灵芝载体固定化醋酸杆菌发酵苹果醋的研究

以灵芝粒为载体吸附固定醋酸杆菌制备固定化发酵剂,用其对苹果酒进行发酵试验,研究了液体深层发酵苹果醋的工艺.结果表明,灵芝粒可作为醋酸菌良好的吸附性固定化载体,首批次固定化发酵细胞负载率可达6log水平,15批次发酵过程中前8批次可在6～7d内结束发酵,转酸率超过90％,其余批次可在第10d转酸率超过90％.固定化醋酸菌活性可维持180d以上,具有重复使用特性,显示出一定的生产应用前景.     

自然发酵的苹果醋中醋酸菌的分离鉴定

选用自然发酵的苹果醋醪液为样品,以恶臭醋酸杆菌AS1.41为对照菌株。采用钙平板分离初筛、革兰氏染色与产醋酸定性试验初步鉴定、乙醇氧化试验法复筛等方法从中分离筛选出5株醋酸菌。再经过产酸量试验、耐盐性试验、耐酒精性试验等一系列试验后,确定了2株产酸量高且稳定的优势醋酸菌株,并对其进行形态观察、生理生化试验、16S r DNA序列以及dna K功能基因序列分析。最终鉴定这2株菌分别为巴氏醋酸杆菌(Acetobacter pasteurianus)B103和热带醋酸杆菌(Acetobacter tropicalis)B104。其中巴氏醋酸杆菌(Acetobacter pasteurianus)B103的产酸量达到35.6g/L,耐酒精浓度为7%,耐盐浓度为0.3%。热带醋酸杆菌(Acetobacter tropicalis)B104的产酸量达到33.2g/L,耐酒精浓度为7%,耐盐浓度为0.3%。     

苹果醋高产醋酸菌的筛选

介绍了从苹果果皮、酱醋厂醋醅和醋厂周围土壤中分离选育优良醋酸菌的方法,并根据其生理生化特性,初步鉴定该醋酸菌为巴氏醋酸细菌巴氏变种。     

青梅果醋醋酸发酵菌种的筛选与鉴定

目的:筛选1株适合青梅果醋生产的醋酸菌种。方法:从自然发酵的青梅果醋中筛选醋酸菌种,研究其酒精耐受性、酒精消耗速度、产醋酸速度。发酵生产青梅果醋,对其进行感官分析。以ABI377型DNA序列分析仪对最适菌种进行16SrRNA序列分析,鉴定其种属。结果:筛选出性能较好的3株醋酸菌株,分别命名为QM08、QM17与QM50,其中QM17菌株综合性能优,能够耐受13%的酒精,且起始酒精含量为10%时酒精转化较快,产酸速度较快。用本方法生产的果醋质量佳,色泽淡黄,质地澄清、透亮,风味芳香怡人。根据形态观察与16SrRNA序列分析,将其鉴定为醋杆菌属的巴氏醋杆菌(Acetobacter pasteurianus),命名为巴氏醋杆菌QM17。结论:巴氏醋杆菌QM17适宜青梅果醋的生产。     

酵母固定化与醋酸菌发酵生产苹果醋工艺的研究

以新鲜苹果为原料,研究了海藻酸钙周定活性干酵母与醋酸菌发酵生产苹果醋的工艺技术.结果表明,苹果破碎时用0.1%柠檬酸和0.1%异VC进行护色,接种0.5%固定化活性干酵母在20%～25%发酵至高泡期,经糖分调整至潜在糖度18°Bx,再经二次发酵至酒精度8.5%,接种醋酸菌10%,28°C～32℃发酵4d,即可得到醋酸含量7.0g/100mL、糖度1.0°Bx,具有浓郁苹果香气、清亮透明、口感微甜的苹果醋.     

细菌型豆豉发酵芽孢杆菌的筛选与鉴定

对贵州省10 个细菌型豆豉产区的样品进行菌种分离与鉴定。旨在通过纯种发酵、口感评测、产蛋白酶能力测定、产气实验,筛选出能够取代自然发酵、蛋白酶产量高、发酵风味好、发酵不产气的芽孢杆菌菌株。结果从分离的184 株芽孢杆菌中,筛选出3 株发酵品质突出且不产气的菌株：BJ3-2、BJ1-3 和ZY4-5,其产蛋白酶能力(h/c)分别为3.60、1.71 和1.50。生理生化鉴定和16S rDNA 序列分析结果显示,它们均为枯草芽孢杆菌。扩大纯种发酵实验证明,可以将其作为工业发酵参考菌株。     

