棉酚对大鼠下丘脑超微结构影响的观察

本文观察了棉酚对雄性成年大鼠下丘脑弓状核、视上核和室旁核细胞超微结构的影响。棉酚以每日30mg/kg体重给大鼠灌服,连续5周。结果表明服棉酚后,视上核和室旁核变化不明显;而弓状核中,部分细胞呈现一系列神经分泌功能增强的变化,高尔基复合体和粗面内质网轻度扩张,内充均质低电子密度物质;神经分泌颗粒、溶酶体、核仁样体和微管数量增多。本文并对以上超微结构改变的性质、意义和可能原因进行了讨论。     

醋酸棉酚对大鼠垂体促性腺细胞及睾丸间质细胞超微结构影响的观察

本文对服棉酚后的大鼠垂体促性腺细胞和睾丸间质细胞进行了电镜观察。比较了短期和长期服药的效应。实验表明,在电镜下,垂体前叶促性腺细胞有四种类型。对照组动物以Ⅰ、Ⅱ型细胞为主。尤其以Ⅱ型细胞数量最多,占65％。服药组Ⅱ型细胞随着服药时间的加长而有递减趋势。Ⅲ型细胞在对照组动物为数极少,只有6％,而服药组则为主要类型。服药一个月的大鼠Ⅲ型细胞占促性腺细胞总数的56％。服药二个月的占44％,服药一年的占58％。Ⅳ型细胞胞浆内粗面内质网高度膨胀,形成大泡,几乎占据整个胞浆,形态上类似切除性腺后出现机能亢进的“阉割细胞”。这种细胞未见于对照组和服药一个月的动物,而于服药二个月后才开始出现,占促性腺细胞的13％。睾丸间质细胞的形态与对照组比较没有明显差异。最后讨论了这些变化的意义以及棉酚作用促于性腺细胞的可能机制。     

醋酸棉酚对大鼠胚胎内膜及黄体的影响

本文为进一步研究醋酸棉酚对雌性大鼠抗生育机理。配后大鼠于D_1-D_4连续灌服醋酸棉酚90mg/kg,D_5回收胚胎并取子宫内膜及黄体,进行形态学观察。结果显示:D_5胚胎发育受影响,摄取~3H-TdR活性减低,偶见子宫内膜局部受损伤,内膜微血管数量明显减少;一半动物卵巢黄体细胞形态发生改变。这些因素可能是酯酸棉酚对雌性抗生育的主要环节。     

棉酚对大鼠垂体远部细胞超微结构的影响

本文对服棉酚30mg/kg体重/d共5周的成年雄性大鼠垂体远部细胞的超微结构进行了观察。结果表明,促性腺激素细胞的分泌活性显著增强,表现为功能不太活跃的Ⅰ、Ⅱ型细胞比对照组减少;而高尔基复合体发达,粗面内质网扩张为小泡的Ⅲ、Ⅳ型细胞增多,并出现类阉割细胞(Ⅴ型)和脱颗粒细胞(Ⅵ型)。垂体远部其他类型促激素细胞未见明显变化。本文还讨论了垂体促性腺激素细胞的分型、棉酚引起促性腺激素细胞变化的可能机制。     

醋酸棉酚对假孕大鼠卵巢甾体合成的影响

本工作利用假孕大鼠、观察了醋酸棉酚对卵巢Δ~5-3β-羟甾脱氢酶活性,卵巢重量及子宫重量的影响。用利血平(2mg/kg)造成假孕,次日作为假孕第一天。自假孕第一天开始给药,实验组灌服醋酸棉酚(30mg/kg/天),最长给药10天,对照组灌服等量花生油。分别于给药前、假孕第5天、7天、10天以及15天各处死一组动物,称重卵巢、立即放入液氮中。并取下子宫称重。     

醋酸棉酚对雌性大鼠抗着床作用的形态学观察

成年wistar雌鼠17只。随机分为对照和实验组。实验组喂服醋酸棉酚(100mg/kg/d)一月后交配。受精后第10天剖腹,观察妊娠动物数与着床胎数,并分别对卵巢组织化学(△~5-3β-羟甾脱氢酶)观察以及和心、肝、子宫等作组织学方法观察。发现醋酸棉酚对大鼠具有明显抗着床作用,抗着床率为100%。此时,阴道涂片显示动情周期紊乱;黄体细胞的△~5-3β-羟甾脱氢酶活性明显下降,子宫内膜相当于间期时的内膜。以上结果提示△~5-3β羟甾脱氢酶活性下降,孕酮合成受阻,可能是醋酸棉酚抗着床作用的机理之一。     

