异黄酮配合物法纯化染料木苷的研究

介绍了纯化大豆异黄酮中染料木苷的一种方法。用水溶性有机溶剂提取一种含有异黄酮混合物的原料,将氧化钙或氢氧化钙加入提取物中,形成钙-异黄酮配合物,并从提取物中分离出配合物,此时钙-异黄酮配合物沉淀中染料木苷配合物的含量要高于黄豆苷配合物和黄豆黄素苷配合物。上述钙-异黄酮配合物可通过加酸转化成游离苷形式,再次经过提取、浸灰、分离和转化可使染料木苷含量进一步提高。      

大豆异黄酮苷元的纯化

以大豆异黄酮糖苷水解产物为原料,分离纯化染料木黄酮和大豆苷元.以丙酮为溶剂进行萃取分离,通过单因素实验考察溶剂体积、萃取温度和萃取时间对分离效果的影响,最终确定分离条件为:加入30倍体积丙酮,15℃分离20 min,最终产品染料木黄酮纯度72.3%,回收率89.5%;大豆苷元纯度67.7%,回收率84%.     

偏钒酸钠促进大豆芽异黄酮类物质黄豆苷元和染料木黄酮合成的研究

目的:分析比较偏钒酸钠对大豆芽合成异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄酮的影响;方法:将大豆种子在不同浓度的偏钒酸钠水溶液(0、200、400、600、800、1000、1200、1400、1600mg/LNaVO3)于28℃萌发6d,第6d收获富钒大豆芽,洗净烘干至恒重,用95%乙醇提取大豆芽中的异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄素,黄豆苷元和染料木黄素含量由高效液相色谱法测定;结果:分析测定结果表明,当大豆种子在浓度为200～600mg/L偏钒酸钠溶液中于28℃萌发6d,收获的大豆芽中的异黄酮类物质黄豆苷元和染料木黄酮的含量高于同等条件下其他浓度偏钒酸钠萌发液中萌发的大豆芽;结论:综合大豆芽的生长情况及大豆芽中异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄酮含量等因素,在本实验条件下,萌发富钒大豆芽的适宜偏钒酸钠酸浓度为200～600mg/L,适宜的培育时间为96～120h,适宜温度为28℃。     

偏钒酸钠促进大豆芽异黄酮类物质黄豆苷元和染料木黄酮合成的研究

目的:分析比较偏钒酸钠对大豆芽合成异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄酮的影响;方法:将大豆种子在不同浓度的偏钒酸钠水溶液（0、200、400、600、800、1000、1200、1400、1600mg/LNaVO3）于28℃萌发6d,第6d收获富钒大豆芽,洗净烘干至恒重,用95%乙醇提取大豆芽中的异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄素,黄豆苷元和染料木黄素含量由高效液相色谱法测定;结果:分析测定结果表明,当大豆种子在浓度为200～600mg/L偏钒酸钠溶液中于28℃萌发6d,收获的大豆芽中的异黄酮类物质黄豆苷元和染料木黄酮的含量高于同等条件下其他浓度偏钒酸钠萌发液中萌发的大豆芽;结论:综合大豆芽的生长情况及大豆芽中异黄酮类物质-黄豆苷元和染料木黄酮含量等因素,在本实验条件下,萌发富钒大豆芽的适宜偏钒酸钠酸浓度为200～600mg/L,适宜的培育时间为96～120h,适宜温度为28℃。      

双波长光度法测定染料木黄酮和黄豆苷元含量

利用双波长法同时测定大豆异黄酮中染料木黄酮和黄豆苷元含量。经扫描测得染料木黄酮最大吸收波长为261.6 nm,黄豆苷元最大吸收波长为249.4 nm。采用双波长光度法,选用黄豆苷元的测定波长对为249.4/272.8 nm,染料木黄酮和黄豆苷元合量在波长250.2 nm的等吸光点进行测定。黄豆苷元质量浓度在0～6μg/mL范围内符合比尔定律,染料木黄酮和黄豆苷元质量浓度在0～6μg/mL范围内符合比尔定律。     

高速逆流色谱法分离制备大豆异黄酮中的大豆苷和染料木苷

采用高速逆流色谱法分离纯化大豆异黄酮中的大豆苦和染料木昔。溶剂系统为乙酸乙酯一醋酸一水,体积比为5:1:10,上相为固定相,下相为流动相,逆流色谱仪转速为800r/mm,流速为1.5ml/min。所得大豆昔、染料木昔经高效液相色谱分析测定,纯度分别达到98.2%和99.2%(面积归一法)。     

葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析分离纯化蓝莓花色苷的研究

本论文初步探讨了采用Sephadex LH-20凝胶柱层析分离纯化蓝莓花色苷的工艺条件,比较了花色苷在不同缓冲液浓度、不同流速和不同上样量条件下的分离效果,并将最佳分离条件下得到的组分进行紫外可见波长扫描,对其中的花色苷组分进行HPLC检测。结果表明,当以30%的酸化甲醇为洗脱液,采用混合流速进行洗脱,进样量为20 mg时,蓝莓花色苷的分离效果最好,共收集到七个峰组分。经紫外-可见光谱扫描,可确定组分Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ为非花色苷类物质;组分Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ为花色苷类物质。由HPLC检测可知:组分Ⅳ中只含一种蓝莓花色苷;组分Ⅵ、Ⅶ均以一种花色苷为主,且其峰面积比例达到85%以上;组分Ⅴ中主要含两种花色苷。      

高纯度大豆染料木苷的制备工艺研究

从低温脱溶豆粕超声提取大豆染料木苷,水洗纯化染料木苷粗提物.通过单因素及正交试验,优化制备高纯度大豆染料木苷的最佳工艺条件为:乙醇浓度为70％、超声时间为40 min、提取温度为40℃、水洗纯化温度为90℃、染料木苷粗提物与水体积比为1∶50(mL/mL)、压滤机的压强为0.25 MPa.此条件下制备的染料木苷纯度高达...     

吸附树脂分离大豆异黄酮染料木苷和乙酰基染料木苷的研究

利用Sepabeads SP207大孔吸附树脂分离提纯大豆异黄酮。用乙醇从脱脂大豆中提取的大豆异黄酮主要含有染料木苷,还含有大豆苷、黄豆苷和乙酰基染料木苷等;经Sepabeads SP207大孔吸附树脂的乙醇梯度洗脱,可分离得到染料木苷和乙酰基染料木苷;经HPLC检测其纯度均为90%以上。     

大豆粗磷脂中磷脂酰胆碱的分离纯化研究

为了筛选出从醇溶性大豆磷脂中分离纯化大豆磷脂酰胆碱的最佳分离纯化工艺,本文了采用正交设计试验筛选提取大豆磷脂酰胆碱的最佳工艺。结果表明大豆磷脂酰胆碱最佳提取工艺为:按1∶10的料水比进行加热,在78℃恒温下4 h回流提取,重复2次。大豆磷脂酰胆碱的进一步的精制方法为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析法,并且考察了葡聚糖凝胶Sephadex LH-20对大豆磷脂酰胆碱的纯化能力。首先采用无水乙醇作为葡聚糖凝胶Sephadex LH-20凝胶柱层析洗脱液纯化大豆磷脂酰胆碱,然后将所得的大豆磷脂酰胆碱干燥,最后通过高效液相色谱法对所得的大豆磷脂酰胆碱进行含量测定。结果表明,乙醇提取法以及葡聚糖凝胶Sephadex LH-20柱层析法相结合的纯化过程对大豆磷脂酰胆碱分离纯化效果良好,此外该方法收率高,能够得到纯度为90.12%的大豆磷脂酰胆碱。     

影响苹果多酚分离提纯的因素

本文研究了苹果多酚分离提纯过程中柱长径比和流速对解吸率、表儿茶素和绿原酸的得率三个指标的影响。采用SephadexLH-20柱,以乙醇水溶液和60%的丙酮水溶液为洗脱液。冻干苹果粉用无水乙醇浸提得到粗苹果多酚,上柱后洗脱,采用四种不同的流速,三种不同的柱长径比进行试验。结果表明,当凝胶柱的吸附速率为1.5ml/min、解吸速率为1.0ml/min,柱长径比为20×2.5时,这三项指标均最好。     

β-Glucosidases from Soybeans Hydrolyze Daidzin and Genistin

β-Glucosidases which hydrolyze isoflavone glucosides, daidzin and genistin, were partially purified from soybean cotyledon. Three iso-forms of β-glucosidases (A,B,C) were separated on a CM-Sephadex C-50 ion exchange column. β-Glucosidase-B and C brought about nearly all of the hydrolyzing action on daidzin and genistin. β-Glu-cosidase-B and C were further purified with gel-filtration chromatog-raphy, and the partially purified enzymes were characterized at pH 5.0 and 45°C, (optimum conditions). Adding the β-glucosidase-B and C to soymilk at 45°C, both enzymes hydrolyzed daidzin and genistin and caused an increase in aglycones daidzein and genistein.     

