痰嗜酸粒细胞在支气管哮喘气道炎症中作用的研究进展

痰嗜酸粒细胞(EOS)作为支气管哮喘的炎症效应细胞,与哮喘患者气道炎症、气道重构密切相关,在哮喘发病机制中起重要作用。痰EOS作为评价哮喘治疗效果的重要指标,具有评价治疗反应性、预测哮喘再次发作风险以及提示预后等作用。连续动态监测痰EOS计数,有助于评估哮喘治疗的反应性和充分性,将其作为气道炎症标志物的哮喘管理模式在哮喘临床管理中具有一定的参考价值。由于不同哮喘患者存在气道炎症表型差异,明确表型并分别给予精准治疗方案,可优化哮喘治疗的管理方法。目前,抗白细胞介素-5治疗支气管哮喘已显示出一定的功效,针对哮喘气道EOS炎症靶向药物的治疗已得到肯定,靶向药物为未来哮喘的治疗提供了更多可能性。     

慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞性炎症及气道高反应性的影响

目的探讨慢性烟曲霉暴露对哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的募集活化及气道反应性的影响。方法使用卵白蛋白腹腔注射后雾化吸入法制备Wistar大鼠哮喘模型,采用雾化吸入孢子悬液的方式模拟慢性烟曲霉暴露,并设置相应的生理盐水对照组。测定反映大鼠气道反应性的指标Penh值,ELISA法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中自细胞介素5（IL-5）、嗜酸粒细胞趋化因子（Eotaxin）浓度,肺组织切片HE染色观察气道炎症性病理改变,测定嗜酸粒细胞浸润程度。瑞士姬姆萨复合染色计数BALF中嗜酸粒细胞比例。结果烟曲霉可引起哮喘大鼠气道反应性升高及气道嗜酸粒细胞增多,加重哮喘大鼠气道过敏性炎症。烟曲霉暴露组中气道嗜酸性细胞增加与IL-5、Eotaxin水平升高相一致。但烟曲霉对生理盐水对照组大鼠的气道反应性、嗜酸粒细胞及IL-5、Eotaxin水平改变无显著作用。结论烟曲霉孢子雾化吸入可促进IL-5、Eotaxin的生成从而加重哮喘大鼠气道的嗜酸粒细胞性炎症,并可加重气道高反应性。     

嗜酸粒细胞性支气管炎与咳嗽变异性哮喘患者的气道炎症特征

目的研究嗜酸粒细胞性支气管炎以及咳嗽变异性哮喘患者气道炎性细胞因子以及炎性介质的特性,明确二者的不同气道炎症特性的潜在机理.方法 EB组16例患者,CVA组16例患者、哮喘组15例患者以及对照组15名正常体检者,检测这4组人员诱导痰中的嗜酸粒细胞即EOS比例;流式检测IL-5和γ-IFN刺激的EOS表面CD69蛋白的表达;ELISA法检测各组患者诱导痰上清液中PGE2、LTC4的蛋白表达量.结果 EB组、CVA组、哮喘组患者诱导痰中EOS表面CD69蛋白的表达量差异不具统计学意义,与对照组相比具有统计学意义(P<0.05).EB组与对照组、CVA组、哮喘组患者诱导痰中PGE2浓度比较差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,CVA组患者、EB患者以及哮喘组患者的诱导痰中LTC4浓度显著增高(P<0.05),EB组患者的LTC4的蛋白表达量和CVA组患者以及哮喘组患者差异有统计学意义(P<0.05).结论 EB组患者的诱导痰中PGE2的表达水平增高,CVA组患者的LTC4/PGE2比值与EB组患者相比也是明显升高,推测这2个因素是EB缺乏气道反应性的潜在炎症基础.     

不伴有气道高反应性的过敏性气道炎症

目的　探讨在SD大鼠过敏性气道炎症情况下气道阻力及气道对乙酰胆碱的反应性变化情况。方法　用卵清蛋白(OA)免疫和激发SD大鼠。以气道阻力较基线值升高 2 0 0 %时所需乙酰胆碱的负对数浓度 (-LogPC2 0 0 )为标准检测气道反应性。结果　①哮喘组气道阻力基线值较对照组明显升高 (从 2 2 82± 0 12 8到 3 193± 0 2 39,P <0 0 1)。②反复OA激发后气道对乙酰胆碱的反应性明显降低 (-LogPC2 0 0 从 4 0 0 6± 0 5 5 4到 2 0 5 9± 0 2 6 2 ,P <0 0 1)。支气管肺泡灌洗液 (BALF)和肺组织病理切片均证实过敏性气道炎症存在。结论　本研究证实反复过敏原激发后支气管收缩反应和气道高反应性不存在相关性 ,同时提示反复OA激发后虽然出现过敏性气道炎症 ,但气道反应性降低伴持续支气管收缩反应。     

