番荔素纳米混悬剂的制备及其抗肿瘤作用研究

目的 制备高载药量番荔素纳米混悬剂（ACGs-NSPs）,并研究其对小鼠乳腺癌4T1移植肿瘤的生长抑制作用,为强效抗肿瘤药物ACGs的临床应用提供可用注射剂型。方法 番荔素、TPGS、SPC（质量比7:5:2）采用超声-沉淀法制备ACGs-NSPs,并用动态光散射法测定ACGs-NSPs的粒径,透射电镜观察其形态;稳定剂TPGS、SPC组成比例对ACGs-NSPs的溶血性考察;透析法考察其体外释放;采用MTT比色法评价ACGs-NSPs对4T1细胞细胞毒性;建立4T1乳腺癌皮下小鼠肿瘤模型,以紫杉醇注射液（PTX）为阳性对照,考察不同剂量ACGs-NSps静脉注射给药对4T1肿瘤的抗肿瘤药效。结果 ACGs-NSPs为表面光滑的球形,平均粒径为(129.03±1.03）nm,多分散指数PDI为0.134±0.03,zeta为（-17.7±0.16）mV,HPLC法测得番荔素线性回归方程为Y=0.157 2 X-0.363 2（R²=0.999）,在5~200 μg/mL范围内显性关系良好,载药量高达（45.03±0.72）%;体外释放较为缓慢;MTT试验中,ACGs-NSPs对4T1乳腺癌的细胞毒性显著强于游离药物（IC⁵⁰,3.221 μg/mL vs 4.464 μg/mL,P<0.05）;4T1荷瘤小鼠的药效学实验中,ACGs-NSPs表现出剂量相关性的抑瘤作用,高、中、低剂量组（0.4、0.2、0.1 mg/kg）抑瘤率分别为76.09%、74.34%、42.03%;但高剂量组小鼠有死亡（3/10）。结论 成功制备高载药量的ACGs-NSPs,且其对4T1乳腺癌有显著的抑制作用;从药效和小鼠存活率来看,0.2 mg/kg为合适的给药剂量。     

香菇多糖–番荔素纳米粒的性能考察及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的抑制作用

目的 考察香菇多糖–番荔素纳米粒的性能,及其对小鼠黑色素瘤肺转移癌的体内外抑制效果。方法 采用反溶剂沉淀法制备香菇多糖–番荔素纳米粒,以动态光散射法测定粒径、分散系数（PDI）及Zeta电位,及其在不同生理介质（5%的葡萄糖、生理盐水、PBS的混悬液）中的稳定性;采用透射电子显微镜观察纳米粒的形态、大小;精确称量香菇多糖–番荔素纳米粒质量,并采用HPLC法测量番荔素中番荔辛,计算载药量;用酶标仪在540 nm处测量不同浓度（2、1.5、1、0.5、0.25、0.125 mg/mL）香菇多糖–番荔素纳米粒与5%葡萄糖溶液等渗液的吸光度,并计算溶血率;采用透析袋法考察香菇多糖–番荔素纳米粒的体外释放行为。用划痕实验与MTT实验对香菇多糖–番荔素纳米粒进行体外药效学考察。构建黑色素瘤肺转移癌小鼠模型,以紫杉醇注射液为阳性对照,对不同剂量香菇多糖–番荔素纳米粒进行体内药效学研究。结果 香菇多糖–番荔素纳米粒的粒径为（160.6±1.0）nm,PDI为0.082±0.023,Zeta电位为（-28.10±1.14）m V,透射电镜下呈球状。香菇多糖–番荔素纳米粒在5%的葡萄糖、血浆中稳定,无溶血...     

