肝硬化患者外周血单核细胞内毒素受体表达与慢性炎症反应关系的临床意义

背景:内毒素受体在内毒素、细胞因子等介导的炎性信号转导过程中具有重要作用。目的:了解肝硬化患者外周血单核细胞(PBMC)内毒素受体的表达变化与慢性炎症反应关系的临床意义。方法:应用荧光素标记的抗人Toll样受体(TLR)4/抗人CD14单抗,以流式细胞术检测40例肝硬化患者和15名健康志愿者PBMC内毒素受体TLR4和CD14蛋白的表达;以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测内毒素受体TLR4 mRNA、CD14 mRNA和信号转导分子MyD88 mRNA的表达;以酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血清白细胞介素(IL)-1β、IL-10和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;以偶氮基质显色法测定血浆内毒素水平。结果:肝硬化患者PBMC内毒素受体TLR4和CD14蛋白的表达水平显著高于对照组(P<0.05),但不同Child-Pugh分级组间差异无统计学意义;与对照组相比,PBMC内毒素受体TLR4 mRNA、CD14 mRNA和信号转导分子MyD88 mRNA的表达水平也有增高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);肝硬化患者血清细胞因子IL-1β、IL-10和TNF-α水平,以及血浆内毒素水平均较对照组显著升高(P<0.05),且高内毒素水平患者内毒素受体的表达显著高于低内毒素水平患者(P<0.05),细胞因子水平也较低内毒素水平者增高。结论:肝硬化患者PBMC内毒素受体的表达明显上调,与患者的慢性炎症反应状态一致。     

终末期肾脏疾病对机体免疫功能的影响

血液透析(HD)和腹膜透析(PD)技术已有显著进步,但终末期肾脏疾病(end-stage renal disease,ESRD)患者年死亡率仍高达20%,其中70%死于心血管疾病(cardiovascular disease,CVD)或感染性疾病[1,2]。免疫功能紊乱是尿毒症患者一个突出表现,但它在CVD和感染中的作用目前尚无明确结论     

Toll样受体4与肝损伤

Toll样受体是近几年发现的天然免疫受体，主要参与病原微生物产物的识别及炎症信号传导，是天然免疫与获得性免疫的连接点。Toll样受体4介导内毒素引起的感染性免疫反应，参与了肝脏内的损伤、纤维化、再生与修复等炎症反应过程。     

Toll样受体4介导的抗病毒免疫

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)4是一重要的模式识别受体(pattern recognition receptor,PRR),其通过识别细菌、病毒和环境中病原体相关分子模式(pathogen-associated molecular pattern,PAMP),启动固有免疫和获得性免疫应答,并在联系固有免疫和获得性免疫中起桥梁作用。以往研究大多集中在TLR4对细菌感染的     

肝纤维化的免疫相关性

肝脏是人体最大的消化器官,虽然不属于免疫系统,但由于其特殊的解剖位置和血管系统,使肝脏在免疫细胞的激活和分化、机体的局部和全身性免疫反应、以及免疫调节等方面具有重要作用.免疫应答导致的肝损伤是许多肝脏疾病的发病机制,同时也参与各种病因引起的肝纤维化发生.     

益生菌对实验性结肠炎大鼠Toll样受体4表达的影响

目的 观察两种益生菌(乳酸杆菌、双歧杆菌)对溃疡性结肠炎的大鼠结肠黏膜Toll样受体4(TLR4)及TNT-α的变化及影响.方法 采用三硝基苯磺酸/乙醇与免疫复合物联合诱导溃疡性结肠炎大鼠模型.观察和评估其结肠黏膜的大体和组织学变化.以免疫组化方法检测TIR4、TNF-α的表达,以蛋白免疫印迹法检测蛋白表达.结果 造模后结肠组织中可见大量炎性细胞浸润,杯状细胞减少,隐窝脓肿形成.与正常对照组相比,模型组结肠组织TLR4的表达显著增加(P＜0.01).TNF-α表达显著升高(P＜0.01);与益生菌组相比,模型组结肠组织TLR4的表达显著减少(P＜0.01),TNF-α表达显著减少(P＜0.01).其两种菌相比差异不大(P＞0.05).结论 从免疫机制的视角观察到益生菌可能通过抑制Toll样受体4表达从而减少炎性因子TNF-α产生.     

