丙泊酚对心肌再灌注大鼠的保护作用

探讨丙泊酚对心肌再灌注大鼠的保护作用及对NOD样受体蛋白3(NLRP3)/半胱天冬酶-1(caspase-1)通路的影响。方法 SPF级雄性SD大鼠60只,随机分为6组:对照组、模型组(造模前股静脉注射生理盐水3 mL/kg)、NLRP3抑制剂组(造模前股静脉注射CY-09 5 mg/kg),丙泊酚低、中、高剂量组(造模前大鼠股静脉分别注射丙泊酚20、40、60 mg/kg)。除对照组外,均采用结扎左冠状动脉前降支(LAD)法制备心肌再灌注模型。再灌注结束即刻采用氯化三苯四氮唑(TTC)法测心肌梗死面积百分比,苏木素伊红(HE)染色观察心肌形态学改变;黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD),采用硫代巴比妥酸比色法检测丙二醛(MDA)含量;酶联免疫法(ELISA)检测大鼠心肌中白细胞介素–1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平;采用Western blot法检测心肌NLRP3、caspase-1、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达水平。结果与对照组比较,模型组心肌病理变化损伤严重,心肌梗死面积百分比升高,MDA含量升高,SOD含量降低,心肌组织中NLRP3、caspase-1...     

灯盏花素对创伤性损伤大鼠的神经保护作用

目的 探讨灯盏花素(Bre)基于活性氧簇(ROS)-NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体通路对创伤性脑损伤(TBI)大鼠的神经保护作用.方法 构建TBI大鼠模型,实验分为假手术组、模型组、低、中、高剂量Bre组、胞磷胆碱钠组.采用神经功能缺损评分表(NSS)对大鼠神经功能评分;测定脑组织含水量和血脑屏障通透性;酶联...     

感染性休克患者APACHE Ⅱ评分与血小板参数及心肌损伤标志物的表达分析

目的观察感染性休克患者急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分、血小板参数、心肌损伤标志物的表达特点,分析其与感染性休克预后的关系。方法选取2014年8月-2015年8月医院治疗的49例感染性休克患者为感染休克组,将成功生存的26例患者为生存亚组,将死亡的23例患者为死亡亚组,另选取资料相仿的45例未见感染性休克患者为对照组,对比各组患者在APACHEⅡ评分、血小板参数、心肌损伤感染标志物方面的差异,同时分析APACHEⅡ评分与血小板参数、心肌损伤标志物之间的相关性。结果感染休克组患者APACHEⅡ评分、血小板平均容积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)、血清肌钙蛋白I(cTn I)显著高于对照组,血小板(PLT)计数显著低于对照组(P<0.05);死亡亚组病患APACHEⅡ评分、MPV、PDW、cTn I显著高于生存亚组,PLT计数显著低于生存亚组(P<0.05);PLT计数与APACHEⅡ评分呈显著负相关,而MPV、PDW、cTn I与APACHEⅡ评分呈显著正相关性(P<0.01)。结论感染性休克患者APACHEⅡ评分、血小板参数、心肌损伤标志物表达水平异常,APACHEⅡ评分、血小板参数、心肌损伤标志物在一定程度上能够反映感染性休克预后,且心肌损伤程度与APACHEⅡ评分具有正相关性。     

连续性血液净化对合并心肌损伤的感染性休克患者心功能及组织灌注的影响

目的 探究连续性血液净化对合并心肌损伤的感染性休克患者心功能及组织灌注的影响。方法 将本院2018年6月-2022年8月收治的64例合并慢性肾脏病或接受血液透析治疗的感染性休克患者作为研究对象,以计算机完全随机分组法将其分为实验组与参照组,每组32例。参照组行常规临床治疗方案,实验组加行连续性血液净化。对比两组患者的血清炎性因子水平、组织灌注水平及相关临床指标。结果 实验组血清炎性因子水平中TNF-α、IL-6及IL-10水平均低于参照组,差异有统计学意义（P<0.05）;实验组组织灌注水平中cTn1、LAC、BNP数据均低于参照组,差异有统计学意义（P<0.05）;实验组P(cv-a)CO2、ScVO2数据均高于参照组,差异有统计学意义（P<0.05）;实验组各项临床指标中LDH、SOFA、MYO。ALT及mAST均低于参照组,差异有统计学意义（P<0.05）。结论 连续性血液净化可以降低合并心肌损伤的感染性休克患者的血清炎性因子水平,改善患者的组织灌注水平及相关临床指标。     

