可溶性IL-2R检测法比较及其在肺结核患者测定中的临床意义

<正>可溶性白细胞介素-2受体(Soluble interleukin-2receptor,slL-2R)是活化淋巴细胞膜白细胞介素2受体(1L-2R)α如链成份P55,即Tac抗原,可由细胞膜释放入循环或培养上清,血清中sIL-2R浓度高低,与某些疾病如白血病、艾滋病、肿瘤、肾移植等的病情、分期和程度有关,可以反映 T淋巴细胞激活程度.本文应用四种单克隆抗体和多克隆抗体建立了sIL-2R ELISA,并检测了正常人和肺结核患者血清sIL-2R.     

肺结核患者支气管冲洗液及血清中IL—2，SIL—2R的研究

目的：探讨检测肺结核患者支气管冲洗液及血清中IL－2,SIL－2R的临床意义。方法：采用RIA,ELISA法分别检测肺结核患者支气管冲洗液及血清中IL－2,SIL－2R水平。结果：支气管冲洗液中IL－2,SIL－2R及血清SIL－2R的水平高于对照组（P＜0．05）,而血清中IL－2的水平低于对照组（P＜0．05）。结论：同步检测肺结核患者支气管冲洗液及血清中IL－2,SIL－2R有助于宿主免疫状态的判断。     

肺结核患者血清sIL—2R的观察

应用酶联免疫技术（ＥＬＩＳＡ）测定５５例肺结核患者血清中可溶性白细胞介素２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）的浓度，并与３０例正常对照组进行比较。结果显示：肺结核患者ｓＩＬ－２Ｒ水平明显高于对照组（Ｐ〈０．０１）；患病时间超过４年者ｓＩＬ－２Ｒ水平高于４年以下者（Ｐ〈０．０５）。     

进展期肺结核患者血清可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)测定结果比较

目的:测定白细胞介素-2受体(sIL-2R)含量,对肺结核的鉴别诊断提供帮助.方法:应用夹心ELISA法对疾病组115例,其中肺结核进展期23例、肺结核稳定期肺结核33例、肺癌22例、急性肺炎25例、肺结核初治组10例、肺结核复治组13例和正常对照组34 例进行血清sIL-2R含量测定.结果:肺结核进展期与肺结核稳定期有显著性差异(t=2.9 63 ,P＜0.01);肺结核复治组sIL-2R含量高于初治组,两者间差异有显著性意义(t=2. 305,P＜0.05); 进展期肺结核波及4个肺野以上组sIL-2R含量最高,波及1个肺野含量最低.痰菌阳性组与痰菌阴性组血清胸片病变改善,其血清sIL-2R含量下降,胸片未和痰菌持续阳性者,sIL-2R含量不降低,反而呈增高趋势.结论:测定肺结核进展患者血清sIL-2R含量,有助于对进展期肺结核疾病的判断 .     

白介素-2对胃癌术后患者免疫功能影响

目的：通过观察胃癌术后病人白介素－2（IL－2）治疗过程中外周血淋巴细胞表型、血清白介素－2受体（SIL－2R）和血清白介素－12（IL－12）水平的变化，对胃癌术后患者的免疫机能的影响进行评价。方法：胃癌术后患者64例随机分成两组：一组给予IL－2，另一组为对照组。用药前、后分别行IL－12和SIL－2R测定以及用流式细胞仪测定淋巴细胞的表型。结果：用药后血清IL－12及CD4^ 、CD8^ 、CD56^ 比用药前明显升高（P＜0．05）。而SIL－2R明显下降（P＜0．05）。结论：应用IL－2治疗胃癌术后患者，其细胞免疫机能明显改善。     

肺癌患者可溶性白介素—2受体的变化及意义

为了解可溶性白介素－２受体（ｓＩＬ－２Ｒ）在肺癌中的变化及临床意义，观察了８５例肺癌、８例肺部良性疾病和２８例正常人血清的ｓＩＬ－２Ｒ水平。结果肺癌组ｓＩＬ－２Ｒ明显高于正常对照组（Ｐ〈０．０１），而与肺良性疾病组无显著差异（Ｐ〉０．０５）；ＴＭＮⅢ￣Ⅳ期者ｓＩＬ－２Ｒ明显高于Ｉ￣Ⅱ期者（Ｐ〈０．０５）；对１８例化疗前后的ｓＩＬ－２Ｒ观察发现化疗后呈负增长。提示ｓＩＬ－２Ｒ可作为肺癌病情监测和预后     