阿斯匹林对小鼠乳腺癌细胞株的抑制作用

目的 观察阿斯匹林在体外对小鼠乳腺癌细胞株有无确切的抑制作用。方法 将小鼠乳腺癌细胞株（ＨＣ－１１）与不同浓度的阿斯匹林共同培养,于培养后２４、４８、７２小时分别作细胞计数,并计算ＩＣ５０。结果 阿斯匹林对ＨＣ－１１有明确的生长抑制作用,且此作用与阿斯匹林的用量呈明显正相关。结论 提示阿斯匹林在乳腺癌的化学预防方面有一定的应用前景。     

儿茶素对小鼠造血祖细胞的刺激增殖作用

目的:观察儿茶素对小鼠造血祖细胞增殖作用.方法:通过造血祖细胞培养观察儿茶素对小鼠CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-Meg生长的作用.结果:加入儿茶素工作液后,CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-Meg集落数均明显升高.至100 nag·L-1时,各系造血祖细胞集落数均增加至最高,与未加儿茶素的实验组相比均有统计学差异(P<0.01).结论:儿茶素可明显促进小鼠造血祖细胞(CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-Meg)的增殖,并可与造血生长因子起协同效应,具有明显的造血促进作用.     

儿茶素对小鼠巨噬细胞VCAM-1表达的影响

<正>血管细胞黏附因子介导的血管炎性病变是很多疾病[如动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)[1]、风湿病、肾病等]共同的病理基础。研究发现[2]AS的血管壁中有VCAM-1的大量表达。过量表达的VCAM-1介导的炎症反应参与了AS发生发展的全过程[3]。儿茶素(catechin)是从茶叶中提取的酚类物质,有良好的     

聚酯型儿茶素对小鼠的免疫调节作用

目的 :研究聚酯型儿茶素对正常小鼠及实验性免疫功能低下小鼠的影响。方法 :选用二硝基氟苯 (DNFB)致小鼠迟发型超敏反应 (DTH)模型、小鼠腹腔巨噬细胞 (PMΦ )吞噬鸡红细胞模型以及血清溶血素生成法 (HC50) ,分别观察对正常小鼠特异性细胞免疫、非特异性细胞免疫和体液免疫功能的影响。以环磷酰胺腹腔注射15mg/(kg·d)×4d造成免疫功能低下的模型 ,采用DTH、碳粒廓清法及血清溶血素生成法测定有关免疫指标。结果 :聚酯型儿茶素 (50、100、200mg/(kg·d)×7d)可明显增强正常小鼠的耳片肿胀度、腹腔巨噬细胞吞噬功能及血清溶血素生成 ,明显提高环磷酰胺所致免疫低下小鼠的DTH反应、碳粒廓清K和α值及HC50 值。结论 :聚酯型儿茶素对正常及免疫功能低下小鼠的细胞免疫和体液免疫均具有增强作用。     

丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用

目的 初步研究丁酸钠对乳腺癌细胞MCF-7生长的抑制作用.方法 常规培养乳腺癌细胞MCF-7至对数生长期,观察用丁酸钠处理后细胞生长速度、倍增时间、克隆形成率、细胞周期分布和细胞凋亡的变化.结果 与MCF-7亲本细胞相比,用丁酸钠处理的MCF-7细胞:①生长速度减慢.倍增时间延长(MCF-7亲本细胞、2.5mmol/L、5mmol/L和10mmol/L丁酸钠处理的MCF-7细胞倍增时间分别为29.9h、62.3h、164.2h和301.0h,P<0.05);②克隆形成率显著降低(MCF-7亲本细胞和丁酸钠(5mmol/L)处理24h的MCF-7细胞平均克隆形成率分别为72%和16.7%,P<0.05);③出现明显的G1期阻滞,S期和G2/M期细胞比例显著减少(P<0.05);④凋亡细胞数量明显增加(P<0.05);⑤出现明显的DNA"梯子"样断裂变化.结论 初步揭示了丁酸钠可以逆转乳腺癌细胞MCF-7的恶性生物学行为,其该作用可能与诱导MCF-7细胞凋亡有关,为丁酸钠在乳腺癌治疗中应用的可能性提供了初步的理论和实验依据.     

