共查询到20条相似文献,搜索用时 0 毫秒
1.
丹参4-(5′-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶的cDNA全长克隆及其诱导表达分析 总被引:4,自引:0,他引:4
本文首次从丹参毛状根中克隆得到了丹参4-(5′-二磷酸胞苷)-2-C-甲基-D-赤藓醇激酶(简称为SmCMK)的编码基因的全长cDNA序列,GenBank注册号:EF534309。KEGG软件分析表明:SmCMK位于二萜类化合物生物合成的上游途径——非甲羟戊酸途径(DXP),是DXP途径上唯一的激酶。所克隆的SmCMK基因序列全长1 493 bp,包括完整的开放阅读框(open readingframe,ORF),推测编码396个氨基酸的多肽,分子质量为43.302 kDa,等电点(pI)值为6.78;含有71 bp的5′非转译区(5′ UTR)和232 bp的3′非转译区(3′ UTR)。末尾具有完整的AATAA加尾信号和PolyA结构,说明所克隆基因的序列较为完整。经序列比对分析表明,SmCMK与其他植物CMK激酶家族具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果显示该基因受茉莉酸甲酯(MJ)诱导后表达水平显著升高,与丹参酮类成分含量受MJ诱导后的增加趋势一致,初步证明了SmCMK基因表达量与丹参酮类成分的积累之间的关系,为进一步研究丹参酮类成分的次生代谢调控机制奠定了基础。 相似文献
2.
克隆并表达了结核分枝杆菌H37Rv的4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D赤藓糖醇(CDP-ME)合成酶基因,并纯化该蛋白.经HPLC和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明该蛋白为同二聚体,Mg2+为最适二价金属离子.对辅因子的底物特异性高,最适底物为胞苷三磷酸(CTP).CTP和2-C-甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)的Km值分别为92和43μmol/L,Vmax为7.8μmol·(min·mg)-1. 相似文献
3.
本研究根据转录组数据提供的基因片段设计特异引物,利用cDNA快速末端扩增方法克隆丹参4-羟基-3-甲基-2-丁烯基焦磷酸还原酶全长cDNA(SmHDR),GenBank注册号JX233817,并进行蛋白结构预测、序列多重比对和构建进化树等生物信息学分析;然后采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测该基因在Ag+诱导后的表达情况,使用UPLC检测对应样品的丹参酮类化合物含量。获得的SmHDR全长基因由1 647个核苷酸组成,编码463个氨基酸,蛋白分子质量为51.88 kD,等电点pI 5.72,二级结构中α-螺旋结构占35.64%、β-折叠占20.30%、无规则卷曲占44.06%。序列比对和系统进化分析表明,SmHDR与其他植物HDR家族具有较高的同源性,并与库洛胡黄连HDR两者的亲缘关系较近。RT-PCR结果显示,SmHDR受Ag+诱导后表达水平在12 h时急剧上升后显著下降,丹参酮类成分含量受Ag+诱导后先缓慢上升,在120 h时有明显提高,两者的增加趋势呈正相关。推测SmHDR基因可能参与丹参酮类成分的生物合成,这为进一步研究丹参酮类成分生物合成及其次生代谢调控机制奠定了基础。 相似文献
4.
应用发根农杆菌9402侵染丹参叶片获得了一株可以稳定产生多种丹酚酸类化合物的丹参毛状根。除迷迭香酸和丹酚酸B外还含有丹酚酸K、丹酚酸L、乙基丹酚酸B、甲基丹酚酸B以及一个分子量为538的未知化合物(化合物538)。LC-MS对这些化合物进行了鉴定。对茉莉酸甲酯(MeJA)和酵母诱导子对几种主要化合物积累的影响进行了分析:MeJA促进丹酚酸B、迷迭香酸、丹酚酸K和化合物538的积累,分别从干重4.21%、2.48%、0.29%和0.01%提高到7.11%、3.38%、0.68%和0.04%;酵母诱导子提高迷迭香酸含量,从干重2.83%上升到5.71%,抑制了丹酚酸B、丹酚酸K和化合物538的生物合成。实验结果表明所获得的丹参毛状根可以作为生产丹酚酸B、迷迭香和丹酚酸K以及化合物538的替代资源。对这些酚酸类化合物对诱导子的生物累积效应变化趋势进行分析推测:丹参毛状根中丹酚酸K和化合物538可能是从迷迭香酸合成丹酚酸B的中间产物。 相似文献
5.