巴氏醋酸杆菌醋酸发酵工艺的优化

分析比较了巴氏醋酸杆菌AC2005和恶臭醋酸杆菌AS1.41的菌种性能,发现菌株AC2005对酒精和醋酸的耐受性较AS1.41优越.采用响应面分析方法对巴氏醋酸杆菌AC2005初始发酵培养基进行了优化.确定了其最佳水平组合为酒精浓度2.7%、醋酸浓度2.6 g/100mL、装液量40.0mL时,酒精转化率为97.5%,醋酸浓度可达到5.2 g/100mL.在此基础上初步建立了巴氏醋酸杆菌AC2005单批补料的发酵工艺,在发酵过程中补加3次山楂果酒以维持发酵液中酒精浓度为2.0%vol～2.5%vol,发酵周期80h～85h,醋酸浓度可达7.0 g/100mL～8.0 g/100mL.     

醋酸杆菌最佳诱变剂的筛选

以野生型醋酸杆菌为出发菌株经紫外线、亚硝酸、5-溴尿嘧啶、吖啶橙、2-氨基腺嘌呤、盐酸羟胺6种诱变剂进行诱变，用青霉素测定醋酸杆菌对各种诱变剂的敏感性，进而筛选出对此菌种诱变效果显著的最佳诱变剂。试验结果表明，最佳诱变剂为盐酸羟胺，在其诱变基础上传接五代培养，并对其发酵产酸能力进行定性测量，并与同步培养发酵的野生株进行对照比较，发现诱变后其产酸能力比野生型的菌株有明显提高，且遗传稳定。     

醋酸杆菌最佳诱变剂的筛选

以野生型醋酸杆菌为出发菌株经紫外线,亚硝酸,5-溴尿嘧啶,吖啶橙,2-氨基腺嘌呤,盐酸羟胺六种诱变剂进行诱变,用青霉素测定醋酸杆菌对各种诱变剂的敏感性,进而筛选出对此菌种诱变效果显著的最佳诱变剂。试验结果最佳诱变剂为盐酸羟胺,诱变后其产酸能力比野生型的菌株有明显提高。     

醋酸高产菌株的筛选及高酸度苹果醋的酿造

国内外对适合酿造高酸度果醋(总酸质量浓度100 g/L)的菌株选育和工艺开发等研究较少,为生产高酸度苹果醋,提高原料利用率,作者筛选得到一株高产醋酸的巴氏醋杆菌CYD159,并采取流加发酵的方法,探究了乙醇体积分数和分割取醋对发酵的影响。结果表明,当初始乙醇体积分数为3%,并控制流加速率,使发酵过程中乙醇体积分数不超过3%,分别在36、66、85 h分割3次时,可得到总酸(以乙酸计)120 g/L的高酸度苹果醋,是单批发酵总酸的2倍。     

葡萄果醋发酵用醋酸菌的分离及鉴定

选用腐烂的葡萄皮及周边土壤为样品,采用纯化培养、定性试验等方法,从中筛选出18株醋酸菌,再经过产酸量、遗传稳定性等的测定,确定了一株产醋酸度高且产量稳定的醋酸菌M12(产酸量达36.35g/L),并对其进行形态特征、生理生化特征试验、16S rDNA,最终鉴定其为醋酸杆菌属中的巴氏醋酸杆菌。     

小米发酵液中高发酵性能芽孢杆菌的分离筛选与鉴定

从小米的自然发酵液中分离出芽孢杆菌的疑似菌落50株,然后通过检测CO2失重进行初级筛选,通过测定发酵液还原糖含量、p H值进行二级筛选,通过生长曲线法进行三级筛选,最终筛选出发酵性能最好的疑似芽孢杆菌3株,并对其进行菌种鉴定。通过16S rRNA扩增比对鉴定筛选的菌种,进而通过MEGA 4.0构建系统进化树进行分析,结果表明3号和5号菌种为枯草芽孢杆菌,20号菌种为暹罗芽孢杆菌。经4代培养后,3株菌种的迭代稳定性佳。     

山西老陈醋发酵阶段高产淀粉酶芽孢杆菌的筛选与鉴定

从山西老陈醋酒化阶段和醋化阶段筛选高产淀粉酶的芽孢杆菌（Bacillus）。采用水解圈法和3,5-二硝基水杨酸（DNS）法对分离菌株进行初筛和复筛,并对筛选出的菌株进行环境耐受性分析。得到一株产淀粉酶能力较高的菌株JT10-9,淀粉酶活力可达到228.73 U/mL。该菌株能耐受9%的乙醇体积分数,在pH 3.5的条件下可生长,在20～50 ℃环境中生长良好。通过形态观察、生理生化试验及16S rDNA鉴定,鉴定菌株JT10-9为解淀粉芽孢杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。     