表没食子儿茶素没食子酸酯抗乳腺癌作用机制的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，其发病率呈逐年上升趋势。表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）是茶叶中的主要活性成分之一，具有抗氧化、抗炎症、保护心血管、预防糖尿病及抗肿瘤等功效。近年来，多项体内和体外研究表明EGCG通过抑制细胞增殖、血管生成、干性、侵袭转移及促进凋亡等方式抑制乳腺癌的发生发展。主要对EGCG抑制乳腺癌的分子机制进行综述，为乳腺癌的防治提供新的线索。     

毛萼乙素纳米混悬剂.Ⅱ.对小鼠肝癌H22移植瘤的生长抑制作用

采用小鼠肝癌H22移植性肿瘤模型,考察不同给药途径和剂量下,毛萼乙素纳米混悬剂的抗肿瘤作用及毒性.在适宜的给药剂量下,毛萼乙素纳米混悬剂经静脉注射、腹腔注射和灌胃3种途径给药均可抑制小鼠肝癌H22移植瘤的生长,并呈现明确的量效关系,但其毒性也随着剂量的增加而明显增大.在10 mg/kg的剂量下,腹腔注射的抑瘤作用优于静脉注射;但该途径给药产生的毒性也比静脉注射大.灌胃给药的抑瘤作用最弱,且高剂量时会产生严重的胃肠道不良反应.     

儿茶素微囊剂对小鼠的免疫调节作用

目的:研究儿茶素微囊剂对小鼠的免疫调节作用。方法:环磷酰胺诱导小鼠免疫功能低下,予儿茶素微囊剂,观察小鼠耳片肿胀度、半数溶血值(HC50 )、碳粒廓清指数K、吞噬指数α等有关免疫指标的变化。结果: 儿茶素微囊剂高剂量组(500mg·kg-1·d-1 )小鼠的耳肿胀度为(36±7 )mg与生理盐水组(20±3)mg比较差异有非常显著意义(P<0. 05),碳粒廓清指数K和吞噬指数α分别提高为0. 053 3±0. 002 5, 7. 08±0. 03,与生理盐水组(0. 041 2±0. 002 8, 6. 16±0. 19 )相比差异有非常显著意义(P<0. 01 );环磷酰胺+儿茶素高剂量组小鼠耳片肿胀度为(19±3 )mg,与环磷酰胺组(9±4)mg比较差异有非常显著意义(P<0. 01 ),HC50增高至(223±15)与环磷酰胺组(193±18)比较差异有非常显著意义(P<0. 05 ),碳粒廓清指数K、吞噬指数α分别为0. 034 8±0. 002 8, 6. 01±0. 11,与环磷酰胺组(0. 024±0. 004, 5. 1±0. 6 )相比有一定的提高(P<0. 01 )。结论:儿茶素微囊剂对正常及免疫功能低下小鼠的细胞免疫和体液免疫均具有增强作用。     

聚酯型儿茶素对人肝癌细胞生长的抑制作用及其机制

目的　探讨聚酯型儿茶素对人肝癌SMMC 772 1细胞的生长抑制作用及其机制。方法　应用MTT法、集落形成试验、同位素掺入试验、细胞内cAMP/cGMP浓度测定、原位杂交等方法进行检测。结果　 5 0mg·L-1聚酯型儿茶素对SMMC 772 1细胞的生长、集落形成有明显的抑制作用 ;[3H] TdR、[3H] Leu掺入试验证明其可明显抑制细胞DNA和蛋白质合成 ;聚酯型儿茶素作用后 ,SMMC 772 1细胞内cAMP及cGMP浓度明显增加 ,细胞的c myc基因mR NA水平表达明显降低 ,而 p5 3基因mRNA水平表达明显升高。结论　聚酯型儿茶素对肝癌SMMC 772 1细胞的生长有明显的抑制作用 ,此作用与其抑制细胞DNA和蛋白质合成、升高细胞内cAMP浓度和抑制c myc基因表达、增强p5 3基因表达有关     

穿心莲内酯对小鼠乳腺癌的抑制作用和机制

目的研究穿心莲内酯(andrographolide, Andro)对乳腺癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及对线粒体功能的影响并探讨其机制。方法 MTT法检测Andro对4T1的抑制作用;测量肿瘤体积,计算脏器指数,HE染色分析Andro对肿瘤的抑制作用及对免疫、代谢器官的影响。试剂盒检测血清中乳酸含量,分析Andro对糖酵解的影响;试剂盒检测肿瘤组织中ATP、乙酰辅酶A含量、Western blot检测PDH蛋白表达,分析Andro对氧化磷酸化的影响;Clark氧电极、JC-1染色检测耗氧量及线粒体膜电位,分析线粒体功能。结果 Andro可抑制4T1细胞增殖,抑制肿瘤生长,且对免疫、代谢器官无显著影响;Andro可下调乳酸含量,抑制糖酵解;上调ATP、乙酰辅酶A含量及PDH蛋白表达,恢复氧化磷酸化;升高耗氧及线粒体膜电位,改善线粒体功能。结论 Andro对乳腺癌小鼠肿瘤生长具有抑制作用,其机制可能与抑制糖酵解,恢复氧化磷酸化,改善线粒体功能有关。     

