一种新的肿瘤相关耐药蛋白--乳腺癌耐药蛋白

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是1998年才发现的一种与多药耐药(MDR)相关的肿瘤耐药蛋白,它与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族成员.本文就BCRP近两年的研究情况作一综述.     

多药耐药相关蛋白对急性白血病的预后意义

P 糖蛋白 (P GP)、多药耐药相关蛋白 1(MRP1)、肺耐药相关蛋白 (LRP)、乳癌耐药蛋白 (BCRP)是近年来研究较多的四种多药耐药相关蛋白。它们的过多表达是白血病化疗中产生多药耐药的重要原因之一。本文重点综述了这四种蛋白的相关表达对急性白血病化疗预后的意义。     

一种新的肿瘤相关耐药蛋白—乳腺癌耐药蛋白

乳腺癌耐药蛋白（BCRP）是1998年才发现的一种与多药耐药（MDR）相关的肿瘤耐药蛋白，它与P-gp和多药耐药相关蛋白（MRP）同属ABC转运蛋白超家族成员。本文就BCRP近两年的研究情况作一综述。     

乳腺癌耐药蛋白及其介导的多药耐药研究进展

最近发现的乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是一种不同于P-糖蛋白等的新型多药耐药蛋白,属于ATP结合盒转运子蛋白亚家族成员,为半转运子,以二聚体形式形成活性转运复合体。药敏细胞中转染或过度表达BCRP可导致该细胞耐药,可预示白血病患者的化疗敏感性及预后。     

多药耐药相关蛋白对急性白血病的预后意义

P-糖蛋白（P-GP），多药耐药相关蛋白1（MRP1），肺耐药相关蛋白（LRP），乳癌耐药蛋白（BCRP）是近年来研究较多的四种多药耐药相关蛋白，它们的过多表达是白血病化疗中产生多药耐药的重要原因之一。本文重点综述了这四种蛋白的相关表达对急性白血病化疗预后的意义。     

乳腺癌耐药相关蛋白与多药耐药关系的研究进展

肿瘤细胞对各种药物的耐药性是导致乳腺癌患者化疗失败的主要原因之一.肿瘤细胞在药物诱导下对结构和功能不相关的药物产生耐药,是多药耐药(MDR)现象.MDR与几种转运蛋白相关: P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP1～7)和乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP/ABCG2),这些蛋白都属于ATP结合盒(ABC)膜转运蛋白超家族.它们作为药物排出泵,可以导致胞内的细胞毒药物浓度降低,使肿瘤细胞对多种抗肿瘤药物产生耐药.BCRP(ABCG2)作为其中发现最晚的1个家族成员,近年来关于ABCG2的结构、分布、功能、作用底物、基因表达及调节等相关方面的研究逐渐开展起来.     

多种膜转运蛋白在早期非小细胞肺癌中的表达及意义

目的:探讨P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)和乳腺耐药蛋白(BCRP)在肺癌中的表达及其临床意义.方法:利用组织芯片技术和免疫组织化学二步法,对86例行术后辅助化疗的早期非小细胞肺癌标本进行上述4种膜转运蛋白检测.结果:在肺癌组织中P-gp、MRP、LRP、BCRP表达的阳性率分别为70.9%、73.3%、79.1%和39.5%,其表达与临床病理类型无关(P＞0.05);术后化疗效果不佳患者MRP、BCRP的表达水平高于术后化疗效果佳患者,但差异无显著性(P＞O.05);P-gp、LRP的表达水平与肺癌耐药及预后有关(P＜0.05).结论:P-gp、MRP、LRP、BCRP在未化疗过的肺癌组织中均有不同程度的表达,且与肺癌的某些生物学行为有关,联合检测P-gp、LRP有助于早期肺癌术后辅助化疗的选择及预后的判断.     

