Th17细胞在小鼠变应性鼻炎模型中的表达及调控作用

目的:通过探讨变应性鼻炎小鼠与正常小鼠、抗IL-17抗体治疗后的变应性鼻炎小鼠的行为学、组织病理学,Th1、Th2、Th17细胞因子的数量以及Th17细胞特异性转录因子的表达水平,评价Th17细胞在变应性鼻炎发病机制中的作用.方法:以卵清蛋白致敏模型组和治疗组小鼠建立BALB/c小鼠变应性鼻炎模型,造模成功后治疗组予IL-17抗体治疗.对照组以生理盐水对照.采集外周血ELISA法测IL-17、IL-4和IFN-γ.并取黏膜行苏木精-伊红染色及RT-PCR法测孤儿核受体(RORγt)mRNA的表达水平.结果:卵清蛋白造模成功,治疗后症状及炎症病理缓解.模型组IL-17、IL-4及RORγt mRNA表达水平均较对照组明显增高,IFN-γ降低;治疗后前三者降低而后者升高(P<0.05).结论:Th17细胞与Th2细胞在变应性鼻炎中大量表达,说明两者可能与其发病机制有关,本实验从IL-17抗体局部治疗有效方面提出治疗依据,通过调控Th17细胞可能成为有效阻止变应性鼻炎的治疗方法.     

齐墩果酸通过抑制自噬调节变应性鼻炎中的Treg/Th17细胞失衡CSCD

目的探讨齐墩果酸对变应性鼻炎(AR)中调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)/辅助性T细胞17(helper T cells 17,Th17)的调节作用及潜在机制。方法收集AR患者鼻黏膜组织及外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)。饲养BALB/c小鼠。PBMC用于建立AR细胞模型,BALB/c小鼠用于建立AR动物模型。对于AR细胞使用150μg/ml的齐墩果酸进行治疗。对于AR小鼠使用低剂量(L)-齐墩果酸(50 mg/kg)、高剂量(H)-齐墩果酸(200 mg/kg)、自噬抑制剂3-MA(10 mg/kg)、H-齐墩果酸+自噬激活剂雷帕霉素(Rapa,1 mg/kg)分别进行治疗。qRT-PCR测人鼻黏膜组织IL-17A和Foxp3的表达以及小鼠各组鼻黏膜组织中RORγt和Foxp3的表达。流式细胞术从PBMC中分选Th17和Treg细胞,并检测PBMC中白细胞介素17A(IL-17A)细胞和叉头样转录因子3(Foxp3)细胞的比例。Western blot法检测Th17和Treg细胞中自噬相关蛋白Beclin1、LC3-II、LC3-I、p62的表达。酶联免疫吸附试验检测各组小鼠鼻腔灌洗液中IL-17A和IL-10的表达。结果AR组患者鼻黏膜组织中IL-17A表达显著增加,但Foxp3的表达显著降低(P均<0.05)。齐墩果酸下调PBMC中IL-17A的表达,并上调Foxp3的表达。齐墩果酸抑制Th17细胞和Treg细胞中Beclin1、LC3-II以及LC3-I的表达(P均<0.05),促进p62的表达水平。齐墩果酸降低AR小鼠体内IL-17A和RORγt水平,并上调IL-10和Foxp3的水平(P均<0.05)。结论齐墩果酸通过抑制自噬信号改善AR中Th17/Treg细胞的平衡。     

白细胞介素-12和干扰素-γ表达与变应性鼻炎的相关性

目的 探讨变应性鼻炎患者白细胞介素12(interleukin-12,IL-12)和干扰素-γ(interferon-gamma,IFN-γ)的表达及两者与变应性鼻炎的相关性.方法 通过原位杂交染色法和酶联免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA),检测30例变应性鼻炎患者和22例对照鼻黏膜组织中IL-12和IFN-γ的表达.结果在变应性鼻炎组和对照组,外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclearcell,PBMC)IL-12 mRNA杂交阳性率分别为0.13±0.03和0.77±0.15(t=11.1,P<0.05);血清IL-12的含量为(13.7±2.4)pg/L和(52.9±8.4)pg/L (t=6.2,P<0.05);血清IFN-γ的含量为(11.2±2.1)pg/L和(51.8±6.4)pg/L(t=7.9,P<0.05).结论变应性鼻炎的病理过程与IL-12和IFN-γ的表达下调有关.Th细胞分化偏移,Th2功能亢进是导致变应性鼻炎的重要原因.     