4T1细胞的骨播散型细胞的特征研究

基于小鼠乳腺癌4T1细胞骨转移的潜能,通过6-巯基嘌呤筛选,获得骨髓中播散的4T1细胞。通过形态学观察、增殖实验、上皮细胞及间充质细胞标志物表达、转录组测序及成瘤实验等研究骨髓中播散的4T1细胞的特征。结果表明,转移至骨髓中的4T1细胞相比未转移的4T1细胞,其细胞偏圆,呈纺锤状,增殖率、迁移能力降低,上皮细胞黏附分子(epithelialcelladhesionmolecule,EpCAM)、E钙黏蛋白(E-cadherin)表达降低,N钙黏蛋白(N-cadherin)表达增加,但波形蛋白(vimentin)无明显变化,具有部分上皮间充质转化特征。此外,骨髓中的4T1细胞具有较高脂肪酸代谢和较强成瘤性的特征。本研究为乳腺癌转移的基础研究奠定实验基础。本论文所有动物实验均符合中国药科大学动物伦理委员会标准。     

纳米雄黄对MCF-7乳腺癌干细胞的体外抑制作用

目的 研究纳米雄黄对乳腺癌干细胞的体外抑制作用.方法 以人乳腺癌MCF-7亲本细胞为对象,采用无血清培养法培养获得乳腺癌干细胞.以阿霉素(1 mg/L)为阳性对照,以相同质量浓度的水飞雄黄为参照,采用CCK-8法检测纳米雄黄对MCF-7亲本细胞及干细胞增殖的影响;借助悬浮球形成及分化实验、划痕实验、Transwell侵...     

葫芦素B体外对乳腺癌细胞的生长抑制作用研究

目的观察葫芦素B(Cucurbitacin B)对非磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MCF-7和磷酸化STAT3人乳腺癌细胞系MDA-MB-435S的增殖抑制和诱导凋亡作用,为临床应用提供依据。方法用不同浓度的葫芦素B分别处理MCF-7和MDA-MB-435S细胞,48 h后用MTT法检测细胞增殖;用荧光显微镜观察细胞凋亡。结果MTT结果显示,葫芦素B对MCF-7和MDA-MB-435S细胞的增殖抑制作用具有明显的剂量依赖性,统计学分析提示,各实验组与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);荧光显微镜显示典型的细胞凋亡。结论葫芦素B对人乳腺癌细胞的增殖具有抑制作用(与STAT3的活化状态无关),诱导乳腺癌细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤效应。     

珠子参提取物抗氧化活性及其对乳腺癌细胞的抑制作用研究

目的探索珠子参提取物体外抗氧化活性和其对MCF-7乳腺癌细胞增殖的抑制作用。方法采用2-联氮-二-(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)和二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)检测珠子参提取物的抗氧化活性。采用噻唑蓝(MTT)法检测不同提取物对乳腺癌细胞生长的影响。结果珠子参提取物具有清除ABTS和DPPH自由基的能力,其体外抗氧化作用均随浓度的增大而增强,且对人乳腺癌MCF-7细胞的增殖具有明显的抑制作用。结论 4种提取物的抗氧化能力存在一定差异性,HPD-100大孔树脂制备的提取物具有较好的抗乳腺癌活性。     

