散发性非息肉性大肠癌微卫星DNA不稳定性分析

为分析Ｄ２Ｓ４４１、Ｄ２Ｓ１１９和Ｄ２Ｓ１２３３个微卫星ＤＮＡ标记位点不稳定性,研究ＳＮＰＣＣ发生机理的分子基础。应用ＰＣＲ－ＳＳＬＰ扩增微卫星ＤＮＡ,聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对３１例临床诊断为散发性非息肉性大肠癌的肿瘤组织及其相应的正常组织的Ｄ２Ｓ４４１、Ｄ２Ｓ１１９和Ｄ２Ｓ１２３３个微卫星ＤＮＡ标记位点进行分析。结果显示,３１例中,２例在所检测的３个位点均存在微卫星ＤＮＡ不稳定性。提示微卫星ＤＮＡ不稳定性与散发性非息肉性大肠癌发生有关,可通过检测微卫星ＤＮＡ不稳定性筛选大肠癌高危人群,以便早期预防。     

膀胱癌微卫星不稳定及hMSH2基因突变研究

目的：研究膀胱癌微卫星不稳定及ｈＭＳＨ２基因突变情况。方法：应用Ｄ２Ｓ１１９及Ｄ２Ｓ１２３两个微卫星位点标记,ＰＣＲ法检测４５例膀胱癌标本微卫星不稳定;ＰＣＲ－ＳＳＣＰ银染法分析ｈＭＳＨ２基因外显子７、８、１５突变情况。结果：４５例膀胱癌中微卫星不稳定者有７例,微卫星不稳定发生率为１５．６％;在这７例微卫星不稳定标本中有３例同时检测出ＤＮＡ错配修复基因ｈＭＳＨ２突变,占微卫星不稳定总数的４２．９％,且均为体细胞突变。结论：微卫星不稳定和错配修复基因ｈＭＳＨ２突变可能参与膀胱癌癌变过程。     

胃癌组织幽门螺杆菌感染与微卫星不稳定性研究

通过分析胃癌组织幽门螺杆菌感染与微卫星ＤＮＡ不稳定性（ＭＳＩ）的关系,探讨幽门螺杆菌与胃癌发生中的作用。方法：采用ＰＣＲ为基础的方法对４９例胃癌组织Ｈｐ尿素酶酶和Ｂ基因以及６个微卫星位点（Ｄ１７ｓ２６１,Ｄ１７ｓ７９９,ＴＣＦ－２,Ｄ１８ｓ３４,Ｄ５ｓ４０９和Ｄ５ｓ４０９和Ｄ５ｓ８２）进行检测,对Ｈｐ感染与微卫星不稳定性间的关系进行分析,结果胃癌组织ＨｐＤＮＡ的检出率为４０．８％（２０／４９）,其     

中国人散发性大肠癌中微卫星DNA不稳定的研究

目的：探讨中国人散发性大肠癌中微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 不稳定及复制差错与大肠癌生物学行为的关系。方法：选择１０ 个微卫星位点, 应用 Ｐ Ｃ Ｒ－ 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对３９ 例散发性大肠癌组织进行检测。结果：在多个位点上发现了较高的微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 不稳定（ Ｍ Ｉ） ,其中 Ｄ３ Ｓ１３１７ 位点上 Ｍ Ｉ为４４ ％ , Ｄ３ Ｓ９６６ 上 Ｍ Ｉ为２６ ．６ ％ , Ｄ２ Ｓ１２３ 和 Ｄ２ Ｓ１１９ 上 Ｍ Ｉ分别为３６ ％ 和２５ ．７ ％ 。结论： Ｍ Ｉ阳性率和肿瘤组织学分类无明显相关性,而与肿瘤组织的分化程度、浸润程度等有显著的相关关系,因而微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 可以为肿瘤的早期诊断及患者预后判断提供帮助。同时,在散发性结肠癌中也存在较高的微卫星 Ｄ Ｎ Ａ 不稳定,这可能与某种 Ｄ Ｎ Ａ 错配修复基因发生突变有关。     