特异性脱敏治疗对变应性鼻炎血中Th1/Th2细胞比例调节的影响

目的:探讨经鼻内和(或)舌下特异性脱敏治疗常年性变应性鼻炎(PAR)的效果及对患者血清Th1/Th2细胞因子平衡的调节及总IgE(tIgE)水平表达的影响.方法:选择36例PAR患者经鼻特异性脱敏治疗(鼻喷组)和36例PAR舌下特异性脱敏治疗(舌下组),并进行疗效比较,以32例健康成年人作为正常对照组.同时用免疫放射平衡法和双抗夹心法检测鼻喷组及舌下组治疗前后血清IL-2、IL-4、IL-8及tIgE水平;用酶联免疫吸附法检测IFN-γ;鼻分泌物涂片观察局部嗜酸粒细胞的浸润与变化.结果:变应性鼻炎(AR)患者在经鼻和舌下特异性免疫治疗(SIT)前两组血清Th1细胞因子IL-2及IFN-γ含量显著减少,而Th2细胞因子IL-4、IL-8和tIgE含量显著增高,鼻喷组及舌下组与正常对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);SIT至维持量后,AR患者血清中IL-2及IFN-γ含量较治疗前明显增高,而IL-4、IL-8及tIgE含量则明显降低(P<0.01或P<0.05).SIT后鼻喷组和舌下组临床总有效率分别为97.22%和94.44%,两组疗效比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:AR患者体内存在Th1/Th2细胞比例和细胞因子平衡失调,表现为Th2细胞功能亢进.经鼻黏膜和舌下脱敏治疗能通过对AR血中Th1/Th2细胞因子比例平衡和细胞因子水平表达的调控及对血tIgE水平的调节来改善和纠正Th1/Th2细胞失平衡,能明显改善AR的临床症状.     

变应性鼻炎大鼠IL-35的表达及对辅助性T细胞免疫调节的影响

目的 探讨变应性鼻炎(AR)大鼠IL-35的表达及对辅助性T细胞免疫调节的影响。 方法 以卵清蛋白作为致敏原,建立AR大鼠模型。大鼠随机分为对照组、模型组、地塞米松组和IL-35干预组。分析比较大鼠过敏症状评分;采用RT-PCR分析鼻黏膜中IL-35、IFN-γ、IL-4和IL-17的mRNA表达情况;酶联免疫吸附法测定IL-35、IFN-γ、IL-4和IL-17在外周血的表达水平;流式细胞术检测外周血中Th1、Th2和Th17细胞百分比。 结果 IL-35干预可明显降低AR大鼠的症状积分;AR模型组IL-35和IFN-γ的mRNA表达及在外周血的表达均显著低于对照组,而在IL-35干预组的表达高于AR模型组,AR模型组IL-4和IL-17表达显著高于对照组,而在IL-35干预组的表达低于AR模型组(P<0.05);AR模型组Th1细胞百分比显著低于对照组,而在IL-35干预组Th1细胞百分比显著高于AR模型组,Th2和Th17细胞百分比显著高于对照组,IL-35干预组Th2和Th17细胞百分比显著低于AR模型组(P<0.05)。 结论 AR大鼠IL-35的表达降低,IL-35干预可通过上调IFN-γ和下调IL-4、IL-17表达降低炎症反应,机制可能与调节Th1、Th2和Th17平衡有关。     

