DEX和rhBMP2对体外培养人牙髓细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨不同浓度地塞米松(Dexamethasone,DEX)、重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein 2,rhBMP2)及两者联合应用对体外培养的人牙髓细胞(human dental pulp cells,HDPCs)碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase,ALP)活性的影响.方法 组织块法培养HDPCs并进行鉴定;采用酶动力学的方法,观察 DEX、rhBMP2及二者联合应用对HDPCs的ALP活性的影响.结果 单独应用DEX时ALP活性明显增高,且在生理浓度范围内当浓度为0.01 nmol/ml时,对HDPCs的ALP活性达到最大的刺激作用,rhBMP2对HDPCs的ALP活性呈浓度依赖性增强;当联合应用DEX和rhBMP2,ALP活性比单独应用相应浓度的rhBMP2明显增高.结论 DEX、rhBMP2对HDPCs的ALP活性均有增强作用,同时二者对HDPCs的ALP活性有显著的功能放大性协同增强作用.     

Bmp-2对牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨骨形成蛋白-2（BMP-2）对人牙周膜（PDL）细胞增殖及碱性磷酸酶（ALP）活性的影响。方法 通过体外细胞培养技术。用噻唑盐（MTT）法检测BMP-2刺激前后人PDL细胞增殖的情况，用酶动力学方法检测ALP活性。结果 BMP-2可明显促进PDL细胞增殖。在实验的5d范围内，浓度在25-400μg／ml时呈浓度-时间依赖关系，最佳效应浓度为200μg／ml（比对照组增加了193．4％），最佳效应时间均为3d。BMP-2可显著增强PDL细胞的ALP活性，25μg／L作用下ALP活性已经比对照组差异有显著性（P〈0．01）。浓度为100μg／L时效果最佳（P〈0．001），从第2d起。能增强人PDL细胞的ALP活性，第5d时作用趋于缓和。结论 BMP-2能促进人PDL细胞的分化和增殖，能促进细胞ALP的活性。     

压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨不同压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法采用酶动力学方法,比较不同压强的压力在不同的作用时间下对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果压力增加导致牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。结论颌力过大将造成牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低,可能影响牙周组织健康。     

成骨生长肽对钛表面人牙周膜成纤维细胞增殖分化影响的研究

目的:研究成骨生长肽(Osteogenic growth peptide,OGP)对人牙周膜成纤维细胞(Periodontal ligament cells,PDLCs)在钛金属表面增殖分化的影响.方法:将纯钛试件放在12孔培养板内,取生长良好的第五代人牙周膜成纤维细胞接种在试件表面,加入不同浓度的OGP(10-11～10-7mol/L),分别在接种后1、3、5、7 d应用MTT法检测细胞增殖;接种后3、7、10 d应用酶联免疫法检测细胞内碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP)活性的表达.结果:OGP在该浓度范围内时,对钛表面的人牙周膜成纤维细胞的增殖率有明显的促进作用(P＜0.05),并且能促进细胞内ALP表达活性(P＜0.05),最佳作用浓度为10-9mol/L.结论:OGP可促进钛片表面人牙周膜成纤维细胞的增殖活性,同时可以增强细胞碱性磷酸酶表达的活性,提示OGP在口腔种植领域中具有良好的应用前景.     

富血小板纤维蛋白对人牙髓干细胞增殖、凋亡 及碱性磷酸酶活性的影响

目的 探讨富血小板纤维蛋白（PRF）对人牙髓干细胞增殖、凋亡及碱性磷酸酶活性的影响及机制。 方法 从人牙髓组织中分离出人牙髓干细胞（hDPSCs）,hDPSCs 随机分为对照组及实验组,CCK8 实验检测PRF 刺激hDPSCs 第0、1、3、5 及7 天时细胞增殖情况;RT-PCR 检测PRF 刺激hDPSCs 第0、3、7 及14 天时 碱性磷酸酶（ALP）的mRNA 表达情况;流式细胞仪检测PRF 刺激hDPSCs 7 d 后细胞的凋亡情况,Western blotting 检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）、p38、p-p38 蛋白表达。结果 实验组第1 天时细胞的增殖与对照组比较,差异无统计学意义（P >0.05）,第3、5、7 天时细胞的增殖均高于 对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;实验组第3 天时ALP mRNA 表达与对照组比较,差异无统计学意义（P > 0.05）,第7 和14 天时ALP mRNA 表达均高于对照组,差异有统计学意义（P <0.05）;细胞的凋亡率及 Cleaved Caspase-3 蛋白、p-p38 蛋白表达实验组与对照组比较,差异有统计学意义（P <0.05）,实验组细胞的 凋亡率及Cleaved Caspase-3 蛋白表达均下降,p-p38 蛋白表达上调,p38 蛋白表达两组间比较差异无统计学意 义（P >0.05）。结论 PRF 可促进hDPSCs 的增殖,上调ALP 的mRNA 表达,抑制其凋亡,其机制与激活p38 信号通路有关。     

