兔局限性肝肿瘤模型的建立

肝癌是常见的消化系统肿瘤。近年来,肝癌的介入治疗和微创治疗成为热门的研究课题。由于缺少可移植性的肝癌大动物模型。限制了其实验范围。我们结合国内外文献材料。并在此基础上进行了改进,建立了局限性生长的兔VX2肝癌模型。通过观察种植成功率。肺转移,腹腔转移和生存期等,证实了改良的VX2肝癌模型的可行性和稳定性,从而有效地解决了基础研究的关键环节。为观察肝癌治疗效果的实验研究提供了可靠的实验基础。现报道如下：     

兔肝VX2肿瘤模型的建立及影像学研究现状

VX2肿瘤细胞株是一种可移植的肿瘤细胞株,可接种到兔的肝脏、肾脏等部位,建立原位肿瘤动物模型。兔VX2肝癌模型是目前较常用的实验性动物肝癌模型,本文就兔肝VX2肿瘤模型的建立和影像学表现进行综述。     

超声引导下瘤块注射建立兔VX2肝肿瘤模型

目的研究超声引导下微创建立兔VX2肝肿瘤动物模型的方法，分析兔VX2肝肿瘤超声、CT及血管造影的影像学特征。方法切除植于兔后腿肌肉内的VX2肿瘤组织并剪成0．5mm见方的块状瘤块，在超声引导下，将瘤块直接注射接种于60只新西兰白兔肝左叶，2周后测定兔肝肿瘤接种成功率，观察研究其超声、CT和血管造影的影像学特征。结果兔VX2肝肿瘤接种成功率为95％（57／60）；荷瘤兔平均自然生存时间为（45±8）d。肝肿瘤的超声表现为圆形或类圆形低回声结节，其周边及内部可见较丰富的血流信号；多排螺旋CT平扫肝肿瘤表现为低密度结节影；肝动脉造影显示VX2肝肿瘤富含血管且血管网杂乱，肿瘤显影以周边为主。结论超声引导下穿刺接种制作兔VX2肝肿瘤动物模型操作简便，成功率高，其影像学特征与人原发性肝癌相似。     

兔脊柱VX2移植瘤模型的建立及生物学特性观察

目的探讨兔脊柱VX2移植瘤模型的建立方法及其生物学特性。方法新西兰大白兔25只,分为两组。实验组（20只）采用VX2瘤细胞悬液经横突椎弓根注射法建立兔脊柱VX2移植瘤动物模型,对照组（5只）以生理盐水注射代替VX2瘤细胞悬液进行同样操作。接种后每天观察下肢神经功能变化,接种术后第2周起每周行X线、CT影像学检查肿瘤生长情况。动物出现下肢瘫痪、死亡或接种后6周为观察终点,取出接种椎作组织学检查。结果对照组5只兔观察期内均未出现神经功能障碍,检查未见异常。实验组中1只兔因钻孔破人椎管,退出实验。19只兔成功接种,1只于接种术后9天感染死亡,1只经病理检查证实观察截止时仍无肿瘤生长,其余17只成瘤（89．5％）。观察期内9只出现完全瘫痪,5只不全瘫,其余3只未出现神经功能障碍。结论经横突-椎弓根种植法建立兔脊柱VX2移植瘤模型具有成瘤率高、可重复性好的特点。该模型能较好地模拟脊柱转移癌发展、压迫脊髓导致瘫痪的病理过程,有助于脊拄转移癌各种治疗模式的研究和探索。     