γδT细胞、调节性T细胞、白细胞介素17及转化生长因子β1在变应性鼻炎患者外周血中的表达

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者外周血中γδ T细胞、调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)、白细胞介素(interleukin,IL) 17及转化生长因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)的表达及临床意义.方法 2012年3-7月,收集32例AR患者(AR组)和20例健康志愿者(对照组)的外周血,采用流式细胞术检测外周血中γδ T细胞和Treg细胞比例;酶联免疫吸附试验检测血清中IL-17、TGF-β1的水平,并分析它们之间的相关性.采用SPSS 16.0软件进行数据分析.结果 γδ T细胞百分比在AR组和对照组分别为(13.30±8.62)％、(5.18±1.86)％,差异有统计学意义(t =5.18,P＜0.01);Treg细胞百分比分别为(1.75±0.56)％、(4.76±1.74)％,差异有统计学意义(t =7.46,P＜0.01).AR组血清中IL-17的表达水平为(668.55 ±45.15) pg/ml,高于对照组的(573.53±17.42) pg/ml,差异有统计学意义(t=8.97,P＜0.01);AR组TGF-β1的表达水平为(0.34±0.04) pg/ml,低于对照组的(0.49 ±0.06) pg/ml,差异有统计学意义(t=9.51,P＜0.01).AR组患者外周血中γδ T细胞百分比与Treg细胞百分比呈负相关趋势(r=-0.561,P＜0.01),γδ T细胞百分比与IL-17呈正相关趋势(r=0.469,P＜0.01),γδ T细胞百分比与TGF-β1呈负相关趋势(r=-0.622,P＜0.01),Treg细胞百分比与TGF-β1呈正相关(r=0.738,P＜0.01),IL-17表达水平与Treg细胞百分比、TGF-β1无相关性(r值分别为-0.111、-0.196,P＞0.05).结论 AR患者外周血中γδ T细胞和Treg细胞之间存在免疫平衡失调,γδ T细胞可能参与了IL-17的分泌,这可能在AR的发病和发展过程中发挥重要作用.     

中晚期鼻咽癌患者Thl7细胞功能活性及调节性细胞因子水平的免疫病理意义*

目的探讨Th17细胞功能活性及其相关调节性细胞因子在中晚期鼻咽癌患者免疫病理中的意义。方法28例中晚期鼻咽癌患者,应用流式细胞术检测外周血Thl7细胞数量比例,RT-PCR法检测ROR-γt mRNA转录水平,ELISA法检测血清白介素l0（IL-l0）和17（IL-17）及γ干扰素（IFN-γ）含量水平,并以l5例健康人作为对照,分析其组间差异及其意义。结果中晚期鼻咽癌患者外周血单个核细胞中Thl7细胞占CD4+T细胞的数量比例和ROR-γt mRNA的相对表达量均低于正常对照组（P＜0.05）,血清IL-10水平高于健康对照组(P＜0.05),IL-17和IFN-γ水平低于正常对照组(P＜0.05),提示Th17细胞功能活性显示了一种与患者病情进展程度呈现负相关关系的趋势。结论 Thl7细胞数量及其功能活性降低,可能是中晚期鼻咽癌患者肿瘤微环境中免疫耐受现象突出、产生免疫逃逸的重要因素之一。一旦该结论得到确认,则有望成为新的干预治疗靶标。     

转录因子RORC2和白细胞介素17的表达与变应性鼻炎症状关系的研究

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhinitis,AR)患者转录因子维甲酸相关孤儿受体(retinoic acid-related orphan receptor variant 2,RORC2)和白细胞介素(interleukin,IL)17的表达与过敏症状的关系.方法 取23例AR患者和16例健康人鼻黏膜、鼻分泌物和静脉血,采用免疫组化、实时荧光定量反转录聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验检测其中RORC2和IL-17的表达.对AR患者进行症状评分.采用SPSS 13.0软件对变应性鼻炎组与健康对照组各检测指标进行统计学分析.结果 AR组鼻黏膜中RORC2和IL-17免疫组化染色的阳性细胞率分别为0.17±0.05(-x±s,以下同)和0.72±0.13,高于健康对照组的0.05±0.02和0.27±0.11,差异有统计学意义(t值分别为9.51和11.92,P值均＜0.05).AR组鼻黏膜和外周血RORC2 mRNA的相对表达量为0.063±0.011和0.452±0.031,高于对照组的0.029±0.009和0.239±0.027,差异有统计学意义(t值分别为6.51和3.35,P值均＜0.05).AR组IL-17在鼻黏膜、鼻分泌物和外周血中的水平分别为(70.28±10.69)、(45.32±8.55)、(6.76±1.18)pg/ml,高于对照组的(18.43±8.34)、(6.83±1.31)、(0.74±0.05)pgml,差异有统计学意义(t值分别为7.92、17.66和15.43,P值均＜0.05).AR组鼻过敏症状评分为(9.43±1.27)分,分别与鼻黏膜、外周血RORC2 mRNA的表达以及鼻黏膜、外周血IL-17的表达水平呈正相关(r值分别为0.820、0.746和0.629、0.841,P值均＜0.05).结论 RORC2和IL-17参与了AR的炎性反应,可作为判断病情严重程度的指标之一.