醋酸棉酚对大鼠体内及离体生精细胞蛋白质及核酸合成影响的观察

为了分析棉酚抗生育的作用机理,本实验对大鼠睾丸生精细胞进行了体内和离体的氨基酸并合实验研究。大鼠按每日30毫克/公斤体重的棉酚剂量,连续灌服3,4,6,6周后取材。取材前2小时分别作睾内注射~3H-精氨酸,~3H-赖氨酸和~3H-5-尿嘧啶核苷,按常规取出睾丸制成放射自显片进行观察。离体实验则将上述睾丸中分离的生精细胞与同位素标记的氨基酸分别温育后,测定其并合的放射活性。实验结果表明棉酚对生精细胞并合~3H-赖氨酸和~3H-5-尿嘧啶核苷的能力没有明显影响。但对变态后期(11～19期)精子细胞并合~3H-精氨酸的活动则有明显的干扰作用,标记率明显下降。本实验结果表明进行选择性并合精氨酸替代赖氨酸合成组蛋白阶段的变态后期精子细胞对棉酚较为敏感。对该转换阶段受到干扰与精子丧失受精能力导致不育的可能性进行了讨论。     

棉酚对大鼠毒性的电子显微镜观察

棉酚对雄性大鼠有明显的抗生育作用。用电镜和同位素放射自显术对服药后大鼠睾丸变化动态的观察表明棉酚主要破坏生精上皮的精子发生过程,其中变态期精子细胞和中、后期初级精母细胞对棉酚的毒性最为敏感。4000多名志愿服药者的临床试验进一步证明了棉酚的抗生育效果肯定可靠。精液脱落细胞的分析亦以精子细胞和精母细胞的脱落为主。棉酚对生精细胞的这种毒性作用,为当前寻找男用避孕药提供了前景。棉酚对其他脏器组织的毒性作用亦已有报道。猪服棉酚后可引起心肌损伤,肝、脾、肾     

醋酸棉酚对HeLa细胞作用的透射电镜和扫描电镜观察

本文报道人体子宫颈癌HeLa细胞系细胞的超微结构,及其在培养液中加入10,20μg/ml醋酸棉酚,作用24,48h后的变化状态。HeLa细胞在常态生长情况下,具有一般癌细胞的超微结构特点。在醋酸棉酚的作用下,这些细胞间的紧密连接未见发生改变。而在细胞内,线粒体首先发生变化,由肿胀、嵴断裂、空泡化,直至溶解成颗粒状物。棉酚对HeLa细胞的损害作用,具有剂量相关性和作用时间相关性。在棉酚浓度加大和作用时间增长时,可见除线粒体以外的其他细胞器的改变,包括溶酶体大量增多、核膜受损及核内异染色质改变等。扫描电镜下,可见微绒毛断落,细胞表面出现极不正常的泡状突起。本文还对棉酚损伤HeLa细胞的性质及其意义进行了讨论。     

停服棉酚后人精子的超微结构观察

20例口服棉酚节育者,服药总剂量分别为2—13.95克,停药已2-8年,精子常规计数均曾回升至400万个/ml以上。采其精液作精子电镜观察,以探讨服棉酚停药后精子的超微结构改变。结果:精液中畸形精子数颇多,扫描电镜多见精子的颈、中段有异常膨隆;在透射电镜下,该膨隆区内包含有不规则形或成层板状的膜性小体,它们主要由核后环尾侧的核膜过度增生,向颈、中段胞质延伸而成,亦有反褶入胞核内,成为核内膜性包含体。     

