新伪尾柱虫腹皮层纤毛器微管胞器的形态和形态发生

应用荧光紫杉醇直接荧光标记法显示,腹毛目纤毛虫新伪尾柱虫(Pseudourostyla nova)腹皮层纤毛器微管胞器由口围带、波动膜、额腹横棘毛和左右缘棘毛等纤毛器微管及纤毛器基部附属微管组成.口围带基部含小膜托架及与托架相联系的肋壁微管,其中领部小膜托架间由"Λ"形微管相联接;额腹横棘毛基部含前纵微管束、后纵微管束、横微管束和周围微管束,其微管在不同棘毛基部的发达程度不一;缘棘毛基部含前纵微管束、后纵微管束.同时,对新伪尾柱虫纤毛器微管胞器的形态发生和生理改组过程进行了详细的追踪研究,并对细胞皮层的额腹棘毛定位及组成特征进行了补充报道.此外,发现形态发生末期新纤毛器微管形成时,残存部分老额棘毛、横棘毛和缘棘毛,此后老结构逐渐被吸收.结果表明,新伪尾柱虫的纤毛器基部微管具有其种的特异性,新纤毛器微管分化过程中老结构可能具有定位和物质贡献作用.     

魏氏拟尾柱虫腹皮层纤毛器微管胞器的形态及形态发生

应用荧光紫杉醇直接荧光标记和抗α-微管蛋白抗体免疫荧光标记显示,魏氏拟尾柱虫(Paraurostyla weissei)腹面皮层纤毛器微管胞器由口围带、波动膜、额腹横棘毛和左右缘棘毛等纤毛器微管、纤毛器基部附属微管等组成。其中口围带基部微管包括小膜托架、小膜附属微管;额腹横棘毛和左右缘棘毛基部附属微管包括前纵微管束、后纵微管束和横微管束,它们由各自的纤毛器基部向皮层细胞质不同方向发射,形成腹皮层表面下微管网。结果表明,魏氏拟尾柱虫的纤毛器骨架、纤毛器附属结构也是一类以微管蛋白为基本成分的微管胞器,其中缘棘毛基部附属微管具有不同于其他纤毛虫(例如棘尾虫)中所观察到的同种微管胞器的建构特征。形态发生中,前仔虫口围带在老结构位置形成,其结构建成与部分老口围带的更新有关;老缘棘毛的结构物质对新的左、右缘棘毛的发生可能具有定位作用及物质贡献,但此后新的左、右缘棘毛列分别在老缘棘毛的右侧形成,而并非是在老缘棘毛位置分化的。在有些细胞中,新的左缘棘毛左侧另有一列棘毛,这可能是形态发生中老的左缘棘毛退化不完全产生的。     

腹毛目纤毛虫大尾柱虫腹皮层纤毛器基部微管的荧光标记

应用荧光紫杉醇直接荧光标记,显示腹毛目纤毛虫大尾柱虫Urostyla grandis腹皮层纤毛器微管胞器由口围带、波动膜、额腹横棘毛和左、右缘棘毛等纤毛器微管、纤毛器基部附属微管等组成.其中,口围带小膜托架及其相联系的肋壁微管和波动膜基体托架,额棘毛基部前纵微管束、后纵微管束及横棘毛基部前纵微管束,中腹棘毛及左、右缘棘毛基部前纵微管束、后纵微管束和横微管束,是该纤毛虫皮层纤毛器基部的主要附属微管.据结果推测,尽管腹毛目纤毛虫的纤毛器基部微管具有相同的结构成分,但其结构的组成、分化特征、定位和定向、发达程度等均有差异.所得结果为进一步说明纤毛虫细胞皮层纤毛器的形态及其微管建构的多样性提供了新的证据资料.     