子宫内膜异位症患者血浆和PBMC培养上清液中IFN-γ、IL-4的表达及其临床意义

目的 检测子宫内膜异位症患者血浆和PBMC培养上清液中IFN-γ、IL-4的表达水平,并分析其临床意义.方法 对25例子宫内膜异位症患者和25例健康生育年龄妇女的外周血单个核细胞(PBMC)进行分离和培养,并采用ELISA方法检测血浆和PBMC培养上清液中IFN-γ、IL-4的表达水平.结果 (1)在PBMC诱生培养上清液中,内膜异位症组IL-4的表达水平为(33.6±11.7)ng/L,明显比对照组[(23.4±4.8)ng/L]升高(P＜0.01),而IFN-γ的表达水平(1 038.8±356.7)ng/L较对照组[(1463.1±348.3)ng/L]明显下降,子宫内膜异位症组的IFN-γ/IL-4比值(38.5±18.2)较对照组(73.2±13.6)也明显下降(P＜0.01).(2)在血浆中,除子宫内膜异位症组IL-4水平[(30.1±10.8)ng/L]高于对照组[(21.4±5.7)ng/L](P＜0.05)外,IFN-γ的表达水平及IFN-γ/IL-4比值与对照组比较,差异均无显著性(P＞0.05).结论 子宫内膜异位症患者体内存在Th1/Th2失衡,使子宫内膜能够逃避免疫监视及杀伤而在异位种植,引起内异症的发生发展.     

血液系统恶性肿瘤患者白介素—2受体的测定和意义

用ＥＬＩＳＡ法测定１１９例血液系统恶性肿瘤患者及５０名健康人ＳＩＬ－２Ｒ浓度，发现各种血液系统恶性肿瘤患者ＳＩＬ－２Ｒ均高于健康对照组。动态观察２７例急性白血病患者化疗前ＳＩＬ－２Ｒ，结果表明，化疗后缓解组患者在化疗后ＳＩＬ－２Ｒ水平持续明显降低，而未缓解组则降低不明显。     

人外周血单个核细胞白细胞介素-2受体的荧光定量法研究

本文探索了应用荧光分光光度计定量测定正常人外周血单个核细胞介素-2受体(IL_2R)的方法及其条件.以PHA与ConA诱导单个核细胞IL_2R表达的最适细胞浓度为3×10~6/ml:PHA和ConA最适浓度分别为100μm/ml和10μg/ml,PHA诱导较ConA为优.PHA诱导细胞IL_2R的表达24h达到高峰,尔后逐渐下降.第一抗体(抗—Tao)和第二抗体(荧光抗体)与单个核细胞孵育时间分别以20min和10min为好.检测同一标本不同复管的细胞(1×10~6)IL_2R结合荧光抗体mol(简称M)为5.22±0.45×10~(10),变异系数(CV)为8.6％,表明该法稳定性较好.测定5例正常人细胞(1×10~6)IL_2R结合荧光抗体M为4.8±0.97×10~(10).CV为20.2％,结果表明该法能较客观检测出不同个体IL_2R表达.     

肺结核病患者mIL-2R、sIL-2R的检测及其临床意义

为了探讨肺结核病患者外周血单个核细胞(PBMC)膜白介素2受体(mIL-2R)和血清可溶性白介素2受体(sIL-2R)的表达及其在肺结核病鉴别诊断中的应用价值,应用生物素一链霉亲和素(BSA)法检测47例肺结核、25例支气管肺炎患者植物血凝素(PHA)诱导前后的mIL-2R表达水平,用ELISA法检测血清sIL-2R含量。结果发现支气管肺炎患者PBMC在PHA诱导前后mIL-2R水平分别为(4.56±1.52)％、(35.12±7.21)％,空洞型肺结核与非空洞型肺结核患者PHA诱导前后mIL-2R水平分别为(2.11±1.14)％、(27.25±3.50)％和(3.41±1.35)％、(31.17±4.11)％,支气管肺炎患者高于空洞性肺结核患者(P<0.01)。支气管肺炎患者血清sIL-2R含量为(368±74)kU/L,空洞型肺结核与非空洞型肺结核患者血清sIL-2R含量为(1 156±98)kU/L、(978±91)kU/L,相互比较差异均有显著性(P<0.01)。PBMC TB-DNA(+)者PHA诱导前后mIL-2R及血清sIL-2R水平分别为(2.08±1.16)％、(26.88±3.61)％、(1 174±83)kU/L,与PBMC TB—DNA(一)者相比,差异有显著性(P<0.01)。研究认为肺结核病患者体内存在明显的细胞免疫功能紊乱,主要表现为mlL-2R表达水平降低,血清sIL-2R含量增高,结核杆菌感染PBMC后可进一步抑制mIL-2R表达。mIL-2R、sIL-2R表达水平与肺结核病患者的病情似有一定关系     