Abstract：

Objective To evaluate the relationship between allergic symptoms and retinoic acid related orphan receptor variant 2 (RORC2) and interleukin(IL) 17 in patients with allergic rhinitis(AR).Methods Blood sample,nasal secretion and nasal mucosa were taken from 23 patients with AR and 16 health individuals.The expression of RORC2 and IL-17 were detected by immunohistochemistry and quantitative real-time fluorescence reverse polymerase chain reaction.The allergic symptoms in patients were graded.Results The rate of positive cells of RORC2 and IL-17 in AR group were 0.17 ±0.05 and 0.72 ±0.13,higher than the 0.05 ± 0.02 and 0.27 ± 0.11 of health controls,the difference was statistically significant(t were 9.51 and 11.92 respectively,all P ＜0.05＝.The expression level of RORC2 mRNA in nasal mucosa and peripheral blood of AR group were 0.063 ± 0.011 and 0.452 ± 0.031,higher than the 0.029 ±0.009 and 0.239 ±0.027 of health controls,the difference was statistically significant (t were 6.51and 3.35 respectively,all P ＜0.05＝.The concentrations of IL-17 in the nasal mucosa,nasal secretions and serum levels of AR group were (70.28 ± 10.69) ,(45.32 ± 8.55) and (6.76 ± 1.18) pg/ml,compared with (18.43 ± 8.34),(6.83 ± 1.31) and (0.74 ±0.05) pg/ml of controls,the difference was statistically significant(t were 7.92,17.66 and 15.43 respectively,all P ＜ 0.05＝.The allergy symptom scores of AR group were 9.43 ± 1.27.There were correlations between the allergic symptom and the expression of RORC2 mRNA and IL-17 in nasal mucosa and peripheral blood (r value were 0.820,0.746,0.629,0.841 respectively,all P ＜ 0.05＝.Conclusion RORC2 and IL-17 involved in the inflammatory response of AR and can be used as an indicator to judge the severity.     

变应性鼻炎小鼠鼻黏膜中半乳糖凝集素3和9的表达

目的 探讨小鼠鼻黏膜内半乳糖凝集素3(galectin-3)和半乳糖凝集素9(galectin-9)的表达水平及其与变应性鼻炎的关系.方法 20只BALB/c小鼠随机分为变应性鼻炎组(AR组)和对照组,每组10只.AR组分别于第1天和第14天腹腔注射含卵清蛋白10μg及氢氧化铝2 mg的生理盐水悬液0.1ml,第21天起鼻腔给予1%卵清蛋白局部激发,持续7 d;对照组用生理盐水代替卵清蛋白.通过免疫组织化学染色和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测鼻黏膜中galectin-3和galectin-9 的表达,同时采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测外周血中自细胞介素4(IL-4)、白细胞介素5(IL-5)及γ干扰素(IFN-γ)的表达.结果 AR组和对照组均有galectin-3和galectin-9蛋白及mRNA的表达,AR组表达强度高于对照组,差异具有统计学意义(t值分别为11.18、9.261、7.667和6.971,P值均＜0.05).与对照组相比,AR组小鼠外周血中IL-4和IL-5含量均有不同程度的增高(t值分别为7.202和8.121,P值均＜0.05),而IFN-γ含量则下降(t=-11.94,P＜0.05).galectin 3和galectin 9 mRNA的表达强度与外周血中IL-4、IL-5的含量呈正相关(r值分别为0.667、0.847、0.720及0.736,P值均＜0.05),与IFN-γ含量呈负相关(r值分别为-0.528和-0.817,P值均＜0.05).结论 galectin 3和galectin 9可能在变应性鼻炎的发病过程中发挥一定作用.     

