仁70%丙酮提取物中分得6个可水解丹宁成分,分别鉴定为水杨梅丁素(gemin D,1),木麻黄素(casuariin,2),英国栎鞣花酸(pedunculagin,3),特里马素(tellimagrandin I,4),皱褶菌素(rugosin F,5),刺玫果素(heterophylliin D,6)。结论：以上成分均为首次从该植物种子中分得。     

健脾化湿法治疗儿童特应性皮炎的研究

目的：观察健脾化湿法治疗儿童特应性皮炎（AD）的疗效。方法：选择100例脾虚湿蕴型AD患儿,分为两组,治疗前及治疗后2周、4周时分别记录病情评分。结果：2周后病情评分即有降低,4周后评分进一步下降,有显著性差异（P＜0.01）。结论：健脾化湿法治疗AD疗效确切,安全性好。