感染性休克患者预后影响因素及循环组蛋白和NLRP3炎症小体对预后的价值

目的 分析引起感染性休克患者预后不良的危险因素并探讨循环组蛋白及NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体与患者预后的关联性。方法 选取2020年10月-2023年2月金华市中心医院收治的感染性休克患者80例,分析感染病原菌分布特点,并根据预后分为存活组43例,死亡组37例,采用多元Logistic回归分析预后影响因素,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析外周血循环组蛋白、NLRP3炎症小体对预后的预测价值。结果 80例感染性休克患者共分离出93株病原菌,其中革兰阴性菌61株占65.59%,革兰阳性菌24株占25.81%,真菌8株占8.60%;多因素分析结果显示：年龄≥60岁及高水平的多器官功能障碍综合征(MODS)评分、循环组蛋白、NLRP3均是感染性休克患者死亡的影响因素(P<0.05); ROC曲线显示：循环组蛋白临界值为0.30 mg/L时预测不良预后的敏感度、特异性分别为85.82%、83.93%,曲线下面积(AUC)为0.881; NLRP3炎症小体mRNA相对表达量临界值为1.98时预测不良预后的敏感度、特异性分别为88.37%、67.57%,AUC为...     

灯盏花素对庆大霉素所致急性肾损伤的保护作用及机制研究

  目的  探讨灯盏花素（Bre）基于活性氧簇（ROS）-NOD样受体蛋白 3（NLRP3）炎症小体通路对创伤性脑损伤（TBI）大鼠的神经保护作用。  方法  构建 TBI 大鼠模型,实验分为假手术组、模型组、低、中、高剂量 Bre 组、胞磷胆碱钠组。采用神经功能缺损评分表（NSS）对大鼠神经功能评分;测定脑组织含水量和血脑屏障通透性;酶联免疫吸附（ELISA）法测定脑组织中 S100B 蛋白（S100B）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）、肿瘤坏死因子 – α（TNF-α）、白细胞介素 1β（IL-1β）、IL-18、IL-6水平;试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、脑组织中 ROS 水平;蛋白印迹法测定脑组织中 NLRP3、caspase-1 水平。  结果  与假手术组比较,TBI 组大鼠 NSS 评分、脑组织含水量、EB 含量和 MDA、S100B、NSE、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、ROS、NLRP3、caspase-1 水平显着升高（P < 0.05）,SOD 水平明显降低（P < 0.05）;大鼠海马区锥体细胞排列散乱,细胞缩小、核仁不明显。与 TBI 组比较,大鼠 NSS 评分、脑组织含水量、EB 含量和 MDA、S100B、NSE、TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、ROS、NLRP3、caspase-1 水平明显降低（P < 0.05）,SOD 水平明显升高（P < 0.05）,大鼠海马区锥体细胞结构层次分明,排列恢复紧密,坏死细胞数减少。  结论  Bre 可能通过下调 TNF-α、IL-1β、IL-8、IL-6、MDA 水平,上调 SOD 水平以缓解 TBI 大鼠症状,其机制可能与 ROS-NLRP3 信号通路有关。     

MiR-30a靶向Keap1缓解大鼠脑缺血再灌注损伤的机制研究

目的:研究大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤中miR-30a的功能及其作用机制。方法:血管内栓线法制备大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测脑组织中miR-30a的表达变化;大鼠侧脑室注射miR-30a慢病毒后,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测大鼠脑梗死面积,Beder...     