变应性鼻炎患者Treg/Th17细胞相关转录因子及细胞因子的失衡表达

目的:探讨变应性鼻炎患者外周血Treg/Th17细胞相关转录因子及血清细胞因子表达的变化。方法:采用视觉模拟量表(VAS)评估变应性鼻炎患者(18例,实验组)症状的严重程度。用RT-PCR法检测实验组与对照组(12例健康体检者)外周血Treg/Th17细胞相关转录因子FOXP3、RORC的表达水平,ELISA法检测2组细胞因子TGF-β与IL-17的表达水平。结果:①中重度变应性鼻炎患者VAS评分为8.5±0.8,全体变应性鼻炎为6.2±1.6;②实验组FOXP3mRNA、TGF-β表达量均明显低于对照组(均P<0.01);RORC mRNA、IL-17表达量均高于对照组(均P<0.01)。结论:变应性鼻炎患者Treg/Th17细胞失衡可能在其发病中起作用。     

变应性鼻炎患者外周血单个核细胞Th1/Th2细胞因子的检测及其意义

目的探讨T淋巴细胞活化及释放的Th1/Th2细胞因子失平衡与变态反应性鼻炎发病的关系.方法用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)测定40例变态反应性鼻炎患者,20例慢性鼻炎患者和20例健康人的外周血单个核细胞(PBMC),经PHA诱导培养后上清液中Th1细胞因子γ干扰素(IFN-γ)和Th2细胞因子白介素4(IL-4)、白介素5(IL-5)的水平及血清中可溶性白介素2受体(sIL-2R)的水平,并分别对变应性鼻炎患者的sIL-2R与IFN-γ、IL-4、IL-5的相关性进行研究.结果PBMC培养的上清液中变应性鼻炎组的IL-4和IL-5水平显著高于慢性鼻炎组和正常组(P＜0.01);而IFN-γ水平却显著低于后两组(P＜0.01).变应性鼻炎组患者血清的sIL-2R变应性鼻炎组均显著高于后两组(P＜0.01)且与PBMC培养的上清液中IL-4和IL-5的浓度呈正相关(r分别为0.625和0.595,P＜0.01).与IFN-γ浓度呈负相关(r=-0.580,P＜0.01).结论变应性鼻炎患者体内激活的T淋巴细胞是Th2细胞,并释放Th2细胞因子,Th1细胞和Th1细胞因子分泌则受到抑制;Th2细胞因子在调节变应性鼻炎IgE合成及嗜酸性细胞浸润等病理生理机制上起重要作用.     

鼻康片对变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群及细胞因子的影响

目的探讨鼻康片对变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群及细胞因子的影响。方法前瞻性收集我院收治的变应性鼻炎患者100例,根据完全随机数字表原则,将患者分为观察组和对照组,每组各50例。观察组给予鼻康片联合氯雷他定片治疗,对照组仅给予氯雷他定片治疗。观察两组患者治疗前后外周血Th1、Th2、Th17和Treg细胞、IL-2、IL-4、IFN-γ、过敏性鼻结膜炎生活质量(RQLQ)。结果两组患者治疗前Th1、Th17、Treg、IL-2和RQLQ等差异均无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,观察组患者治疗后Th1显著升高(14.38±1.89 vs.11.48±1.44%,P=0.000);Th17显著降低(1.34±0.28 vs.1.61±0.29%,P=0.000);Treg显著升高(3.48±0.75 vs.2.72±0.52%,P=0.000);IL-2显著升高(45.38±9.83 vs.34.38±10.83 pg/ml,P=0.000);RQLQ评分显著降低(17.38±5.84 vs.20.32±6.48,P=0.019)。两组患者治疗前后Th2、IL-4和IFN-γ均无统计学意义(P0.05)。结论鼻康片有助于纠正变应性鼻炎患者外周血T细胞亚群失衡,改善患者生存质量。     

