应用正交实验研究铜绿假单胞菌原生质体制备与再生

通过对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生进行正交实验,探讨各因子对铜绿假单胞菌原生质体制备与再生影响水平,得到铜绿假单胞菌原生质体制备与再生的最优条件:酶解时间 0. 5h,酶浓度 2mg/L,菌龄为 15h 此时原生质体形成率为 80. 5%,再生率为 20. 6%     

球红假单胞菌降解褐煤的条件研究

通过分析球红假单胞菌降解褐煤时的煤样粒度、菌液用量、煤浆浓度、转化降解时间及pH值的变化,研究以上各因素对煤炭微生物转化率的影响。研究结果表明,各因素对煤炭微生物转化率影响的大小为煤样粒度>煤浆浓度>降解时间>菌液用量。试验条件下,各因素的最优水平为煤样粒度-0.2mm、菌液用量10mL/100mL、煤浆质量浓度0.9g/50mL、降解时间14d,此时经硝酸预处理的义马褐煤的煤炭微生物转化率为41.72%;在整个试验过程中,培养基pH值是在呈上升的趋势。用XRD和FTIR测试分析了褐煤的微生物转化产物,结果表明,转化产物的芳香聚合度和分子量有很大程度降低,官能团含量也发生了变化,褐煤样中的大量芳香类高聚物降解为低分子量类物质及其他类物质。研究为实现煤炭微生物降解的产业化提供了参考。     

荧光假单胞菌与植物病害生物防治

荧光假单胞菌对多种植物病害具有防治作用,它首先在植物根际定殖,然后靠噬铁素对铁离子(Fe~(3+))的竞争和抗生素的拮抗作用抑制病原菌的生长发育,保护植物体免受病菌危害。荧光菌在根际的定殖能力与它同根系分泌物的凝集能力有关,与它在根表的短期不可逆吸附也有一定关系。荧光菌菌剂研究较多,目前最好的可贮存一年。虽然荧光菌已成功地用于一些病害的生物防治,但仍有许多问题有待解决。     

红假单胞菌产类胡萝卜素条件的研究

通过对影响红假单菌类胡萝卜素的因素的全面研究,获得了胡萝卜素产量相对辊主贩培养条件,以乙酸钠为碳源,谷氨酸钠为氮源,酵母亮为生长因子,４ｍｇ／Ｌ,ＭｇＳＯ４,２ｍｇ／ＬｆＥ２（ｓｏ４）３,１５００ｌｘ光照度,３０℃,微好氧培养１２０ｈ。     

荧光假单胞菌P32培养基的优选

本文对荧光假单胞菌P32的培养基成分进行了研究,利用正交试验筛选出产菌量较高的培养基,成分如下:(％,W/V)蔗糖6,甘油3,蛋白胨1,NH_4H_2PO_4,0.5.     

荧光假单胞菌噬铁素的性质研究

本文报道了荧光假单胞菌Ｐ３２产生的噬铁素的特性．噬铁素在紫外光下发出黄绿色荧光，与Ｆｅ３＋有高度亲和性，在２３０ｎｍ和４００ｎｍ附近各有一吸收峰，氨基酸组成为苏氨酸：甘氨酸：赖氨酸：胱氨酸：亮氨酸：天冬氨酸＝２：４：４：４：１：１，生物合成需较低浓度Ｆｅ３＋为条件，与Ｆｅ３＋的复合物无荧光，但可用连二亚硫酸钠，８－羟基喹啉和抗坏血酸粉末恢复荧光．     

检查假单胞菌荧光色素方法的改良

金氏B培养基中加入蛋黄之后,荧光假单胞杆菌产生荧光色素的能力加强,便于检验,对于产生荧光色素能力弱的菌株也能得到明确的阳性结果,这一方法的使用,消除了(月示)蛋白胨对培养基质量的限制。     

纳豆芽孢杆菌原生质体制备条件的研究

以纳豆芽孢杆菌ZJ-zx为出发菌株,利用溶菌酶进行原生质体制备,并对其制备条件进行了优化.结果表明:在溶菌酶质量浓度为0.6mg/mL、酶解时间为40min、酶解温度为35℃、渗透压稳定剂为0.7mol/L的条件下,制备原生质体的形成率为95.46%,再生率为15.83%,为下一步的诱变育种工作奠定了基础.     