Candesartan治疗对SHR大鼠心肌AngⅡ及其受体表达的影响

目的观察Candesartan早期治疗对SHR大鼠心肌纤维化及心肌AT1、AT2表达的影响,探讨其抗心肌纤维化的机制。方法选取4周龄的雄性自发性高血压大鼠SHR（Spontanous Hypertensive Rat,SHR）及与之年龄性别相配的正常大鼠WKY;动物分组：WKY组、SHR组、Candesartan治疗组（SHR—Can组,给药4周后停药,继续喂养至24周）;尾袖法测定大鼠血压,断头取血,称量全心与左心质量,计算心体比与左室质量指数;放免法测定血浆及心肌AⅡ水平;免疫组化法检测心肌组织中AT1、AT2的表达;Western blotting法测定心肌AT1、AT2的表达水平;天狼星红染色测定心肌胶原指数。结果8周龄后,与SHR组相比,SHR—Can组血压明显下降并持续24周（P〈0．05）;HR-Can组心体比及左室质量指数明显低于SHR组（P〈0．05）;SHR组血浆中AⅡ水平与WKY组相比明显增高（P〈0．01）,SHR—Can组与SHR组相比降低（P〈0．05）;心肌组织AⅡ含量SHR—Can组明显低于SHR组（P〈0．05）。心肌免疫组化染色示：与WKY相比,SHR大鼠AT1、AT2明显增高（P〈0．05）;与SHR相比,SHR-Can组心肌中AT1、AT2明显减少（P〈0．05）。Western blotting结果示：SHR组AT1、AT2表达水平明显高于WKY组（P〈0．05）;SHR—Can组AT1、AT2表达水平明显降低（P〈0．05）。天狼星红染色心肌胶原含量SHR—Can组明显低于SHR组（P〈0．05）。结论Candesartan早期治疗可抑制SHR大鼠高血压的形成与发展,也可抑制SHR心肌纤维化并降低心脏指数,还能降低SHR心肌AT1、AT2的表达,Candesartan抑制心肌纤维化可能与心肌局部AT1、AT2表达水平有关。     

中草药与汉防己甲素对大鼠矽肺转化生长因子-β1信号传导通路的影响

目的探讨芪丹颗粒剂与汉防己甲素治疗大鼠矽肺纤维化的疗效及其对转化生长因子β1（TGF-β1）信号传导通路的影响。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、模型组、芪丹颗粒剂治疗组（芪丹组）、汉防己甲素治疗组（汉甲组），每组各10只。对照组给予生理盐水（1ml）气管注入，其余各组采用气管注入染尘（50mg／只）造模。芪丹组和汉甲组分别从造模后第30天灌注芪丹颗粒剂（3125mg／kg）和汉防己甲素（22mg／kg），其余各组灌注等体积生理盐水，汉甲组每周给药6d，共给药3个月，其余各组每周给药7d，给药4个月；5个月后处死全部大鼠，计算大鼠肺系数；用碱水解法测定羟脯氨酸含量，用酶联免疫吸附测定法（ELISA）N定肺泡灌洗液中TGF—β1蛋白的表达，用免疫组化（SABC法）方法测定肺组织中TGF—β1、转录因子Smad3、转录因子Smad7蛋白表达；观察肺组织及肾脏病理改变。结果模型组肺组织主要以Ⅲ～Ⅳ级矽结节为主，芪丹组及汉甲组肺组织主要以Ⅱ级矽结节为主；芪丹组、汉甲组的肺系数、羟脯氨酸含量、支气管肺泡灌洗液及肺组织中TGF—β1和肺组织中转录因子Smad3的蛋白表达均低于模型组，差异有统计学意义（P〈0．05）；芪丹组、汉甲组肺组织中转录因子Smad7的蛋白表达（169．5±4．88）、（169．55±4．73）均高于模型组，差异有统计学意义（P〈O．05）；汉甲组大鼠出现肾损伤的病理改变。结论芪丹颗粒剂与汉防己甲素均可促进转录因子Smad7蛋白表达，抑制转录因子Smad3蛋白和TGF—β1蛋白表达，抑制矽肺纤维化的进展，芪丹颗粒剂无肾毒性。     

