桃果实白肉/黄肉性状的RAPD标记向SCAR标记的转化研究

以桃品种京玉和美味的正反交69株F1群体为试材,利用RAPD技术扩增出了与桃果实白肉/黄肉性状连锁的899bp的多态性片段,经克隆、测序后,根据获得的序列重新设计了一对引物进行SCAR转化。利用引物对BFP15/60成功将RAPD标记转化成了SCAR标记,并命名为SCU03-900。该标记仅在果肉为白肉的个体和重组型个体中出现,与白肉/黄肉性状的连锁距离为21cM,且扩增稳定,为桃果实白肉/黄肉性状育种的分子标记辅助选择奠定了基础。     

利用AFLP和RAPD标记构建桃的遗传连锁图谱

为了给进一步研究桃的遗传标记的定位打下基础,以毛桃北京2—7[Prunus persica(L．)Batsch．Beijing2-7]、山桃白花山碧桃[Prunus davidiana(Carr．)Franch．Baihuashanbitao]以及2者的F1代为试材,用RAPD、AFLP标记构建了北京2—7和白花山碧桃的遗传连锁图,分别覆盖221．7 cM(7个连锁群)、1238．8 cM(12个连锁群)。其中北京2—7的连锁图包含19个标记,标记间平均距离为11．7 cM;白花山碧桃的连锁图包含103个标记,标记间平均距离为12．0 cM。     

桃果实有毛/无毛性状的SCAR标记

 以桃品种‘京玉’和‘美味’的正反交69株F1 群体为试材, 利用RAPD技术扩增出了与桃果实有毛/无毛性状(G/ g) 连锁的2 258 bp的多态性片段, 经克隆、测序后, 根据获得的序列重新设计了两对引物进行SCAR转化。引物对BFP94 /BFP95在有毛和无毛个体中均扩增出了2 258 bp的片段, RAPD显示的多态性消失。利用引物对BFP96 /BFP98成功将RAPD标记转化成了SCAR标记, 并命名为SCP2022258。该标记仅在果实有毛的个体中出现, 与有毛/无毛性状的连锁距离为718 cM, 且扩增稳定, 为桃果实有毛/无毛性状育种的分子标记辅助选择奠定了基础。     

西瓜核雄性不育育性基因的RAPD标记

利用RAPD技术对西瓜G17AB隐性核雄性不育系的不育株和可育株基因组DNA进行了比较分析,共利用了31套620个RAPD引物,其中548个引物在二者之间得到了扩增产物,筛选到了可育株与不育株的特异扩增条带A123k片段,并用该引物对单个不育株后代育性分离群体进行了RAPD分析,从而确定了A123k与育性基因的遗传距离为8.1cM。     

桃主要性状的分子标记与功能基因定位研究进展

综述了桃果实、花、树体及抗根结线虫等主要性状的功能基因定位和分子标记开发的最新研究成果,阐述了决定果皮茸毛有无、果肉颜色(黄/白)、果肉质地与核黏离性、短枝型矮化和柱型等质量性状的功能基因定位,分析了1个与成熟期主效位点相关的重要候选基因,同时对决定果实糖、酸含量变化的QTL以及根结线虫(Meloidogyne incognita)、蚜虫(Myzus persicae Sulzer.)抗性相关位点的研究进展进行总结,为桃性状定位和整个发育期调控糖、酸含量的基因及其作用模式研究提供参考。在此基础上,对功能基因和分子标记在辅助选择育种和种质资源鉴定中的应用及发展方向进行展望。     

离核晚熟桃新品种‘双红艳’

‘双红艳’桃是2000年用‘河洛红蜜’作母本,‘玉西红蜜’、‘艳光’和‘地方桃’的混合花粉作父本杂交育成的晚熟离核新品种。果实圆球形,平均单果质量350g,阳面呈玫瑰红色,肉质细密,味甜。离核,硬度大,耐贮运,抗逆性强。果实于9月中下旬成熟,恰逢中秋节和国庆节,市场前景良好。     

利用RAPD标记评价桃种间杂交一代群体的分离方式

以毛桃2-7(Prunus persica)、山桃白山碧桃(Prunus davidiana)以及两者的F_1代为试材,对RAPD标记的分离方式进行分析。结果表明,RAPD标记在F_1代呈3种分离方式:孟德尔分离、偏离孟德尔分离规律、异常分离。3种分离位点出现的频率和数量分别为:80%、240,14%、42,6%、18。呈孟德尔分离的情况有:不分离、1:1分离和3:1分离,其中不分离的频率为64％。并对偏离孟德尔分离比例和异常分离的RAPD标记进行分析。其研究结果可为该群体是否适合构建遗传连锁图谱进行评价及进一步利用该群体奠定良好基础。     

桃分子标记研究进展

桃属于蔷薇科(Ra.saceae)桃属(Prunus),起源于我国最古老的果树之一,栽培历史悠久,分布十分广泛,是我国重要的果树种类.它的染色体数目少(2n=16),基因组小,含有0.30±0.02PgDNA,大约有3.0×108bp,只有拟南芥基因组的两倍,是最适合进行遗传学研究的多年生果树种类,也是目前研究较为深入和广泛的果树种类.分子标记是继形态标记、细胞标记和生化标记之后发展起来的一种较理想的遗传标记形式.     