高浓度乙酸注射治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的利用兔VX2肝移植瘤模型探讨高浓度乙酸注射治疗肝肿瘤的价值,并探索注射治疗肝肿瘤的最适乙酸浓度.方法用移植法建立兔VX2肝肿瘤模型,将40只携瘤兔随机分为A、B、C、D四组.术前以CT测量肿瘤直径.开腹向A、B、C、D组肝肿瘤内分别注入50%、75%、100%乙酸和生理盐水,48 h后重复注射一次,术后一周处死兔子取肝脏观测比较各组肿瘤体积改变情况及坏死灶周围新生灶情况,并取肿瘤组织制作石蜡切片(HE染色),镜下观察肿瘤组织坏死情况.结果注射后一周各实验组肿瘤直径均减小,对照组肿瘤直径明显增大.100%乙酸组10例仅1例在坏死灶周围发现新生灶,而50%乙酸组发现5例,75%乙酸组发现7例.镜下显示100%乙酸组肿瘤中未坏死的肿瘤细胞团较75%和50%乙酸组少见.结论高浓度的乙酸对兔VX2肝肿瘤的灭活效果显著;其中100%的乙酸效果最佳.     

高浓度乙酸注射治疗兔VX2肝肿瘤的实验研究

目的 利用兔VX2肝移植瘤模型探讨高浓度乙酸注射治疗肝肿瘤的价值，并探索注射治疗肝肿瘤的最适乙酸浓度。方法 用移植法建立兔VX2肝肿瘤模型，将40只携瘤兔随机分为A、B、C、D四组。术前以CT测量肿瘤直径。开腹向A、B、C、D组肝肿瘤内分别注人50％、75％、100％乙酸和生理盐水，48h后重复注射一次，术后一周处死兔子取肝脏观测比较各组肿瘤体积改变情况及坏死灶周围新生灶情况，并取肿瘤组织制作石蜡切片(HE染色)，镜下观察肿瘤组织坏死情况。结果 注射后一周各实验组肿瘤直径均减小，对照组肿瘤直径明显增大。100％乙酸组10例仅1例在坏死灶周围发现新生灶，而50％乙酸组发现5例，75％乙酸组发现7例。镜下显示100％乙酸组肿瘤中未坏死的肿瘤细胞团较75％和50％乙酸组少见。结论 高浓度的乙酸对兔VX2肝肿瘤的灭活效果显著；其中100％的乙酸效果最佳。     

射频消融治疗兔肝VX2肿瘤后残余肿瘤细胞间信息传导功能的变化

目的　探讨射频消融治疗兔肝VX2肿瘤后残余肿瘤细胞间信息传导功能的变化。方法　用移植的方法建立兔肝VX2肿瘤模型 ,采用射频消融 (RFA)进行治疗 ,并通过控制肿瘤边缘的温度人为造成肿瘤残余。实验动物分为治疗组及对照组 ,治疗组根据活检时间分为 3个时相点 :第 1周、第 2周及第 3周。细胞间信息传导功能的测定采用显微注射荧光染料 (LY)的方法 ,细胞间连接蛋白 (Cx32 )的表达采用免疫组织化学方法检测。结果　Cx32阳性指数及LY扩散范围在治疗后第 1周 [Cx32阳性指数 :( 0 .2 0 3± 0 .0 14 ) ;LY扩散范围 :( 2 2 4.5± 34.6 ) μm ]、2周 [Cx32阳性指数 :( 0 .40 4± 0 .0 6 7) ;LY扩散范围 :( 2 5 7.8± 42 .7) μm]均明显高于对照组 [Cx32阳性指数 :( 0 .10 7± 0 .0 2 4) ;LY扩散范围 :( 137.5± 30 .6 ) μm] ( P <0 .0 1) ,但在第 3周与对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;LY在肿瘤组织内的扩散范围与Cx32阳性指数呈显著正相关 (r =0 .88,P <0 .0 1)。结论　残余肿瘤细胞在RFA治疗后 2周内GJIC功能比治疗前有明显改善 ,其恶性生物学行为可能有所改善。     

