人工真皮支架早期修复特重烧伤手足深度创面

目的 与传统的切削痂自体中厚皮移植术相比,探讨切削痂人工真皮支架植入术+自体刃厚皮移植术修复特重烧伤患者手足深度创面的疗效.方法 选择2012年3月至2015年3月第二军医大学长海医院烧伤外科收治的有手足深度创面的特重烧伤患者作为研究对象.符合纳入标准的28例患者按手术方法不同分为两组,观察组(14例)在伤后第4～7天行四肢深度创面切削痂、生物敷料覆盖+手足创面切削痂、人工真皮支架植入术,伤后第21～28天行手足创面自体刃厚皮移植术;对照组(14例)在伤后第4～7天行四肢深度创面切削痂、生物敷料覆盖术,手足深度创面以保痂换药为主,第28～35天行手足深度创面切削痂自体中厚皮移植术.记录每次手术持续时间、植皮成活情况、皮片坏死的原因、供皮区愈合时间、能否再次供皮、随访手足瘢痕增生情况.结果 观察组第1次手术持续时间(h)与对照组比较差异无统计学意义[(4.50±0.76) vs(4.14±0.86),P＞0.05];第2次手术持续时间(h)少于对照组[(2.11±0.35) vs (3.39±0.49),P＜0.001].植皮术后第8天打开换药时,观察组皮片全部成活者占97.37％(37/38),创面出现感染者占2.63％(1/38);对照组皮片全部成活者占73.68％(28/38),部分成活者占23.68％(9/38),创面感染者占2.63％(1/38).观察组供皮区愈合时间(d)少于对照组[(6.07±0.83) vs(14.64±0.93),P＜0.001].经评估观察组可再次供皮者占78.57％(11/14),对照组可再次供皮者占14.29％(2/14,P＜0.05).随访1年,根据温哥华瘢痕量表评分(分)观察组手足瘢痕增生情况好于对照组[(5.07±1.21) vs (8.07±1.14),P＜0.001].结论应用人工真皮支架能早期修复特重烧伤手足深度创面,不需额外增添手术操作时间,植皮成活情况及远期活动功能可,对供皮区损伤小.     

人工真皮支架联合自体刃厚皮修复大面积烧伤患者手部创面

目的探讨大面积烧伤患者手部深度烧伤使用人工真皮支架结合自体刃厚皮移植的治疗效果。方法双手烧伤面积大于80%并在早期切痂患者58例,其中切痂后使用人工真皮支架联合自体刃厚皮移植的28例患者为观察组,切痂后直接进行自体中厚皮移植的30例患者为对照组,对比评估2组手部创面愈合时间、双手创面愈合后皮片外观、双手功能,随访近期、远期手部功能恢复情况及供皮区愈合情况、色素、瘢痕生长情况。结果观察组双手创面愈合时间较对照组延长,而供皮区愈合时间较对照组缩短,差异均有统计学意义(P<0.05)。患者痊愈后经随访3～6个月,2组双手手术区均无明显瘢痕增生,外观良好,创面愈合后皮肤弹性好,均无明显色素沉着,且2组患者双手屈指、对掌功能均良好。观察组供皮区均无明显瘢痕增生或色素沉着,且不影响头发生长,不影响再次取皮;而对照组供皮区存在一定瘢痕增生,且供皮区颜色较周围正常皮肤深,无法再次取皮。2组病例手部植皮区存活皮片均外观好,功能佳。结论采用人工真皮支架修复手部创面有利于创面愈合,且对供皮区影响小,对患者全身打击小,有利于患者的恢复。     