棉酚对大鼠精子细胞碱性核蛋白合成与更新的影响

大鼠喂服棉酚(30毫克/公斤体重/日)3周、4周和6周后,用特异显示精氨酸的坂口反应及显示富于赖氨酸碱性蛋白的肝素-阿尔新蓝(HAB)染色法,结合并合~3H-精氮酸液闪测定,对棉酚影响精子细胞核蛋白在合成与代谢上的改变,进行分析。结果表明: 1.正常大鼠14期以后的晚期精子细胞核坂口反应阳性,HAB染色阴性。相反,精原细胞、精母细胞及14期以前的精子细胞坂口反应为阴性,而HAB染色较深,表明14期前后精子细胞核蛋白有精蛋白合成的转换过程。 2.服棉酚后,部分曲细精管中14期以后的精子细胞及游离精子坂口反应变弱,并能为HAB染色。这是甲绿-焦宁染色异常的原因。也提示棉酚对晚期精子细胞核蛋白转变可能有干扰作用。 3.睾内注射~3H-精氨酸的活体实验和分离后的精子细胞与同位素温育的体外实验,均未见对照组和实验组之间有明显差异。对精子细胞变态过程中核蛋白合成上的转换的细胞化学显示方法,棉酚对这一转换过程的干扰作用的可能性及其意义予以讨论。     

醋酸可的松对神经分泌影响的超微结构研究

本研究将大剂量醋酸可的松(25mg/d)注射于大白鼠肌内,并于不同用药次数后,分别取垂体神经部以戊二醛固定,常规包埋,超薄切片和染色,在电镜下观察垂体神经部的超微结构变化。发现用药后垂体神经部神经分泌纤维及其末梢呈现膨胀;分泌颗粒滞留;透明小泡增多。随着剂量加大,神经分泌颗粒外溢、神经纤维变性、质膜溶解。垂体细胞出现活跃的吞噬现象。退变的神经分泌纤维被垂体细胞包卷,分泌颗粒被吞噬。我们认为大剂量可的松对视上核和室旁核神经分泌细胞有明显的抑制作用。本文还就可的松抑制神经分泌的机理、垂体细胞与各种细胞器之间的关系作了讨论。     

醋酸棉酚对雄性阉猪垂体远侧部作用的组织学观察

棉酚的抗生育作用,近年来已有大量报道,本实验是观察服棉酚过程中垂体远侧部的组织学变化及停药后的恢复情况,借以为棉酚的避孕机制及毒副作用提供参考资料。材料及方法用体重39.5～55.5公斤雄性阉猪九只,其中两只(6、9号)为对照组,7只为实验组(2～5、7、8、10号),喂以中国医学科学院药物研究所精制的醋酸棉酚,生活条件两组无异。投药前,实验动物先饲养五天,观察其行为、饮食等均属正常,随即用口服法投药30     

棉酚对大鼠生精上皮支持细胞影响的电镜观察

本实验用电子显微镜观察了大鼠口饲棉酚后睾丸生精上皮中支持细胞的超微结构的改变。棉酚每日剂量30毫克/公斤体重,连服4～6周后分别杀死取材,制成超薄切片观察。结果表明服棉酚后支持细胞呈现一系列细胞功能活跃与吞噬功能有关的胞器超微结构改变:溶酶体及脂滴增多,线粒体增生和多形性变化,服药6周后,内质网扩张明显,脂滴堆积,细胞开始处于不活跃状态。结合上述结果,本文对服棉酚后支持细胞超微结构变化的性质及其意义进行了讨论。     

棉酚对大鼠~(42)K代谢影响的研究

本实验用同位素~(42)钾(~(42)KGl)示踪放射自显影定位以及定量测定方法研究棉酚对大鼠钾代谢的影响及其与低血钾的可能关系。动物连续喂服棉酚(剂量为5～10毫克/日/鼠)4-17周后按体重从舌下静脉注射50～100微居里~(42)KGl溶液。于注射后不同时距冷冻动物制成放射自显片观察,另取心、肾、骨骼肌、血和尿进行γ线闪烁定量测定。实验结果表明:(1)~(42)K注入体内后迅速与体内钾交换而摄入于脏器组织中,其中肾、心、脾、胰及胃肠道管壁出现放射活性高峰的时间最早,摄入速度最快。以下依次为软骨、肌肉、肝、皮下脂肪、肺、皮肤及睾丸,而以红细胞和脑脊组织的摄入速度最慢。血浆~(42)K的放射强度在注入体内30分钟后即降至较心、肾和肌肉为低的相对恒定水平。(2)大鼠服棉酚后,各脏器和血液中~(42)K的单位放射强度、摄入速度和分布动态,一般与对照组无明显差异,但肾脏的尿排~(42)K率则有增高倾向。其中少数动物在尿~(42)K排出率增高的同时,血浆和脏器~(42)K均明显下降。提示棉酚引起肾性失钾的可能性。本文对棉酚影响K代谢及引起肾性失钾的可能机理予以分析和讨论。     