压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酶活性的影响

目的 探讨不同压力环境对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法 采用酶动力学方法，比较不同压强的压力在不同的作用时间下对人牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性的影响。结果 压力增加导致牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。结论 颌力过大将造成牙周膜成纤维细胞碱性磷酸酶活性降低。可能影响牙周组织健康。     

碱性成纤维细胞生长因子对牙周膜成纤维细胞的影响

碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)是近年来研究较为热门的生物因子,为具有多种功能的多肽生长因子,能广泛促进来源于中胚层及神经外胚层细胞的增殖,是体内重要的创伤愈合因子之一。bFGF有主动诱导分化和加速生长作用,可以促进牙周膜成纤维细胞的分化和增殖,促进牙周组织的修复和再生。     

表皮生长因子与碱性成纤维生长因子对人牙髓干细胞增殖的影响

目的：探讨表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和碱性成纤维生长因子（basic fibroblast growth factor, bFGF）对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells, hDPSCs)增殖能力的影响。方法：采用噻唑蓝（MTT）比色法分别测定不同浓度EGF和bFGF在不同时间,单独或联合应用对hDPSCs增殖能力的影响。结果：50 ng/ml EGF和20 ng/ml bFGF促hDPSCs增殖能力最强。以50ng/ml EGF、20ng/ml bFGF单独或联合作用,其促hDPSCs增殖能力均具有时间依赖性,第3 d、5 d、7 d, EGF、bFGF促hDPSCs增殖作用显著增强,二种生长因子联合作用,促增殖作用显著高于其单独作用效果,差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：生长因子EGF和bFGF最大效应浓度分别为：50 ng/ml、20 ng/ml。EGF和bFGF单独作用均能显著促进hDPSCs的增殖,二者联合作用对hDPSCs的增殖有一定的协同作用。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子对创面愈合的影响

目的观察重组人碱性成纤维细胞生长因子(Rsecombinanthumanbasicfibroblastgrowthfactor,rhbFGF)对烧伤、手术取皮区和慢性创面愈合的影响,并探讨用药方法。方法将163例各种创面患者按创面类型分为3组:烧伤创面组62例、手术取皮区创面组36例和慢性创面组65例。在常规治疗同时,加用rhbFGF治疗。烧伤创面组和手术取皮区创面组采用随机自身对照法,慢性创面组采用相同个体治疗前后创面情况对照。分别观察创面愈合时间、用药前后血尿常规、肝、肾功能变化及不良反应。结果烧伤创面组及手术取皮区创面组用药区创面完全愈合时间较对照区缩短(P<0.01,P<0.05),慢性创面组用药区创面愈合时间较对照区缩短(P<0.01)。结论rhbFGF具有促进烧伤、皮肤外伤、慢性创面愈合的作用,尤其对深Ⅱ度烧伤、严重皮肤外伤(中厚皮片取皮伤)、慢性创面促进愈合作用更为显著。     

rhBMP-2明胶微球的制备及对人牙周膜细胞增殖和碱性磷酸酶活性影响

目的: 观察重组人骨形成蛋白-2(rhBMP-2)明胶微球(rhBMP-2-GMs)对人牙周膜细胞(PDLCs)增殖和碱性磷酸酶活性的影响. 方法: 体外培养人PDLCs,分别用不同浓度的rhBMP-2和rhBMP-2-GMs作用,用四唑盐比色实验(MTT)和酶动力学方法进行观察. 结果: rhBMP-2和rhBMP-2-GMs均可以明显促进人PDLCs增殖、提高碱性磷酸酶(ALP)活性,并呈剂量依赖性,rhBMP-2-GMs较单独应用rhBMP-2的效应更加显著. 结论: rhBMP-2-GMs利用其对rhBMP-2的缓释作用,对人PDLCs增殖和碱性磷酸酶活性的作用效果优于单独应用rhBMP-2.     

rhBMP2对人牙髓干细胞分化及Delta蛋白表达的影响

目的：研究重组人骨形成蛋白2（rhBMP₂）对人牙髓干细胞分化及Delta蛋白表达的影响,为人牙髓干细胞的研究提供理论依据。方法：酶消化法获得人牙髓干细胞,光镜下进行形态学观察,免疫荧光法检测细胞表面标志的表达;取第5代牙髓干细胞, 分为实验组（加含50 μg•L^-1rhBMP₂的培养液）及阴性对照组（只加入培养液）,检测碱性磷酸酶活性和Delta蛋白表达的变化。结果：人牙髓干细胞呈集落状生长, 免疫组织化学检测显示nestin、 vimentin染色呈阳性,免疫荧光法检测STRO-1呈阳性。与阴性对照组比较,实验组第7、14及21天碱性磷酸酶活性均明显升高（P<0.01）,第21天Western blotting法检测Delta蛋白表达明显升高(P<0.05)。 结论：培养的牙髓干细胞具有干细胞特性,并且rhBMP₂可使其碱性磷酸酶活性增高并上调Delta蛋白表达,提示Delta蛋白可能参与牙髓干细胞向成牙本质样细胞分化的过程。     