特异性免疫治疗对变应性鼻炎患者外周血中Th9细胞分化及转录因子表达的影响

目的观察变应性鼻炎(AR)患者变应原特异性免疫治疗(specific immunotherapy,SIT)前、后外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中Th9细胞分化因子及相关转录因子GATA-3、PU.1、IRF4 mRNA表达的变化。方法采用视觉模拟量表(visual analogue scale,VAS)评估71例AR患者(实验组)症状严重程度。流式细胞术检测36例AR患者PBMC中Th9细胞百分率,ELISA法检测血清特异性IgE(specific IgE,sIgE)、特异性IgG4(specific IgG4,sIgG4)、白细胞介素9(interleukin-9,IL-9)和IL-10水平在治疗前及治疗1、2年后变化,对鼻部症状计分。并取32例健康者血清作为对照组。用实时荧光定量PCR法检测实验组与对照组PBMC中Th9细胞相关转录因子GATA-3、PU.1和IRF4mRNA表达水平。结果①AR患者治疗前,PBMC中Th9细胞百分率明显高于对照组(P<0.01),而治疗1、2年后Th9细胞百分率均明显低于治疗前(P<0.01)。②AR患者治疗前,血清sIgE及Th9细胞中IL-9水平高于对照组(P均<0.01),而sIgG4及IL-10水平低于对照组(P均<0.01);治疗1、2年后sIgE和IL-9均低于治疗前(P均<0.01),而治疗2年后,sIgG4和IL-10水平均低于治疗1年后,但高于治疗前(P均<0.01),治疗2年后sIgE水平高于治疗1年后(P<0.01)。③治疗前、后各组GATA-3mRNA表达量与对照组相比均无显著差异(P>0.05),治疗前PU.1、IRF4 mRNA表达量均高于对照组(P均<0.01),而治疗1、2年后PU.1、IRF4 mRNA表达量均低于治疗前(P均<0.01)。结论 SIT可能通过抑制Th9细胞分化,调节相关转录因子的表达而调节机体免疫状态,诱导免疫耐受。     

变应性鼻炎患者外周血IL-35及EBI3 mRNA和IL-12A mRNA表达的研究

目的：探讨变应性鼻炎（AR）患者外周血IL-35及其亚基病毒诱导基因3（EBI3）mRNA、IL-12A mRNA的表达及意义。方法：分别采集AR组（46例）及对照组（30例）外周血,采用ELISA法检测血清IL-35的表达水平,同时用SYBR Green实时定量PCR检测外周血单个核细胞中EBI3mRNA及IL-12AmRNA的表达水平。结果：AR组和对照组II,35水平分别为（251．22±46．27）、（382．17±25．41）ng／L,2组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。外周血单个核细胞EBI3 mRNA的表达水平AR组明显低于对照组,约为对照组的50％,2组差异有统计学意义（P〈0．01）;IL-12AmRNA的表达水平AR组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：IL-35、EBI3 mRNA水平降低可能与AR的发生密切相关。     

变应性鼻炎患者白细胞介素23和白细胞介素27对调节性T细胞/辅助性T细胞17细胞平衡的调控作用

目的　探讨白细胞介素23（IL-23）、白细胞介素27（IL-27）对于调节性T细胞/辅助性T细胞17（Treg/Th17）细胞平衡的调控作用,以及它们在变应性鼻炎（AR）免疫治疗中可能存在的价值。方法　选取确诊为AR的患者30例为AR组,健康体检者29例为对照组。采用酶联免疫吸附试验检测受试者外周血IL-23及IL-27的表达水平。采用流式细胞术对受试者外周血中CD4+IL-17+Th17细胞、CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞百分率进行检测。结果　AR组血清IL-23表达水平显著高于对照组（t =34.061,P＜0.05）,IL-27低于对照组（t =-16.669,P＜0.05）,二者呈负相关关系（r =-0.662,P＜0.05）;AR组CD4+IL-17+Th17细胞占CD4+T细胞百分率显著高于对照组（t =19.951,P＜0.05）,其与IL-23呈正相关关系（r =0.499,P＜0.05）,与IL-27呈负相关关系（r =-0.377,P＜0.05）;AR组CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞占CD4+T细胞的百分率显著低于对照组（t =-17.105,P＜0.05）,其与IL-23呈负相关关系（r =-0.671,P＜0.05）,与IL-27呈正相关关系（r =0.639,P＜0.05）;Th17与Treg细胞二者占CD4+T细胞的百分率呈负相关关系（r =-0.413,P＜0.05）。结论　IL-23分泌增加、IL-27分泌减少及Th17/Treg细胞比例失调,可能参与AR的发病;IL-23的高表达有助于Th17细胞的发育和维持,同时降低Foxp3+细胞出现的频率;IL-27的低表达削弱对Th17细胞原有的抑制作用,并不利于Foxp3+细胞生成。     