利用RAPD标记对桃品种特殊种质分析

采用RAPD技术，用从200 个随机引物筛选的22 个10碱基随机引物对148个桃品种进行DNA扩增。根据各品种扩增的RAPD带和聚类结果，分析具特殊位点，并在聚类图中聚在外围、相似系数较低的品种有玉露蟠桃、秋蜜、爱保太、佛尔蒂尼莫蒂尼和金皇后等特殊品种种质。从分子生物学角度，为种质保存和育种提供理论依据。     

与苹果果皮红色性状相关的RAPD分子标记的筛选

用355条10bp随机引物来筛选与苹果果实红色性状连锁的分子标记。通过分离群体分组分析,在果实红色与非红色2个对比基因池间进行了扩增筛选,初步选出49个多态性引物,进一步对这些多态性引物进行群体上的分析发现S519可以扩增出大约1000bp左右的一条与红色性状相关的DNA特异带。对本研究的73个来自3个不同杂交组合的F1后代个体分析表明,该标记判断果实红色性状的符合率为76.7%。鉴于获得的多态性标记对果皮颜色预测的准确率不高的现状,我们采用了双标记组合分析方案,即用S5191000分别与以往获得的3个与果色性状相关的标记(S12891200、S12351000和S21071200)配对组合进行判断,从而使得标记对目标性状预测的正确性大为提高。另外,对总共获得的4个RAPD标记在9个栽培品种上进行了分析,大多数品种的表现与理论一致。     

中国野生葡萄抗霜霉病基因RAPD标记的筛选

以抗病的中国野生华东葡萄(Vitis pseudoreticulata)白河-35-1(Baihe-35-1)与感病的欧洲葡萄佳利酿(Carignane)杂交F2代为试材,从520条随机引物中筛选出21条可以扩增多态性DNA片断的随机引物,从中获得了6个抗霜霉病基因的RAPD标记,对这些标记回收、克隆、测序后,将得到的6个标记分别记录为:S294-369,S202-527,S382-615,S221-677,S416-1224和S390-725。通过分析这6个RAPD标记在F2代植株中的表现,证明这些标记都与霜霉病抗性的基因有连锁关系。这将为葡萄抗霜霉病育种的分子标记辅助选择提供分子依据。     

Identification of RAPD marker linked to fruit skin color in Japanese pear (Pyrus pyrifolia Nakai)

In Japanese pear, fruit skin color is a very important trait for growers because the russet skin protects the fruit against external stress caused by disease, insects, bad weather, and shipping. This report describes the development of a randomly amplified polymorphic DNA (RAPD) marker linked to major genes controlling the fruit skin color in Japanese pear. Two F₁ progenies from the cross of ‘Kousui’ × ‘Kinchaku’ and ‘Niitaka’ × ‘Chikusui’ segregated by fruit skin color were used for bulked segregant analysis. Four kinds of bulked DNA were constructed and used for the polymerase chain reaction in RAPD analysis. After 200 random primers were screened against four bulks, a band named OPH-19₄₂₅ was selected in cooperation with green bulks. The recombination rate between OPH-19₄₂₅ and the green skin phenotype was 7.3%. The RAPD marker (OPH-19₄₂₅) could select green fruit with probability as high as approximately 92%. The marker was apparently useful for the selection of green-skinned individuals in a breeding program. This is the first report on developing a DNA marker closely linked to the fruit phenotype in Japanese pear.     

RAPD技术在果树遗传育种中的应用

RAPD技术是一种随机扩增多态性DNA的方法，操作简单、快捷且经济，可从分子水平提供直接的遗传证据。RAPD在果树育种中可用来构建遗传图谱，鉴定种质资源，对体细胞杂种进行鉴定；用于基因定位和基因分离，通过分子标记辅助选择育种材料。     

一个与苹果属显性矮生主基因Dw连锁的RAPD标记

 运用RAPD 技术, 采用集群分析法进行了苹果抗寒矮化种质资源扎矮76 〔Malus baccata (L. )Borkh. 〕显性矮生主基因Dw连锁的分子标记研究。研究结果表明, 扎矮76 的矮生性状由显性单基因控制, RAPD 标记OPE1521001 与Dw基因连锁, 其连锁距离为0. 69 cM。这为最终定位及克隆该矮生基因打下基础。     

厚皮甜瓜抗蚜基因的RAPD标记分析

以厚皮甜瓜抗蚜自交系LZK-0402、感蚜自交系LZK-0201及其F2代分离群体为试验材料,采用混合分组分离法(Bulked sergeants analysis,BSA),运用RAPD技术筛选了330条随机引物,找到1个与甜瓜抗蚜基因连锁的RAPD标记OPA1100,其遗传距离为13.7 cM。     

中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记的克隆、序列分析及辅助育种应用

对中国野生葡萄抗黑痘病基因RAPD标记OPS03-1300进行了克隆、测序及序列分析,结果表明该标记实际长度是1354bp,因此更名为OPS03-1354,其GenBank登录号为DQ350885。该标记序列与99条来自欧洲葡萄的EST有同源性,其中与1条来自赤霞珠叶片感染葡萄皮尔斯病病原菌后获得的EST同源性为82%,与2条来自赤霞珠果实在不同发育期获得的EST同源性分别为80%和85%。该序列与1条来自中国野生华东葡萄白河-35-1叶片接种霜霉病病原菌后获得的EST同源性为67%。该序列编码葡萄的一种假定蛋白。此外,应用该标记对中国野生葡萄与欧洲葡萄的种间杂交广西-1×京可晶F1代339株、白河-35-1×佳利酿F2代207株进行了辅助选择。