应激大鼠肠道树突细胞的免疫功能

目的研究应激大鼠肠道树突细胞(DC)表型及功能状态的改变。方法选用20只雄性SD大鼠随机分为对照组、实验组,各10只。给予实验组大鼠结直肠扩张联合束缚刺激,对照组大鼠不处理,采用大鼠腹部收缩反射(AWR)对两组大鼠进行直肠气囊扩张,测量肠道容量感觉阈值。成功建立模型后,磁珠分选技术分离肠系膜淋巴结DC,检测其表面CD80、CD86、MHCⅠ、MHCⅡ、Toll样受体(TLR)4的表达,将MLNDC与脾脏单个核细胞体外混合培养,流式标记CD4+/CD8+T淋巴细胞,检测MLNDC促CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖的能力。结果实验组大鼠的疼痛阈值明显低于对照组(P<0.05);实验组大鼠MLNDC表达MHCⅡ水平高于对照组(P<0.05),而表达CD80、CD86、MHCI与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);实验组大鼠MLNDC表达TLR4高于对照组(P<0.05);与对照组相比,实验组大鼠MLNDC促CD4+/CD8+T淋巴细胞增殖能力增强(P>0.05)。结论大鼠应激刺激后肠道DC上调表达TLR4,刺激其本身分化成熟,进一步表达MHCⅡ,后者通过介导T淋巴细胞活化,引起肠道低度炎症,从而引起肠道内脏高敏感的产生。     

基于TLR4/MyD88/NF-κB信号通路探讨毒消肝清丸对肝硬化内毒素血症大鼠肝组织炎症反应的影响

目的通过CCl4复合造模制备肝硬化内毒素血症模型,探讨毒消肝清丸对大鼠肝脏炎性损伤的保护机制。方法:66只大鼠造模过程中有17只死亡,取3只大鼠检测内毒素和观察肝脏结构,确定造模成功,剩余随机分成正常组(n=6),模型组(n=8)、乳果糖组(n=8)、毒消肝清丸高、中、低剂量组(223. 4 mg/kg、111. 7 mg/kg、58. 9 mg/kg,n=8)。采用CCl4复合造模法造模8周,制备肝硬化内毒素血症动物模型。正常组和模型组给予蒸馏水,乳果糖组予乳果糖,毒消肝清丸药物组按上述剂量每天给药1次,连续8周。测定内毒素含量变化、HE染色观察肝脏组织变化情况、采用ELISA检测肝脏组织TNFα、IL-1β、IL-6的含量;Western Blot和RT-PCR技术检测TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及其mRNA的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t法。结果各组间大鼠血浆内毒素水平差异有统计学意义(F=26. 011,P 0. 001);模型组内毒素水平较正常组显著升高(P 0. 01);给药后乳果糖组、毒消肝清丸不同剂量组大鼠血清内毒素含量较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠血清IL-6、IL-1β以及TNFα水平差异均有统计学意义(F值分别为35. 390、38. 271、40. 241,P值分别为0. 002、0. 001、0. 001);与正常组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα显著升高(P值均0. 01);给药后乳果糖组及毒消肝清丸不同剂量药物组大鼠血清IL-1β、IL-6以及TNFα水平较模型组均显著降低(P值均0. 01)。各组间大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白表达差异均有统计学意义(F值分别为24. 483、29. 547、19. 242、18. 752、22. 146、15. 834,P值均0. 01);与正常组大鼠相比,模型组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量均显著升高(P值均0. 01);乳果糖和毒消肝清丸不同剂量治疗后大鼠肝组织TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量较模型组均显著下降(P值均0. 01)。与低剂量治疗组比较,中高剂量组大鼠肝脏TLR4、MyD88、NF-κB mRNA及其蛋白相对表达量下降尤为显著(P值均0. 01)。结论药物组可能通过下调肝脏组织TLR4/MyD88/NF-κB信号通路来抑制炎症信号的转导,减少了细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6的表达,进而缓解内毒素血症并对肝脏组织起到保护作用。     