口腔鳞癌组织中染色体3p14.2区杂合性丢失的研究

目的：检测口腔鳞癌组织中３ｐ１４．２区Ｄ３Ｓ１３００位点丢失情况,为新的抑癌基因定位提供依据。方法：应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以Ｄ３Ｓ１３００位点微卫星多态为遗传标记,检测口腔鳞癌组织中该位点的杂合性丢失（Ｌｏｓｏｆｈｅｔｅｒｏｚｙｇｏｓｉｔｙ,ＬＯＨ）状况。结果：２２例口腔鳞癌１７例提供信息,７例出现杂合性丢失,ＬＯＨ率为４１％（７／１７）,有２例出现微卫星的不稳定性。结论：３ｐ１４．２区Ｄ３Ｓ１３００位点杂合性丢失可能与口腔鳞癌的发生发展相关,提示该区域可能存在口腔鳞癌的抑癌基因,该区的错配修复基因突变可能是口腔鳞癌发生的一个新机理     

联合应用D21S11,IFNAR位点定量PCR快速诊断先天愚型

为了探讨定量ＰＣＲ方法在分子水平对先天愚型基因诊断意义,本实验以ＳＴＲ（Ｄ２１Ｓ１１ １ＦＮＡＲ）做为遗传标记,合成特异引物对１１例正常人（６例外周血,５例羊水及２８例先天愚型患者外周血进行同位素标记ＰＣＲ扩增后定量分析,结果显示在Ｄ２１Ｓ１１位点１１例正常人中１０人呈ＤＮＡ含量为１：１关系的两条带,１人为１条带。２８例患者中２４人呈ＤＮＡ含量为２：１的两条带,３人为ＤＮＡ含量为１：１：１关系的三     

肝豆状核变性基因连锁图谱的研究

为寻找适于中国人Ｗｉｌｓｏｎ氏病（ＷＤ）基因连锁分析的遗传标记及制定ＷＤ基因所在区域的遗传图谱，我们应用Ｄ１３ｑ１４－２１区域４个ＤＮＡ标记对７５名无亲缘关系个体及９个ＷＤ家系成品进行连锁分析。结果发现４个ＤＮＡ标记中３个标记等位片段与白种人相同而杂合率相异，其中２个ＤＮＡ标记Ｄ１３Ｓ３１，Ｐ１２３Ｍ１．８与ＷＤ基因存在紧密连锁关系。其遗传顺序为：着丝点－Ｒｂ－Ｄ１３Ｓ３１－ＷＮＤ。     

胰腺癌微卫星不稳定性及其临床病理特点的研究

胰腺肿瘤的发生目前认为与癌基因Ｋ ｒａｓ的激活以及抑癌基因ＤＰＣ4、Ｐ16、Ｐ5 3,ＦＨＩＴ的失活有关。而微卫星不稳定性 (ＭＳＩ)可能代表了肿瘤发生的另一种机制。我们用 5条染色体上的 6个微卫星位点对 41例胰腺癌标本进行ＭＳＩ的检测和分析 ,现将结果报道如下。一、对象与方法1 对象 :41例胰腺癌标本全部来自江西医学院第一、二附属医院 1994～ 1998年存档的石蜡标本 ,再经两位病理医师复检证实。标本包括胰腺癌组织及正常胰腺组织。2 ＤＮＡ提取及聚合酶链式反应 (ＰＣＲ) :用显微切割技术分离切取癌组织及正常组织 ,按常规提取石…     

微卫星不稳定性-遗传性非息肉病性大肠癌诊断的分子标志:附4例报告

目的探讨微卫星ＤＮＡ不稳定性（Ｍｉｃｒｏｓａｔｅｌｌｉｔｅ　ｉｎｓｔａｂｉｌｉｔｙ．ＭＳＩ）与遗传性非息肉病性大肠癌（Ｈｅｒｃｄｉｔａｒｙｎｏｎｐｏｌｙｓｉｓｃｏｌｏｒｅｃｔａｌｃａｎｃｅｒ,ＨＮＰＣＣ）的关系。方法采用银染ＰＣＲ－ＳＳＣＰ方法,检测４例遗传性非息肉病性大肠癌及其相应正常组织的第２、５、１７号染色体的４个位点的ＭＳＩ．结果４例ＦＩＮＰＣＣ均存在至少一个位点的ＭＳＩ。ＨＮＰＣＣ多位于右半结肠,低分化,粘液腺癌多见。结论ＭＳＩ是ＨＮＰＣＣ常见的分子学事件。ＨＮＰＣＣ有其特有的生物学特性。     

