ALDH1作为干细胞标志物在胃癌中的研究进展

ALDH1是一种在不同组织中广泛存在的通过消耗NAD(P)+将细胞内的乙醛氧化为乙酸的一种蛋白质,可降解细胞内的有毒物质而起到保护细胞的作用。目前已有大量研究证明ALDH1与肿瘤的发生发展密切相关,可作为多种恶性肿瘤的干细胞标志物。本文就ALDH1作为干细胞标志物在胃癌中发挥的作用作一综述。     

肿瘤干细胞标志物ALDH1在恶性肿瘤中表达特点与预后关系的研究进展

恶性肿瘤仍是目前的世界性医疗难题,肿瘤干细胞是恶性肿瘤临床治疗的关键影响因素。肿瘤干细胞具有肿瘤原始活性,呈侵袭性生长,具有自我更新和形成肿瘤的能力,是导致肿瘤复发和转移的重要因素之一。乙醛脱氢酶1(ALDH1)是肿瘤干细胞的肿瘤标志物,在食管癌、胰腺癌、卵巢癌、结肠癌和乳腺癌等肿瘤细胞中的表达明显增高,且ALDH1升高程度与肿瘤恶性程度及患者预后密切相关,即ALDH1表达水平越高,肿瘤恶性程度越高,患者预后越差。     

血管平滑肌细胞凋亡对动脉粥样硬化作用的研究进展

血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)是血管壁中的主要细胞类型,其凋亡参与了动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生和发展.在早期AS中,VSMCs凋亡可作为新生内膜增生和管腔狭窄的代偿机制,然而这一过程又会加速AS斑块破裂,造成严重的心血管疾病并发症....     

SYNM、ALDH1、Galectin–3在大肠癌中的表达及相关性研究

目的 研究联丝蛋白（synemin,SYNM）、乙醛脱氢酶1（aldehyde dehydrogenase1,ALDH1）、半乳糖凝集素–3（Galectin–3）在大肠癌中的表达及与病理特征的相关性。方法 选取2017年8月至2019年8月在台州市第一人民医院病理科保存的大肠癌组织标本74例,设为大肠癌组;另选取同期在台州市第一人民医院病理科保存的正常大肠黏膜（距离癌组织>5cm）74例,设为对照组。将其进行免疫组织化学染色,评估SYNM、ALDH1、Galectin–3阳性表达情况。随访至2020年8月,统计两组患者的存活率。结果 与对照组相比,大肠癌组SYNM阳性表达下降,ALDH1、Galectin–3阳性表达升高,差异均有统计学意义（P<0.05）。与肿瘤最大径<2.0cm患者相比,2.0cm～5.0cm、>5.0cm患者的ALDH1、Galectin–3阳性表达较高;高分化程度患者SYNM阳性表达高于低、中分化程度患者;与高分化程度患者相比,中、低分化程度患者ALDH1、Galectin–3阳性表达较高;中分化程度患者ALDH1、Galectin–3阳性表达高于低分化程度患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。TNM分期Ⅲ、Ⅳ期患者SYNM阳性表达低于Ⅰ、Ⅱ期患者,ALDH1、Galectin–3阳性表达高于Ⅰ、Ⅱ期患者;与无淋巴结转移患者相比,有淋巴结转移患者SYNM阳性表达较低,ALDH1、Galectin–3阳性表达较高,差异均有统计学意义（P<0.05）。SYNM阴性表达和ALDH1、Galectin–3阳性表达患者生存率分别低于SYNM阳性表达和ALDH1、Galectin–3阴性表达患者,差异均有统计学意义（P<0.05）。结论 SYNM、ALDH1、Galectin–3在大肠癌组织中表达异常,其阳性表达高低与患者肿瘤最大径、分化程度、TNM分期、淋巴结转移有关,三者联合检测在大肠癌患者预后中具有重要意义。     