Toll样受体与免疫疾病

机体接触致病微生物后即迅速对致病原进行识别并产生抵抗病原体入侵的反应。发挥这一功能的主要是天然免疫细胞 ,如巨噬细胞、树突状细胞和中性粒细胞。这些天然免疫细胞因子可能表达“模式”识别受体 (pattern recognitionreceptors,PRRs) ,而这些受体对于致病原相关的分子“模式”(pathogen associatedmolecularpatterns,PAMPs)具有很高的特异性[1] 。新近研究表明 ,一族被称为Toll样受体 (Toll likereceptors,TLRs)的跨膜蛋白可能作为上述PAMPs的特异性PRRs ,从而参与了致病因子的信号转导过程 ,在抗感染免疫中具有重要作用[2 ] …     

肝硬化患者小肠细菌过度生长及其外周血单个核细胞TLR4表达的变化

目的探讨肝硬化患者小肠细菌过度生长（SIBO）和外周血单个核细胞表面TLR4表达的变化。方法采用乳果糖-氢呼气试验（LHBT）检测40例肝硬化患者和16例正常人小肠细菌生长情况,使用流式细胞仪检测外周血单个核细胞表面TLR4表达。结果肝硬化患者SIBO检出率为42.5%（17/40）,显著高于正常人的6.3%（1/16,P<0.01）;肝硬化患者外周血单个核细胞表面TLR4相对表达量为（23.4±11.4）,显著高于正常人的【（14.4±5.2）,P<0.05】;17例肝硬化SIBO阳性患者外周血单个核细胞表面TLR4表达为（30.2±12.3）,显著高于23例肝硬化SIBO阴性患者【（19±8.6）,P<0.05】。结论肝硬化患者存在较高的SIBO发生率,外周血单个核细胞表面TLR4表达上调,SIBO可能通过与TLR4的作用在肝硬化病情进展中发挥作用。     

老年肺炎患者免疫功能失常的初步探讨

目的:初步探讨免疫功能失常在老年肺炎发病机制中的作用.方法:以老年肺炎患者25例为研究对象,以青年肺炎患者23例,健康老年人18例和青年人20例作为对照,利用放射免疫测定法(RIA)检测唾液和血清中分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量,流式细胞术(FCM)测定外周血中经佛波酯(PMA)和离子霉素(Ionomycin)刺激前后T淋巴细胞表面CD154的表达,以阳性细胞率(PPC)和平均荧光强度(MFI)表示,评价机体的体液和细胞免疫状况.结果:健康老年组唾液和血清sIgA的含量低于健康青年组,老年肺炎组低于青年肺炎组(P均＜0.05),但肺炎组与各自的对照组间无显著差异.CD3 T细胞上CD154表达的PPC,刺激前健康老年组高于健康青年组(P＜0.05),低于老年肺炎组(P＜0.05);刺激后健康老年组低于健康青年组(P＜0.05),但与老年肺炎组无显著差异(P＞0.05),另外老年肺炎组低于青年肺炎组(P＜0.05).CD3和CD154的MFI在刺激后的表达,健康老年组低于健康青年组(P＜0.05);老年肺炎组低于青年肺炎组(P＜0.05),但肺炎组与各自的正常对照组间无显著差异(P＞0.05).结论:随着年龄增长,B细胞介导的体液免疫衰退与T细胞功能下降有关.     

Effect of Triglycyl-Lysin-Vasopressin on Quantitative Liver Function Tests in Patients with Cirrhosis

The effects of vasopressin and of its analogues on liver function, and their possible mechanisms of action, are poorly understood. This study was designed to assess the effect of triglycyl-lysin-vasopressin on liver function, evaluated by two quantitative tests independent of liver blood flow, i.e., indocyanine green intrinsic hepatic clearance and galactose elimination capacity. Indocyanine green intrinsic hepatic clearance and galactose elimination capacity were determined before and after administration of 2 mg triglycyl-lysin-vasopressin to (respectively) 10 and 12 patients with cirrhosis. Eighteen additional patients with cirrhosis were studied before and after infusion of placebo. No significant variation in either test was observed in placebo-treated patients. A significant decrease in indocyanine green intrinsic hepatic clearance, averaging 22%, was observed in patients receiving the drug (p = 0.04). Conversely, galactose elimination capacity remained unchanged after the drug. These results are compatible with the hypothesis that the drug produced a preferential decrease in perfusion in functioning areas of the liver, with relative maintenance of blood flow in non-functioning areas.     

复方谷氨酰胺和益生菌对肝硬化失代偿期患者肠黏膜屏障功能的影响

目的研究联用复方谷氨酰胺和益生菌对肝硬化失代偿期患者肠黏膜屏障功能的影响。方法将56例乙肝后肝硬化患者随机分为治疗组和对照组。在常规抗病毒、护肝、利尿和支持治疗的基础上,治疗组给予复方谷氨酰胺肠溶胶囊和益生菌治疗,设定疗程30 d,分别于治疗后15 d和30 d测定口服乳果糖和甘露醇后其尿液排泄率比值、血清TNF-α和内毒素水平。结果治疗15 d后,治疗组尿液果糖甘露醇尿液排泄率(LAC/MAN)比值较基线期显著下降(P<0.05);血清内毒素和TNF-α水平显著下降(P<0.05),而对照组虽也有不同程度下降,但无统计学意义。治疗30 d后,对照组和治疗组LAC/MAN均显著下降(P<0.05),但治疗组下降幅度高于对照组;治疗组和对照组内毒素和TNF-α水平较基线期均显著下降(P<0.05)。结论联用复方谷氨酰胺和益生菌能快速改善肠黏膜屏障功能,改善患者内毒素血症。     

益生菌对炎症和免疫系统影响的研究进展

益生菌有利于人体健康,现在不但作为食品添加剂广泛地使用,还可应用于胃肠炎的治疗、胃肠管道癌症的防治以及术后恢复等.益生菌是如何调节免疫系统和影响炎症？益生菌可否作为治疗疾病的手段？本文将做进一步的讨论.     

扶正抑瘤饮对消化道恶性肿瘤患者细胞免疫功能的影响

目的 :观察扶正抑瘤饮对接受化疗的消化道肿瘤患者细胞免疫功能的影响。方法 :6 0例中晚期消化道肿瘤患者随机分成治疗组 (化疗加中药 )、对照组 (单纯化疗 ) ,在 1个疗程化疗前后分别检测患者外周血 T淋巴细胞亚群、可溶性白细胞介素 - 2受体 (s IL- 2 R)含量 ,并与正常组作比较。结果 :化疗前与正常组相比 ,治疗组、对照组外周血 CD4 细胞比例均减少 ,CD 8细胞比例升高 ,CD 4/ CD 8比值降低 (P <0 .0 5 ) ;s IL- 2 R含量明显升高 (P <0 .0 1)。化疗后与化疗前相比 ,对照组外周血 CD 4细胞比例下降 ,CD 8细胞比例升高 ,CD 4/ CD 8比值下降 ,外周血s IL - 2 R含量升高 ;而治疗组 CD 4细胞比例明显升高 ,CD 4/ CD 8比值上升 ,s IL - 2 R含量下降 ,差异均有显著性意义(P <0 .0 5 ) ;结论 :扶正抑瘤饮可显著改善化疗引起的免疫功能低下     