低温储存猪真皮治疗Ⅱ度烧伤

目的研究应用低温储存猪真皮覆盖治疗浅Ⅱ度和深Ⅱ度偏浅烧伤创面的方法和效果。方法对2002年1月~2005年6月住院治疗的63例91对肢体创面进行对比治疗,分成浅Ⅱ度组和深Ⅱ度偏浅组,在同一个体相同的创面分别用磺胺嘧啶银冷霜(SD-Ag)外敷和猪真皮覆盖包扎治疗,观察对比愈合效果。结果浅Ⅱ度SD-Ag治疗愈合时间为(10.7±2.9)d,猪真皮覆盖愈合时间为(7.9±2.8)d,P<0.01,两者差异有统计学意义;深Ⅱ度偏浅SD-Ag治疗愈合时间为(17.2±3.5)d,猪真皮覆盖愈合时间为(12.6±3.1)d,P<0.01,两者差异有统计学意义。低温储存猪真皮覆盖治疗Ⅱ度烧伤创面,可以有效恢复微循环淤滞区的血运,使渗出减少,减轻疼痛和减少费用。结论低温储存猪真皮覆盖治疗Ⅱ度烧伤创面比用SD-Ag包扎可防止创面继发性加深,减少感染,缩短疗程及提高愈合质量。     

兔耳背植入人工真皮支架模型的应用评价

目的探讨运用新西兰兔作为动物模型进行人工真皮支架动物体内评价的可行性.方法建立兔耳背皮下埋植模型,将人工真皮支架埋植于兔耳背皮下,术前及术后1个月内定期监测实验兔一般情况及生化指标,术后第2、7、14和28d取材作组织学观察.结果术前及术后1个月内各时相点一般情况及各项生化指标无明显变化,组织学观察结果证实人工真皮支架具有良好的组织相容性和快速血管化能力.结论兔耳背皮下埋植模型可以简便地对人工真皮支架进行体内评价.     

激光微孔脱细胞猪真皮支架对Ⅲ度皮肤烧伤血管化的影响

目的: 探讨新的脱细胞方法配合激光打孔制备的激光微孔脱细胞猪真皮支架对大鼠Ⅲ度皮肤烧伤创面血管化的影响。方法: 将激光微孔脱细胞猪真皮(A组)、普通打孔脱细胞猪真皮（B组）两种真皮支架分别移植至Ⅲ度皮肤烧伤清创后创面,另设无真皮支架对照创面（C组）,1周后加植表皮,大体观察植入真皮支架1、2、3周创面的修复情况,并通过HE染色和免疫组化标记创面中CD31、α-SMA表达阳性血管并计数。结果: 制备的脱细胞猪真皮呈瓷白色,有光泽,柔软;显微镜下未见细胞残留。加植表皮后,A组较B组存活率高。两组支架植入后及无支架对照组1～3周创面中CD31、α-SMA表达阳性血管数持续增加,其中两组真皮支架均较无支架组多,差异有统计学意义(P<0.05); A组显著高于B、C组(P<0.05)。结论:该方法制备的激光微孔脱细胞猪真皮基质能快速血管化,提高表皮存活率,为一种较理想的真皮替代物。     

脱细胞猪真皮基质覆盖治疗人深Ⅱ度烧伤

目的 研究应用脱细胞猪真皮基质（以下简称基质）一次性覆盖治疗人体深Ⅱ度烧伤的方法及效果。方法 对1998年1月-2002年1月在我院住院治疗的128例烧伤患者的治疗方法与效果进行总结分析。对深Ⅱ度偏浅创面。用新洁尔灭液冲洗受伤皮肤，去净表皮，用浸过碘伏液的基质覆盖，纱布绷带包扎，对深Ⅱ度偏深创面。行削痂术削到间生态层，用基质覆盖，纱布绷带包扎。结果 128例全部治愈，均得到满意的临床效果。结论 基质是一种良好的促进创面上皮化的生物敷料，用其一次性覆盖创面。中途不换药治疗深Ⅱ度烧伤是可行的。可使病人休克期及整个疗程病情稳定，并发症减少。病程缩短。     

