Ciglitazone在NF-κB圈套寡核苷酸抑制肝癌细胞增殖中的作用

目的:观察核转录因子-κB圈套寡核苷酸抑制NF-κB活性后,肝癌HepG2细胞对ciglitazone敏感性的变化。方法:运用基因转染技术将NF-κB圈套寡核苷酸转染入肝癌HepG2细胞中,检测转染前后NF-κB活性。再用ciglitazone处理转染细胞,描记HepG2细胞生长曲线,流式细胞仪检测细胞周期,Western blot检测处理前后细胞周期素D1(Cyclin D1)的变化。结果:转染后的肝癌HepG2细胞NF-κB活性明显降低;ciglitazone抑制HepG2细胞增殖作用增强,70.65%的细胞被阻滞于G1/G0期,Cyclin D1表达明显下降。结论:NF-κB圈套寡核苷酸能增加肝癌HepG2细胞对ciglitazone的敏感性,可能与其下调NF-κB的活性、增强ciglitazone抑制肝癌细胞增殖和阻滞细胞周期有关。     

核因子-κB圈套寡核苷酸转染对小鼠成熟树突状细胞生物学特性的影响

目的 探讨核因子KB圈套寡核苷酸(NF-κB decoy ODN)转染对小鼠成熟树突状细胞(DCs)生物学特性的影响.方法 体外诱导Balb/c小鼠骨髓细胞生成未成熟DCs(imDCs),经抗原OVA以及LPS孵育后成为OVA冲击的骨髓来源成熟nCs(mDCs),流式细胞仪检测DCs表面分子CDllc以及MHC-Ⅱ的表达予以鉴定;将NF-KB decoy ODN体外转染小鼠骨髓来源成熟DCs,同时设立阴性对照组(转染NF-KB"变异"ODN)以及未转染组,EMSA检测转染后NF-KB的活性变化;流式细胞仪检测各组DCs表面共刺激分子(CIMO、CDSO、CD86)的表达;混合淋巴细胞反应观察各组DCs对OVA致敏的T淋巴细胞增殖的影响.结果 成功培养出骨髓来源成熟DCs;NF-κB decoy ODN转染DCs的NF-KB活性明显降低(P<0.05),DCs表面CD40、CDS0共刺激分子的表达与阴性对照组、未转染组比较无明显改变(P0.05),而CD86的表达与其他各组比较明显降低(P<0.05);在混合淋巴细胞反应中,NF-KB decoy ODN转染DCs对T细胞的增殖有抑制作用(P<0.05),而阴性对照组与未转染组的DCs具有强烈的激发T细胞增殖的能力(P<0.05).结论 NF-KB decoy ODN转染DCs可能通过CD86的表达降低显著抑制抗原特异性T细胞活化,该改良的DCs有可能用于哮喘的免疫治疗.     

靶向核因子κB的圈套核苷酸策略在疾病研究中的应用

圈套核苷酸技术是一种新型的抑制转录因子转录激活的基因操作技术,目前已广泛应用于疾病研究。核因子κB(NF-κB)圈套核苷酸是针对κB序列(5′-GGGACTTTCC-3′)设计的双链核苷酸序列,其可与活化的NF-κB二聚体结合而抑制目的基因的转录表达。NF-κB圈套核苷酸是目前研究应用最多的圈套核苷酸,已在肿瘤、心血管、神经、风湿、呼吸、肾脏和器官移植等相关疾病的治疗性研究中获得肯定的疗效。     

NF-κB在膀胱肿瘤中的抗凋亡作用研究进展

NF-κB是重要的真核细胞转录因子参与多种基因表达的调控,与机体免疫应答、炎症反应、细胞增殖及凋亡有关,与肿瘤的发生发展、侵袭转移、凋亡控制关系密切.目前发现,NF-κB在多种泌尿系肿瘤中均有表达.笔者就NF～κB在膀胱肿瘤中的抗凋亡作用研究进展作一综述.     