乳腺癌耐药蛋白及其介导的多药耐药研究进展

最近发现的乳腺癌耐药蛋白（BCRP）是一种不同于P－糖蛋白等的新型多药耐药蛋白，属于ATP结合盒转运子蛋白亚家族成员，为半转运子，以二聚体形成活体转运复合体。药敏细胞中转染或过度表达BCRP可导致该细胞耐药，可预示白血病患者的化疗敏感性及预后。     

急性白血病耐药蛋白表达及其检测、逆转技术的进展

1979年Biedler研究中国仓鼠肺细胞时首次发现交叉耐药现象.有多种机制可能与急性白血病（AL）化疗中的多药耐药（MDR）相关.包括肿瘤细胞不能对化疗作用发生程序性死亡或药物不能达到并作用于胞内特定目标.目前血液系统已发现的耐药蛋白主要有P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（multidrug resistance-associated proteins,MRP1）、肺耐药相关蛋白（lung resistance protein,LRP）、乳腺癌耐药蛋白（breast cancer resistance protein,BCRP）,它们同属膜转运蛋白超家族成员,介导AL多药耐药机制.笔者对近年来发现的几种膜转运蛋白超家族成员在AL耐药细胞中的作用机制、表达与预后相关性,逆转剂对耐药蛋白作用效果的评价,基因水平的新型多药耐药逆转技术以及耐药蛋白检测技术的新进展作一综述.     

P-糖蛋白与乳腺癌耐药蛋白基因在急性髓系白血病中表达的意义

目的:探讨多药耐药蛋白(P-gp)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)基因在急性髓系白血病(AML)中的表达以及它们的相关性。方法:本研究应用半定量逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,以β-actin作为内对照,检测41例AML患者及20例非恶性血液病对照组的骨髓白细胞的BCRP mRNA表达;应用流式细胞仪(FCM)采用直接免疫荧光标记法对41例AML患者及20例正常对照的骨髓单个核细胞(BMMNC)进行P-gp检测。结果:(1)AML中P-gp总阳性率与正常对照组无显著性差异(P>0.05);BCRP基因总阳性率明显高于正常对照组(P<0.05)。(2)AML中P-gp难治/复发组阳性率明显高于初治组(P<0.05);AML中BCRP基因难治/复发组阳性率与初治组无显著差异(P>0.05)。(3)P-gp 组完全缓解(CR)率和BCRP 组CR率明显低于P-gp-组和BCRP-组(P<0.05)。P-gp 组和BCRP 组早期复发率明显高于P-gp-组和BCRP-组(P<0.05)。(4)P-gp /BCRP 组CR率明显低于P-gp-/BCRP-组(P<0.01);P-gp /BCRP 组早期复发率明显高于P-gp-/BCRP-组(P<0.05)。(5)P-gp和BCRP基因在初治组和难治/复发组表达不相关(P>0.05)。结论:(1)P-gp和BCRP基因均与临床耐药密切相关。(2)P-gp和BCRP基因高表达均提示预后不良。联合检测P-gp和BCRP基因对评价AML的预后有较大意义。(3)P-gp和BCRP基因表达无相关性。     