双层人工真皮移植在关节深度烧伤创面的早期修复效果

目的 探讨双层人工真皮早期应用于关节深度烧伤创面的治疗效果。 方法 选择40例伴关节部位深度烧伤的特重度烧伤患者作为研究对象,按治疗方式随机分为观察组和对照组（各20例）,观察组关节深度烧伤创面于受伤后3~5 d行切/削痂术后植入Lando双层人工真皮覆盖创面,待真皮血管化良好后去除硅胶层,植入自体刃厚皮片。对照组关节部位深度烧伤创面于伤后3~5 d行切/削痂术后自体刃厚皮片移植术。记录两组自体刃厚皮植入后7 d皮片成活率、21 d创面愈合率。创面愈合后指导康复性训练,统计关节部位水泡、疼痛、瘙痒发生率,随访并评估关节部位瘢痕增生及烧伤后患者生活质量。 结果 植皮术后7 d换药时,观察组皮片成活率高于对照组,术后21 d,观察组创面愈合率高于对照组,观察组水泡、疼痛、瘙痒发生率低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。随访12个月,根据温哥华瘢痕量表量表评分,观察组瘢痕增生情况好于对照组,根据BSHS-B评分,观察组烧伤后生活质量情况优于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论 双层人工真皮早期移植修复关节部位深度烧伤创面,植皮成活率高,创面不良事件发生率低,关节部位瘢痕增生不明显,烧伤患者生活质量高。     

胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架修复Ⅲ度烧伤创面时组织TGF-β1表达与细胞凋亡的研究

目的 探讨胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架修复Ⅲ度烧伤创面时生物合成替代和细胞凋亡的机制,为临床应用提供理论依据.方法 将胶原-磺化羧甲基壳聚糖/硅橡胶双层人工皮肤支架移植于10头猪Ⅲ度烧伤清创后创面,对植入后1、2、3周的创面及植入后2周创面加植表皮后2周的修复情况进行观察.同时,通过免疫组织化学、TUNEL、天狼猩红染色方法,对不同时间的创面组织中转化生长因子p 1（TGF-p 1）的表达水平、细胞凋亡发生情况以及支架自身胶原替代情况进行观测.以不植入人工真皮支架的同期烧伤创面作为对照.结果 （1）实验组植入人工真皮支架后2～3周,创面颜色逐渐红润,并变光滑,而对照创面表面粗糙;（2）实验组TGF-β 1表达水平在人工真皮支架植入后1～2周持续增高且高于对照组,3～4周持续下降且低于对照组.对照组1～3周的创面持续升高,4周下降;（3）实验组植入后2～4周凋亡细胞持续增多且数量显著高于相应对照组,对照组3～4周时凋亡细胞持续增多;（4）人工真皮支架植入后1周,自身胶原已开始合成,植入后3周基本完成支架自身胶原替代.结论 胶原-磺化羧甲基壳聚糖人工真皮支架在创面修复中有明显作用,其修复创面的机制与自然的肉芽或瘢痕修复不同,在创面修复重建中有良好的应用前景.     

脂肪间充质干细胞复合人工真皮修复大鼠深度烧伤创面的研究

目的探讨脂肪间充质干细胞（ADSCs）复合人工真皮（皮耐克）修复大鼠深度烧伤创面的作用。方法用胶原酶法消化SPF级绿色荧光蛋白转基因大鼠腹股沟脂肪,获得ADSCs,用流式细胞仪分析鉴定其表面特异性标志物,并观察ADSCs向成骨细胞、成脂细胞分化的潜能。建立大鼠深度烧伤模型,将大鼠对称的左、右创面分为实验组和对照组。实验组采用人工真皮+ADSCs治疗,对照组采用人工真皮+0.9%氯化钠注射液治疗。分别于术后7、14、21d观察创面最大直径以评估创面愈合情况,术后21d时荧光显微镜下观察创面冷冻切片评估实验组与对照组创面情况。结果成功获得大鼠ADSCs,具有较强的增殖能力及多向分化能力。ADSCs对间充质干细胞标志物CD29、CD90、CD44呈现高表达;对造血干细胞表面标志物CD34、白细胞共同抗原CD45则呈低表达。治疗后14d时,实验组创面最大直径明显小于对照组（P＜0.05）,即实验组创面愈合速度比对照组明显增快。治疗后21d,实验组创面可见散在点状绿色荧光,而对照组未观察到明显荧光。结论ADSCs联合人工真皮作用于深度烧伤创面可显著促进创面愈合,是一种有效的治疗深度烧伤的方法。     