塞来希布抑制人肝癌HepG2细胞生长及COX-2、NF-κB表达

目的:观察塞来希布(celecoxib)对人肝癌细胞株HepG2细胞生长及COX-2和NF-κB表达的影响,探讨celecoxib抗肿瘤作用的机制。方法:用不同浓度的celecoxib作用于HepG2细胞,检测其对HepG2细胞增殖和凋亡以及COX-2、NF-κB表达的影响。结果:celecoxib呈剂量依赖性抑制HepG2细胞增殖,并诱导细胞凋亡;celecoxib处理组HepG2细胞COX-2和NF-κB蛋白表达明显减弱(P<0.05),COX-2蛋白表达和NF-κB蛋白表达呈正相关(P<0.05)。结论:celecoxib明显抑制HepG2细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与抑制COX-2和NF-κB的蛋白表达有关。     

NF-κB在心血管疾病中的作用

心血管疾病已成为现代社会人类死亡的首要病因。本文综述了近年来核因子-κB(NF-κB)在心血管疾病的发病、进展和治疗方面的研究进展。可以预见,NF-κB将有可能成为心血管疾病治疗中的新途径和新靶向。     

NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素诱导裸鼠肝癌细胞HepG_2凋亡

目的:探讨NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素对裸鼠肝癌细胞HepG2的作用及机制。方法:接种传代培养的人肝癌细胞HepG2于裸鼠皮下,局部注射NF-κB decoy寡核苷酸和/或阿霉素进行治疗。观测裸鼠瘤体大小变化,计算抑瘤率;HE染色观察肝癌组织结构和细胞形态改变;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:NF-κB decoy寡核苷酸联合阿霉素治疗组裸鼠肝癌细胞的生长受到明显抑制,抑瘤率为80.52%;肿瘤重量、体积明显小于单用NF-κBdecoy寡核苷酸、阿霉素治疗组及对照组;联合组癌组织凋亡增加,凋亡指数为(39.8±1.6)%,与其余3组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:NF-κB decoy寡核苷酸协同阿霉素能抑制NF-κB活性,促进肝癌细胞凋亡,增加其对化疗药物的敏感性。     

金雀黄素抑制人肝癌细胞Bel 7402中 NF-κB表达的实验研究

从核转录因子水平探讨金雀黄素抗肿瘤作用机理.采用MTT法测定金雀黄素抑制肿瘤的作用;通过免疫组化、Western Blot及电泳迁移率变动分析,分别检测了用药前后p65和I κ Bα在人肝癌细胞株Bel 7402中的表达.结果提示金雀黄素有显著抑制肿瘤生长的作用,用药后,Bel 7402细胞中的p65表达水平降低,而IκBα表达较用药前高.表明金雀黄素的抗肿瘤作用机理与其抑制IκBα降解从而抑制NF-κB功能有关.     

NF-κB在B细胞淋巴瘤中的表达和意义

目的探究核转录因子κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)在B细胞淋巴瘤中的表达情况及其临床意义。方法搜集2011年6月至2014年6月期间郑州大学附属肿瘤医院收治的57例B细胞淋巴瘤患者和34例淋巴结反应性增生患者的淋巴组织样本,采用免疫组化SP法检测两组患者淋巴组织中NF-κB的表达情况,并分析NF-κB表达和B细胞淋巴瘤患者临床病理特征的关系。结果 B细胞淋巴瘤患者淋巴组织中NF-κB表达显著高于反应性增生患者(P<0.05)。NF-κB的表达与患者的年龄、性别和发生部位无关(P>0.05),与患者的临床分期、恶性程度和国际预后指数(IPI)有关(P<0.05)。结论 NF-κB的表达与B细胞淋巴瘤发生发展有关,可能成为该病预后判断的指标。     

NF-κB反义寡核苷酸对博莱霉素致小鼠肺纤维化病理过程中NF-κB/IκB的影响

目的探讨NF-κB反义寡核苷酸对博莱霉素致小鼠肺纤维化病理过程中NF-κB/IκB的影响。方法 C57BL/6肺纤维化模型小鼠造模前6 h,尾静脉注射NF-κB反义寡核苷酸,取肺组织,模型组及对照组分别行原代培养。肺组织及培养细胞进行NF-κB、IκB-α蛋白的免疫组织化学染色及细胞化学染色,并行图像分析,以平均光密度(MOD值)表示各指标的表达量。结果在肺组织及培养细胞中,模型组NF-κB、IκB-α蛋白表达量均较对照组增加(P<0.05),干预组各项指标的表达量均较模型组减少(P<0.05)。NF-κB蛋白与IκB-α蛋白表达呈正相关。结论 NF-κB反义寡核苷酸可以抑制博莱霉素致小鼠肺纤维化病理过程中NF-κB/IκB的表达,从而起到治疗肺纤维化的作用。     