三种耐药相关基因及其蛋白在乳腺癌组织中的表达和意义

目的 探讨乳腺癌组织和癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其相应蛋白P-gp、BCRP、LRP的阳性表达情况及临床意义.方法 采用RT-PCR检测42份乳腺癌组织及其相应癌旁正常组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的相对表达量,同时采用IHC检测126份乳腺癌组织及42份相应癌旁正常组织中P-gp、BCRP、LRP蛋白的阳性率,并观察3种耐药相关基因及其蛋白与乳腺癌患者临床病理因素、腋窝淋巴结转移及5年复发转移与未复发转移之间的关系.结果 RT-PCR检测MDR1、BCRP、LRP mRNA在乳腺癌组织中的相对表达量分别为0.81±0.17、0.78 ±0.14、0.79±0.13,癌旁正常组织中的相对表达量分别为0.33±0.11、0.45±0.09、0.36±0.10;3种耐药基因在2组中的相对表达量的差异均有统计学意义(t值分别为4.613、4.850、8.089,P均<0.01).IHC检测P-gp、BCRP、LRP蛋白在乳腺癌组织中的阳性率分别为41%(52/126)、39%(49/126)和66%(83/126),癌旁正常组织中的阳性率分别为14%(6/42)、17%(7/42)和19%(8/42),3种耐药蛋白在2组中的表达差异有统计学意义(x2值分别为10.147、7.020、27.820,P均<0.01).MDR1 mRNA和P-gp与乳腺癌患者不同临床分期及腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.369、0.39 8,P均<0.05),BCRPmRNA及其蛋白与乳腺癌患者腋窝淋巴结有无转移有关(r=0.355,P<0.05);5年内发生复发转移的39例患者与5年内未发生复发转移的32例患者P-gp、BCRP及LRP阳性率比较,P-gp阳性率在2组中的差异有统计学意义(x2=11.771,P<0.01),BCRP及LRP阳性率在2组中的差异无统计学意义(x2=2.261、0.078,P均>0.05).3种耐药基因及其蛋白在乳腺癌组织中阳性表达的一致率分别为90.48%、92.85%和85.71%(Kappa值分别为0.806、0.751和0.697,P均<0.01).结论 乳腺癌中存在着广泛的原发性多药耐药现象,3种耐药基因MDR1、BCRP、LRP的mRNA及其P-gp、BCRP、LRP蛋白均参与了乳腺癌多药耐药的形成;检测3种耐药基因和蛋白的表达可为乳腺癌患者有目的 地选择化疗方案提供一定的理论依据及策略;特别是对于P-gp阳性表达者不宜使用CAF(环磷酰胺+阿霉素+5-氟尿嘧啶)方案化疗.     

白花蛇舌草通过调控Hedgehog通路增加大肠癌耐药细胞的药物蓄积研究

目的:探讨白花蛇舌草(HDW)对大肠癌耐药细胞药物外排功能、Hedgehog信号通路调控的影响及其逆转耐药作用机制。方法:采用白花蛇舌草乙醇提取物(EEHDW)对大肠癌5-氟尿嘧啶(5-FU)耐药细胞HCT-8/5-FU进行药物干预,用MTT法检测HCT-8/5-FU的细胞活力,计算EEHDW对细胞增殖的抑制率;倒置显微镜观察EEHDW对HCT-8/5-FU细胞形态的影响;HPLC检测细胞内5-FU蓄积;倒置荧光显微镜观察细胞内阿霉素(ADM)蓄积;Western Blot检测ABC转运蛋白家族多药耐药相关蛋白1(MRP1)、P-糖蛋白(P-gp)、肺耐药蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达及Hedgehog通路相关蛋白(SHH、SMO、SUFU、Gli-1)的表达。结果:经EEHDW干预后,HCT-8/5-FU的增殖受到显著抑制,并呈剂量依赖性;细胞内5-FU、ADM蓄积明显增加,提示药物泵功能受到显著抑制(P0.01);MRP1、P-gp、LRP、BCRP等膜转运蛋白的表达明显下降;耐药相关Hedgehog信号通路受到显著抑制。结论:HDW可通过调控抑制Hedgehog信号通路活化,抑制大肠癌耐药细胞的药物外排功能,进而增加细胞内化疗药物的蓄积,发挥逆转大肠癌细胞耐药的作用。     

