粘附分子CD44v6免疫靶向治疗与细胞表面工程技术

粘附分子CD44拼接变异体6（CDd4 splice variant 6,CD44v6）是CD44的拼接变异体之一,其表达可改变肿瘤细胞表面细胞黏附分子的构成和功能,有助于肿瘤细胞获得转移潜能。CD44v6的异常表达可作为肿瘤早期诊断、转移和复发的生物学标志物,其肿瘤的靶抗原性可能成为研究热点。细胞表面工程技术的应用为免疫靶向治疗提供了更加广阔的空间。     

人源分子佐剂C3d3促进人免疫活性细胞抗绒毛膜促性腺激素β亚基的免疫效应

目的探讨3个拷贝人源分子佐剂C3d(hC3d3)与绒毛膜促性腺激素β亚基(hCGβ)的融合蛋白hCGβ-hC3d3作用于人外周血单个核细胞(PBMC)对hCGβ抗原免疫原性的影响。方法用L-亮氨酸甲基酯(L- LME)或B细胞磁珠阴性分离试剂盒对人PBMC进行细胞分离纯化;实验分成B细胞、B T细胞、PBMC和Raji细胞4组。分别应用1、10及100 nmol／L不同浓度的hCGβ、hCGβ-hC3d3及美洲商陆(PWM)等抗原体外作用于以上细胞10～12 d,采用氚标记的胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)掺入法了解不同抗原刺激后各组细胞的增殖情况;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测培养上清液中抗hCGβ抗体的分泌水平;而酶联免疫斑点法(ELISpot)可测定各种抗原刺激后特异抗体分泌的细胞数量。结果与hCGβ相比,融合蛋白hCGβ-hC3d3能使各组细胞增殖明显升高,且呈浓度依赖性。应用100 nmol／L的不同抗原培养12 d后,取培养上清液进行ELISA检测,经hCGβ及PWM刺激后,上清液中均未检测到抗hCGβ特异性抗体;经hCGβ-hC3d3培养后则在B T细胞及PBMC组中见低水平抗hCGβ抗体。采用ELISpot法分析抗hCGβ特异性抗体生成细胞,经hCGβ刺激的细胞仅有数个散在的阳性细胞;而经hCGβ-hC3d3刺激后,阳性细胞明显增多(P<0．05)。结论hC3d3明显促进人免疫活性细胞对hCGβ抗原的免疫原性。     

树突状细胞疫苗与肿瘤免疫

抗原脉冲的树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌ，ＤＣ）的潜能和新颖的肿瘤靶的鉴定，重新激起对恶性肿瘤治疗型疫苗的研究兴趣，已成为许多研究课题的热点。本文综述ＤＣ在肿瘤免疫治疗中的开发应用。１引言人体免疫系统具有抵御恶性细胞失控制性生长的能力，其核心是...     

人绒毛膜促性腺激素β亚基cDNA的克隆

用新鲜的人绒毛膜组织提取总RNA,并通过逆转录反应合成cDNA第一链,利用人工合成的一对寡核苷酸引物,采用PCR技术特异性地扩增人绒毛膜促性腺激素β亚基(hCG—β)cDNA,琼脂糖凝胶电泳结果显示扩增片段大小为500bp,与预计的片段长度相符,将此片段刊用T—A载体克隆至PCRⅡ质粒上并进行全序列分析,结果显示克隆片段包含hCG—βcDNA5’端和3’端的非编码区及完整的编码区。     

人绒毛膜促性腺激素β亚基cDNA的克隆初步报告

用新鲜的人绒毛膜组织，抽提组织总ＲＮＡ并通过逆转录反应合成ｃＤＮＡ第一链。利用人工合成的一对寡核苷酸引物，采用ＰＣＲ技术特异性地扩增ｈＣＧ－β－ｃＤＮＡ。琼脂糖凝胶电泳结果显示扩增片段大小为５００ｂｐ，同预计的片段长度相符。将此片段利用Ｔ－Ａ载体克隆至ＰＣＲⅡ质粒上并进行全序列分析，结果显示克隆片段包含ｈＣＧ－βｃＤＮＡ５’端和３’端非编码区及完整的编码区。     

树突状细胞在肿瘤免疫中的作用

继手术、化疗、放疗之后免疫治疗越来越受到医学界的重视。但是,肿瘤的低免疫原性和机体对肿瘤的低免疫反应性,使得免疫治疗受到限制。目前,树突状细胞(DC)的免疫呈递作用,在提高机体对肿瘤的免疫反应得到进一步认识。有望成为临床上治疗肿瘤的新方法。     

树突状细胞抗肿瘤免疫的研究进展

树突状细胞(dendritic cell,DC)是体内最有效的专职抗原递呈细胞(antigen presenting cell,APC),其主要功能为捕获、加工处理抗原,并将抗原信息呈递给T、B淋巴细胞,进而引发一系列免疫应答.有别于其他APC,DC最大特点是能够刺激初始型T细胞活化,在诱导机体免疫应答中起关键作用.近年来,随着对DC在肿瘤抗原的识别、加工处理及递呈过程中作用机制的进一步阐明,DC在抗肿瘤免疫中的重要作用日益受到关注,DC介导的肿瘤免疫治疗研究也取得了较大进展,显示其在抗肿瘤免疫治疗中良好的应用前景.本文就DC的生物学特性、抗肿瘤机制、DC疫苗及其在肿瘤免疫治疗中的应用等方面予以综述.     