棉酚对人类精子作用的冷冻复型法超微结构研究

应用冷冻复型透射电镜研究法,观察了连续口服醋酸棉酚50天后,人类精子超微结构的变化。发现除精子头尾的肥大、瘦小、萎缩、扭曲、断尾和结节隆起等一般改变外,精子内部、生物膜及膜内微粒皆有相应更敏感的变化。生物膜的变化系单位膜两叶片的相互贴附性有某些改变;膜内微粒的变化系表现特殊集结,即在头尾的质膜集结为窗格状,在后头区可集结为粒团;在后顶体膜则出现两类颗粒,其中小的一种表现为各向成行的阵列。核孔未发现变化。作者认为棉酚对精子的影响作用首先表现在生物膜及膜内微粒,而一般外形改变则是继发结果。文内还推论棉酚对精子影响的靶性关系,可能与精子质膜存在棉酚受体有关。     

棉酚对动物腓肠肌影响的电子显微镜观察

本文报道了醋酸棉酚对雄猴、大鼠和豚鼠腓肠肌超微结构的影响。雄性恒河猴按4毫克/公斤/日服棉酚两年,其腓肠肌超微结构基本保持正常。但个别动物腓肠肌肌细胞核出现固缩和核膜分离。成年 Wistar 雄性大鼠服抗生育剂量棉酚(20、30毫克/公斤/日×30)时,除光滑内质网轻度扩张及核膜分离外,腓肠肌超微结构与对照比较无明显变化。豚鼠实验亦得到类似结果。大鼠服棉酚剂量加大到(60毫克/公斤/日×37)时,虽然大部分肌原纤维仍保持正常的周期性结构,可见递次重复的明带和暗带。但某些肌原纤维失去正常纹理,有的Ⅰ带明显加宽,还有少数肌原纤维开始断裂、溶解,而线粒体未见明显病变。当大鼠服药时间延长至55日时,上述病变更加明显。线粒体细长,排列紊乱,同时更多的肌原纤维出现萎缩和断裂,表现为原纤维型坏死。豚鼠口服棉酚(60毫克/公斤/日×25)时,肌原纤维变化不甚明显,而部分线粒体出现不同程度的肿胀变性,损伤严重的线粒体嵴断裂溶解,表现为线粒体型坏死。本文初步分析和讨论了以上结果与低钾性肌无力的关系。     

棉酚对大白鼠精子发生影响的银染观察

大白鼠喂服棉酚后,对其附睾精子活动力、精子形态学及睾丸减数分裂制片进行银染观察。对大白鼠一次性喂服大剂量棉酚(400 mg/kg体重),喂后2～5周,精子活动力明显降低,不正常精子频率增加,附睾精子银染显示精子尾部有损伤,包括精子头尾分离、尾部成圈、精子尾部中段部分区域损伤,但精子头部形态正常。服药6周后,附睾精子全部恢复正常。短期体外孵育实验,显似类似结果,但较轻微。喂服棉酚2～4周期间,不同发育阶段精子细胞的嗜银结构消失。实验组睾丸组织切片及睾丸减数分裂制备片,并无异常发现。     

棉酚对男性精子影响的电子显微镜观察

本研究报道育龄男子服醋酸棉酚后不同时期精液中精子超微结构改变的观察结果。育龄男性志愿者每日服药剂量为20毫克,连服50天后,改服每周40毫克的维持量,共观察了服药前5例作为自身对照,他们于服药后30天和50天分别再予检查;另对服维持量第84天的7例进行了观察。精液离心之沉渣用戊二醛-锇酸固定,丙酮脱水,Epon 812包埋,电镜观察。观察结果表明,螺旋鞘膜线粒体和顶体-核帽系统是对棉酚最敏感的细胞器,出现损伤最早、最严重,轴丝体和细胞核亦有不同程度的改变。严重的可见整个精子崩溃解体,精液中出现细胞残体和大量脱落细胞。根据上述结果,对棉酚造成精子损伤的性质及其意义予以分析和讨论。