Caveolin-1结合Cyclophilin A改善大鼠血管平滑肌细胞胆固醇蓄积

观察caveolin-1和cyclophilin A在血管平滑肌细胞荷脂过程中的表达变化及其对细胞内胆固醇蓄积的影响。实验采用Western-blot、免疫荧光法分别定量,定位检测caveolin-1和cyclophilin A蛋白的表达;油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况;高效液相检测细胞内外总胆固醇含量;免疫共沉淀检测caveolin-1和cyclophilin A相互作用。结果显示,随着荷脂时间延长,caveolin-1和cyclophilin A的蛋白表达逐渐减弱;细胞内脂滴形成逐渐增多,细胞内总胆固醇含量不断增加;caveolin-1和cyclophilin A在大鼠血管平滑肌细胞中相互结合,并且cyclophilin A活性抑制后,与caveolin-1结合能力减低,而细胞内胆固醇含量增加。这提示,caveolin-1和cyclophilin A在血管平滑肌细胞内可相互结合,并参与改善细胞内胆固醇蓄积。     

动脉粥样硬化中的血管平滑肌细胞及其分子影像学研究进展

动脉粥样硬化(AS)是引起心脑血管疾病的主要原因之一。血管平滑肌细胞被认为是AS斑块形成的主要启动子,血管平滑肌细胞迁移、增殖和凋亡在AS病变形成及粥样斑块破裂机制中起重要作用。现就血管平滑肌细胞在AS中的作用及其近年来针对AS斑块尤其是平滑肌细胞的分子影像学研究进展进行综述。     

Stathmin-1、Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达及意义

目的 探讨Stathmin-1、Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达及其在子宫平滑肌肿瘤发生、发展中的作用。方法 选取2013年1月～2016年6月于温州市人民医院及温州医科大学附属第一医院、第二医院的72例手术患者。根据组织病理学结果分为普通型子宫平滑肌肿瘤及瘤旁正常肌层组织30例,子宫富于细胞平滑肌肿瘤24例,子宫平滑肌肉瘤18例。采用免疫组化Envision二步法研究Stathmin-1、Ki-67在各组中的表达及临床病理学特征的相关性。结果 Stathmin-1表达于细胞质,子宫平滑肌肉瘤组阳性表达率及染色分值高于另外3组(P均<0.05)。Ki-67表达于细胞核,子宫平滑肌肉瘤组阳性表达率及染色分值高于另3组(P均<0.05)。Stathmin-1与Ki-67染色分值在子宫平滑肌肉瘤组中存在正相关(r_s=0.795,P=0.000)。 Stathmin-1与Ki-67在子宫平滑肌肿瘤中的表达与患者年龄、肿瘤直径、数目等临床病理学特征均无相关(P均>0.05)。Stathmin-1联合Ki-67检测子宫平滑肌肉瘤的敏感度77.78%,特异性90.04%。结论 Stathmin-1及Ki-67在子宫平滑肌肉瘤中的高表达可能与子宫平滑肌肉瘤的发生相关。联合检测Stathmin-1与Ki-67有助于早期辅助诊断子宫平滑肌肉瘤。     

血管内皮细胞调控血管平滑肌细胞表型的机制及其在动脉血管疾病中的作用研究进展

血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)与血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)在结构上紧密相连,在功能上互相影响。VECs可通过直接(Notch信号通路)或间接(细胞因子、外泌体)方式调控VSMCs表型转变,以应对缺氧、炎症或异常机械力等刺激并维持血管稳态,该过程异常是导致动脉粥样硬化、主动脉瘤、主动脉夹层等动脉血管疾病的重要原因。本文将对VECs调控VSMCs表型转变的机制及其在动脉血管疾病中的作用做一综述。     

urantide对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂urantide干预下,UⅡ在大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达,阐明其可能的作用机制.方法:采用贴块法对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞进行体外培养,实验分为正常对照组(C组)、UⅡ组(M组)、阳性药对照组(Flu组)及urantide干预组(浓度分别为1×10-10、1×10-...     