兔肝VX2肿瘤射频消融后不同区带VEGF的表达和细胞凋亡

目的分析兔肝VX2肿瘤射频消融(RFA)后不同区带血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达和肿瘤细胞凋亡情况。方法将48只兔肝移植VX2肿瘤,建立动物模型,分为实验组(n=42)和对照组(n=6)。对实验组行RFA,分别在术后即刻、1天、2天、1周、2周、3周各处死7只实验兔,留存肿瘤标本,进行HE染色、VEGF检测、Annexin V-FITC/PI标记和流式细胞仪检测,观察不同时间段、不同区带的VEGF变化及细胞凋亡情况。结果实验组RFA术后针道炭化区、热凝固区和消融边界区平均VEGF值差异均有统计学意义(P均0.05);针道炭化区、热凝固区及边界区术后即刻与其他时间点间两两比较差异均有统计学意义(P均0.05);针道炭化区及热凝固区VEGF在术后即刻达高峰,术后1天~3周呈整体下降趋势,消融边界区VEGF在术后即刻到1周呈上升趋势,2周后下降。术后针道炭化区、热凝固区和消融边界区平均肿瘤细胞凋亡率与对照组比较差异均有统计学意义(P均0.05),各区带细胞凋亡率均在术后1天达高峰,后呈下降趋势。结论 RFA后针道区和热凝固区内肿瘤细胞VEGF下降和肿瘤凋亡显著,而消融交界区仍可能有存活的肿瘤细胞;在RFA后第3周时,残留肿瘤细胞的增殖能力可恢复到术前状态,此时宜进一步采取相应的治疗措施。     

经皮瘤内注射艾迪注射液治疗兔移植性VX2肝肿瘤

目的探讨超声引导下复方中药艾迪注射液瘤内注射治疗兔移植性VX2肝肿瘤的作用效果及机制。方法建立新西兰大白兔移植性肝VX2肿瘤模型28只,随机分为3组,即艾迪注射液组（12只）、无水乙醇组（PEI组,8只）、生理盐水组（8只）。全部动物在接种2周后每隔3天向肿瘤内注入治疗药物,注射4次后处死动物。于术前术后兔耳缘静脉抽血行血生化检查,同时行64排螺旋CT扫描测量并计算肿瘤体积、肿瘤增长率及肿瘤坏死率,以及进行组织细胞学与细胞超微结构的观察。结果各实验组病灶均进行性增大,但艾迪注射液组肿瘤增长率及坏死率最小,与生理盐水组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）,与无水乙醇组比较差异无统计学意义;TUNEL法检测显示艾迪注射液组凋亡指数明显高于无水乙醇组及生理盐水组（P〈0.05）;艾迪注射液组肝肾功能及白细胞计数治疗前后均无明显差异,组内及组间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论艾迪注射液可诱导肿瘤细胞凋亡,对肿瘤细胞具有细胞毒性作用。     

稀硫酸和无水乙醇注射治疗兔肝脏移植性VX2肿瘤

目的　探讨稀硫酸和无水乙醇兔VX2肝肿瘤内注射的临床价值。方法　移植性VX2肿瘤兔 16只 ,随机分为稀硫酸和无水乙醇组 ,分别于肿瘤内注射 10 %稀硫酸和无水乙醇各 0 .5ml。结果　兔移植性VX2肿瘤内分别注射 10 %稀硫酸和无水乙醇各 0 .5ml,2 4h后 ,稀硫酸组肿瘤坏死率大于乙醇组 (P <0 .0 5 )。电镜观察肿瘤细胞表现为变性 ,坏死及凋亡改变。MRI扫描肿瘤术前T1WI、T2WI和T2DWI分别表现为均匀低信号、高信号和高信号 ,边界清楚 ;术后表现为混杂不均匀信号。肿瘤凝固性坏死在T1WI和T2WI上表现为高信号和稍低信号 ,增强时病灶无明显强化。结论　稀硫酸是一种新型肿瘤细胞灭活物质 ,经皮硫酸注射疗法创伤小 ,无明显副作用 ,可成为肝癌治疗的一种新方法。     