脱细胞猪真皮基质覆盖治疗人深Ⅱ度烧伤

目的研究应用脱细胞猪真皮基质（以下简称基质）一次性覆盖治疗人体深Ⅱ度烧伤的方法及效果。方法对1998年1月-2002年1月在我院住院治疗的128例烧伤患者的治疗方法与效果进行总结分析。对深Ⅱ度偏浅创面,用新洁尔灭液冲洗受伤皮肤,去净表皮,用浸过碘伏液的基质覆盖,纱布绷带包扎。对深Ⅱ度偏深创面,行削痂术削到间生态层,用基质覆盖,纱布绷带包扎。结果128例全部治愈,均得到满意的临床效果。结论基质是一种良好的促进创面上皮化的生物敷料,用其一次性覆盖创面、中途不换药治疗深Ⅱ度烧伤是可行的,可使病人休克期及整个疗程病情稳定,并发症减少,病程缩短。     

三度烧伤创面削痂植皮的疗效观察

目的 探讨削痴植皮术在三度烧伤创面早期祛痂手术中的应用。方法 选择1997-2004年肢体三度烧伤患者157例作为A组，1991～1996年肢体三度烧伤患者80例作为B组，排外电烧伤、热挤压伤等深三度烧伤。A组行削痂植皮术，B组行切痂植皮术，观察两组手术时问、植皮成活率、创面愈合时间、以及创面愈合后肢体外形、对称性和功能的恢复。结果A组创面愈合后肢体外观、对称性和功能较好，自身对照上下肢分别缩小5．7％和5．8％，差异无显著性；B组创面愈合后肢体明显缩小、左右明显不对称、功能较差，上下肢分别缩小21．6％和25．1％，差异具有显著性意义（P〉0．05）。而两组手术时间、植皮成活率、创面愈合时间比较差异无显著性。结论 三度烧伤创面采用削痂植皮术治疗能更好地维护肢体的美观、保护肢体的功能。     

全厚皮移植整形外科技术在小面积深度烧伤创面修复中的价值

目的探讨全厚皮移植等整形外科技术在小面积深度烧伤创面修复中的近远期疗效,评价其在小面积深度烧伤创面修复中的价值。方法小面积深度烧伤患者26例(30处创面),采用全厚皮移植、各种皮瓣和直接缝合等整形外科技术进行创面修复,观察愈合情况。患者出院后3个月、6个月、12个月随访,调查患者满意度。结果本组26例患者30处创面经整形外科技术修复,其中创面Ι期愈合28处,占93.33%;出现腹部带蒂皮瓣蒂部感染1处,Ⅱ期断蒂手术是经处理后愈合良好;全厚皮移植1处虽然为Ι期愈合,但出现局部花斑改变;创面术后外形良好,肤色与正常皮肤相似,弹性好,随访过程中无明显瘢痕生长情况,关节部位无明显的功能障碍;随访3个月、6个月、12个月,满意度无明显差异(P>0.05)。结论全厚皮移植等整形外科技术在小面积深度烧伤创面修复中可以缩短创面愈合时间,远期满意度高,美学效果理想,在临床上具有广阔的前景。     