人绒毛膜促性腺激素与T细胞亚群的相关性

为了观察人绒毛膜促性腺激素与T细胞亚群之间的相关性,我们分别选择正常妊娠早、中、晚三期妇女45例、40例、42例,原因不明习惯性流产(unexplained habitual abortion UHA)早孕患者39例作为实验组;20例正常育龄期妇女和9例未采用HCG治疗的UHA患者作为对照组.     

人绒毛膜促性腺激素对T细胞表型亚群的作用

目的:旨在阐明人绒毛膜促性腺激素(hCG)对免疫应答调节作用的部分机理,为理解临床某些疾病的发病机理提供理论参考。方法:分别应用荧光显微镜法和流式细胞仪法,观察了hCG对T细胞表型亚群的作用。并用抗hCG各亚单位的单克隆抗体封闭hCG后作上述试验,分析了hCG分子上与上述作用有关的表位所在。结果:hCG在一定剂量范围内可抑制T细胞表型亚群表达CD3、CD4及CD8分子。hCG作用的阻断试验证明抗hCGβ(10号)及抗完整hCG(17号)单克隆抗体可阻断上述抑制作用,而抗hCGα单克隆抗体(4号)则无此作用。结论:本文证明hCG对T细胞表型亚群有不同程度的抑制作用,而hCG分子上与此作用有关的表位则可能存在于包括β亚单位及完整hCG在内的部分。     

i2000免疫分析仪测定血清人绒毛膜促性腺激素的方法学评价

目的初步评价Architect i2000免疫分析仪测定血清人绒毛膜促性腺激素的临床应用性能。方法根据美国临床实验室标准化委员会颁布的《定量临床检验方法的初步评价:批准指南(EP10-A)》提供的方法,按照特定顺序连续5d测定低、中、高浓度质控品中的-HCG,计算偏差、总不精密度,及其截距、斜率、非线性、携带污染和漂移,并进行统计分析。结果偏差:低值0.09IU/L、中值1.21IU/L、高值5.69IU/L,均在允许偏差的范围内。总不精密度(用表示):低值6.22%、中值5.25%、高值4.78%,均小于厂家说明书规定的10%的允许范围。漂移(>0.01)和携带污染(>0.01)对精密度的影响差异无显著性。结论Architect i2000免疫分析仪测定血清人绒毛膜促性腺激素准确度和精密度良好,性能指标符合临床应用要求。     

显微外科技术在骨组织工程中的应用

利用显微外科技术,通过带血管蒂软组织瓣包裹或血管束植入的方法,在构建组织工程化骨的同时建立良好的血液供应,从而构建出血管化的组织工程骨,具有良好的应用前景。本文对当前应用显微外科技术构建血管化的组织工程骨的国内外研究进展进行综述。     

组织工程气管上皮组织体外构建的研究

目的：体外构建气管上皮组织，为气管组织工程奠定基础。方法：利用消化法获得气管上皮细胞、成纤维细胞，体外扩增后作为种子细胞，在胶原上接种气管上皮细胞、成纤维细胞，体外构建活性双层气管上皮组织，并行组织学检测。结果：复合培养的组织学苏木精-伊红（H-E）染色切片显示成纤维细胞构成的薄层结缔组织上有气管上皮细胞形成的上皮细胞层：结论：利用胶原成功地在体外构建出了气管上皮组织。     

肺吸入用微粒的粉体工程学技术研究进展

近年来,药物的肺部递送作为一种非侵入性的给药途径引起了广泛关注,肺部给药的市场需求也不断增加。各种粉体工程学技术被用于开发具有合适物理性质的用于肺部递送的药物颗粒,这些经过设计的药物颗粒为高效的肺部递送和最优的治疗效果提供了可能。本文重点阐释了肺部颗粒的沉积机制以及各种粉体工程技术在肺部给药领域中的应用,其中PulmoSphereTM和TechnoSphereTM两种新技术已用于上市产品的生产。     