Th17相关细胞因子在CRSsNP中的表达及意义

目的:检测Th17细胞核转录因子RORC及细胞因子IL-17A、IL-22以及中性粒细胞标记MPO在慢性鼻-鼻窦炎不伴鼻息肉(CRSsNP)中的表达及其相关性,进而探讨Th17在CRSsNP发病机制中的作用及其与中性粒细胞炎症的关系。方法:实时定量方法检测17例CRSsNP患者筛窦黏膜及10例鼻中隔偏曲矫正患者下鼻甲组织中RORC、IL-17A及IL-22mRNA表达并探讨其相关性;免疫组织化学检测IL-17A+细胞的表达;ELISA检测MPO的表达并探讨其与Th17的相互关系。结果:RORC及IL-17A、IL-22mRNA在CRSsNP组中的表达较对照组显著上调且RORC、IL-17A及IL-22mRNA表达呈正相关,免疫组织化学证实CRSsNP组较对照组具有更高的IL-17A表达。CRSsNP组较对照组含有更高的MPO表达,然而MPO的表达与Th17相关因子表达无相关性。结论:Th17细胞以及中性粒细胞炎症反应可能共同参与了CRSsNP的发病,然而二者可能并无内在的相互作用。     

大蒜新素对大鼠变应性鼻炎模型血浆中白细胞介素4和γ干扰素的影响

目的 探讨大蒜新素对大鼠变应性鼻炎模型外周血中愀扇潘和白细胞介素4(IL-4)的影响.方法 健康雌性SD大鼠30只,随机分为对照组、空白组和实验组,每组10只.实验组用卵清蛋白辅以氢氧化铝和灭活百日咳杆菌佐剂建立变应性鼻炎模型,成功后连续腹腔注射大蒜新素10 d;对照组造模方法同实验组,成功后腹腔注射等体积的生理盐水;空白组除无卵清蛋白致敏和激发外,方法同对照组.颈内静脉取血,分离血浆,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血浆中IL-4和INF-愕暮俊＝峁实验组、对照组和空白组大鼠外周血浆中IL-4水平(-x±s,下同)分别为(22.81±8.79)pg/L、(41.43±4.93)pg/L和(9.93±2.07)pg/L;INF-愕乃椒直鹗.32±11.20)pg/L,(11.35±2.45)pg/L和(21.69±5.93)pg/L.实验组血浆中IL-4的水平低于对照组而高于空白组,差异具有统计学意义(t值分别为3.22及4.17,P值均<0.05);实验组血浆中INF-γ水平高于对照组(t=3.84,P<0.05),而与空白组相比差异无统计学意义(t=1.47,P>0.05).结论 大蒜新素能降低大鼠变应性鼻炎模型外周血中IL-4的水平,同时提高INF-γ的水平,对Th1和Th2细胞因子水平具有调节作用.     