细胞焦亡相关因子表达对2型糖尿病患者动脉粥样硬化性心血管病的预测作用

目的 探讨细胞焦亡相关因子NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、白介素-1β(IL-1β)及白介素-18(IL-18)表达对2型糖尿病(T2DM)患者合并动脉粥样硬化性心血管病(ASCVD)的预测作用。方法 回顾性分析2020年1月—2021年6月于本院就诊的90例T2DM患者的临床资料,全部患者均于入院后测定NLRP3炎性小体、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平,根据是否合并ASCVD将其分为ASCVD组与单纯T2DM组,采用单因素及多因素logistic回归分析T2DM患者合并ASCVD的影响因素,通过绘制受试者工作特征曲线(ROC)评估NLRP3炎性小体、Caspase-1、IL-1β及IL-18水平对T2DM患者合并ASCVD的预测价值。结果 单因素分析结果显示,ASCVD组年龄、男性占比、高血压占比、空腹血糖、T2DM病程以及血浆NLRP3、Caspase-1、IL-1β、IL-18表达水平高于T2DM组(P<0.05);多因素logistic回归结果显示,年龄(大)、高血压以及血浆NLRP3炎性小体、I...     

VAP患者WISP1/TLR4/整合素β5通路基因及相关炎性因子的表达

目的 探究Wnt1-诱导的信号通路蛋白1(WISP1)/Toll样受体4(TLR4)/整合素β5通路基因及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8在呼吸机相关性肺炎(VAP)患者中的表达。方法 选取2018年4月-2021年3月绍兴市人民医院收治的120例VAP患者(VAP组)及60例机械通气非VAP患者(对照组),统计VAP患者病原菌分布;比较两组外周血单个核细胞WISP1、TLR4、整合素β5 mRNA相对表达量及血清TNF-α、IL-6、IL-8水平;绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析相关指标预测VAP患者28 d死亡的临床价值。结果 120例患者分离出156株病原菌,革兰阴性菌、革兰阳性菌、真菌分别占51.92%、36.54%、11.54%。VAP组外周血单个核细胞中WISP1、TLR4、整合素β5相对表达量以及血清TNF-α、IL-6、IL-8表达水平较对照组均升高(P<0.05)。VAP组死亡患者外周血单个核细胞中WISP1、TLR4 mRNA相对表达量以及血清TNF-α、IL-6表达水平较存活组均升高(P<0.05)。WISP1 mR...     

