多药耐药基因在肺癌中的表达及临床意义

目的 探讨mdr-1基因在肺癌中的表达状况,预期指导临床个体化疗。方法 应用RT—PCR方法检测48例肺癌患者外周血淋苣细胞mdr-1表达水平。结果 28例肺癌患者初治组原发阴性表达18例,占64．3％,低阳性表达6例。占21．4％,高阳性表达4例,占14．3％;而在化疗后的20例患者中,mdr-1阴性表达2例,占10％,低阳性表达18例,占90％,高阳性表达6例,占30％,均显著高于初治组。结论 RT—PCR方法检测肺癌患者外周血淋巴细胞mdr-1基因表达取材方便,结果可靠,提示不同程度的mdr-1基因表达水平可以客观地反映不同个体的药物耐受情况,为临床个体化疗提供指导性信息,以提高化疗疗效．     

多药耐药基因在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

近年来。肺癌的发病率呈上升趋势，严重危害人类的健康与生命。化疗是治疗肺癌的一种主要手段，但癌细胞对化疗的多药耐药却成为取得满意疗效的重要障碍。P-糖蛋白是多药耐药基因MDR的编码产物，它与许多肿瘤的多药耐药有关。为此，我们采用免疫组化法检测了76例非小细胞肺癌(non-small celln lung cancer，NSCLC)组织中P-糖蛋白的表达情况。并对其与肺癌临床病理参数的关系进行了探讨。     

多药耐药基因及血管内皮细胞生长因子表达在肺癌中的研究进展

肺癌是常见的恶性肿瘤之一 ,发病率及死亡率呈逐年上升趋势 ,其中小细胞肺癌 (ＳＣＬＣ)占 2 5 % ,非小细胞肺癌 (ＮＳＣＬＣ)占75 %。据统计 ,肺癌患者总治愈率约为 13 % ,化疗在肺癌综合治疗中发挥着重要作用。ＳＣＬＣ首次化疗敏感 ,有效率达 90 % ,但大多数易复发或发生远处转移 ,并形成多药耐药 ;ＮＳＣＬＣ首次化疗敏感性很低 ,表现为原发耐药。肿瘤对化疗药物的原发耐药及获得性耐药是导致化疗失败的主要原因 ,可能与多药耐药基因 (ＭＤＲ1 )表达水平升高有关 ;而肿瘤的复发、转移与肺癌组织中血管内皮细胞生长因子 (ＶＥＧＦ)表达水…     

贲门癌组织中多药耐药基因和多药耐药相关蛋白基因表达的临床研究

目的 了解多药耐药基因(MDR1)和多药耐药相关蛋白基因(MRP)在贲门癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)。观察46侧贲门癌及癌旁组织中MDR1和MRP的表达。结果 癌组织中MDR1和MRP表达的阳性率分别为63%和50%,均高于癌旁组织(P<0.05);贲门癌术前化疗者MDR1 mRNA和MRP mRNA表达水平显著高于未化疗者(P<0.05);中低分化肿瘤MDR1和MRP两基因mRNA表达水平高于高分化肿瘤(P<0.05)。结论 贲门癌组织中具有内源和获得性耐药性;MDR1和MRP表达与肿瘤的TNM分期无关,其高表达状态可预示肿瘤组织的分化不良。     

乳腺癌组织中多药耐药基因的表达及其临床意义

目的探讨多药耐药基因蛋白P-糖蛋白(P-gp)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)及DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法用免疫组化法检测78例原发乳腺癌组织中P-gp、GST-π及TopoⅡ的表达水平。结果(1)78例乳腺癌组织中P-gp、GST-π和TopoⅡ表达率分别为28.2%、38.5%和52.8%。(2)P-gp和GST-π表达与年龄、肿瘤大小、淋巴结转移、远处转移、临床分期、组织学类型无显著差异(P>0.05),TopoⅡ表达与肿瘤大小、远处转移、临床分期、组织学类型无显著差异(P>0.05),但与年龄、淋巴结转移有显著差异(P<0.05)。P-gp和GST-π的表达呈正相关(P<0.05),P-gp和TopoⅡ的表达呈明显负相关(P<0.05),GST-π和TopoⅡ呈明显负相关(P<0.05)。结论(1)部分乳腺癌患者体内原发存在耐药基因,对抗癌药物已产生耐药性。(2)乳腺癌化疗前检测耐药基因P-gp、GST-π与TopoⅡ,对肿瘤的化疗药物选择具有指导作用,对判断预后及研究耐药逆转提供参考价值。     