复方抗瘤冲剂对老年胃肠道肿瘤患者免疫功能的影响

目的:评价复方抗瘤冲剂配合静脉化疗对老年胃肠道肿瘤患者免疫功能的影响.方法:老年胃肠道肿瘤患者43例随机分为两组:对照组22例,用甲酰四氢叶酸钙、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素方案行静脉化疗;治疗组21例,在静脉化疗同时,服用复方抗瘤冲剂.化疗前及化疗2个疗程结束后(6周)分别检测外周血常规、免疫球蛋白、T淋巴细胞亚群,进行统计学分析.结果:化疗结束时治疗组患者外周血中白细胞、血小板计数、血红蛋白较化疗前无明显下降;与对照组比较,治疗组免疫球蛋白IgG、IgM及T淋巴细胞亚群CD 4、CD 4/CD 8值均有提高,两组差异均有统计学意义.结论:复方抗瘤冲剂可有效提高老年胃肠道肿瘤患者机体免疫功能,使患者平稳经受化疗.     

Lung Function Abnormalities in Patients with Primary Biliary Cirrhosis

ABSTRACT Twenty-five patients with primary biliary cirrhosis (PBC) in different stages were investigated with respect to pulmonary function abnormalities. The results were compared with a reference sample of 17 sex- and age-matched healthy subjects. A high prevalence of lung function impairment was found in the PBC patients (14/25 [56%]). Bronchial asthma was present in three patients, and severe lung emphysema in one. These four patients had an abnormal lung function, mainly of obstructive type. There was a statistically significant difference between the remaining 21 PBC patients without chronic obstructive lung disease and the reference subjects with respect to diffusion capacity. Almost all abnormal lung function data were found in the symptomatic PBC patients (i.e. symptoms of pruritus, xanthoma, xanthelasmata, jaundice, hyperpigmentation, hepatosplenomegaly), 13 out of 18 (72%), whereas only one out of seven asymptomatic patients was affected. Nine patients (36%) had reduced diffusion capacity compared with none of the reference subjects. The lung function abnormalities in PBC patients are similar to those found in sarcoidosis, another granulomatous disease.     

乳黄制剂对肝硬化模型大鼠肝组织脂多糖结合蛋白mRNA、CD14 mRNA及Toll样受体4 mRNA的影响

目的:研究乳黄制剂对肝硬化大鼠肝组织LBP(脂多糖结合蛋白)mRNA、CD14 mRNA、TLR4(Toll样受体-4)mRNA的影响.方法:SPF级雄性Wister大鼠88只随机分为6组:正常组、模型组、预防组、预防对照组、模型治疗组、模型治疗对照组.采用CCl4复合因素法制造肝硬化模型.用乳黄制剂进行预防和治疗,并与乳果糖对照药进行比较,分别检测大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA的表达水平.结果:治疗组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平明显低于模型组(P＜0.05),预防组大鼠肝组织LBP mRNA、CD14 mRNA、TLR4 mRNA表达水平与正常组比较差异无显著性意义(P＞0.05).结论:乳黄制剂能有效抑制内毒素调节蛋白及其相关受体的表达,从而减少内毒素血症的发生.     

肝硬化患者肺功能状态观察

目的：了解肝硬化患者的肺功能状态。方法：测定40例肝硬化患者的肺功能及血气分析,并以健康人群作对照。结果：肝硬化患者肺功能指标（FVC、FEV1、FEV1／FVC、MVV、V25、V50、V75、DLco,PaO2)较健康对照组明显减低,P（A-a)O2明显升高,有显著差异（P＜0．01）,且肝硬化患者病情越严重肺功能损害越明显。结论：肝硬化患者的FVC、FEV1、FEV1／FVC、MVV、V25、V50、V75、DLco,PaO2较对照组明显降低,P（A－a)O2明显升高,表明肝硬化患者存在肺通气功能障碍和弥散功能障碍。腹水、肝性胸水是肺通气功能障碍的主要原因;而肺内血流异常（肺内动－静脉分流和肺血管扩张）是肺弥散功能障碍的主要原因。