沼泽瘦尾虫皮层纤毛器及其附属微管的观察

应用扫描电镜技术、荧光紫杉醇直接荧光标记显示了腹毛目纤毛虫沼泽瘦尾虫(Uroleptus limnetis)的细胞形态和皮层纤毛器的组成模式,以及皮层口围带、额腹横棘毛、左右缘棘毛等纤毛器微管和纤毛器附属微管的建构特征,可为进一步阐明瘦尾虫类纤毛虫的形态学及其系统发育研究提供基础资料。     

原生动物伪红色双轴虫细胞纤毛器微管胞器的直接荧光标记

应用荧光紫杉醇直接荧光标记法显示,原生动物纤毛虫伪红色双轴虫(Diaxonellapseudorubra)细胞纤毛器微管中,口围带基部含小膜托架及与托架相联系的肋壁微管;额腹横棘毛基部含前纵微管束、后纵微管束、横微管束和周围微管束,其微管在不同棘毛基部的定向和发达程度不一;缘棘毛基部含前纵微管束、后纵微管束。细胞形态发生过程中,前仔虫口纤毛器微管独立发生于老口围带内侧,在细胞形态发生末期新纤毛器微管形成时,尚有部分老额棘毛、横棘毛和缘棘毛残存,此后老结构逐渐被吸收。结果表明,伪红色双轴虫的纤毛器基部微管的分化很可能具有种属级的特异性,新纤毛器微管分化过程中老结构可能具有定位和物质贡献作用。     

冠突伪尾柱虫接合过程中小核的形态发生作用

为查明有性生殖期间小核对形态发生的影响程度和范围 ,我们利用蛋白银染色对冠突伪尾柱虫不同交配型无小核体之间的接合过程进行了跟踪观察。结果表明 :无小核细胞的交配反应能力明显下降 ;接合双方第一次皮膜形态发生如常进行 ,但纤毛器原基分化往往出现异常 ;接合后体照常进入拟包囊阶段 ,但原有纤毛器多不从皮膜上消失 ;由于没有新核器形成 ,均不能启动第二次形态发生并于拟包囊早期解体死亡。因此 ,小核对于维持接合早期及第一次皮膜改组的正常进行具有某些明显作用 ,其衍生的大核原基对于启动后续的发育则是绝对必要的     

冠突伪尾柱虫小核对胞口结构稳定性的影响

在通过显微手术所建立的冠突伪尾柱虫（Pseudourostyla cristata)无小核系中,部分细胞因口围带翻领部小膜出现不同程度的缺损而导致畸形;在细胞生长静止期的群体中,口围带畸形率高达50％以上;对无小核系600多个刚完成二分裂的前,后仔虫及1000多个生理改组末期的虫体进行蛋白银染色观察,除发现4个二分裂仔虫和3个生理改组后虫体的口围带异常外,绝大多数经过形态发生后的细胞都具有正常的胞口结构。另一方面,选择性培养实验进一步证明,口围带畸形产生于非形态发生期。由此可见,失去小核的细胞,同时也失去了胞口结构的稳定性。     

冠窦伪尾柱虫接合过程中小核的形态发生作用

为查明有性生殖期间小核对形态发生的影响程度和范围,我们利用蛋白银染色对冠突伪尾柱虫不同交配型无小核体之间 的接合过程进行了跟踪观察。结果表明：无小核细胞的交配反应能力明显下降;接合双方第一次皮膜形态发生如常进行,但纤毛器原基分化往往出现异常;接合后体照常进入拟包囊阶段,但原有纤毛器多不从皮膜上消失。由于没有新核器形成,均不能启动第二次形态发生并于拟包囊早期解体死亡。因此,小核对于纤维接合早期及第一次皮膜改组的正常进行具有某些明显作用,其衍生的大核原基对于启动后续的发育则是绝对必要的。     

冠突伪尾柱虫有性生殖期间皮膜发育的核控制

通过显微手术去小核建立多个冠突伪尾柱虫（Pseudourostyla cristata)无小细胞系,并诱导它们与有小核细胞进行接合生殖,以评估小核及其衍生的大核原基在有性生殖期间对皮膜形态发生的影响,当无小核接合体从有小核配偶获得1枚配子核后,接合双方不仅能平行地继续核器演化,而且使第1次皮膜改组能够同步进行和正常发育,说明小核在有性周期中除了生殖功能外仍保留着某些控制皮膜发育的体功能,虽然大部分接合后体的大核原基在DNA贫乏期停止发育,但少数接合后体能够超越这一时期,并启动第2次皮膜改组和顺利完成其后续的有性发育全程,表明指令发动第2次皮膜发育的信号来自DNA贫乏期后以排出一核物质团块为标志的大核原基。     