大鼠腹腔内异位心脏移植模型的复制及改进

目的：建立一种快速有效的大鼠腹腔异位心脏移植模型。方法：封闭群Wistar及Lewis近交系大鼠各40只,行Wistar大鼠间移植及Lewis大鼠间移植腹腔异位心脏移植。心脏移植在Ono术式的基础上加以改进：将受体鼠的腹主动脉及下腔静脉略作游离后用血管钳阻段,不分离二者,亦不结扎二者的分支;将供心的升主动脉及主肺动脉分别与受体的腹主动脉和下腔静脉做端侧吻合,将供心移植于受体的腹腔内。结果：共建立40只大鼠异位心脏移植模型,手术成功率92.5%。供心总缺血时间（22±3）min,手术总时间（55±8）min。供心平均存活时间：Wistar大鼠为（8.6±1.1）d,Lewis大鼠除1只用于取标本,其余30d时仍然存活。结论：本方法可提高手术成功率,缩短供心缺血时间。     

同种异体大鼠膀胱移植动物模型的建立

目的:建立稳定的大鼠同种异体膀胱移植模型,为开展器官移植的研究奠定基础.方法:5周龄Wistar大鼠20只为受体,随机分为7 d组和14 d组,每组10只.30只SD幼大鼠作为供体,其中10只作为正常对照,切取膀胱后作病理学观察;另20只切取膀胱后,分别将其无血管吻合移植至Wistar大鼠大网膜上,同时肌肉注射环孢素A...     

兔肾VX2肿瘤声像图特点及超声造影的实验观察

目的分析兔肾VX2肿瘤在二维灰阶超声（2DUS）、彩色多普勒血流显像（CDFI）、方向性能量多普勒（CCD）及超声造影（CEUS）的表现,探讨CEUS在检测兔肾VX2肿瘤中的作用。方法采用超声引导下组织悬浊液注射法建立18只兔肾VX2肿瘤模型,应用2DUS、CDFI和CCD观察肾肿瘤的大小、形态、内部回声和血流表现,实时观察肿瘤在CEUS模式下的造影剂灌注。结果肿瘤2DUS以低回声-等回声为主要表现,形态呈圆形或欠规则,CDFI及CCD呈星点状、短棒状或树枝状血流。肿瘤大部分表现为低增强或者环形增强模式。结论常规超声可作为检测VX2兔肾肿瘤的有效手段,用来实时观察肿瘤的生长变化,CEUS能更好地反映了兔肾种植瘤的特征性血供及微血管灌注情况。     

Long-Term Evaluation of Allogenic Chondrocyte-Loaded PVA–PCL IPN Scaffolds for Articular Cartilage Repair in Rabbits

ObjectiveThis study tested the long-term efficacy of two synthetic scaffolds for osteochondral defects and compare the outcomes with that of an established technique that uses monolayer cultured chondrocytes in a rabbit model.MethodsArticular cartilage defect was created in both knees of 18 rabbits and divided into three groups of six in each. The defects in first group receiving cells loaded on Scaffold A (polyvinyl alcohol–polycaprolactone semi-interpenetrating polymer network (Monophasic, PVA–PCL semi-IPN), the second on Scaffold B (biphasic, PVA–PCL incorporated with bioglass as the lower layer), and the third group received chondrocytes alone. One animal from each group was sacrificed at 2 months and the rest at 1 year. O’Driscoll’s score measured the quality of cartilage repair.ResultsThe histological outcome had good scores (22, 20, and 19) for all three groups at 2 months. At 1-year follow-up, the chondrocyte alone group had the best scores (mean 20.0 ± 1.4), while the group treated by PVA–PCL semi-IPN scaffolds fared better (mean 15 ± 4.2) than the group that received biphasic scaffolds (mean 11.8 ± 5.9). In all three groups, defects treated without cells scored less than the transplant.ConclusionThese results indicate that while these scaffolds with chondrocytes perform well initially, their late outcome is disappointing. We propose that for all scaffold-based tissue repairs, a long-term evaluation should be mandatory. The slow degrading scaffolds need further modifications to improve the milieu for long-term growth of chondrocytes and their hyaline phenotype for the better incorporation of tissue-engineered constructs.     