ω-3多不饱和脂肪酸对大鼠肠道缺血/再灌注损伤时Toll样受体4和高迁移族蛋白-1的影响

目的 研究大鼠肠道缺血/再灌注损伤时远隔组织Toll样受体4（TLR4）与内源性配体高迁移族蛋白-1（HMGB1）的表达及ω-3多不饱和脂肪酸（ω-3 PUFA)的干预作用。方法 SD雄性大鼠48只, 体重（281.50±22.68）g,胃造口后随机分为3组：正常饮食组、肠内营养组、肠内营养加ω-3 PUFA组（ω-3 PUFA组）。根据肠道缺血/再灌注时是否进行肠淋巴引流,每组又分为亚组：引流组和不引流组(共6组,n=8)。所有大鼠用无创血管夹夹闭肠系膜上动脉60 min后复灌120 min;3个引流亚组在缺血/再灌注同时行淋巴引流术180 min。结果 ω-3 PUFA引流组与肠内营养引流组淋巴液中白细胞介素-6均较正常饮食引流组低［ω-3 PUFA引流组、肠内营养引流组、正常饮食引流组：（85.35±23.93）、（97.58±40.34）、（154.57±69.30)ng/L,P=0.021］;ω-3 PUFA引流组血清HMGB1显著低于其他5组［ω-3 PUFA不引流组、肠内营养不引流组、正常饮食不引流组、ω-3 PUFA引流组、肠内营养引流组、正常饮食引流组：（2.95±1.17）、（3.86±0.99）、（4.45±1.73）、（1.71±1.41）、（2.11±0.56）、（3.13±0.79）μg/L, P=0.000］,ω-3 PUFA不引流组与肠内营养不引流组HMGB1均低于正常饮食不引流组(P均＜0.05)。ω-3 PUFA组的血清内毒素显著低于正常饮食不引流组和肠内营养不引流组 ［ω-3 PUFA不引流组、ω-3 PUFA引流组、肠内营养不引流组、正常饮食不引流组 ：（0.020±0.004）、 （0.018±0.006）、（0.028±0.006）、（0.028±0.005）EU/ml, P=0.014］,ω-3 PUFA引流组和ω-3 PUFA不引流组肿瘤坏死因子-α显著低于肠内营养不引流组、正常饮食不引流和正常饮食引流组［ ω-3 PUFA引流组、ω-3 PUFA不引流组、肠内营养不引流组、正常饮食不引流组、正常饮食引流组：（12.03±6.57）、(14.32±6.11)、（23.27±15.60）、（27.42±10.37）、（26.87±5.30）ng/L,P=0.013］。 所有不引流组空肠和回肠黏膜肿胀、萎缩、糜烂,甚至出现断裂。ω-3 PUFA组空、回肠HMGB1黄染以及损伤情况都轻于另外两组。3个淋巴液引流组空肠、回肠和肝脏的TLR4 mRNA表达均低于非引流组［空肠：ω-3 PUFA不引流组、肠内营养不引流组、 正常饮食不引流组、ω-3 PUFA引流组、肠内营养引流组、正常饮食引流组： 2.32± 0.62、3.08±1.29、3.50±2.44、1.62±0.79、1.67±1.11、1.94±0.81, P=0.025; 回肠：ω-3 PUFA不引流组、肠内营养不引流组、正常饮食不引流组、ω-3 PUFA引流组、肠内营养引流组、正常饮食引流组： 2.67±1.08、5.22±3.96、 6.95±4.92、1.70±0.68、1.80±0.29、3.68±1.47, P=0.012;肝脏：ω-3 PUFA不引流组、肠内营养不引流组、正常饮食不引流组、 ω-3 PUFA引流组、肠内营养引流组、正常饮食引流组： 5.67±1.94、7.50±3.89、7.18±4.55、1.70±0.86、3.90±1.95、4.12±2.11, P=0.001］,与肠道、肝脏和肺脏的HMGB1表达减少和核因子-κB活性降低相一致（P＝0.000）。结论 肠道缺血再灌注时淋巴管引流和(或) ω-3 PUFA干预能够减少HMGB1和炎症因子的产生,抑制HMGB1和TLR4 mRNA的表达,从而减轻远隔组织的损伤。     

Aβ25-35诱导大鼠心肌细胞内质网应激和细胞凋亡的研究

目的 研究β淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)对培养大鼠心肌细胞的凋亡及内质网应激相关蛋白的影响,探讨内质网应激在A β25-35所致心肌损伤中的作用.方法 体外培养大鼠心肌细胞,给予不同浓度Aβ25-35刺激,用MTT方法观察心肌细胞的存活率,采用Hoechst33258染色观察心肌细胞的形态,流式细胞术检查细胞凋亡率,采用Western blot方法检测内质网应激蛋白X盒结合蛋白-1(XBP-1)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的水平,以及凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved PARP的水平.结果 Aβ25-35可以降低体外培养大鼠心肌细胞的存活率,促进凋亡,且呈现浓度依赖的方式.给予Aβ25-35后内质网应激蛋白XBP-1、GRP78和CHOP表达增加,同时凋亡蛋白cleaved caspase-3和cleaved聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)表达也增加.结论 Aβ25-35可以导致体外培养的大鼠心肌细胞发生凋亡,而内质网应激可能参与了心肌细胞发生凋亡过程,为有效防治AD相关性心肌损伤提供新思路.