表面修饰化材料对颌下腺种子细胞生长影响的研究

目的 探讨应用表面修饰技术处理的生物支架材料与颌下腺种子细胞复合培养研究对种子细胞支架材料上的附着、生长和分泌功能的影响.方法 选用明胶海绵36块,均分为3组.A组:明胶海绵材料与鼠颌下腺细胞复合培养物;B组:层黏连蛋白(laminin,LN)表面修饰的明胶海绵材料与鼠颌下腺细胞复合培养物;C组:转化生长因子(TGF-β3)表面修饰的明胶海绵材料与鼠颌下腺细胞复合培养物.各组在体外进行复合培养,3、7和15 d各时间点行组织学观察和扫描电镜观察,15 d行免疫组织化学鉴定细胞来源,测定上清淀粉酶含量并进行比较.结果 组织学和扫描电镜观察见培养第3天各组细胞分散于材料表面,无细胞突起形成;第7天见B组细胞数量明显多于A组和C组,细胞突起形成并锚定于胶原海绵表面;第15天,B组细胞数量仍多于A组和C组,并可见细胞之间有触突联系和腺管样结构形成.免疫组织化学染色观察复合培养的颌下腺细胞Brdu呈强阳性.随着接种后培养时间的延长,各组颌下腺细胞分泌的淀粉酶含量均有不同程度的增加.15d,C组淀粉酶含量明显高于A组和B组(P＜0.05).结论 应用细胞外基质和细胞因子成分对生物支架材料进行表面修饰,可促进颌下腺种子细胞在材料上的附着、增殖和分泌,有利于组织工程化颌下腺研究的进一步成功.     

LBL结合PBL在医学院校细胞工程课程中的应用

细胞工程是一门理论与实践相结合的学科,已成为医学院校生物技术、生物科学等相关专业的必修课程.在医学院校细胞工程教学中,于传统LBL教学模式基础上引入PBL教学模式,为细胞工程课程教学探索出一条PBL与LBL相结合的教学模式道路,以期提高教学质量和医学生的综合素质.     

Prenatal cytogenetic diagnosis. Amniotic cell culture versus chorionic villus sampling

Chorionic villus sampling is under evaluation throughout the world. Amniocentesis with amniotic cell culture is reliable for the diagnosis of certain types of genetic disease in the second trimester, and has been the subject of extensive clinical and laboratory audit. Chorionic villus sampling has the advantage of the early diagnosis (for example, at 10 weeks) of chromosomal abnormalities, a shorter delay with results after the diagnostic procedure, and is, for some couples, a more socially and morally acceptable method of antenatal diagnosis. In current experience, the disadvantages of chorionic villus sampling include an increased fetal loss and an increased diagnostic error rate. Another factor is the early diagnosis of fetuses with chromosomal abnormalities--a proportion of whom would have miscarried spontaneously before being detected at an amniocentesis at 16 weeks. This has implications for an increased rate of therapeutic terminations of pregnancy. Chorionic villus sampling and amniotic cell culture are discussed and comparisons are drawn that concern the clinical advantages and diagnostic issues which are inherent in each method of prenatal diagnosis.     

甲氨蝶呤对异位妊娠血清人绒毛膜促性腺激素高值患者的疗效及安全性

目的 探讨甲氨蝶呤在不同血清人绒毛膜促性腺激素（β-hCG）水平的异位妊娠患者中的疗效和安全性。方法 选取2019年1月—2020年10月海南现代妇女儿童医院收治的90例异位妊娠患者为研究对象。根据治疗前24 h的β-hCG水平将患者分为β-hCG高值组55例（β-hCG≥3 000 u/L）和β-hCG低值组35例（β-hCG <3 000 u/L）。所有患者给予甲氨蝶呤50 mg/m2肌内注射。比较两组治疗后的临床疗效、β-hCG水平恢复情况、异位妊娠包块消失情况及不良反应。结果 治疗7 d后β-hCG高值组临床总有效率高于β-hCG低值组（P <0.05）;治疗7 d后β-hCG高值组β-hCG恢复时间短于β-hCG低值组（P <0.05）,β-hCG水平低于β-hCG低值组（P <0.05）,异位妊娠包块消失时间短于β-hCG低值组（P <0.05）,异位妊娠包块直径小于β-hCG低值组（P <0.05）;两组总不良反应发生率比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 相对于低值β-hCG患者,高值β-hCG异位妊娠患者接受甲氨蝶呤治...     

Studies with choriocarcinoma and normal pregnancy serum chorionic gonadotrophin

Serum obtained from either normally pregnant women or those with choriocarcinoma was pooled and purified by ammonium acetate/alcohol extraction followed by ionic exchange and gel filtration chromatography. The CG activity was monitored using a double antibody radioimmunoassay utilizing anti hCG both as the labelled ligand and standard. Biological activity was measured by the rat luteal cell radioreceptor assay. Both purified preparations exhibited heterogeneity in terms of the behaviour during ionic exchange chromatography and isoelectric focussing. The Stokes radii were 33A and 33.3A for normal pregnancy and choriocarcinoma hCG respectively. Material from both sources focussed between pH 4.5 and 5.5. Relative to the second international hCG standard the immunological activity of normal pregnancy hCG was 9,100 iu/mg and that of choriocarcinoma CG was 10,970 iu/mg. The corresponding biological potencies were 8,190 iu/mg and 7,569 iu/mg respectively. There was a significant difference between the biological to immunological activity of choriocarcinoma hCG (0.69) when compared with that of normal pregnancy CG (0.90). This was confirmed with a subsequent follow up study when individual serum samples from normal pregnancy were compared with those from choriocarcinoma patients (p = 0.01). It was concluded that in a third world situation this significant difference in the ratio of biological to immunological activity may be a useful method for evaluating treatment of choriocarcinoma patients.