股骨干骺端髓内血运阻断诱发兔膝关节骨性关节炎模型

目的：髓腔内血供阻断可能诱发邻近软骨退变，利用此方法可制作骨性关节炎的动物模型。方法：以髓腔内髓质刮除、骨蜡填充的方法，将20只成年大耳白兔的股骨远端干骺端髓内血供阻断。在术后8、16周时进行关节软骨的组织切片和透射电镜观察。结果：在术后8周时，关节软骨无显著性改变。在16周时关节软骨出现显著的退行性变。结论：实验证实，采用干骺端髓内血供阻断是获得满意的骨关节炎动物实验模型的好方法，并为骨关节炎的研究提供了一种新的动物模型。     

羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响

目的 研究羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射对兔肝VX2种植瘤生长的影响.方法 将接种VX2肝肿瘤的新西兰白兔随机分成4组,每组10只.A组:肝种植瘤内注入含0.2%羧甲基纤维素钠的生理盐水1 ml;B组:注入20 mg/ml 5-Fu 1 ml;C组:注入20 mg/ml Nano-HAP溶胶1 ml;D组:注入同样浓度5-Fu和Nano-HAP混合液2 ml.四组实验动物于注药后7、14、21 d行肝脏B超扫描,记录生存时间,取肝肿瘤组织病理学检查.结果 术后7、14、21 d A组平均肿瘤体积分别为(4.93±0.76)cm3、(15.67±2.75)cm3和(52.36±10.57)cm3 ; B组为(4.16土0.33)cm3、(10.26±1.60)cm3和(18.89±4.65)cm3;C组为(1.43±0.13)cm3、(3.69±0.77)cm3和(9.51±2.09)cm3;D组为(2.80±0.46)cm3、(3.77±0.91)cm3和(8.46±0.95)cm3.B、C、D三组肿瘤体积均小于同期对照组,D组肿瘤体积最小.四组动物中位生存期分别为34、41、51和44 d.B、C、D三组生存期较对照A组延长.超声监测显示C、D组羟基磷灰石纳米粒子溶胶瘤内注射时可见肿瘤内强回声光点.多次注射后瘤体内可见钙化样强回声光团.HE染色后光镜下观察见A组和B组肿瘤组织出现多处片状坏死,C、D组注射区域呈片状坏死,被条索状或片状钙化灶分隔.结论 羟基磷灰石纳米粒子瘤内注射治疗兔VX2肝肿瘤是安全、可行的,对肿瘤生长有明显的抑制作用,未见毒性反应.     

CO2气腹对慢性肺功能不全兔肺功能影响的实验研究

目的探讨腹腔镜手术中建立的CO2气腹对慢性肺功能不全兔肺功能的影响和损伤机制. 方法依据随机原则,将50只健康雄性日本大耳白兔分为4组,即正常对照组(N0:n=5,免气腹),实验对照组(T0:n=5,免气腹),10 mmHg气腹实验组(T10:n=20, 10 mmHg气腹),15 mmHg气腹实验组(T15:n=20, 15 mmHg气腹).兔肺气肿模型稳定后,建CO2气腹,压力为10 mmHg(1.33 kPa)和15 mmHg(2.00 kPa)2种,作用时间2 h.分别在气腹前后各时点通过脉冲振荡法测4组肺功能(呼吸总阻力、中心阻力、总气道阻力). 结果兔肺气肿模型稳定后呼吸总阻力、中心阻力、总气道阻力升高.与气腹前相比,气腹结束时呼吸总阻力、中心阻力、总气道阻力显著下降(q=17.824, P<0.05;q=69.643, P<0.0.5;q=9.315,P<0.05),气腹后2 h表现为各值升至最高(q=48.631,P<0.05;q=107.842,P<0.05;q=57.213, P<0.05),此后开始降低,气腹后18 h升至比气腹结束时略高状态(q=26.313, P<0.05;q=73.499,P<0.05;q=23.547,P<0.05).15 mmHg(2.00 kPa)压力下变化更为显著. 结论在CO2 气腹条件下,慢性肺功能不全机体易发生血流动力学紊乱和肺通气障碍、顺应性降低,导致肺功能损伤,且气腹压力越高损伤越显著.