探讨过敏性哮喘中Eotaxin致气道炎症的机制

目的　探讨过敏性哮喘中嗜酸粒细胞趋化因子Eotaxin致气道炎症的机制 .方法　将豚鼠 4 0只随机分为哮喘组和对照组 ,卵蛋白致敏及诱发过敏性哮喘 . 1收集支气管肺泡灌洗液 (BAL F) ,观察细胞总数 (TC)及嗜酸粒细胞(Eos)、巨噬细胞 (AM)、淋巴细胞 (L)、中性粒细胞 (N)比例变化 ;2豚鼠肺组织病理标本经 HE染色 ,观察病理学改变 ;3采用原位分子杂交技术观察肺组织中 Eotaxin m RNA的表达 ;4采用 Northern blot方法观察肺组织中 Eotaxin m RNA表达情况 .结果　过敏性哮喘豚鼠 BAL F中 TC,Eos比例较对照组明显升高 (P<0 .0 1) ,AM比例显著下降 (P<0 .0 1) ,L和 N比例与对照组相差不明显 (P>0 .0 5 ) .哮喘豚鼠肺组织中可见气道炎症反应及 Eos和 L粘膜下浸润 .支气管粘膜、粘膜下层及周围肺组织中 Eotaxin m RNA阳性细胞表达率(198± 4 6 ) mm- 2较对照组 (16± 8) mm- 2明显增加 (P<0 .0 1) .Nortthern blot杂交可见哮喘组表达 Eotaxin m RNA较对照组明显升高 .结论　过敏性哮喘中 Eotaxin基因表达明显增强 ,同时伴有 Eos肺内募集及激活 ,进而导致气道炎症而诱发哮喘     

促嗜酸性粒细胞炎症的细胞因子与支气管哮喘

近年来 ,随着医学科学的发展 ,尤其是分子免疫学研究的进展 ,研究者认识到支气管哮喘的本质是一种慢性变态反应气道炎症 ,涉及多种细胞的相互作用。其中嗜酸性粒细胞浸润是其气道病理改变的主要特征 ,成为哮喘发病机制中的中心环节。因此 ,对嗜酸性粒细胞聚集、粘附、激活、调控等有关的细胞因子 ,在哮喘发生发展中发挥关键作用。促嗜酸性粒细胞炎症的细胞因子正日益受到重视 ,本文就近年来有关研究作一综述。1　白介素 5 (ＩＬ 5 )　　ＩＬ 5是一种嗜酸性粒细胞分化因子。分子量为 18ＫＤ ,主要来源于活化的ＣＤ4Ｔ淋巴细胞 (ＴＨ2 ) ,哮…     

过敏性肺嗜酸粒细胞增多性浸润1例

患者 ,男 ,4 4岁。因乏力、食欲不振、巩膜黄染30日 ,胸闷、气短、咳嗽 13日入院。入院前 2 8日曾在某医院 ,经肝功、肝炎系列等辅助检查确诊为乙型病毒性肝炎。给以肝复肽 80ｍｇ/ｄ ,头孢拉定 5 .0ｇ/ｄ ,静脉滴注 15日 ,巩膜黄染消退 ,肝功好转。但患者随之出现胸闷、憋气、干咳 ,呈进行性加重。听诊双下肺散在水泡音 ,曾诊断为支气管肺炎。改头孢拉定为头孢三嗪 2 0ｇ ,每日两次静点 3日 ,病情仍不见好转 ,肺内水泡音增多。白细胞计数 9.98× 10 9/Ｌ ,嗜酸粒细胞计数 0 .61× 10 9/Ｌ ,肺ＣＴ示双肺双泛高度渗出性阴影 ,呈融合状态 ,…     

麻黄雾化液对过敏性哮喘大鼠气道嗜酸粒细胞的影响

目的观察麻黄雾化液吸入对过敏性哮喘大鼠肺泡灌洗液（BALF）中嗜酸粒细胞（EOS）含量的影响。方法以卵蛋白（OVA）致敏并吸入激发法制备大鼠哮喘模型,在激发前予麻黄液雾化吸入治疗,连续7天治疗后处死大鼠并收集BALF,光镜下行EOS计数。结果与正常对照组比较,模型组大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显升高（P〈0．01）,麻黄液雾化吸入治疗后大鼠BALF中自细胞总数和EOS计数明显下降（P〈0．01）。结论麻黄液雾化吸入能够降低BALF中EOS含量,减轻哮喘动物模型气道炎性细胞的聚集,抑制炎症反应。     

吸入嗜酸性粒细胞成分溶液对豚鼠气道反应性的影响

从多粘菌素Ｂ处理珠豚鼠腹腔渗出液中，分离嗜酸性粒细胞用超声粉碎仪破坏细胞，离心后收集含Ｅｏ２成分的上清液，给豚鼠经气管插管雾化入，６０ｍｉｎ后豚鼠对组胺的气道反应性ＰＣ２０值显著降低。Ｅｏｓ成分吸入处理组和正常对照组支气管肺泡灌洗液中的细胞总数、Ｅｏｓ绝对计数差异均无显著意义。     

嗜酸性粒细胞在哮喘发病机制中的研究进展

随着工业化的广泛开展,支气管哮喘已逐渐成为大多数工业化国家的主要疾病。哮喘是一种肺部慢性、复杂的炎症性疾病,导致喘息、胸闷、咳嗽和气促等症状反复发作。其炎症反应主要表现为气道中大量炎性细胞浸润,其中最主要的是嗜酸性粒细胞浸润及其导致的气道高反应     

大鼠过敏性鼻炎模型建立及应用

目的：建立一种能简单而又客观反映过敏性鼻炎临床症状及评价药效的动物模型。方法：采用卵白蛋白对大鼠的全身致射和局部攻击的方式制作过敏性鼻炎模型,通过PCA反应测定IgE抗体效价,证实是否被致敏。结果：过敏性鼻炎的打喷嚏数、搔鼻次数在抗原致敏第14d开始明显增加,同时血中IgE抗体效价明显上升。酮替芬和阿司咪唑可分别浓度依赖,并显著地减少由抗原攻击引起的打喷嚏数和搔鼻次数。证明酮替芬和阿司咪唑均可明显抑制过敏性鼻炎症状。结论：该模型适合于评价和筛选治疗I型过敏性鼻炎的药物。     

不同通气方式对机械通气引起急性肺损伤兔模型的影响

目的：通过表面活性物质缺乏的兔肺模型,评估传统通气模式（ｃｏｎｖｅｎｔｉｏｎａｌ ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ ｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ,ＣＭＶ）与允许性高碳酸血症加最佳ＰＥＥＰ（ｐｅｒｍｉｓｓｉｖｅ ｈｙｐｅｒｃａｐｎｉａａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈｉｄｅａｌＰＥＥＰｖｅｎｔｉｌａｔｉｏｎ,ＰＨＹ＋ ＰＥＥＰｉ）的通气模式对肺损伤的影响,了解肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒα,ＴＮＦα） 与机械通气引起肺损伤（ｖｅｎｔｉｌａｔｏｒｉｎｄｕｃｅｄｌｕｎｇｉｎｊｕｒｙ,ＶＩＬＩ） 的关系。方法：１２ 只成年兔,以反复肺灌洗法制备表面活性物质缺乏兔肺模型。以ＣＭＶ（Ｃ组） 或ＰＨＹ＋ ＰＥＥＰｉ （Ｐ 组） 通气４ ｈ 后,测定通气前、后的支气管肺泡灌洗液（ｂｒｏｎｃｈｏａｌｖｅｏｌａｒ ｌａｖａｇｅ ｆｌｕｉｄ,ＢＡＬＦ）中ＴＮＦα含量和白细胞分类计数,测定肺水量,进行动脉血气分析和病理检查。结果：ＣＭＶ 组表现为明显的低氧血症,ＢＡＬＦ中较多的中性粒细胞数,总肺水量及血管外肺水量明显增多,肺内病理改变为较明显透明膜形成及炎性细胞聚集;而ＰＨＹ＋ ＰＥＥＰｉ 组引起较少的上述病理、生理变化。且ＣＭＶ 组ＢＡＬ     

电针背三针对哮喘大鼠气道重塑模型TGF－β1／Smad3信号通路的调控

【目的】观察电针背三针（双侧大杼、风门、肺俞）对哮喘大鼠气道重塑模型转化生长因子β1（TGF－β1）和Smad3蛋白及mRNA表达的影响,探讨电针背三针治疗哮喘的作用和分子机制。【方法】采用卵蛋白雾化法复制哮喘模型,在激发哮喘6周后处死,采用图像分析法测量大鼠气道形态学参数,免疫组织化学染色法检测支气管肺组织TGF－β1、 Smad3的蛋白表达,采用实时荧光定量PCR （qRT－PCR）检测TGF－β1、 Smad3 mRNA表达水平。【结果】与空白组比较,模型组大鼠平滑肌横断面的标化后面积（WAm／Pbm）、支气管内管壁横断面标化后面积（WAi／Pbm）,支气管肺组织TGF－β1、 Smad3蛋白及mRNA表达水平均显著升高;与模型组比较,电针组各指标均显著降低,差异均有统计学意义（P＜0．05）。【结论】电针背三针对气道重塑的作用可能与其对TGF－β1／Smad3信号通路的调控有关。     

过敏性哮喘动物模型在致敏、哮喘发作和气道高反应性等方面的应用研究

过敏性哮喘的发病率呈上升趋势。使用了几十年的主要治疗药物肾上腺糖皮质激素副作用较大,因此发现好的预防和治疗方法成为迫切要解决的问题。动物模型是研究人类疾病的重要手段,但不少疑难病的发病机理不明确,因而制备的动物模型和人类疾病的相似度有差异。但Ⅰ型变态反应作为过敏性哮喘的发病机理是比较明确的,据此制备的动物模型和人类的哮喘就有很高的相近度,结果的可信度就较高。本文回顾了哮喘动物模型制备的基本方法和某些重要的细节。着重讨论了当今最常用的气道高反应性模型的优劣。如果综合运用不同特点的模型尤其是能观察记录哮喘发作全过程包括速发和迟发反应的模型,将可以更直接地探索哮喘发病过程和治疗药物。对气道重塑及基因敲除和转基因技术在动物模型中的研究和使用也做了一般性论述。动物模型将是一个有力的工具为最后有效地预防和治疗过敏性哮喘找到突破口。     

针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌胰岛素受体底物和葡萄糖转运蛋白4的影响

【目的】观察针刺对胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌胰岛素受体底物-1（IRS-1）、胰岛素受体底物-2（IRS-2）和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)的影响。【方法】将32只SD大鼠随机分成正常组、正常针刺组、模型组和模型针刺组,采用葡萄糖氧化酶法、酶联免疫吸附法（ELISA）、实时荧光定量PCR等方法,检测并比较各组大鼠空腹血糖(FPG),血浆胰岛素(FINS),胰岛素敏感性指数(ISI),血清C-肽(C-P),骨骼肌IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达。【结果】模型组大鼠的FPG、 FINS、C-P水平较正常组显著升高（P＜0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较正常组显著降低(P＜0.01);模型针刺组的FPG、 FINS、 C-P水平较模型组显著降低（P＜0.05或P＜0.01), ISI, IRS-1、 IRS-2、 GLUT4 mRNA表达较模型组显著升高(P＜0.01)。【结论】针刺可能在基因转录水平对IRS-1、 IRS-2、 GLUT4产生影响,从而改善PI3K通路的信号转导。     

交泰丸对睡眠剥夺大鼠下丘脑Orexin A及γ-氨基丁酸的影响

【目的】观察交泰丸对快速动眼（REM）睡眠剥夺大鼠下丘脑神经递质Orexin A及γ-氨基丁酸（GABA）的影响。【方法】采用水环境小平台法制备大鼠睡眠剥夺模型,将造模成功的大鼠随机分为6组,即交泰丸高、中、低剂量组（剂量分别为18.6、9.3、4.6 g/kg）,地西泮组（剂量为3 mg/kg）、模型组及正常组,采用酶标仪吸光度法检测大鼠下丘脑促觉醒神经递质Orexin A,高效液相法库伦电化学检测大鼠下丘脑促睡眠神经递质GABA。【结果】与正常组比较,模型组大鼠完全处于失眠状态,其下丘脑Orexin A含量显著升高（ P<0.05）;与模型组比较,交泰丸高、中、低剂量组失眠状态有明显改善, Orexin A含量显著降低（P<0.05）;与模型组比较,交泰丸高、中、低剂量组GABA含量无显著变化（P＞0.05）。【结论】交泰丸的镇静催眠作用可能是通过抑制大鼠下丘脑促觉醒神经递质Orexin A实现的。     

慢性经耳电点燃癫痫对大鼠穿梭箱被动回避反应的记忆保持能力的作用

目的：探讨慢性经耳电点燃癫痫对大鼠穿梭箱被动回避反应的记忆保持能力的影响。方法：大鼠每24h一次经双耳夹给予亚惊厥剂量电刺激（40mA，0．2S）诱发电点燃大发作癫痫，然后利用穿梭箱系统检测大鼠的被动回避反应的记忆保持能力，HE染色法观察海马神经元的病理变化，高效液相色谱分析法检测海马中组胺、γ-氨基丁酸、谷氨酸的含量变化。结果：所有大鼠在连续刺激7～10d后均完全点燃。慢性经耳电点燃癫痫的穿梭箱被动回避反应的记忆保持能力明显下降，海马CA1神经元发生退行性变化，海马内组胺含量下降。结论：慢性经耳电点燃癫痫可导致大鼠被动回避反应记忆保持能力下降，可能与癫痫造成的海马CA1神经元变性及海马内组胺能神经活性降低有关。     

卡介苗联合脂多糖诱发大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型的构建

目的：联合卡介苗（BCG）和脂多糖（LPS）构建大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型，用于护肝药物的初步筛选。方法：预注BCG 12d的大鼠制备原代肝细胞，用10mg/L LPS诱发肝细胞损伤。用联苯双酯（DDB）、马洛替酯（MLT）、水飞蓟宾（SB）和甘利欣（GRZ）进行防护，同法进行整体动物实验，以论证该模型的适用性和可靠性。测定血清和上清液中AST、LDH和一氧化氮（NO）；计算肝脾指数；进行肝脏病理检查。结果：体外实验中，BCG＋LPS组上清液AST、LDH和NO明显高于正常对照组（P＜0.01)，且呈时间依赖性增加，12h达稳态。DDB、MLT、SB和GRZ均可明显抑制12h的AST、LDH和NO。整体实验中，BCG和LPS处理6h后血清AST、NO及肝脾指数明显高于正常对照组（P＜0.01)，LDH增加但无统计学差异（P＞0.05)；肝脏病理损伤明显。DDB、MLT、SB和GRZ对上述指标和病理损伤均有不同程度抑制作用。结论：BCG联合LPS诱发的大鼠原代培养肝细胞免疫性损伤模型可望用于护肝药物活性的初步筛选。     

秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎大鼠肠黏膜细胞因子的影响

目的研究秦皮甲素对实验性溃疡性结肠炎（ulcerative colitis, UC）大鼠肠黏膜的保护作用及其机制。方法选用40只SPF级SD大鼠随机分为正常组、模型组、柳氮磺胺吡啶组（SASP组）和秦皮甲素组（EH组）,每组10只。模型组、SASP组和EH组均采用三硝基苯磺酸（TNBS,剂量为100 mg／kg）灌肠法复制大鼠UC模型, SASP组和EH组分别灌胃给予SASP (剂量为600 mg／kg）和秦皮甲素(剂量为100 mg／kg）进行治疗。治疗结束后,采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测各组大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-10（IL-10）的水平。比较各组大鼠一般状态、肠黏膜损伤情况和血清TNF-α、 IL-10水平。结果秦皮甲素能显著改善UC大鼠的一般状态,显著缓解其结肠组织炎症。模型组大鼠结肠黏膜疾病活动指数（DAI）评分和组织学损伤指数（TDI）评分较正常组显著增高(P<0.01),各给药组DAI评分和TDI评分较模型组显著降低（P<0.01）。模型组大鼠血清中TNF-α水平显著升高, IL-10水平显著降低（均P<0.01）。与模型组比较, SASP组和EH组TNF-α水平显著降低, IL-10水平显著增高（均P<0.01）。结论秦皮甲素对TNBS诱导的大鼠UC有良好的治疗作用,其作用可能是通过抑制TNF-α分泌,上调IL-10表达,改善肠道免疫平衡紊乱而实现的。     

胃痞消对胃癌前病变大鼠胃黏膜组织病理学的影响

【目的】观察健脾化瘀解毒复方胃痞消对胃癌前病变(gastric precancerous lesions,GPL)大鼠胃黏膜组织病理学的影响。【方法】将SD大鼠随机分为正常组,模型组,维酶素组(剂量为0.2 g·kg-1·d-1),胃痞消高、中、低剂量组(剂量分别为15、7.5、3.75 g·kg-1·d-1)。采用N-甲基-N’-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)饮用液自由饮用、饥饱失常、耗气泻下法复制GPL大鼠模型,连续18周。从第9周起,给药组按上述剂量连续灌胃给药共10周,观察胃痞消治疗后大鼠胃黏膜上皮的病理学改变。【结果】模型组大鼠胃黏膜肠上皮化生及异型增生的病理积分均较正常组显著升高(P0.01);胃痞消各剂量组病理学改变均有不同程度改善,并以胃痞消低剂量组作用为佳(P0.05或P0.01)。【结论】胃痞消可以从一定程度上阻断和逆转GPL大鼠胃黏膜肠上皮化生及异型增生病变,低剂量胃痞消防治胃癌前病变的远期疗效更佳。