NF-κB“诱骗”寡核苷酸对LPS诱导的SW480细胞IL-1β表达的影响

目的探讨核转录因子-κB（NF-κB）＂诱骗（decoy）＂寡核苷酸（ODNs）对脂多糖（LPS）诱导的结肠癌SW480细胞IL-1β表达的影响。方法体外培养SW480细胞并随机分为5组,对照组、LPS组（以10μg/L的LPS刺激3h）、NODN组（以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的NF-κB decoy ODNs）、SODN组（以10μg/L的LPS刺激3h后转染1μmol/L的错译ODNs）、lipofectin2000组（以10μg/L的LPS刺激3h后加入同剂量的lipofectin2000）,检测各组细胞培养液中LDH的水平,并应用RT-PCR技术检测各组细胞IL-113 RNA的表达。结果各组细胞培养液中LDH浓度差异无统计学意义（P〉0.05）。与对照组比较,LPS组、NODN组、SODN组及lipofectin2000组IL-1 13 mRNA表达均升高,差异有统计学意义（P〈0.01）;与LPS组比较,NODN组IL-1βmRNA表达显著降低（P〈0.01）,而SODN组及lipofectin2000组差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 NF-κB decoy ODNs可有效下调SW480细胞IL-1βmRNA的表达,有望成为治疗炎性肠病的一种新型基因药品。     

NF-κB和COX-2在肺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨核转录因子κB(NF-κB)、环氧化酶-2(COX-2)在肺癌发生中的作用及二者的关系。方法:逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测56例肺癌组织及相应的癌旁正常组织、12例肺良性病变中NF-κBmRNA和COX-2 mRNA的表达。结果:67.8%肺癌组织表达NF-κB mRNA,相应癌旁正常组织、肺良性病变则分别为12.5%(P<0.01)、5/12(P<0.01),60.7%肺癌组织表达COX-2 mRNA,相应癌旁正常组织、肺良性病变则分别为10.7%(P<0.01)、3/12(P<0.01),肺癌组织NF-κB mRNA和COX-2 mRNA表达的阳性率均高于癌旁正常组织(P均<0.01),癌旁正常组织和肺良性病变则差异无显著性(P均>0.05);肺癌组织NF-κB mRNA和COX-2 mRNA表达呈显著正相关(P<0.01)。结论:NF-κB和COX-2基因表达在肺癌组织增高,二者呈显著正相关,提示二者协同作用共同促进肺癌的发生、发展,从而为肺癌治疗提供新的靶位点。     

急性肺损伤小鼠NF-κB的表达

目的：研究核转录因子-κB(nuclearflactor-κB，NF-κB)在急性肺损伤的动态改变，以期找到NF-κB在肺损伤中的作用。方法：25只雄性小鼠随机分为5组，正常对照及不同时间点致伤组，致伤组腹腔注射脂多糖形成急性肺损伤模型，采用免疫印迹和免疫组化法检测正常鼠及致伤鼠肺组织中NF-κB的表达。结果：脂多糖注射后1hNF-κB即开始增高，3h达高峰，随后开始下降。结论：NF-κB可能是急性肺损伤发病中的一个关键性因子。     

NF-κB与TNF的体内抗前列腺癌作用

探讨NF-κBI(NF-κB抑制剂)与融合基因PSP94-TNFαD11a联合注射抗前列腺癌的 作用。方法制作PC-3细胞裸鼠动物模型。肌注PSP94与TNFαD11a融合基因的pcDNA-PSP94-TNFαD11a真核表达质粒DNA,并联合肌注NF-κBI,同时设pcDNA-PSP94、pcDNA-PSP94联用NF-κBI、pcDNA-PSP94-TNFαD11a、NF-κBI、空载体、生理盐水和环磷酰胺对照组。注射后第10天处死动物,称瘤重、计算押瘤率。结果pcDNA-PSP94-TNFαD11a联合NF-κBI用药组抑瘤率(36％)高于pcDNA-PSP94-TNFαD11a组(20％),前者瘤重〔(1.87±0.934)g〕明显低于后者〔(2.32±1.373)g〕。差异具有显著性(P<0.05)。结论NF-κBI可提高TNF的抗前列腺癌作用。     