中药逆转肺癌多药耐药的研究新进展

肺癌发病率和死亡率居全球恶性肿瘤首位,作为治疗主导方向的化疗,药物推陈出新,方案不断优化,疗效却已达“平台期”,究其原因,肺癌细胞的多药耐药(MDR)不容忽视。寻找肺癌化疗耐药逆转剂,逆转MDR 是肿瘤领域的研究热点。中药活性广泛而显著,高效小毒,多靶点逆转MDR,临床药效逐步得到肯定,但明确的逆转机制尚待研究。     

多药耐药基因在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨多药耐药基因(MDR1)在上皮性卵巢癌组织中的表达及临床意义.方法 采用逆转录-聚合酶链反应测定27例上皮性卵巢癌(A组)、38例卵巢上皮性良性肿瘤(B组)、20例正常卵巢组织(C组)中MDR1的表达,比较三组MDR1表达的差异,并分析其临床意义.结果 C组不表达MDR1,B组.MDR1阳性表达率为15.7%,A组MDR1阳性表达率为74.1%,A、B两组比较,差异有统计学意义(P<0.01),A组中化疗无效者MDR1阳性表达率是90.1%,明显高于化疗有效者的58.8%(P<0.05).结论 MDR1在上皮性卵巢癌组织中有较高的表达,并与化疗疗效有关.     

人肺癌组织多药耐药基因的探讨

本文采用RT-PCR方法检测了38例NSCLC肿瘤组织,10例良性瘤样病变争35例病灶旁正常肺组织中mdrl基因的表达水平。结果表明,肺癌组织中mdrl mRNA过度表达,因此推测mdrl基因表达是肺癌产生耐药性的主要机制之一。     

多药耐药相关蛋白及其在肿瘤耐药中的作用

多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肿瘤患者化疗失败的主要原因。介导多药耐药的重要机制之一是多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated proteins,MRPs)的表达增加。MRPs是一类ATP能量依赖型跨膜转运蛋白,是具有选择性和特异性的药物外排泵。本文主要针对MRPs的生理特征、结构特点、耐药谱特征及其逆转进行综述。     

乳腺癌组织中六个多药耐药基因表达的意义

目的 为了更好地预测乳腺癌术前化疗的预后.方法 应用荧光定量PCR方法 检测51例术前未经化疗的乳腺癌组织中mdr1、MRP、LRP、GST-π、TOPOⅡα、BCRP基因表达,分析它们的表达水平与临床病理因素的关系.结果 这6个基因在乳腺癌组织表达水平均与临床分期、ER、PR无关;mdr1、MRP、LRP、GST-π、TOPOⅡα的表达水平均与淋巴结转移无关;但BCRP在淋巴结转移组中的表达水平显著高于其在非淋巴结转移组中的表达.结论 BCRP的高表达可能与部分乳腺癌患者术前化疗无效有关,定量检测BCRP基因的表达可以预测乳腺癌术前化疗的预后.     

多药耐药基因与肺癌氨柔比星耐药的相关性

目的探讨肺癌氨柔比星耐药与多药耐药基因(MDR1)的相关性。方法收集本院近年的肺癌标本,荧光定量PCR检测肺癌组织中MDR1基因的表达,MTT细胞毒实验检测氨柔比星对肺癌耐药细胞的生长抑制率。结果 MDR1基因在肺癌标本中的阳性表达率为37.5%,其中MDR1基因的表达在鳞癌和腺癌中高于小细胞肺癌(P<0.05),鳞癌与腺癌之间没有统计学差异(P>0.05),MDR1的表达在临床病理分级之间没有显著性差异(P>0.05),肺癌MDR1的表达量与氨柔比星对肺癌细胞的半数生长抑制浓度呈正相关(r=0.91)。结论肺癌对氨柔比星的耐药与MDR1基因的表达密切相关,MDR1基因可作为氨柔比星疗效果评价的一个生物分子标记。     