内蒙古传统发酵乳中优质乳杆菌的筛选与鉴定

从内蒙古鄂尔多斯市乌审旗多户牧民家庭自制的传统发酵乳制品中,共分离得到36株乳杆菌。经发酵特性试验筛选,共得到2株同时具有优良产酸和产黏特性的乳杆菌,它们分别是WSQ-18和WSQ-34。经16s r DNA鉴定与API50辅助鉴定,确定WSQ-18为德氏乳酸杆菌乳酸亚种2、WSQ-34为植物乳杆菌1。将两株乳杆菌与嗜热链球菌进行复配发酵试验,并与市售酸奶对照,最终确定WSQ-18为试验菌株,具有作为酸奶发酵剂的可能性。     

高产醋酸的醋酸菌筛选及菌种鉴定

以腐烂的水果为筛选样品,经过纯化培养、定性试验,从中筛选出12株醋酸菌,经过产酸量、遗传稳定性的测定,确定1株醋酸产量高而且遗传性能稳定的醋酸菌Gra9,经过优化培养,其产酸量最高达33.28 g/L。对该菌株进行生理生化特征试验、16S rDNA鉴定,确定其为葡糖杆菌属(Gluconobacter)中的弗氏葡糖杆菌(Gluconobacter frateurii)。     

固定化醋酸杆菌发酵条件的研究

以海藻酸钠为载体,采用包埋法固定化醋酸杆菌,利用固定化醋酸杆菌进行醋酸发酵,寻求其最优工艺参数。在单因素试验的基础上,确定接种量、起始乙醇体积分数和发酵温度为主要影响因素,采用响应面法的Box-Behnken试验设计对发酵条件进行优化。建立产酸量与影响因子的多元二次回归方程,得到固定化醋酸杆菌进行醋酸发酵的最佳条件为:接种量7.88g/100mL,起始乙醇体积分数4.63%,发酵温度32℃,在此条件下,产酸量的理论值为3.56g/100mL。对最佳发酵条件进行实验验证,结果产酸量为3.51g/100mL,与模型预测基本相符。因此,利用响应面分析方法得到的固定化醋酸杆菌发酵条件参数可靠,具有实用参考价值。     

固定化醋酸杆菌发酵特性的研究

采用海藻酸钠包埋法制备固定化醋酸杆菌。摇瓶实验的产酸速率可达0.82克醋酸/升·时。连续14批次的发酵实验表明,固定化细胞活性稳定,凝胶颗粒强度无变化,适于连续化生产。用2～4％海藻酸钠固定的醋酸杆菌,在使用过程中,存在明显的细胞泄漏现象,高产酸速率是固定化细胞和游离细胞共同作用的结果。在本实验条件下,总产酸速率与固定化细胞的投入量成正比。用改变凝胶颗粒直径和改变包埋的细胞浓度的方法考察了固定化醋酸杆菌发酵过程中的内扩散效应,减小颗粒直径可提高包埋法制备的固定化细胞的表观活性。     

山西老陈醋发酵过程中高产蛋白酶芽孢杆菌的筛选与鉴定

以山西老陈醋发酵过程中不同发酵天数的酒醪和醋醅为样品,采用水解圈法和林酚法筛选高产蛋白酶的芽孢杆菌。得到一株产中性蛋白酶和酸性蛋白酶能力相对较高菌株CD92-3,其中性蛋白酶活力达到914.22U/mL,酸性蛋白酶活力达到92.11U/mL。环境耐受性分析表明:该菌株能耐受老陈醋发酵环境中乙醇浓度、pH及温度。通过形态学观察、生理生化试验及16S rDNA鉴定,菌株CD92-3初步确定为Bacillus siamens。     

传统发酵豆瓣酱中益生芽孢杆菌的分离筛选与初步鉴定

以临江寺未发酵成熟的豆瓣酱为研究对象,对豆瓣酱中的益生芽孢杆菌进行分离纯化,筛选出产香能力强,发酵所产风味物质种类多,相对含量多的菌株X1为目的菌株,最后通过对菌株形态及生理生化鉴定,初步确定该菌株为枯草芽孢杆菌.     

纳豆芽孢杆菌的筛选与鉴定

纳豆是大豆经纳豆芽孢杆菌发酵制成的-种药食兼用的传统食品.本文以市售纳豆为原料,利用目标纳豆芽孢杆菌所应具有耐热性、显著的蛋白酶活性等生物学特性,筛选得到一株菌株.根据菌落形态和糖发酵、过氧化氢酶等生理生化试验,初步鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).实验表明,此株菌株具有产γ-聚谷氨酸(γ-PGA)、产纳豆激酶的生理特性,从而证实了该菌株确实为纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto).