荧光实时定量RT-PCR在口腔鳞癌细胞角蛋白19表达研究中的应用

目的探讨荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）在口腔鳞癌组织中细胞角蛋白19（CK19）相对表达量研究中的应用。方法用CK19mRNA的荧光定量RT—PCR检测31例口腔鳞癌患者的癌组织和癌旁组织，用2^-△△Ct公式计算癌组织相对癌旁组织CK19mRNA相对表达的倍数。结果口腔鳞癌癌组织CK19mRNA水平是癌旁组织的2．21倍，扩增片段特异，CK19mRNA水平与病理分化程度相关，分化越差，水平越高。结论荧光实时定量RT—PCR在口腔鳞癌组织CK19相对表达量研究中具有一定的临床价值。     

口腔鳞癌患者唾液cyfra 21-1含量与癌组织CK19表达的相关性研究

目的：检测口腔鳞癌患者唾液中cyfra21-1含量、组织中CK19蛋白质表达和基因转录水平,探讨其相互关系。方法：对30例口腔鳞癌患者和30例正常人的唾液采用ELISA法检测cyfra21-1含量,其中6例口腔鳞癌患者的癌组织和癌旁组织分别采用免疫组织化学和实时定量RT-PCR法检测CK19蛋白质表达强度和CK19mRNA水平,采用SPSS10.0软件包进行统计学分析。结果：口腔鳞癌患者唾液cyfra21-1含量为（85.95±78.00）μg/L,显著高于对照组的（42.27±40.84）μg/L;口腔鳞癌癌组织CK19蛋白质表达强度和CK19mRNA水平显著高于癌旁组织。CK19mRNA水平与CK19蛋白质表达强度呈显著正相关,癌组织CK19蛋白质与唾液cyfra21-1含量也显著相关。结论：口腔鳞癌患者唾液cyfra21-1含量和组织CK19蛋白表达及基因转录水平显著升高,组织CK19表达升高,对唾液cyfra21-1含量的上升起着重要作用。     

口腔鳞癌组织CK17蛋白与mRNA水平的表达及其临床意义

目的：探讨口腔鳞癌组织标本中细胞角蛋白17（cytokeratin 17,CKl7）的蛋白与基因水平的表达及其临床意义。方法：在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本中,分别采用免疫组织化学和荧光实时定量RT—PCR方法,检测CKl7的蛋白表达和mRNA水平,并与各临床病理指标进行统计学分析,采用SPSSIO．0软件包对数据结果进行统计分析。结果：口腔鳞癌组织标本中CKl7蛋白和mRNA表达水平均显著高于癌旁组织（P〈0．01）。CKl7的表达水平与烟酒嗜好、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理分化程度无显著相关性。结论：口腔鳞癌组织中CKl7蛋白质和mRNA表达上升,提示其与肿瘤的发生、发展具有一定关系。     

口腔鳞癌组织中Galectin-1表达及其临床意义

目的:探讨口腔鳞癌组织中半乳糖凝集素1(Galectin-1)基因与蛋白质的表达水平及其临床意义。方法:分别采用荧光实时定量RT-PCR和免疫组织化学方法,检测Galectin-1在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织中mRNA和蛋白质表达水平,其表达水平与临床病理指标之间的关系采用SPSS10.0软件包进行统计分析。结果:口腔鳞癌组织中Galectin-1 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于癌旁组织(P<0.01)。Galectin-1的表达水平与烟酒嗜好、肿瘤大小、淋巴结转移、临床分期、病理分化程度无显著相关性。结论:在口腔鳞癌组织中Galectin-1 mRNA和蛋白质表达上升,可能与肿瘤的发生、发展有关。     

BTG1在78例口腔鳞癌中的表达及临床意义

目的:探讨B细胞易位基因1(BTG1)在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义.方法:采用免疫组织化学染色检测78例口腔鳞癌组织、78例癌旁组织、20例正常口腔黏膜组织及80例颈淋巴结中BTG1蛋白的表达水平;使用蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR分别检测78例口腔鳞癌组织及癌旁组织中BTG1蛋白及mRNA的表达水平.采用SP...     

Lasp1 mRNA和蛋白在口腔鳞癌组织中表达上升及其临床意义

目的：探讨Lasp1基因与蛋白质水平在口腔鳞状细胞癌（OSCC）组织标本中的表达及其临床意义。方法：分别采用荧光实时定量RT-PCR和免疫组织化学方法,检测Lasp1在30例口腔鳞癌患者的癌组织及癌旁组织标本中mRNA和蛋白质表达水平,其表达水平与临床病理指标之间的关系采用SPSS10.0软件包进行统计分析。结果：口腔鳞癌组织标本中Lasp1 mRNA和蛋白质表达水平均显著高于癌旁组织（P〈0.01）。Lasp1蛋白在临床晚期、淋巴结转移阳性病例中表达明显升高,与烟酒嗜好、肿瘤大小及肿瘤分化程度无关。结论：Lasp1在口腔鳞状细胞癌中表达上调,可能与肿瘤的发生、发展和淋巴结转移有关,可以作为一个潜在的生物标志物和治疗的靶标。     

闭锁小带蛋白-1基因在口腔疣状癌和口腔鳞癌中的转录水平分析

目的:研究闭锁小带蛋白-1(zonula occluden-1,ZO-1)在口腔疣状癌和口腔鳞癌中的表达,分析ZO-1相关的上皮间充质转化过程参与口腔癌发生发展的情况。方法:取20例口腔鳞癌及其癌旁组织,10例口腔疣状癌组织及10例正常口腔黏膜组织标本,荧光实时定量Real-time PCR方法检测ZO-1基因mRNA在不同组织中的表达。结果:口腔疣状癌与鳞癌组织中ZO-1基因mRNA的表达低于正常口腔黏膜上皮组织与癌旁组织(P<0.05);口腔疣状癌中ZO-1基因mRNA的表达高于鳞癌(P<0.05)。结论:ZO-1作为上皮间充质转化过程中的关键蛋白,其在口腔疣状癌与鳞癌中表达水平的差异,表明口腔鳞癌与口腔疣状癌中存在不同程度的上皮间充质转化现象。     

实时定量PCR分析脂肪酸合酶在口腔鳞癌中的表达

目的利用实时定量PCR(RT-PCR)相对定量脂肪酸合酶(FAS)在口腔鳞癌、癌周以及正常口腔组织中的表达情况。方法切取口腔鳞癌患者新鲜手术标本的癌组织、癌周组织及正常组织,将组织切剪成碎块,提取细胞总RNA,经寡聚脱氧胸腺嘧啶逆转录,实时定量PCR扩增,针对内参照GAPDH基因相对定量FAS的表达,比较FAS在3种组织中的表达。结果 FAS在癌组织中高表达,19例患者癌组织中的FAS mRNA表达水平皆高于正常组织,最高达16倍Go<0．001)。13例癌旁组织表达水平较正常组织高Go<0．001)。结论 口腔鳞癌组织和正常组织中的FAS表达有显著差异。实时定量PCR方法简便、快速、高效,并能相对定量内源性脂肪酸合酶在口腔鳞癌组织中的表达。     

S100A4基因与口腔鳞癌相关性分析

目的：研究S100A4mRNA表达与口腔鳞癌分化、转移关系。方法：分别提取40例口腔鳞癌组织及远端正常口腔黏膜组织的RNA,用半定量逆转录一聚合酶链反应（RT—PCR）法测定S100A4基因在口腔鳞癌和配对组织mRNA水平的差异表达情况。并结合临床资料,对S100A4基因差异表达与口腔鳞癌病人临床病理参数进行相关性分析。结果：S100A4mRNA在口腔鳞癌中高表达,与癌旁正常口腔黏膜组织比较,具有显著性差异（P〈0．01）。S100A4mRNA的表达水平与口腔鳞癌的分化、淋巴结转移成负相关。S100A4mRNA与患者的性别、年龄、肿瘤大小无关。结论：S100A4基因表达和口腔鳞癌的发生发展、分化、侵袭转移密切关}S100A4mRNA可作为判定口腔鳞癌恶性程度及评价预后的重要指标,也可作为新的生物标志物及治疗口腔鳞癌浸润转移的潜在靶目标。     

细胞角蛋白19mRNA在口腔鳞状细胞癌中表达的研究

目的探讨口腔鳞状细胞癌（OSCC）患者癌组织中细胞角蛋白（CK）19 mRNA的变化和其发生的可能机制以及CK19 mRNA检测的临床应用价值。方法收集未接受过放疗和化疗的20例OSCC患者的手术标本（包括癌组织20块、癌旁组织20块和颈清扫的淋巴结43枚）,采用荧光定量聚合酶链式反应（FQ-PCR）法检测组织内CK19 mRNA的表达,比较CK19 mRNA在上述组织中的相对表达量。结果CK19 mRNA在OSCC癌组织内表达比其在正常口腔黏膜内表达高1.85倍,比其在癌旁组织内表达高1.66倍。9例患者颈清扫淋巴结内CK19 mRNA表达阳性,阳性率为45%（9/20）,而9例患者的22枚淋巴结中CK19 mRNA表达阳性率是81.8%（18/22）,占20例患者43枚淋巴结的41.9%（18/43）。淋巴结CK19 mRNA阳性患者的癌组织与癌旁组织和正常口腔黏膜的表达量比CK19 mRNA阴性患者低。结论CK19 mRNA在OSCC癌组织中的表达高于其在癌旁组织和正常口腔黏膜内的表达,可能是由于癌组织中CK19的合成明显增加所致。淋巴结中CK19 mRNA的表达可以作为检测OSCC淋巴结微转移的指标之一,运用FQPCR法检测淋巴结中CK19 mRNA的表达来检测OSCC的淋巴结微转移比普通病理法检测更灵敏。     

Increased Cyfra 21-1 concentration in saliva from primary oral squamous cell carcinoma patients