克隆并表达了结核分枝杆菌H37Rv的4-二磷酸胞苷-2-C-甲基-D赤藓糖醇(CDP-ME)合成酶基因,并纯化该蛋白。经HPLC和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析表明该蛋白为同二聚体,Mg^2+为最适二价金属离子。对辅因子的底物特异性高,最适底物为胞苷三磷酸(CTP)。CTP和12-C.甲基-D-赤藓糖醇-4-磷酸(MEP)的Km值分别为92和143μmol/L,Vmax为7.8gmol(min·mg)^-1 相似文献
6.
目的 研究抗生素氟氯西林钠的关键中间体3-(2'-氯-6'-氟苯基)-5-甲基-4-异噁唑甲酰氯的合成方法,使之适合工业化生产.方法 以2-氯-6-氟苯甲醛为原料,经肟化、氯化、环合、水解、酰氯化等步骤制得目标化合物.结果 合成产物的化学结构经IR,1H-NMR,13C-NMR and MS确证,总收率为60.2%.结论 此方法收率高,成本低,适合工业化生产. 相似文献
7.
dl-15-甲基PGF_(2α)及其甲酯的HPLC分析研究 总被引:1,自引:0,他引:1
dl-15-甲基PGF_(2α)及其甲酯为前列腺素PGF的衍生物。它们的临床剂量甚小,其合成生产工艺及结构特征表明可能有多种异构体存在,且异构体间的生物活性差异很大。建立具有高专属性、灵敏度以及对各种制剂适用的分析方法是改进生产工艺、深入各项研究和临床安全有效使用所面临的迫切课题。本文报道的反相HPLC直接测定法用ODS柱、UVλ197nm检测、甲醇—水—醋酸为流动相,合成杜鹃素为内标,可对dl-15-甲基PGF_(2α)及其甲酯的各种差向和顺反异构体进行分离和分别直接定量。本法分辨率高,最低检测量为0.03μg,操作简便,定量线性关系良好,分析误差小于3%(CV),节省试剂,并可发展成制备工艺。本法适用于15-甲基PGF_(2α)及其甲酯的合成原料和各种制剂的分析。 相似文献
9.
以丙酰乙酸乙酯为起始原料,先溴化得到4-溴丙酰乙酸乙酯,再在甲苯中与苯甲酰胺回流环合得到2-(5-甲基-2-苯基-4-(口恶)唑)-乙酸乙酯,最后经氢化铝锂还原,得到目标杂环中间体2-(5-甲基-2-苯基-4-(口恶)唑)-乙醇.该合成方法反应步骤少,原料便宜,目标物的总收率为67.3%. 相似文献
10.
以3-甲基-2-丁烯酸为起始原料,经硅酯化和溴代后,再将(Z)-4-溴-3-甲基-2-丁烯酸硅酯转化成相应内酯,从而经蒸馏分离出其反式异构体(E)-4-溴-3-甲基-2-丁烯酸硅酯,水解后即生成(E)-4-溴-3-甲基-2-丁烯酸,总收率为29%. 相似文献
11.
12.
用均匀设计,选择控制反应温度,配料比和发烟硫酸中SO3的含量三个因素,由2-甲基咪唑 硝酸盐发烟硫酸硝化合成2-甲基-5(4)-硝基咪唑,得到优化条件下的 稳定在80%以上。 相似文献
13.