应用蛋白质芯片对汉防己甲素单用及与屈洛昔芬伍用逆转白血病细胞耐药机理的研究

本研究的目的是应用蛋白质芯片检测汉防己甲素(Tet)单独及与屈洛昔芬(Drol)伍用对作用的白血病细胞表面的耐药蛋白,包括P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的作用,为逆转剂的临床应用提供理论依据。选择位于膜表面Pgp、MRP1、BCRP耐药蛋白及其相应的抗体为研究体系,制备蛋白芯片,直接对逆转剂作用12、24和48小时的K562/A02细胞进行检测。结果表明:Tet和Drol联合作用24小时时检测到Pgp表达下调(Tet Drol组:85.27±3.095,对照组:93.67±2.748,P<0.05)。经逆转剂单独及联合作用K562/A02细胞48小时时均检测到Pgp表达下调,且联合应用两药对Pgp表达下调作用明显(Tet Drol:82.62±3.227,Tet:86.44±2.906,Drol:87.23±2.049,对照组:93.67±2.748,P<0.05)。检测结果与流式细胞仪检测结果一致。结论:逆转剂Tet和Drol对K562/A02细胞的Pgp下调呈时间依赖性。联合作用24小时时出现下调Pgp表达,单独作用48小时均下调Pgp表达,联合用药时下调作用明显。不同检测时间均未见下调MRP1和BCRP的表达。     

生长激素释放肽对乳腺癌耐药蛋白表达的影响及意义

[目的]探讨生长激素释放肽(ghrelin)对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)表达的影响.[方法]培养人乳腺癌细胞MDA-MB-231细胞,分别加入ghrelin、多柔比星、ghrelin联合多柔比星,采用tunnel方法检测细胞凋亡,western-blot方法检测细胞丝裂原活化蛋白激酶P38(P38)、磷酸化P38 (p-P38)、BCRP的表达并比较.[结果]tunnel 法检测显示人乳腺癌细胞MDA-MB-231在ghrelin的干预下增殖,而凋亡率在多柔比星的干预下显著降低,ghrelin联合多柔比星能够抑制多柔比星对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的杀伤作用(P＜0.001).ghrelin干预组P38、p-P38蛋白表达增加、且BCRP蛋白表达明显上升;多柔比星干预组P38、p-P38蛋白表达下降;ghrelin联合多柔比星组较多柔比星组P38、p-P38蛋白表达增加,且BCRP蛋白表达明显上升(P＜0.05).[结论]ghrelin激活P38MAPK信号通路促进乳腺癌细胞BCRP表达增加从而抑制多柔比星诱导乳腺癌细胞凋亡.     

肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因测定在急性淋巴细胞白血病中的意义

目的:评价肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因在急性淋巴细胞白血病患者中的表达情况与临床多药耐药的关系。方法:将47例急性淋巴细胞白血病患者分为临床非耐药组(A)和耐药组(B),用RT-PCR方法检测患者骨髓中肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因的mRNA表达。结果:肺耐药相关蛋白基因在A、B组阳性表达分别占6/27和8/20。统计学分析显示组间差异无显著性意义(χ2=1.15,P>0.05)。多药耐药基因在A、B组阳性表达分别占3/27和9/20。统计学分析显示组间差异有显著性意义(χ2=2.98,P<0.05)。在所有20例临床耐药患者中,5例同时表达上述两个基因。而临床非耐药组患者中,无一例同时表达上述两个基本基因。结论:肺耐药相关蛋白基因不能作为独立判定急性淋巴细胞白血病多药耐药的发生指标,多药耐药基因在判定急性淋巴细胞白血病多药耐药的发生中有一定临床意义。     

肿瘤及白血病细胞多药耐药相关蛋白基因的研究与进展

肿瘤细胞多药耐药性的形成机理中除了P_(170)糖蛋白过度表达,DNA拓扑异构酶Ⅱ量和质的异常外,最近又发现了多药耐药相关蛋白(MRP)过度表达所致的多药酎药。本文综述了关于MRP研究的新进展。     

急性髓系白血病细胞内柔红霉素潴留与多药耐药关系的研究

为检测急性髓系白血病(AML)细胞内柔红霉素(DNR)潴留(IDA)与耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)和肺耐药蛋白(LRP)表达水平之间的相关性，我们采用流式细胞术通过测定细胞内DNR荧光评估细胞内DNR浓度，活细胞直接或间接免疫荧光法测定多药耐药(MDR)蛋白的表达．     