结核杆菌感染外周血单个核细胞对细胞免疫功能的影响

目的 :探讨结核杆菌感染外周血单个核细胞 (PBMC)对细胞免疫功能的影响及在结核病转归中的作用。方法 :用PCR检测结核病患者PBMC中结核杆菌DNA(TB DNA) ,用生物素 链霉亲和素 (BSA)系统同步检测其T细胞亚群及经植物血凝素 (PHA)诱导前后膜白介素 2受体 (mIL 2R)水平。结果 :结核病患者T细胞亚群及mIL 2R水平与对照组相比均显著降低(P <0 .0 5～P <0 .0 1)。其中PBMC内TB DNA(+)组与TB DNA(- )组相比 ,CD3+ 、CD4+ 百分率及CD4+ /CD8+ 比值降低 ,CD8+ 百分率增高 (P <0 .0 5 ) ;PHA诱导前后mIL 2R水平较对照组相比均低下 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :结核病患者体内细胞免疫功能低下 ,结核杆菌感染PBMC后可加重患者细胞免疫功能紊乱 ,抑制其mIL 2R表达。     

耐多药结核患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞的变化

目的:探讨CD4+CD25+Foxp3+T细胞在耐多药结核(multidrug-resistant TB,MDR-TB)发病机制中的作用。方法:随机选择MDR-TB患者31例,药物敏感性结核(drug-susceptible TB,S-TB)33例,健康对照(healthy control,HC)30例,流式细胞仪检测外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞。结果:S-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(2.43±0.69)%,显著高于健康人的(1.61±0.46)%,两组之间差异具有显著统计学意义;MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞约占CD4+T细胞的(3.14±0.59)%,显著高于S-TB患者的细胞比例,两组之间差异具有显著统计学意义。结论:MDR-TB患者外周血CD4+CD25+Foxp3+T细胞明显增加,揭示其在MDR-TB发病中发挥了重要作用。     

外周血树突细胞亚群与外周血单个核细胞在肺结核中的变化

目的通过对肺结核患者外周血树突细胞（DC）亚群数量和淋巴细胞（LC）、单核细胞（MO）的绝对值的观察,了解DC亚群和LC绝对值、MO绝对值在肺结核病情中的变化情况,以及三者的相关性,探讨DC亚群和LC、MO在肺结核发病机制中的作用及临床意义。方法采用流式细胞术的三色分析法检测70例肺结核患者的DC1及DC2亚群。用全自动血细胞计数五分类法检测外周血LC、Mo的绝对值。结果①肺结核活动期患者外周血DC1/PBM（C外周血单个核细胞）、DC2/PBMC及DC1、DC2的绝对数均明显低于健康正常者（P〈0.05）,DC1/DC2的比值明显高于健康正常者（P〈0.05）;非活动期患者DC1/PBMC、DC2/PBMC及DC1、DC2的绝对数与健康正常者比较均无显著性差异（P〉0.05）,DC1/DC2的比值与健康正常者比较无显著性差异（P〉0.05）;活动期患者DC2的绝对数明显低于非活动期（P〈0.05）。②活动期与非活动期患者的LC绝对值明显低于健康正常者（P〈0.05）;活动期患者外周血的LC绝对值明显高于健康正常者（P〈0.05）;非活动期患者的MO绝对值与健康正常者比较无显著性差异（P〉0.05）。③肺结核活动期患者的DC1绝对数、DC2绝对数与LC、MO、之间作两两相关性分析,均未发现有相关性（P〉0.05）。结论肺结核患者外周血DC1和DC2数均明显降低、LC绝对值减少及MO绝对值增多。研究提示DC、LC、MO在肺结核的免疫发病机制中均发挥一定的作用,外周血树突细胞亚群（DC1、DC2）的检测可了解肺结核患者的免疫功能状态及反映病情变化,有助于阐明肺结核的免疫致病机理,同时也可为肺结核的生物防治提供新线索。     

CD4＋CD25＋调节性T细胞及其相关基因Foxp3在非小细胞肺癌患者外周血中的变化

目的:探讨非小细胞肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)数量变化及其相关基因Foxp3 mRNA的表达改变.探讨CD4+CD25+调节性T细胞在诱导肿瘤免疫耐受中的作用.方法:采用流式细胞术检测患者外周血中CD4%D25+调节性T细胞数量变化:采用半定量RT-PCR方法检测肺癌患者外周血PBMC中Foxp3 mRNA的表达水平.选取30名非肿瘤患者作为对照.结果:肺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞数量明显高于正常组(P＜0.05);Foxp3 mRNA在肺鳞癌和肺腺癌患者外周血PBMC中的表达明显增强(P＜0.05).结论:CD4+CD25+调节性T细胞可能在肺癌免疫耐受中发挥重要作用.     