戊四氮及NF-κB圈套结构对神经元样细胞突触素表达的影响

目的通过观测戊四氮（pentylenetetrazol，PTZ）及NF—κB（nuclear factor kappa B decoy）圈套寡核苷酸结构对神经元样PC12细胞突触素（synaptophysin，P38）表达的影响，进一步探讨癫痫的发病机制。方法应用免疫印迹技术检测PTZ干预前后神经元样PC12细胞突触素的表达情况，进而运用基因转染技术将NF-κB圈套寡核苷酸转入神经元样PC12细胞中，激光共聚焦成像技术（confocal laser scanning microscope，CLSM）检测转染前后NF—κB活性的变化，免疫印迹观察转染前后突触素的变化情况。结果①PTZ干预后神经元样PC12细胞突触素的表达显著增高；②CLSM检测显示转染NF-κB圈套寡核苷酸后神经元样PC12细胞中NF-κB活性明显下降，但突触素蛋白表达水平不见降低。结论PTZ促进了突触素的表达，NF-κB对突触素的表达不具有调控作用，可能另有其他途径。     

核因子-κB在脓毒症大鼠肾细胞凋亡中的作用

目的研究脓毒症时核因子-κB(NF-κB)在肾细胞凋亡信号转导中的作用,探讨脓毒症时肾功能降低的机制。方法将30只大鼠随机分为5组,其中6只作为对照组,另外24只采用盲肠结扎穿孔术(CLP)复制脓毒症模型,以术后2 h、3 h、4 h、5 h时限分为4组作为实验组。各组均测定肾脏组织NF-κB蛋白及肾细胞凋亡的情况,同时测定肾功能的变化。结果CLP术后肾组织NF-κB蛋白表达升高,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);4 h组NF-κB的含量达高峰,3 h组相对较弱。CLP术后肾细胞凋亡数目与肾组织NF-κB蛋白表达相反。CLP术后血清尿素氮及肌酐增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论CLP所致的脓毒症过程中,NF-κB蛋白表达升高,其活性增强可抑制肾细胞凋亡。     

NF-κB及其在肿瘤发生发展中的作用

核转录因子-κB(NF-κB)是一类普遍存在的转录调节因子。近几年来的研究表明,NF-κB参与了细胞增殖和凋亡调控。NF-κB的活性失控与人类肿瘤生发、浸润转移、耐药、预后密切相关,并为肿瘤治疗提供了新的思路。     

NF-κB在临床急病中的作用

核转录因子NF-κB活性增加可能是临床急病进程恶化的中心环节，最终引起多器官功能衰竭综合征。NF-κB在临床急病的炎症因子调控方面具有极其重要的作用，进一步了解其调控机制，对于寻找临床急病的最佳治疗途径有重要意义。     

NF-κB反义寡核苷酸对博莱霉素致小鼠急性肺损伤的保护作用

目的研究转录因子NF-κB在博莱霉素(BLM)致小鼠急性肺损伤病理过程中的重要作用,及其反义寡核苷酸对肺损伤的防治作用。方法小鼠随机分为5组,于0d经小鼠尾静脉分别注射150mg/kg或300mg/kgBLM,在注射前6h和注射后第5d,150组和300组分别注射生理盐水(NS);anti150组和anti300组分别注射p65的硫甙反义寡核苷酸(900μg/只);同时设立正常对照组,分别在3个时间点(注射前6h、0d、第5d),经尾静脉注射NS,观察各组小鼠体质量变化、死亡情况和肺组织病理改变。结果(1)150组和anti150组死亡率分别为53%和0%(P<0.05);而300组和anti300组死亡率分别为100%和60%(P<0.05)。p65反义寡核苷酸抑制了BLM所致小鼠死亡;(2)150组和anti150组小鼠的最低体质量分别减轻至原来的(65.5±7.8)%和(82.1±3.4)%(P<0.01)。p65反义寡核苷酸改善了BLM所致小鼠体质量减轻;(3)肺组织HE染色显示,BLM致死的150组小鼠,可见肺组织血管结构丧失,出血性水肿,肺泡腔内大量炎性渗出;非BLM致死小鼠注射BLM后14d,可见肺组织大片实变,肺泡结构丧失。而anti150组14d明显减轻了BLM导致的肺组织损伤。结论NF-κB可能在BLM致小鼠急性肺损伤过程中具有重要作用。NF-κB反义寡核苷酸对BLM所致小鼠急性肺损伤具有保护作用。