热化疗逆转人肝癌细胞系BEL-7402/ADM多药耐药性的实验研究

目的　研究热化疗对多药耐药人肝癌细胞系BEL- 74 0 2 /ADM耐药性的影响并探讨相关的机制。方法　通过MTT法测定热化疗对多药耐药人肝癌细胞系BEL -74 0 2 /ADM耐药性影响;利用流式细胞仪检测多药耐药相关基因(MDR)的表达产物P糖蛋白(P- gp)、多药耐药相关蛋白(MRR)、谷胱甘肽转移酶(GSH/GST)的表达。结果　热化疗使多药耐药人肝癌细胞系BEL- 74 0 2 /ADM耐药性降低;P -gp、MRP和GSH/GST的表达均有所下降。结论　热化疗具有逆转多药耐药人肝癌细胞系BEL -74 0 2 /ADM耐药性的作用,可能与多药耐药相关基因表达水平下调有关。     

肝癌多药耐药细胞系HepG2/ADM的建立及耐药机制研究

目的建立人肝癌多药耐药细胞系并研究其耐药特性及机制。方法应用人肝癌细胞株HepG2,采用阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法,建立多药耐药细胞系HepG2/ADM。相差显微镜观察细胞,用MTT法检测该耐药细胞株对多种化疗药物的多药耐药性,采用流式细胞术检测该耐药细胞表面多药耐药基因(mdr)的表达产物P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)及谷胱甘肽硫转移系统(GSH/GST)的表达情况,应用RT-PCR检测MDR、MRP基因表达水平。结果HepG2/ADM对多种抗癌药物产生耐药,对阿霉素的耐药性提高了89.38倍。流式细胞仪分析发现(45.5±5.1)%的HepG2/ADM细胞表面P-gp表达阳性,而对照细胞HepG2表达仅为(11.3±1.2)%,二者差异有显著性(P<0.01);HepG2/ADM和HepG2细胞的MRP及GSH/GST表达无明显变化(P>0.05)。RT-PCR检测发现HepG2/ADM中MDR mRNA高表达。结论HepG2/ADM具有明确的多药耐药性,其多药耐药相关基因MDR mRNA表达升高。     

人骨肉瘤耐阿霉素细胞模型的建立及其生物学特性

背景:多药耐药是骨肉瘤化疗失败的重要原因,目前其耐药机制不明。目的:诱导建立耐阿霉素的人骨肉瘤细胞株并观察多药耐药蛋白1、多药耐药相关蛋白1和肺耐药蛋白的表达。方法:采用逐步递增阿霉素浓度间歇作用的方法诱导143B/WT细胞株建立143B/阿霉素耐药细胞株。结果与结论:经阿霉素诱导45d建立了143B/阿霉素细胞株,其对阿霉素高度耐药,对顺铂、甲氨蝶呤、异环磷酰胺、长春新碱和紫杉醇亦产生不同程度交叉耐药;流式细胞仪检测显示与143B野生型细胞相比,143B/阿霉素细胞周期中G1和S期所占比例增加,而G2/M期所占比例明显减少;罗丹明外排实验显示,143B/阿霉素细胞药物外排能力显著高于143B/WT细胞(P<0.01);流式细胞仪和激光共聚焦显微镜观察发现,143B/阿霉素细胞阿霉素相关性细胞凋亡率显著低于143B/WT(P<0.01);Western blot检测显示143B/阿霉素细胞多药耐药蛋白1表达水平较143B/WT显著升高(P<0.01),二者多药耐药相关蛋白1和肺耐药蛋白表达差异无显著性意义(P>0.05)。提示143B/阿霉素细胞多药耐药的产生与多药耐药蛋白1表达升高相关。