乳腺癌耐药蛋白在人体正常和肿瘤组织中的表达

目的研究乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体正常和肿瘤组织中的表达及其意义. 方法采用半定量RT-PCR检测BCRP在人体正常组织和乳腺癌、胃癌组织中的表达水平. 结果研究发现BCRP mRNA在胎盘和肝脏组织中表达较高,在结肠、小肠、胃、乳腺和肾脏组织中表达较低,在胰腺、脾脏、外周血白细胞和卵巢组织中检测不到.20例乳腺癌中有5例(25%)BCRP阳性表达,而20例胃癌中BCRP均未表达.结论乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体的一些正常组织和乳腺癌中具有表达,其作用可能与该组织的外排功能有关.     

Multidrug resistance in cancer chemotherapy

Resistance to chemotherapy is the single most important reason for treatment failure in cancer patients. Over the past 15 years, we have gained significant insight into one of the mechanisms responsible for this process: multidrug resistance (MDR). Far from being a phenomenon limited to the laboratory, multidrug resistance has been identified in a wide variety of newly diagnosed and recurrent human tumors. A number of compounds can block p-glycoprotein and overcome MDRin vitro andin vivo. Current strategies to block MDR are discussed in this review. Future research in this area will focus on the identification of more selective and potent MDR reversing agents and the development of entirely new approaches to overcoming multidrug resistance such as monoclonal antibodies, immunotoxins, and gene therapy.     

乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体正常和肿瘤组织中的表达及其意义

目的 研究乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体正常和肿瘤组织中的表达及其意义．方法 采用半定量RT-PCR检测BCRP在人体正常组织和乳腺癌、胃癌组织中的表达水平。结果 研究发现BCRP mRNA在胎盘和肝脏组织中表达较高．在结肠、小肠、胃、乳腺和肾脏组织中表达较低．在胰腺、脾脏、外周血白细胞和卵巢组织中检测不到。20例乳腺癌中有5例(25％)BCRP阳性表达，而20例胃癌中BCRP均未表达。结论 乳腺癌耐药蛋白BCRP在人体的一些正常组织和乳腺癌中具有表达，其作用可能与该组织的外排功能有关。     

ATP敏感钾通道亚单位在大鼠组织中的表达

目的　研究ATP敏感钾通道 (KATP)亚单位在大鼠组织中的表达。方法　逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)检测通道mRNA的表达。结果　左心室有Kir 6 1,Kir 6 2和SUR 2A的表达 ,大脑皮层中Kir 6 1,Kir 6 2 ,SUR 1,SUR2B均有表达 ,主动脉平滑肌有Kir 6 1,Kir 6 2 ,SUR 2B的表达 ,膀胱平滑肌中有Kir 6 1,Kir 6 2 ,SUR 2B的表达。结论　各组织的KATP组成有所不同 ,Kir 6 1、Kir 6 2和SUR 2B亚单位在多组织中广泛表达。     

CCDC12蛋白在结直肠癌组织表达情况与肿瘤化疗药物抵抗的关系

目的 探讨结直肠癌组织中CCDC12蛋白表达与肿瘤细胞化疗效果的关系及意义.方法 留取84例结直肠癌手术患者的肿瘤及癌旁正常肠黏膜的石蜡组织及新鲜组织,免疫组化技术检测CCDC12蛋白、多药耐药蛋白1(MRP-1)、P-糖蛋白(P-gp)、生存素(Survivin)、凋亡酶激活因子-1(Apaf-1)的表达情况;噻唑蓝(MTT)法检测氟尿嘧啶(5-Fu)、顺铂(CDDP)、奥沙利铂(L-OHP)对肿瘤细胞的抑制作用.另取20例结直肠癌患者的肿瘤及癌旁正常肠黏膜新鲜标本,蛋白印迹法(Western blotting)检测CCDC12、MRP-1、P-gp、Survivin、Apaf-1的表达情况.结果 免疫组化结果显示CCDC12、MRP-1、P-gp、Survivin在结直肠癌组织中表达均明显高于癌旁正常肠黏膜,Apaf-1在结直肠癌组织中表达降低(均P<0.05).5-Fu、L-OHP对CCDC12阳性表达的结直肠癌细胞抑制率低于阴性表达者(均P<0.05),而CDDP对肿瘤细胞的抑制作用与CCDC12表达无明显关系(P>0.05).5-Fu对结直肠癌细胞的抑制情况与MRP-1、P-gp表达有关;CDDP对肿瘤细胞的抑制情况与Survivin有关;L-OHP对肿瘤细胞的抑制作用与Survivin、Apaf-1有关(均P<0.05).相关分析显示,结直肠癌组织中CCDC12蛋白与P-gp、Survivin均呈正相关,与Apaf-1呈负相关(均P<0.05).Western blot结果与免疫组化相符.结论 CCDC12蛋白在结直肠癌组织中表达增高并与化疗药物的效果有关,CCDC12蛋白参与了结直肠癌的耐药形成并可能成为耐药性逆转的靶蛋白.     