实验性豚鼠炎性胸膜腔积液模型的建立

目的：建立一种炎性胸膜腔积液（简称胸液）的动物模型。方法：选择40只豚鼠分为8组,第1－7组为试验组,第8组为对照组,试验组每只左胸膜腔内注入1％角叉菜胶（carrageenan)0.8-1.0ml,分批处死观察。结果：胸液于1天内已经出现,2－3天积液量最多,胸液中中性粒细胞计数及病理切片中胸膜、肺的炎性改变亦达高峰,以后胸液逐渐吸收,第7天开始出现胸膜纤维化与粘连,第10天时明显,14天呈现胸膜包裹。结论：角叉菜胶是一比较理想的胸膜腔致炎剂;该动物模型的建立,为胸液的进一步研究提供了有用的工具。     

复方磺胺嘧啶银胶原蛋白烧伤膜的制备及其对大鼠深Ⅱ度烧伤的治疗作用评价

目的　研制复方磺胺嘧啶银胶原蛋白烧伤膜 ,并考察其对大鼠深 度烧伤创面的愈合作用。方法　采用交联法制备复方胶原蛋白膜 ,利用 SD大鼠深 度烧伤模型 ,观察外用胶原蛋白烧伤膜对创面愈合作用的影响。结果　制备后得到乳白色半透明、光滑和具有弹性的凝胶膜状物。胶原蛋白膜可促进创面坏死组织溶脱 ,烧伤创面愈合 ,实验组大鼠组织羟脯胺酸含量明显高于对照组 (P<0 .0 5 )。创面细胞 DNA周期变化 ,实验组在烧伤后 5、7、10和 14天 G0 / G1 细胞百分比低于对照组 (P<0 .0 5 ) ,而 S期细胞百分比高于对照组 (P<0 .0 5 ) ,烧伤创面含水量在烧伤后 2 4、36和 48小时明显低于对照组 (P<0 .0 5 )。结论　复方磺胺嘧啶银胶原蛋白烧伤膜具有促进大鼠深 度烧伤创面愈合的作用     

真皮"生物模板"与自体薄皮复合移植组织学观察

目的探讨真皮“生物模板”移植人体后的动态组织学变化。 方法采用真皮“生物模板”(异体无细胞真皮基质)加自体刃厚皮片复合移植的方法,修复深度烧伤病人切痂后创面,并以单纯自体刃厚皮片移植作对照,分别于术后1、2、3、4、6、8周,3、6、12个月取组织活检标本84例次;采用HE、Masson’s染色和透射电镜的方法,对创面组织标本进行动态组织学观察。 结果真皮“生物模板”与自体刃厚皮片复合移植后,修复细胞和血管循真皮模板胶原束间隙长入,新生胶原纤维排列较为规则有序,真皮修复后其结构接近正常真皮组织;而单纯自体薄皮移植修复创面后,真皮内胶原纤维排列紊乱。 结论真皮“生物模板”可以诱导包括成纤维细胞等修复细胞长入模板,合成新生的胶原和血管,创面修复后形成具有和正常真皮结构相似的“新生真皮”。     

小型猪门静脉回流胰液内引流式胰肾联合移植模型的建立

目的建立符合正常生理特点的胰岛素门静脉回流胰液内引流式胰肾联合移植(SPK)动物模型。方法选用20头近交系甘南小型猪作为SPK的供受体。供胰肾原位灌注后整块切取。修整时行供体左肾静脉与脾静脉端端吻合。受体血管吻合采用供体门静脉与受体脾静脉端侧吻合,供体腹主动脉的远端与受体的腹主动脉斜侧吻合;供体十二指肠与受体空肠侧侧吻合,使胰液经节段十二指肠从肠道引流;供肾输尿管皮肤造瘘并置管体外引流用于监测尿量。全组均未作抗排斥处理。结果10头受体猪中除1头因严重的腹胀于术后1 d死亡外,其余9头平均存活(4.5±1.5)d,术后移植胰、肾均即可发挥功能。结论在小型猪建立门静脉回流胰液内引流式SPK模型是可行的,且该术式更符合生理特点,可望用于临床。     