2R-羟甲基-5S-(5′-氟胞嘧啶-1′-)-1,3-氧硫杂环戊烷的合成 总被引:1,自引:1,他引:1
报道2R-羟甲基-5S-(5′-氟胞嘧啶-1′-)-1,3-氧硫杂环戊烷(FTC)及其关键中间体 5R-乙酰氧基-1,3-氧硫杂环戊烷-2-羧酸(1′R,2′S,5′R)-薄荷酯的合成,并对文献报道的路线进行了改进,特别是避免使用昂贵而敏感的三甲基碘硅烷,易于工业化生产。 相似文献
14.
15.
目的寻找一条合成目标化合物4-(6-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖基)-1-甲氧基-2-[(反式-4-正丙基环己基)甲基]苯的简易路线,并研究其晶型。方法利用苯基溴化物片段和6-脱氧葡萄糖酸内酯片段作为起始原料合成目标化合物;采用有机混合溶剂和含水混合溶剂结晶的方式制备目标化合物的晶型,采用粉末X射线衍射分析和热重–差热分析技术对其进行表征,并对其进行了初步稳定性研究。结果目标化合物的总收率为74%,通过上述制备方法获得了同一种晶型,该晶型对光、热和湿均是稳定的。结论设计了一条合成目标化合物的简易路线,该路线操作简便、路线短、收率高,并制备了一种具有良好稳定性的目标化合物的晶型。 相似文献
16.
17.
目的 在前期发现的DPP-Ⅳ抑制剂N-(2-噻吩甲基)-N'-(4-甲基-2-噻唑)甘氨酰胺(1)基础上,设计并合成N-甲基-N-(2-噻吩甲基)-N'-(4-甲基-2-噻唑)甘氨酰胺(2),以延长半衰期,并保证其降血糖活性.方法 尝试了两种方法合成化合物2,一是对化合物1用氨化-还原法甲基化,二是用N-甲基-2-噻吩甲胺(3)与2-氯-N-(4-甲基-2-噻唑)乙酰胺(4)反应制得化合物2.葡萄糖耐量实验降血糖模型研究化合物2的降血糖活性,并研究其药动学.结果 两种方法合成了化合物2,其中方法二收率较高.化合物2的降血糖活性与化合物1相当,但是半衰期延长.结论 获得了合成化合物2的较优方法,保证化合物2降血糖活性前提下,延长了半衰期. 相似文献
18.
为了寻找心血管系统药物,以表雄酮为原料,合成了7个16,17位取代的目标化合物:2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α-羟基-5α-雄甾-17-酮、2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β-二羟基-5α-雄甾烷、2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α-羟基-16α-溴-5α-雄甾-17-酮、2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,16α-二羟基-17-氧-5α-雄甾烷、2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,16α-二羟基-17-肟-5α-雄甾烷、2β-(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,16α-二羟基-17β-氨基-5α-雄甾烷和2β—(4’-甲基-1’-哌嗪基)-3α,17β-二羟基-16β-氨基-5α-雄甾烷。初步药理试验结果表明它们都有不同程度的抗心律失常活性。 相似文献
19.
20.
目的 研究 3 (3′ 甲基 4′ 取代苯基 1′ ,3′ 丁二烯基 )吲哚类衍生物的合成及其抗癌活性。方法 通过亲电取代、羟醛缩合、选择性还原、相转移Wittig反应和水解反应合成目的化合物 ,利用几种药理模型进行抗癌和抗炎活性筛选。结果 设计合成了 11个 3 (3′ 甲基 4′ 取代苯基 1′ ,3′ 丁二烯基 )吲哚化合物 ,均为新化合物。生物活性实验结果表明 ,化合物 8对HL 6 0 ,HCT 8和Bel740 2癌细胞株有效 ,且在浓度为 10 -5mol·L-1时 ,其抗炎抑制率可达 10 0 %。结论 化合物 8显示了抑癌作用和抗炎活性 ,值得进一步研究。 相似文献