家族性混合型高脂血症与人类染色体1q21-23连锁

目的 利用中国和德国非隔离人群家族性混合型高脂血症家系证实家族性混合型高脂血症与人类１号染色体是否存在连锁位点。方法 从德国搜集２４个（１３３人）及中国１２个（８１个）家族性混合型高脂血症家系,选择４个微卫星遗传标记ＡｐｏＡ２、Ｄ１Ｓ１６７７、Ｄ１Ｓ１０４和Ｄ１Ｓ１９４,利用ＧＥＮＥＨＵＮＴＥＲ软件包进行多点连锁分析。结果 多点连锁分析显示Ｄ１Ｓ１０４附近的遗传标记Ｄ１Ｓ１９４有最大ＬＯＤｓｃｏｒ     

应用微卫星多态标记进行大肠癌中5q21-q22杂合性丢失的初步研究

应用ＡＰＣ基因下游４０Ｋｂ处的微卫星多态标记Ｄ５Ｓ３４６，检测３０例大肠癌组织ＤＮＡ，在可提供信息的１５例杂合子中检出５例５ｑ２１＿ｑ２２的杂合性丢失，占３３％。提示ＡＰＣ基因缺失也是中国人大肠癌的遗传改变之一     

应用微卫星多态标记进行大肠癌中5q21—q22杂合性丢失的初…

应用ＡＰＣ基因下游４０Ｋｂ处的微卫星多态标记Ｄ５Ｓ３４６，检测３０例大肠癌组织ＤＮＡ，在可提供信息的１５例杂合子中检出５例５ｑ２１－ｑ２２的杂合性丢失，占３３％。提示ＡＰＣ基因缺失也是中国人大肠癌的遗传改变之一     

新染色体8q24.1带特异性微卫星DNA的筛选和分析

运用人类高分辨染色体显微切割、ＰＣＲ和微克隆技术构建的８ｑ２４．１带特异性ｐＵＣ１９文库，筛选出一个含ＣＡ重复的新的多态微卫星ＤＮＡ［（ＣＡ）ｎ］。经ＰＣＲ检测人鼠杂种细胞板，证实其来源于人８号染色体；在正常人群中检出１１个等位片段，杂合度为０．８４；在１１个家系中进行连锁分析。结果显示，此多态标记与三个已知的位于８ｑ２３－２４．１区域的微卫星ＤＮＡ（Ｄ８Ｓ８５，Ｄ８Ｓ１９９，Ｄ８Ｓ２８１）紧密连锁，其在８号染色体遗传图谱上的相对位置为：着丝粒－Ｄ８Ｓ８５－新（ＣＡ）ｎ－Ｄ８Ｓ１９９－长臂末端。     

一个新的染色体8q24.1带特异性微卫星DNA的筛选和分析

运用人类高分辨染色体显微切割，ＰＣＲ和微克隆技术构建８ｑ２４．１带特异性ｐＵＣ１９文库，筛选出一个含ＣＡ重复的新的多态微卫星ＤＮＡ（（ＣＡ）ｎ）经ＰＣＲ检测人鼠杂种细胞板，证实其来源于人８类染色体，在正常人群检出１１个等位片段，杂合度为０．８４；在１１个家系中进行连锁分析。结果显示，此多态标记与三个已知的位于８ｑ２３－２４．１区域的微卫星ＤＮＡ（Ｄ８Ｓ８５，Ｄ８Ｓ１９９，Ｄ８Ｓ２８１）紧密连锁，其     

应用PCR技术进行常染色体显性遗传多囊肾病家系的基因诊断

目的：用ＰＣＲ方法对中国的常染色体显性遗传多囊肾病（ＡＤＰＫＤ）家系进行基因诊断。方法：提取基因组ＤＮＡ，用ＰＣＲ方法扩增与ＰＫＤ１位点连锁的高度多态性的微小卫星体ＤＮＡ（ＳＭ７，ＡＣ２．５，ＳＭ６，ＫＧ８）为遗传标记，进行家系分析。对２２个ＡＤＰＫＤ家系的１５６个成员（包括６８个患者）找出染色体上与疾病连锁的单体型，进行了连锁分析。结果：２１个被测家系提供了基因诊断信息；另一个家系显示重组或不连锁。结论：能够采用ＰＣＲ方法对中国的ＡＤＰＫＤ家系进行基因诊断。     