荧光假单胞菌产木聚糖酶的纯化和性质

有硫酸铵分级沉淀,葡聚糖凝胶分离技术,对荧光假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕ．）所产的半纤维素酶进行分离纯化,得到单一组分的木聚糖酶。通过凝胶电泳法,测得其摩尔式量为３３０００。研究表明,该酶的最适ｐＨ值为６．０,最适温度６０℃。酶的动力学研究测出米氏常数Ｋｍ值为４．７６ｍｇ／ｍｌ。     

刺孢吸水链霉菌与淡紫灰链霉菌原生质体制备条件研究

通过对甘氨酸浓度、酶解温度、酶浓度、酶解时间等影响因素考察,及正交试验优化,确定了刺孢吸水链霉菌和淡紫灰链霉菌原生质体制备的最佳条件.实验结果表明,刺孢吸水链霉菌最佳原生质体制备条件是：甘氨酸浓度为0.5%,酶解温度28 ℃,溶菌酶浓度为3×10-3 g/mL,酶作用时间60 min;淡紫灰链霉菌：甘氨酸浓度为1.0%,酶解温度32 ℃,溶菌酶浓度4×10-3 g/mL,酶作用时间60min.有效的原生质体保存条件是：-20 ℃,在5 d内,原生质体再生率在15%以上.     

白灵菇原生质体制备与再生研究

借助正交设计法对白灵菇原生质体制备与再生进行研究．结果表明,原生质体最佳制备体系是：液体静置培养7d的菌丝体,在20g／L的溶壁酶作用下,以0．6mol／L蔗糖为渗透压稳定剂,28℃酶解2h,最高制备率为1．34×10^7个／mL;其最佳再生体系是：以液体静置培养7d的菌丝体,0．6mol／LMgSO4·7H2O为渗透压稳定剂,在15g／L溶壁酶与10g／L蜗牛酶作用下,34℃酶解3h,最高再生率为3．7％．     

黑脉羊肚菌培养条件选择及原生质体的制备

探讨了黑脉羊肚菌的培养条件和原生质体的制备.结果表明,洋葱液体培养基适合黑脉羊肚菌生长.培养3d的黑脉羊肚菌菌丝体在30℃下,用4%溶壁酶酶解2 5h,原生质体数目为2 53×106个/mL.     

香菇菌丝原生质体制备及融合条件的研究

讨论不同菌龄、酶解时间、酶解温度、渗透压稳定剂对香菇原生质体产率的影响。结果表明 ,香菇菌丝制备原生质体时最适菌龄为 6天 ,酶解时间为 3h ,酶解温度为 34℃ ,渗透压稳定剂用 0 .6mol/L甘露醇为最佳。在此基础上 ,以 35 %的PEG为融合诱导剂进行香菇B0 1、L2 6种间原生质体融合 ,并用显微镜观察到融合子的形成     

双孢蘑菇原生质体制备条件的优化

采用L16(45)正交分析方法,对双孢蘑菇原生质体制备工艺进行了优化.试验结果表明,最佳制备条件是取菌龄7 d的液体菌丝体,以2.5%溶壁酶 7%蜗牛酶为组合,0.6 mol/L NaCl作为渗透压稳定剂,在30℃条件下,酶解3 h,原生质体产率为2.34×108个/mL.本研究可为双孢蘑菇原生质体的融合及转基因研究提供理论依据.     

金色链霉菌原生质体的制备

对金色链霉菌原生质体制备的具体条件进行了优化研究 .发酵培养基中采用蔗糖浓度 12 %、甘氨酸浓度 0 .5 %、酶解条件采用菌龄为 48h的菌丝、溶菌酶浓度 6mg/mL、酶解时间为 1h制备原生质体 ,原生质体制备率可高达 6 0 %以上 .     

正交设计法探讨茯苓原生质体的最佳制备条件

应用正交设计法研究了不同因素对茯苓原生质体制备的影响.实验结果表明，渗稳剂的种类和酶解时间对茯苓原生质体产量的影响最显著；培养5 d的菌丝体在30 mg/L溶壁酶＋20 mg/L蜗牛酶的酶液中，以0.6 mol/L的蔗糖作为渗稳剂，30℃酶解1 h，茯苓原生质体的产量最高.     

2种捕食线虫真菌大量原生质体的快速制备与再生技术

 比较了培养基、菌龄、溶壁酶、配制酶液的缓冲溶液和酶解条件等重要因素对2种捕食线虫真菌原生质体形成的影响.采用优化后的制备条件,用较低质量浓度的酶液(5mg/mL纤维素酶,5mg/mL蜗牛酶),在短时间内(5h)蠕虫节丛孢(Arthrobotrys vermicola)原生质体得率可达0.5×10⁷～1.0×10⁷mL^-1,球状单顶孢(Monacrosporium sphaeroides)原生质体得率为0.8×10⁷～1.5×10⁷mL^-1.原生质体的再生除了受到原生质体制备方法的影响,还与再生培养基的营养成分、渗透压稳定剂及其浓度有很大关系.另外还对原生质体的释放和再生进行了详细的观察和描述.     

酶水解纤维素条件的优化

为了探究酶水解纤维素的最优条件,以麦草浆为原料,研究纤维素酶用量、pH、水解温度、底物质量分数和酶水解时间对酶水解得率的影响,通过正交实验对酶水解纤维素的工艺条件进行优化.最佳条件为:酶用量27,U,pH,5.5,水解温度50,℃,底物质量分数2%,水解时间60,h.在此条件下,酶水解得率可以达到75.8%.