BACKGROUND: Saliva is the body fluid in the oral cavity and contacts directly with oral mucosa. As a detective media, it is acceptable and non-traumatic. Cyfra 21-1, being the soluble fragment of cytokeratin 19(CK19), correlates well with oral squamous cell carcinoma (OSCC). OBJECTIVE: To investigate the saliva Cyfra 21-1 concentrations in OSCC patients and healthy persons, and the correlation between the Cyfra 21-1 concentration in saliva and the CK19 expression in tissue from OSCC patients. DESIGN: Saliva Cyfra 21-1 concentration was detected by ELISA in 30 OSCC patients and 30 healthy persons; CK19 protein expression and CK19 mRNA level were, respectively, detected by immunohistochemistry and fluorescent real-time RT-PCR in cancerous and paracancerous tissues from 33 OSCC patients. RESULTS: Saliva Cyfra 21-1 concentration in OSCC patients (85.95+/-78.00 microg/L) was significantly higher than that in healthy persons (42.27+/-40.84 microg/L) (P=0.009); it was also significantly higher in the patients suffering later tumour recurrence (130.95+/-66.38 microg/L) than that in the patients without tumour recurrence (74.84+/-63.45 microg/L) (P=0.023). CK19 protein expression increased significantly in OSCC tissues (P<0.001) with positive rate of 90.9%, CK19 mRNA level in cancerous tissues was 2.21 folds higher than that in paracancerous tissues (P=0.020); significant correlation was found between tissue CK19 protein expression and tissue CK19 mRNA level (P=0.003), and great correlation was found between tissue CK19 protein expression and saliva Cyfra 21-1 concentration (P=0.051). CONCLUSIONS: The increased CK19 expression in OSCC tissues plays an important role in the increase of saliva Cyfra 21-1 concentration. Potential clinical value of saliva Cyfra 21-1 detection is suggested for OSCC. Further studies are encouraged to reveal the real diagnostic and prognostic value of detecting saliva Cyfra 21-1 concentration for OSCC.     

Livin基因及其蛋白在人口腔鳞癌中的表达

目的：探讨凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein，IAP）家族的新成员Livinct和Livinβ及其基因在人口腔鳞癌组织中的表达及意义。方法：采用反转录聚合酶链反应法（RT-PCR）检测20例口腔鳞癌组织、15例口腔软组织囊肿和10例癌旁正常口腔黏膜组织中LivinαmRNA和LivinβmRNA的表达．并用Western印迹检测2种Livin蛋白在3种组织中的表达情况，应用SPSS10．0软件包对结果进行统计学分析。结果：19例口腔鳞癌组织中均有Livina和LivinβmRNA的表达，14例口腔软组织囊肿和10例癌旁正常口腔黏膜组织中均可见Livina或LivinβmRNA的表达．3者表达率无统计学差异，但Livina和LivinβmRNA在口腔鳞癌组织中的表达显著高于口腔软组织囊肿和癌旁正常口腔黏膜组织（P〈0．01），Western印迹检测结果和RT-PCR结果一致。结论：Livin可能在人口腔鳞癌的发生、发展中起着重要作用。     

舌体高分化鳞状细胞癌角蛋白谱的分析

目的:研究口腔舌体高分化鳞状细胞癌角蛋白谱的特点。方法:舌体高分化鳞状细胞癌及正常舌体组织活检标本,提取角蛋白,进行SDS-PAGE电泳和利用免疫印迹(Western-blot)杂交方法对比研究舌体高分化鳞状细胞癌及正常舌体组织中角蛋白谱的表达。结果:舌体高分化鳞状细胞癌中出现了单层上皮角蛋白如CK18、19。结论:舌体高分化鳞状细胞癌变异性表达的CK18、19和CK10的不表达,是舌癌发生演变过程的结果,舌癌角蛋白谱的变化与肿瘤的变化有密切关系,可以作为研究肿瘤生物学特征的重要指标。     

口腔鳞癌与正常黏膜中细胞角蛋白基因13的表达

目的:研究细胞角蛋白基因13(cytokeratin13,CK13)在口腔鳞状细胞癌(oralsquamouscellcarcinoma,OSCC)组织中的表达及意义。方法:用RT-PCR方法检测30例OSCC患者肿瘤组织及其配对的正常黏膜中CK13mRNA的表达,同时用免疫组化方法检测CK13蛋白在OSCC及正常黏膜标本中的表达。所得数据采用Fisher确切概率计算法进行统计学处理。结果:RT-PCR检测结果表明,CK13mRNA在27例OSCC中的表达较其对照黏膜表达下调,平均下调4.2倍;免疫组化染色结果显示,CK13蛋白在正常口腔黏膜与肿瘤组织之间、高分化OSCC与中、低分化OSCC之间的表达差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:在OSCC的发生、发展中,CK13基因的转录和表达水平发生明显变化,可能存在转录后水平的表达调控。CK13在OSCC分类诊断中有应用价值。