白细胞介素23在变应性鼻炎患者鼻黏膜中的表达及意义

目的:探讨白细胞介素23(IL-23)在变应性鼻炎(AR)患者鼻黏膜中的表达及意义.方法:收集12例AR患者(AR组)下鼻甲黏膜及11例单纯性鼻中隔偏曲患者下鼻甲黏膜(对照组),采用免疫组织化学方法和实时定量RT-PCR方法检测下鼻甲黏膜中IL-23的表达.结果:IL-23p19 mRNA在AR组中的表达水平较对照组明显增高(P<0.01).免疫组织化学显示IL-23蛋白主要表达于黏膜固有层的炎性浸润细胞,AR组鼻黏膜中IL-23阳性细咆数明显高于对照组(P<0.01).IL-23p19mRNA和蛋白表达水平与黏膜固有层总炎性细胞浸润程度及固有层胶原纤沉积程度成显著正相关(对于mRNA表达水平,相关系数分别为0.678和0.834;对于蛋白表达水平,相关系数分别0.644和0.721,均P<0.01).结论:IL-23可能参与了AR的慢性炎症和组织重塑.     

变应性鼻炎免疫治疗前后外周血T细胞抗原识别受体Vγ和Vδ亚家族谱系和克隆性分析

目的 探讨变应性鼻炎(allergic rhintis,AR)患者屋尘螨特异性免疫治疗1年前后外周血特异性IgE(specific IgE,sIgE)水平、外周血T细胞抗原识别受体(T cell receptor,TCR)Vγ和Vδ亚家族谱系以及TCR Vγ Ⅰ～Ⅲ亚家族基因表达水平的变化情况.方法 选择10例屋尘螨特异性免疫治疗1年有效的AR患者作为研究对象,采用免疫荧光定量分析治疗前后的血清sIgE含量;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)-基因扫描检测治疗前后外周血单个核细胞TCR Vγ Ⅰ～Ⅲ和Vδ 1 ～8亚家族谱系表达情况,分析T细胞的克隆性;采用实时定量PCR检测治疗前后TCR Vγ Ⅰ～Ⅲ亚家族基因表达水平.10例健康成年志愿者外周血作为对照.结果 AR患者免疫治疗前血清sIgE平均((x-)±s,下同)为(22.89±9.60)kU/L,治疗后为(19.62±7.63)kU/L,sIgE水平不随症状的改善而下降(Z=1.051,P＞0.05).TCR Vγ Ⅰ～Ⅲ亚家族基因表达水平治疗前与健康对照组相比,差异无统计学意义(t值分别为-0.679、-0.516、-0.808,P值均＞0.05),而治疗后则出现明显的下降,其中TCR Vγ Ⅰ、Ⅱ亚家族治疗前后的差异有统计学意义(t值分别为-2.904、-2.217,P值均＜0.05).AR患者治疗前、后和健康对照组中TCR Vδ 1～8亚家族谱系表达个数分别为(5.30±0.82)、(4.90±0.57)和(5.20±1.40)个亚家族,以TCR Vδ 1、2、3和6亚家族多见;其中TCR Vδ6亚家族在AR患者治疗前以及健康对照组以多克隆或双克隆增殖为主,少量寡克隆增殖(1/10),而治疗后则以寡克隆增殖为主(6/10),差异有统计学意义(Fisher精确概率法,P＜0.05).结论 AR患者免疫治疗前和治疗1年后患者外周血TCRVγⅠ～Ⅲ亚家族基因表达水平以及TCR Vγ和Vδ基因谱系分布和T细胞克隆性增殖情况存在差异;免疫治疗早期鼻炎症状的改善可能与sIgE水平无明显相关,而与TCRγ δ T细胞有关,尤其是TCR Vδ 6 T细胞亚群.     

辅助性T细胞17在变应性鼻炎患者外周血中的表达CSCD

目的通过对间歇性变应性鼻炎(intermittent allergic rhinitis,IAR)患者不同时期外周血中辅助性T细胞17(T help cell 17,Th17)的检测,探讨Th17细胞在AR中的作用。方法对19例IAR患者在发作间歇期、发作期前及发作期采集外周静脉血,应用流式细胞术检测外周血中Th17细胞水平,并与27例对照进行比较。结果 IAR患者外周血中Th17细胞占外周血中CD4+T淋巴细胞的比例分别为间歇期0.86±0.65、发作期前1.82±1.09、发作期2.71±1.03、对照组1.72±0.69,表现为间歇期降低,发作期前、发作期升高(P<0.05)。结论 Th17细胞表达可能与AR发病有关。