鼻咽癌微卫星不稳定性初步研究

目的：探讨鼻咽癌的微卫星不稳定性。材料与方法：２２例Ⅱ￣Ⅳｂ期鼻咽低分化鳞癌。均为ＥＢＶＣＡ－ＩｇＡ（＋）。取鼻咽部癌组织和外周血有核细胞，分离基因组ＤＮＡ。用ＰＣＲ方法扩增其染色体３Ｐ２４和３Ｐ１４－２１的Ｄ３Ｓ１１两上位点的微卫星（ＣＡ）ｎ，将扩增的微卫星ＤＮＡ作变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，用银染法显带。比较第一对标本（正常－肿瘤）的微卫星ＤＮＡ带型、泳动速率、强度的差异。结果：２２例鼻咽癌中的５     

DNA错配修复基因与大肠癌发生关系探讨

目的：检测散发大肠癌患者的ｈＭＳＨ２基因突变及基因组ＤＮＡ不稳定，以探讨与其发生的关系。方法：ＰＣＲ、ＳＳＣＰ和ＤＮＡ序列分析用于检测３５例大肠癌患者ｈＭＳＨ２突变和微卫星不稳定。结果：５例患者发现生殖系细胞ｈＭＳＨ２突变（外显子７２例，８２例，１５１例），２例肿瘤细胞ｈＭＳＨ２突变（外显子７和８各１例），３例ＤＮＡ序列分析有２例为错义突变，１例为同义突变。微卫星不稳定在９例患者存在。结论：大肠癌中存在ｈＭＳＨ２基因突变和微卫星不稳定，与大肠癌的发生密切相关。     

hMSH2基因在散发卵巢癌中突变研究

目的：研究卵巢癌患者ＤＮＡ错配修复基因ｈＭＳＨ２（ＨｕｍａｎｍｕｔＳｈｏｍｏｌｏｇ）基因突变，同时检测其基因组微卫星Ｄ２Ｓ１２３序列变化。方法：应用ＰＣＲ、ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＤＮＡ序列分析方法检测了１５例卵巢癌患者正常细胞和肿瘤细胞中的ｈＭＳＨ２基因突变。结果：３例患者存在ｈＭＳＨ２基因生殖细胞或体细胞突变，序列分析表明有碱基置换的同义突变，有碱基丢失产生的无义突变。有３例患者基因组表现Ｄ２Ｓ１２３变化，其中１例检测到ｈＭＳＨ２突变。结论：ｈＭＳＨ２基因突变和卵巢癌发生有关。机理可能为其突变引起基因组不稳定，而引起一系列基因变化，导致细胞恶性转化     

改良二温式PCR法快速SM7微卫星标志多态分析对多囊肾病的诊断

成人型多囊肾病（ＡＰＫＤ）是一种常染色体显性遗传病,其基因突变定位在第１６染色体短臂１区３带的ＰＫＤ１位点［１］,后来发现ＡＰＫＤ存在遗传异质性,定位了ＰＫＤ２、ＰＫＤ３位点［２、３］。国际上常用的ＰＫＤ１位点相邻的微小卫星体 ＤＮＡ ＳＭ７为遗传标记本研究采用改良二温式ＰＣＲ扩增法结合聚丙烯酰胺凝胶电泳与银染色对１０个ＡＤＰＫＤ家系成员进行基因连锁分析［５、６、］,并证实是有效的ＡＰ ＫＤ基因诊断方法。１材料和方法１．１染色体ＤＮＡ分离纯化：取静脉血１０ｍｌ,ＥＤＴＡ（１ｍｐ／ｍｌ）抗凝,分离白…     

中国人22q11区微卫星多态性及在法洛四联证／肺动脉闭锁基因诊断？…

目的 检测中国人２２ｑ１１区微卫星多态性、法洛四联症／肺动脉闭锁（ＴＯＦ／ＰＡ）病人２２ｑ１１区基因的缺失以及缺失片段与疾病表型之间的关系。方法 选取５个微卫星ＤＮＡ标记Ｄ２２Ｓ４２０、Ｄ２２Ｓ９４１、Ｄ２２Ｓ９４４、Ｄ２２Ｓ３１１、Ｄ２２Ｓ３０６，分析了５０例正常人与１０例ＴＤＦ／ＰＡ患儿及其父母的等位基因片段，并进行家系分析。结果 ２／１０２例（２０％）ＴＯＦ／ＰＡ病人存在２２ｑ１１区基因缺失