儿茶素对环磷酰胺诱导小鼠迟发性超敏反应的影响*

目的:研究儿茶素对环磷酰胺诱导小鼠迟发性超敏反应的影响。方法:以2,4-二硝基氯苯(DNCB)诱导小鼠迟发性超敏反应(DTH),致敏后立即腹腔注射(ip)环磷酰胺(Cy)125 mg.kg-1和致敏前3 d ip Cy 250mg.kg-1分别诱导小鼠降低和增强的DTH反应,用耳肿胀度、胸腺指数和脾指数作为主要检测指标。以ConA诱导胸腺T淋巴细胞,观察不同剂量或浓度的儿茶素体内外对胸腺T淋巴细胞增殖和IL-2生成的影响。MTT法检测胸腺T淋巴细胞增殖,ConA诱导的胸腺T淋巴细胞培养上清中IL-2活性检测采用活化的小鼠胸腺细胞MTT比色法。结果:于致敏前3 d灌胃儿茶素30,60,120 mg.kg-1.d-1,连续7 d,在Cy诱导的DTH反应降低小鼠模型,儿茶素在60,120 mg.kg-1剂量可显著上调其低下的耳肿胀度、胸腺和脾指数,并上调胸腺T淋巴细胞增殖反应以及产生的IL-2水平;在Cy诱导的DTH反应增强小鼠模型,儿茶素60,120 mg.kg-1可显著下调其增高的耳肿胀、胸腺和脾指数,儿茶素30,60,120 mg.kg-1可显著抑制其增强的胸腺T淋巴细胞增殖反应以及产生的IL-2水平。儿茶素体外在25~200 mg.L-1浓度时能增强Cy诱导的DTH反应降低的小鼠胸腺T淋巴细胞增殖和IL-2水平;儿茶素在12.5~200 mg.L-1浓度时能降低Cy诱导的DTH反应增强的小鼠胸腺T淋巴细胞增殖和IL-2水平。结论:儿茶素对小鼠的细胞免疫具有调节作用。     

西黄丸调节JNK1/AP-1通路抑制荷4T1小鼠乳腺癌细胞生长

目的 研究西黄丸抑制荷4T1小鼠乳腺癌肿瘤的生长及其可能机制。方法 建立荷4T1小鼠乳腺癌模型,以低、中、高剂量（0.39、0.78、1.95 g/kg） ig给予西黄丸两周,分离肿瘤组织,称质量并计算抑瘤率;切片,TUNEL染色检测肿瘤细胞凋亡;实时荧光定量PCR （qRT-PCR）检测肿瘤组织JNK1、AP-1 mRNA表达;免疫荧光染色和Western Blotting检测肿瘤组织中JNK1、AP-1蛋白表达。结果 与模型组比较,肿瘤质量随西黄丸剂量的升高显著下降;TUNEL荧光染色结果显示,肿瘤细胞凋亡数量随西黄丸剂量的升高显著升高;qRT-PCR结果显示,肿瘤组织中JNK1、AP-1 mRNA表达水平随西黄丸剂量的升高显著上调;免疫荧光染色和Western Blotting结果显示,肿瘤组织中JNK1、AP-1蛋白表达随西黄丸剂量的升高显著增加;且高、中、低剂量组差异均具有统计学意义（P<0.05）。结论 西黄丸显著抑制肿瘤生长,其作用机制与激活JNK1/AP-1信号通路促进肿瘤细胞凋亡相关。     

Tautomycetin与Leptomycin B联用协同抑制乳腺癌细胞增殖的作 用及机制

目的 研究Tautomycetin(TMC)和Leptomycin B(LMB)联用对乳腺癌细胞增殖的协同抑制作用及机制。方法 采用MTT、Western blot和免疫荧光等方法检测TMC和LMB对乳腺癌细胞增殖、Bcl-2家族等蛋白的表达与细胞定位等方面的影响。结果 LMB处理24 h后再加TMC对乳腺癌细胞增殖的协同抑制作用最强。与单独用药相比,采用该方式联合用药,TMC和LMB的用量仅为单独用药时的23.8%和17.7%,即可达到相同的半数抑制效应。TMC与LMB联用可促进Bcl-2蛋白表达的下调;并增强对Bad、Akt和FKHR磷酸化的下调作用,促进FKHR的细胞核聚集。结论 TMC与LMB联用对乳腺癌增殖具有显著的协同抑制作用,其机制可能是促进FKHR细胞核定位。