兔干眼模型的建立

目的建立稳定的兔干眼模型,为进一步研究提供动物模型。方法新西兰大白兔14只,采用右眼摘除泪腺、第3眼睑及Harder's腺。造模后第1、3、5、7、10、15天行Sh irm erⅠ试验和1%虎红角膜染色检查,造模前与造模后术眼自身对照。造模后3周取角膜、结膜组织行光学显微镜及透射、扫描电镜检查眼表上皮细胞形态,左、右眼对照。结果造模前兔Sh irm erⅠ试验值(18.1±3.6)mm,造模后Sh irm erⅠ试验值随着时间的推移稳定下降,5 d后稳定在5.0 mm以下。造模后各天Sh irm erⅠ试验值与造模前比较均存在显著性差异(P<0.001)。造模前兔角膜虎红染色阴性,造模后7 d开始出现阳性染色,以后随着时间的推移染色程度逐渐加重。造模后3周术眼角膜、结膜光学显微镜及透射、扫描电镜检查均见异常。结论采用泪腺、第3眼睑和Harder's腺摘除术能成功建立兔干眼模型。     

人工肝治疗急性肝衰竭动物模型代谢物组学研究

目的本实验采用以CC/MS为基础的代谢物组学为理论,结合现代生物质谱技术,对急性肝衰竭动物模型及其生物人工肝治疗效果进行研究。方法本实验选择杜洛克猪作为肝衰竭动物模型,生物人工肝用肝细胞来自中华实验小型猪。实验分为3组:对照组、生物人工肝组和假手术组。对3组实验动物进行12、18、24、36 h时间点的血样采集,并冻存于-80℃超低温冰箱,直至样品前处理。另外,通过GC/MSr质谱检测对所有样品进行分析,并对所得到的经标准化的数据在数学处理软件MATLAB 7.0进行PCA分析。结果通过PCA分析,对照组因动物发生急性肝衰竭在短期内死亡,而生物人工肝组生存时间显著延长。结论急性肝衰竭猪动物模型具有很好的稳定性,可以反映人体肝衰竭过程的病理过程。     

大鼠闭胸式体外循环模型的建立

目的 建立大鼠体外循环(CPB)模型，为CPB脑、肺、肝及肾等重要脏器损伤的基础研究提供经济、实用的模型。方法雄性大鼠，采用尾动脉灌注、腔静脉心房引流、中低温闭胸式CPB，转流时间2h，术中及停机后进行有创动脉压、ECG监测和血气分析。结果9只大鼠顺利建立CPB模型，CPB期间平均动脉压维持在60～90mmHg，动脉血气指标正常，停CPB后，心血管和呼吸功能顺利恢复。结论本实验建立大鼠闭胸式CPB模型是切实可行的，对CPB术后多脏器损伤的病理生理研究具有重要意义。     

紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型的建立

目的探讨建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型的可行性。方法40只成年雄性SD大鼠随机分为4组,各组均在第1、3、5、7天腹腔注射紫杉醇,剂量分别为0、0．5、1．0、2．0mg／（kg&#183;d）,分别于用药前和用药后第3、5、7、12、16、20和25天测定大鼠的机械缩足反射阈值（MWT）和热缩足潜伏期（TWL）,用药后第20天采用透射电镜观察坐骨神经超微结构。结果腹腔注射紫杉醇1．0mg／kg组大鼠最早在用药的第5天出现机械痛敏和热痛敏,机械痛阈在用药的第12天达到最小,而热痛阈在用药的第16天达到最小。腹腔注射紫杉醇1．0mg／kg组大鼠的坐骨神经纤维髓鞘板层结构松散、肿胀变形、排列紊乱、厚薄不均。结论使用SD大鼠重复腹腔注射1．0mg／kg紫杉醇的方法可以成功建立紫杉醇致大鼠外周神经病理性疼痛模型。