绿脓杆菌菌毛制剂对人PBMC表达CD2、CD25、CD69抗原的促进作用

目的 :探讨含Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型菌毛的绿脓杆菌制剂 ,在体外对正常人外周血单个核细胞 (PBMC)的活化作用。方法 :以绿脓杆菌菌毛制剂 ,作用于体外培养的人PBMC ,采用生物素 -链霉亲和素 (BSA)免疫细胞化学法 ,检测人PBMC表面CD2、CD2 5、CD6 9的表达。结果 :该制剂在实验最适条件下 ,可使PBMC上CD2表达率增加15 2 % ,CD6 9表达率增加 2 9.1% ,CD2 5的表达率增加 18.7% ,这与对照组比较差异非常显著 (P <0 .0 1)。结论 :绿脓杆菌菌毛制剂在体外能有效地促进单个核细胞的活化 ,提示该制剂可增强机体的细胞免疫功能。     

宫颈疾病患者外周血CD4+CD25+C-D127-/low Treg细胞的检测及临床意义

目的 检测宫颈癌、宫颈上皮内瘤变患者外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达,分析其临床意义.方法 荧光抗体CD127-FITC、CD4-PECY5、CD25-PE标记T细胞,流式细胞术测定50例宫颈癌患者和49例宫颈上皮内瘤变患者中CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达.结果 与正常对照组[n=33,(8.07±2.18)％]比较,宫颈癌组[n=50,(11.15±1.97)％]、宫颈上皮内瘤变组[n=49,(10.61±2.62)％]CD4+CD25+CD127-low均显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=6.018,P＜0.001;t=4.943,P＜0.001);与宫颈上皮内瘤变Ⅰ级组[n=16,(8.96±0.65)％]比较,宫颈上皮内瘤变Ⅱ～Ⅲ级组[n=33,(11.54±2.72)％]显著升高,两者比较有差异统计学意义(t=4.114,P＜0.001);与宫颈癌Ⅰ期组[n=20,(10.34±1.79)％]比较,官颈癌Ⅱ期组[n=30,(11.68±1.97)％]显著升高,两者比较差异有统计学意义(t=2.424,P＜0.05).结论 外周血CD4+CD25+CD127-/low Treg细胞的表达升高可能在宫颈癌和宫颈上皮内瘤变发病的发生、发展过程中起一定作用.     

肺结核患者外周血中结核杆菌DNA检测的意义

用ＰＣＲ技术对肺强核患者外周血１０８例和痰９６例中结核杆菌ＤＮＡ进行检测，结果患者外周血和痰中结核杆菌ＤＮＡ阳性率分别为７７．７８％和５７．２９％；其中５２例患者外周血和痰标本配对同时检测总阳性率达９２．３％，提示外周血结核杆菌ＤＮＡ检测可提高肺结核诊断敏感性和阳性检出率，可作为肺结核诊断有用的指标。     

骨桥蛋白在肺结核组织中的表达及其临床意义

目的 探讨肺结核病变组织骨桥蛋白（osteopontin,OPN）表达特征,分析其表达与结核病发展的相关性。方法 利用SP免疫组织化学方法,对52例肺结核病变组织和30例正常肺组织中OPN表达进行研究。结果 OPN 表达多呈胞浆表达。结核组OPN表达阳性PU值为3.6691±3.2981,显著高于对照组（0.2419±0.1983,P＜0.001）。在结核组中,初治与复治之间,痰菌阳性与阴性之间,空洞与非空洞之间OPN表达均无显著性差异（P均＞0.05）。结论 OPN高表达可能是肺结核病变组织区别于正常肺组织的重要特征之一,与结核病的发生相关,可作为结核病辅助诊断的标志物。     

PD-L1在结肠癌患者CD4＋CD25hiCD127low／-调节性 T 细胞中的表达及其临床意义

目的：探讨PD‐L1在结肠癌患者外周血CD4＋ CD25hi CD127low／‐T reg细胞上的表达及其与肿瘤病理分期之间的相关性。方法采用流式细胞术分析了47例结肠癌患者外周血中CD4＋CD25hi CD127low／‐T reg细胞的含量及其PD‐L1的表达。结果和健康人比较,结肠癌患者外周血中CD4＋CD25hi CD127low／‐T reg细胞的含量显著上升,并且PD‐L1的表达明显升高。进一步的分析表明,PD‐L1的表达和结肠癌的病理分期呈正相关,而术后患者CD4＋ CD25hi CD127low／‐T reg细胞 PD‐L1的表达则显著下降。结论 CD4＋CD25hi CD127low／‐T reg细胞数量及PD‐L1表达的升高可能导致了免疫抑制的增强,这可能是促进肿瘤免疫逃逸的重要因素。