茶叶中槲皮素单体的分离与制备

以体积分数95%乙醇作为洗脱溶剂,通过Sephadex LH-20柱层析从茶多酚中分离槲皮素,粗品得率为7.82%,HPLC检测纯度为20.40%。槲皮素粗品3.00g经沉淀、冷冻干燥后得178.00mg,HPLC检测纯度为98.89%,纯品得率为5.93%,结构由核磁共振氢谱和碳谱得以确证。     

凝胶柱色谱法分离纯化藜蒿中的黄酮苷类化合物

目的：研究鄱阳湖野生藜蒿中黄酮苷类化合物的分离纯化和结构鉴定。方法：采用超声辅助溶剂提取法提取藜蒿中的化学成分;采用聚酰胺柱层析法分离藜蒿中的黄酮苷元和黄酮苷类化合物;采用凝胶柱色谱法分离纯化藜蒿中的黄酮苷类单体化合物,根据化合物的理化性质和波谱特征鉴定化合物的化学结构。结果：藜蒿提取物中的黄酮苷元和黄酮苷类化合物得到较好的分离,同时分离并坚定了两个黄酮苷类的单体化合物——柯依利素-7-O- β-D- 葡萄糖苷和槲皮素-3-O- β-D- 木糖苷。结论：采用微波辅助溶剂提取结合聚酰胺柱层析可以充分提取并有效分离藜蒿提取物中的黄酮苷元和黄酮苷类化合物,采用凝胶柱色谱分离法可以分离制备藜蒿黄酮苷类单体化合物。     

沙棘果原花青素的分离纯化研究

用大孔树脂、Sephadex LH-20凝胶色谱的方法和反相高效液相色谱分离纯化沙棘果中的原花青素。结果表明：大孔树脂层析法分离纯化沙棘果中的原花青素时使用50％的乙醇水溶液洗脱得到的洗脱液中原花青素的含量较高，达71．9％；将经过大孔树脂层析分离纯化的原花青素粗品经Sephadex LH-20柱分离，50％乙醇作为流动相，原花青素粗品可纯化至95％以上。反相高效液相色谱分析发现，从Sephadex LH-20洗脱下来的组分中含有原花青素的二聚体。     

米酒乳杆菌素分离纯化条件研究

目的：对米酒乳杆菌产生的广谱细菌素进行分离纯化技术研究。方法和结果：采用活性炭脱色、冷乙醇沉淀、Sephadex G50 葡聚糖凝胶层析和高效液相色谱技术对米酒乳杆菌产生的细菌素进行分离纯化。结果表明,发酵浓缩液脱色的最佳工艺条件为活性炭加量3.5%、温度40℃、脱色时间20h,脱色率达64.5%。冷乙醇沉淀的最佳乙醇终浓度为80%,葡聚糖凝胶层析的洗脱液流速为0.5ml/min,上样量3ml,高效液相色谱纯化的流动相为90% 的甲醇水溶液,在此条件下可得到电泳纯的细菌素。结论：确定了米酒乳杆菌素的分离纯化条件,为细菌素的理化性质和抑菌机理的研究提供依据。     

Formation of Succinyl Genistin and Succinyl Daidzin by Bacillus Species

ABSTRACT:  6"- O -Succinyl-4'-hydroxyisoflavone-7- O -β-D-glucopyranoside (succinyl-β-daidzin) and 6"- O -succinyl-6,4'-dihydroxyisoflavone-7- O -β-D-glucopyranoside (succinyl-β-genistin), 2 new isoflavone metabolites, are found in  cheonggukjang  or  natto , traditional soy-based foods fermented with  Bacillus  species. Standard isoflavones including daidzin, genistin, daidzein, and genistein, and mixtures of isoflavones extracted from roasted soybeans were added to the medium growing  Bacillus subtilis  or  B. subtilis  natto and formation of succinyl-β-daidzin and succinyl-β-genistin were monitored by high-performance liquid chromatography (HPLC). Samples containing  Bacillus  with daidzin and genistin produced succinyl-β-daidzin and succinyl-β-genistin, respectively, while those with daidzein and genistein did not produce succinyl derivatives. Daidzin in samples with  B. subtilis  and  B. subtilis  natto decreased by 39.7% and 10.7%, respectively, for 4 h incubation while genistin decreased by 66.8% and 17.6%, respectively. Genistein decreased faster than daidzein during incubation with  B. subtilis  or  B. subtilis  natto without formation of succinyl derivatives. In the case of mixture of isoflavones, succinyl derivatives increased and β-glucosides and aglycones of isoflavones decreased significantly for 8 h incubation ( P  < 0.05).