白藜三醇抑制大鼠血管平滑肌细胞增殖的作用机制

目的 探讨植物雌激素白藜三醇（RV）对大鼠血管平滑肌细胞增殖的调控及可能机制.方法 用植块贴壁法体外培养大鼠血管平滑肌细胞,使用Western blotting检测各组雌激素受体α（ERα）、雌激素受体β（ERβ）、P38、P-P38、C-myc蛋白的表达水平.实验分为6组（每组n=6）：正常对照组（NC组）,含10% 胎牛血清（FBS）的DMEM; RV干预组（RV组）,50 μmol/L RV干预24 h; 血管紧张素Ⅱ组（AngⅡ组）,1 μmol/L AngⅡ干预12 h;RV＋ AngⅡ组,1 μmol/L AngⅡ干预12 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入50 μmol/L RV干预24 h;RV＋ICI182780＋AngⅡ组,1 μmol/L ICI182780干预2 h,然后加入1 μmol/L AngⅡ干预12 h,最后加入50 μmol/L RV干预24 h.结果 各组P38蛋白表达差异无统计学意义（P＞0.05）;ERα、ERβ蛋白的表达：RV组ERα、ERβ蛋白的表达水平较正常对照组增高（P＜0.01）,而RV＋ICI182780组与RV组比较表达降低（P＜0.01）;C-myc蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.05）;P-P38蛋白的表达：RV组与NC组比较表达降低（P＜0.01）,AngⅡ组与NC组比较表达增高（P＜0.01）,AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋AngⅡ组与RV组比较表达增高（P＜0.01）,RV＋ICI182780＋AngⅡ组与RV＋AngⅡ组比较表达降低（P＜0.01）.结论 白藜三醇可以抑制C-myc的表达,抑制P38的磷酸化,此作用可被ICI182780阻断,说明白藜三醇可能是通过ER进而抑制C-myc的表达和P38的磷酸化发挥抗平滑肌细胞增殖的作用.     

L-精氨酸对兔血管平滑肌细胞体外增殖的影响

目的：探讨Ｌ－精氨酸抗动脉粥样硬化（ＡＳ）的作用机制。方法：观察Ｌ－ａｒｇ对兔血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）体外增殖的影响。结果：Ｌ－ａｒｇ显著增加一氧化氮（ＮＯ）含量,明显抑制ＶＳＭＣ,并呈剂量依赖性。加入单甲基－Ｌ－精氨酸（Ｌ－ＮＭＭＡ）,上述作用被逆转 。结论：Ｌ－ａｒｇ可显著抑制兔ＶＳＭＣ体外增殖,且此作用由Ｌ－ａｒｇ转则ａｒｇ抗ＡＳ的作用可能与此有关。     

I型内皮素受体反义寡聚核苷酸抑制VSMC增殖及内膜增生

目的　观察 型内皮素受体 (ETA)反义寡核苷酸(ODN)对血管平滑肌细胞 (VSMC)增殖和内膜增生的抑制作用 .方法　 1细胞培养 :取家兔主动脉中膜消化后培养传代 ,经抗 α- actin鉴定后使用第 4～ 6代传代细胞 ;2人工合成ODN:经 Genbank检索筛选 ,合成含 18bp ETA- ODN片段 ,再对 5 端硫代修饰以增加稳定性 ,同时行地高辛标记以检测反义片段的细胞膜穿透性 ;3 MTT分光光度法检测 ETA-ODN对 VSMC增殖的抑制作用 ;4运用放射受体结合分析法 (1 2 5I- ET- 1)了解 ODN对 ETA蛋白表达的抑制作用 ,以探讨其反义作用 ;5兔颈动脉空气干燥模型在体研究 ODN对血管内膜增生的抑制作用 :应用 F- 12 7凝胶载体携带 ETA-ODN(3.0μmol· L- 1 )导入血管周围 ,术后不同时间观察增生内膜相对厚度 .结果　 ODN于培养后 12 h进入细胞内 ,并逐渐增加 ;15 μmol· L- 1 ETA- ODN对 VSMC增殖具有抑制作用 ,2 4h后即有显著作用 ;ETA- ODN对 ETA表达亦有明显的抑制作用 ,表现为 CPM于 2 4h逐渐减少 ;ETA- ODN导入后 ,血管增生内膜相对厚度减少 .结论　 ETA- ODN以浓度和时间依赖方式抑制 ETA蛋白表达以及 VSMC的增殖 ;反义寡核苷酸是通过反义机制实现对 ETA蛋白和 VSMC增殖的抑制作用     