Application of RT-PCR in formalin-fixed and paraffinembedded lung cancer tissues

Aim:

To analyze gene expression in formalin-fixed, paraffin-embedded lung cancer tissues using modified method.

Methods:

Total RNA from frozen tissues was extracted using TRIZOL reagent. RNA was extracted from formalin-fixed, paraffin-embedded tissues by digestion with proteinase K before the acid-phenol:chloroform extraction and carrier precipitation. We modified this method by using a higher concentration of proteinase K and a longer digestion time, optimized to 16 hours. RT-PCR and real-time RT-PCR were used to check reproducibility and the concordance between frozen and paraffin-embedded samples.

Results:

The results showed that the RNA extracted from the paraffin-embedded lung tissues had high quality with the most fragment length between 28S and 18S bands (about 1000 to 2000 bases). The housekeeping gene GUSB exhibited low variation of expression in frozen and paraffin-embedded lung tissues, whereas PGK1 had the lowest variation in lymphoma tissues. Furthermore, real-time PCR analysis of the expression of known prognostic genes in non-small cell lung carcinoma (NSCLC) demonstrated an extremely high correlation (r>0.880) between the paired frozen and formalin-fixed, paraffin-embedded specimens.

Conclusion:

This improved method of RNA extraction is suitable for real-time quantitative RT-PCR, and may be used for global gene expression profiling of paraffin-embedded tissues.     

肝癌外周血淋巴细胞和肿瘤细胞多药耐药基因表达的研究

目的探讨肝癌患者外周血淋巴细胞和肿瘤细胞多药耐药糖蛋白(P-gp)表达的相关性。方法选取肝癌患者38例,应用流式细胞免疫荧光技术检测肿瘤细胞和外周血淋巴细胞多药耐药糖蛋白的表达。结果38例肝癌肿瘤细胞P-gp阳性细胞率为(2.9%±0.9)%,外周血淋巴细胞P-gp阳性细胞率为(2.4%±0.8)%,肝癌肿瘤细胞与外周血淋巴细胞P-gp表达阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论肝癌患者可以应用外周血淋巴细胞代替肿瘤细胞进行多药耐药基因表达的检测,以提高药敏预测的准确性。     

EGFR-TKI耐药后继续应用原TKI联合化疗与单纯化疗疗效比较

目的:研究表皮生长因子受体-酪氨酸酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗中晚期肺癌发生耐药后行原TKI联合化疗较单纯化疗有无生存获益。方法:回顾性分析一线化疗联合第一代EGFR-TKI治疗中晚期肺癌发生耐药65例,按照后续治疗方案的不同分为单纯组(单纯培美曲塞化疗)35例和联合组(原TKI联合培美曲塞化疗)30例,比较两组疾病控制率(DCR)、无进展生存期(PFS)及和总生存期(OS)。结果:DCR单纯组51.43%,显著低于联合组的80.00%(P<0.05);中位FPS单纯组6.0个月,显著低于联合组的8.0个月(P<0.05);中位OS单纯组8.0个月,显著低于联合组的10.0个月(P<0.05)。结论:在耐药后使用原TKI联合培美曲塞化疗疗效优于单纯应用培美曲塞化疗,且在Ⅳ期肺癌患者中效果更好,而不良反应可耐受。