1,25（OH）2D3对4种细胞碱性磷酸酶活性的影响

观察１，２５（ＯＨ）２Ｄ３对体外培养的人牙乳头细胞，牙髓细胞，牙龈细胞，成骨细胞碱性磷酸酶活性的影响。方法；用组织块培养法和ＡＬＰ测定法。结果：在１，２５（ＯＨ）２Ｄ３ｄ和５ｄ下人牙乳头细胞，人牙髓细胞及人成骨细胞ＡＬＰ活性增加，第７日变化不明显，而人牙龈细胞未见明显变化。     

人牙髓细胞的体外培养及生物学特性研究

目的:从年轻恒牙的牙髓组织中分离培养牙髓细胞,研究其表型及生物学特性.方法:选取因正畸或阻生拔除的年轻健康双尖牙或第三磨牙,取出牙髓,组织块酶消化法分离培养人牙髓细胞,免疫细胞化学检测第3代人牙髓细胞表面标志,并对体外培养的人牙髓细胞的矿化能力进行研究.结果:体外培养的人牙髓细胞表达Ⅰ型胶原及波形丝蛋白,少数细胞增殖可...     

不同浓度bFGF对体外培养人牙髓细胞增殖的影响

目的：探讨不同浓度碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) 对体外培养人牙髓细胞增殖的影响，为寻求最佳影响浓度提供参考依据。方法：以常规组织块培养法体外获得牙髓细胞,随机分为5组，实验组分别加入bFGF，使其终浓度为0.1、1.0、10.0及100.0 μg•L^-1，无bFGF组作为阴性对照。采用MTT法分别测定各组吸光度A值，计算细胞相对增殖率（RGR），观察bFGF对牙髓细胞的增殖作用。结果：人牙髓细胞在不同浓度bFGF的作用下，除0.1 μg•L^-1bFGF组外，其他实验组RGR均高于对照组 (P<0.01)；组间比较显示10.0 μg•L^-1 bFGF组RGR最高，与1.0 μg•L^-1bFGF组比较差异有显著性(P<0.01)，但与100.0 μg•L^-1bFGF 组比较差异无显著性(P>0.05)。结论：bFGF能促进人牙髓细胞的增殖，bFGF的最小显效浓度是1.0 μg•L^-1，最佳增殖浓度是10.0 μg•L^-1。       

BMP2在大鼠牙髓损伤修复中的表达及其对牙髓细胞的生物学效应

目的：从体内体外两方面探讨BMP2在牙髓损伤修复，尤其是牙髓细胞分化过程中的作用。方法：建立大鼠牙髓损伤修复模型和体外人牙髓细胞连续培养，采用免疫组织化学、MTT法和酶动力学等方法，检测BMP2在体内牙髓组织损伤修复过程中的表达，并比较不同浓度rhBMP2对体外人牙髓细胞连续培养各阶段细胞增殖活性及ALP活性的影响。结果：体内牙髓组织损伤修复过程中存在BMP2的表达，牙髓组织损伤修复的不同阶段其表达部位和强度发生变化；rhBMP2可提高体外培养人牙髓细胞的增殖活性，与其本身浓度有关，并可促进人虎髓细胞ALP活性，呈浓度依赖性；结论：BMP2是参与牙髓损伤修复，尤其是牙髓细胞的增殖和分化的重要因子之一。     

骨形成蛋白体外对培养的人牙髓组织的诱导作用

骨形成蛋白可促进牙髓细胞增殖的诱发修复性牙本质形成，作应用体外组织培养技术，分别通过光镜和透射电镜观察了牛骨形成蛋白对体外培养的人牙髓组织的诱导作用，结果发现，培养３ｄ后可见增殖的星形细胞，其胞浆少，细胞小器不发达，培养７ｄ后，可见透明基质中埋有一些软骨样细胞，该细胞胞浆丰富，细胞小器发达，并含有丰富的分泌小泡，说明骨形成蛋白可促进牙髓细胞从低分化状态向高分化状态分化。     

Inductive effect of bovinc bone morphogenetic protein on human dental pulp tissue in vitro

Ｉｎｄｕｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｂｏｖｉｎｃｂｏｎｅｍｏｒｐｈｏｇｅｎｅｔｉｃｐｒｏｔｅｉｎｏｎｈｕｍａｎｄｅｎｔａｌｐｕｌｐｔｉｓｓｕｅｉｎｖｉｔｒｏ￥ＦｕｍｉｈｉｋｏＳＵＷＡ；ＧａｏＹｕｈａｏ（高玉好）；ＹｏｓｈｉｋｕｎｉＯＨＴＡ；ＦａｎｇＹｉ...     

雌激素与孕激素对雌大鼠肝组织碱性磷酸酶活性的影响

雌性大鼠摘除卵巢２周后，肝组织碱性磷酸酶活性显著降低；给去卵巢大鼠注射雌二醇可使肝组织碱性磷酸酶活性明显升高，比去卵巢组高６倍，而去卵巢大鼠注射孕酮则对肝组织碱性磷酸酶活性无明显影响，提示雌激素可促进肝组织碱性磷酸酶的合成．