兔血管内皮细胞与平滑肌细胞体外增殖的相互影响

目的　研究在体外培养条件下血管内皮细胞条件培养基（ECCM）、内皮素-1（ET-1）、内皮素转化酶抑制剂phosphoramidon对血管平滑肌细胞（SMC）增殖的影响,同时研究了血管平滑肌细胞条件培养基（SMCCM）对血管内皮细胞（EC）增殖方面的影响. 方法　EC和SMC均来源于兔主动脉,在获得了EC和SMC的条件培养基（CM）后,分别用两者以及ET-1进行实验,细胞的增殖率通过3H掺入法进行测定. 结果　ECCM和ET-1可明显促进SMC的增殖,并呈现剂量依赖性. 其最大效应分别为(190±11)% (100% ECCM)和(166±9)% (100 ng*L-1 ET-1). 而phosphoramidon存在条件下的ECCM使其分裂作用降低了(33±2)%. SMCCM抑制EC的增殖,这种抑制作用并非剂量依赖性,其最大的抑制效应为基本水平的(78±3)%. 结论　ECCM和ET-1可促进SMC的增殖作用. phosphoramidon可明显地抑制ECCM对SMC的增殖作用.同时SMCCM对EC的增殖起抑制作用.     

二甲双胍通过调节AMPK/ERK通路改善动脉粥样硬化小鼠血管平滑肌细胞异常增殖和动脉粥样硬化

目的探讨二甲双胍对动脉粥样硬化小鼠血管平滑肌细胞异常增殖和动脉粥样硬化的影响和机制。 方法将C57/B6小鼠分为对照组、模型组、二甲双胍组。油红O染色、免疫荧光染色法检测各组小鼠主动脉动脉粥样斑块沉积面积比例以及主动脉组织中Ki67和α-SMA表达情况。CCK-8、划痕实验和Western blotting分析小鼠血管平滑肌细胞增殖、迁移能力以及单磷酸腺苷依赖的蛋白激酶(AMPK)、细胞外调节蛋白激酶(ERK)通路和细胞骨架蛋白Pdlim5的变化。 结果与模型组比较,二甲双胍组小鼠主动脉动脉粥样斑块沉积面积比例、Ki67和α-SMA阳性细胞数、血管平滑肌细胞增殖和迁移能力、ERK水平均降低,而AMPK、Pdlim5水平升高(P＜0.05)。 结论二甲双胍通过调节AMPK和ERK通路改善高脂饮食介导小鼠血管平滑肌细胞异常增殖和动脉粥样硬化。     

西罗莫司对大鼠血管平滑肌细胞增殖、起始识别复合物1表达的影响及机制探讨

目的探讨西罗莫司对体外培养的大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖、起始识别复合物1(ORC1)表达的影响及机制。方法细胞随机分为对照组和实验组,每组3瓶/孔,血清饥饿法培养细胞24h使其同步化。对照组采用含10%胎牛血清的DMEM培养液培养,实验组采用含10μmol/L西罗莫司+10%胎牛血清的DMEM培养液培养。继续培养0～48h,采用免疫细胞化学法检测增殖细胞核抗原(PCNA)表达,电子显微镜观察细胞超微结构,RT-PCR法检测ORC1mRNA的表达,蛋白质印迹法检测P53、cyclin D1、cyclin A和ORC1蛋白的表达。结果与对照组相比,实验组48hPCNA阳性表达率降低[(20±2.1)%vs(80±3.0)%,P<0.05],P53蛋白表达升高(P<0.05);细胞核有固缩的迹象;实验组cyclin D1蛋白表达轻微升高(P>0.05),48hcyclin A蛋白的表达下降(P<0.05)。对照组ORC1mRNA的表达在0～12h升高,24～48h降低,高峰期在12h。实验组细胞ORC1mRNA的表达始终处于高水平。与同时间对照组比较,实验组48hORC1mRNA的表达升高(P<0.05)。蛋白质印迹分析结果与之相似。结论西罗莫司抑制VSMCs增殖,同时促进其凋亡;其作用环节可能是通过阻止细胞由G0/G1期向S期转化,诱导细胞处于静止状态;ORC1的作用环节位于西罗莫司作用点的上游,进一步支持ORC1参与细胞复制起始过程。     

腺病毒介导gax基因转染抑制血管平滑肌细胞增殖

目的　以腺病毒介导gax基因转染血管平滑肌细胞 (VSMC) ,探讨gax基因表达增强后VSMC增殖的变化。方法　以携带大鼠gax基因表达序列的复制缺陷型 5型腺病毒载体 (AdCMV gax)常规转染VSMC后 ,应用免疫细胞化学染色检测gax基因表达的变化 ;应用四唑盐 (MTT)比色试验、3H标记的胸腺嘧啶核苷 ( 3H TdR)掺入试验和流式细胞仪检测观察gax基因表达增强对VSMC增殖的影响。结果　①AdCMV gax转染前 ,PDGF BB下调Gax蛋白的表达 ,接近正常生理浓度的PDGF BB( 2ng ml)即可使VSMC的Gax蛋白表达率由 3 6.42 %显著降低至 2 2 .83 %(P <0 .0 5 ) ,随着PDGF BB浓度的升高 ,gax基因表达下降程度更加显著 ;AdCMV gax转染后 ,无论有无PDGF BB刺激 ,VSMC中gax基因的表达均比转染前显著增高。②AdCMV gax转染使VSMC表达gax增强后 ,VSMC的MTT吸光度值和3H TdR掺入量均较未转染组显著降低 ,G0 G1期的VSMC比例较未转染组显著增高 (P <0 .0 1) ,G2 M期和S期细胞比例显著降低 (P <0 .0 1)。结论　增强gax基因表达可抑制由有丝分裂原刺激所引起的VSMC增殖     

CD73对动脉粥样硬化中血管平滑肌细胞的作用

 目的  探讨CD73对血管平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白-1(moncyte chemoattractant protein-1,MCP-1)、IL-8和基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinase-1,MMP-1)表达及迁移能力的影响,并分析其与动脉粥样硬化发生发展的关系。方法  原代培养人脐带动脉平滑肌细胞 (human umbilical artery smooth muscle cells,HUASMC),利用RNA干扰技术抑制细胞中CD73的表达,以未转染组和阴性转染组为对照。实时荧光定量PCR和ELISA方法检测细胞表达及分泌MCP-1和IL-8 的水平。实时荧光定量PCR和Western blot方法检测细胞表达MMP-1的情况。利用划痕实验观察CD73干扰对细胞迁移能力的影响。结果  成功培养原代HUASMC,并且CD73 siRNA转染可显著降低细胞内CD73表达水平。干扰HUASMC的CD73表达后,细胞表达和分泌MCP-1及IL-8的能力升高,细胞内MMP-1的表达升高,而细胞的迁移能力下降。结论  干扰CD73表达可以使HUASMC的MCP-1、IL-8及MMP-1表达升高;干扰CD73表达可降低HUASMC的迁移,提示CD73在动脉粥样硬化的发生发展过程中发挥重要的生物学作用。     

重组人白介素10对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 观察重组人白介素１０（ｒｈＩＬ－１０）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的影响。方法 离体培养大鼠胸主动脉 ＶＳＭＣ并分别接受不同浓度ｒｈＩＬ－１０、肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－α）、血小板源性生长因子（ＰＤＧＦ－ＢＢ）的刺激,采用ＭＴＳ／ＰＥＳ 法确定ＶＳＭＣ的增殖状态并与对照组比较。结果　与对照组相比,ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ均对ＶＳＭＣ增殖具有明显的刺 激作用（Ｐ＜０．０５）。单独应用ｒｈＩＬ－１０对血管平滑肌细胞生长没有影响。在ＴＮＦ－α和ＰＤＧＦ－ＢＢ分别刺激下,ｒｈＩＬ－１０均可 抑制ＶＳＭＣ的生长（Ｐ<０．０５）。结论　ｒｈＩＬ－１０可抑制细胞因子和生长因子诱导的ＶＳＭＣ增殖。