冠突伪尾柱虫（Pseudourostyla cristata）实验再生研究

冠突伪尾柱虫(Pseudvurostyla cristata) 含约70枚大核。我们用显微手术横切G1期细胞,得前后两块相等断片;分别培养。60小时后,断片再生完成。在再生过程中,随细胞体积增大,大核数目也增加。大核的数目和细胞体积存在着一定的均衡关系。在细胞无性分裂过程中,许多大核改组后,融合成一个融合大核。这个融合大核具两个仔虫的大核数目和DNA量。我们用显微手术得到含融合大核的后断片。在后断片再生后恢复的虫体内,我们发现本应分配到两个仔虫中去的大核数目,被限制在一个虫体的大核数目上。这说明了细胞质可以影响和调节大核的数目。并还证明了这种虫体大核DNA量较正常虫的大核DNA量约多一倍。其中大部分虫体分裂时,大核不经改组就开始融合和分裂;从而使DNA量回复正常。同讨还发现小部分虫体通过排出大核多余核物质方式来调节大核DNA量。这些现象说明了细胞核质之间存在着一种调节相对平衡和相互协调的机制。     

拟翁口虫形态学及形态发生学现象的初步研究

应用荧光紫杉醇直接荧光标记方法显示了一种腹毛类纤毛虫拟翁口虫(Onychodromopsis sp.)腹皮层纤毛器微管胞器及形态发生,根据该纤毛虫的皮层纤毛模式和纤毛器基部微管的形态,将其归为侧毛虫科(Pleurotrichidae)拟翁口虫属(Onychodromopsis);并据后仔虫口原基的发生、左右缘棘毛原基的...     

筛选冠突伪尾柱虫有小核细胞系和无小核细胞系饥饿期差异表达的ESTs

利用显微切割的方法建立大型腹毛目纤毛虫---冠突伪尾柱虫(Pseudourostyla cristata)的无小核细胞系,分别提取有小核和无小核细胞系的总RNA,用SMART-PCR方法直接合成dscDNA,进而运用抑制性消减杂交技术(Sup-pression subtractive hybridization,SSH)对冠突伪尾柱虫去小核前后的差异表达基因进行研究,构建了有与无小核细胞系在饥饿期差异表达基因的消减文库,随机挑取了284个克隆,应用cDNA阵列技术鉴定阳性克隆。将鉴定出的17个阳性克隆进行Blastx分析,结果表明17个EST(Expressed sequence tag)均可能与小核体功能密切相关,此为进一步阐明小核的遗传机理奠定了基础。       

Morphology and morphogenesis of a new oxytrichid ciliate,Notohymena limus n. sp. (Ciliophora,Oxytrichidae) from Delhi,India

The morphology and morphogenesis of a new oxytrichid ciliate, Notohymena limus n. sp. were studied in vivo and after protargol impregnation. The new ciliate was isolated from the sewage sludge at Delhi Jal Board Sewage Treatment Plant located at Rithala, Delhi, India, using the non-flooded Petri dish method. N. limus n. sp. is characterized as follows: flexible dorsoventrally flattened ellipsoidal body; Notohymena-pattern undulating membranes; adoral zone of membranelles (AZM) occupied about 39% of the body length, and consists of around 26 membranelles; large and deep buccal cavity; colorless subpellicular granules present in groups and arranged around the bases of dorsal bristles; 4 macronuclear nodules; 2 micronuclei; 18 fronto-ventral-transverse (FVT) cirri in typical Oxytricha-pattern; 6 dorsal rows of bristles; 3 caudal cirri; about 16 right and 15 left marginal cirri; N. limus n. sp. is a new species on the basis of the combination of morphological, morphometric and morphogenetic characteristic features.     

Morphology,Ontogeny, and Phylogeny of Two Brackish Urostylid Ciliates (Protist,Ciliophora, Hypotricha)

The diversity of hypotrichous ciliates has encouraged numerous researchers to use a combination of morphological, morphogenetic, and phylogenetic data to provide a better understanding of the evolutionary relationships within this complex group. In this study, we investigate the morphology and morphogenesis of Pseudourostyla subtropica sp. nov., isolated from mangrove wetland. The new species can be distinguished from its congeners by the huge body size, many more adoral membranelles and marginal cirral rows, and numerous macronuclear nodules. In addition, we provide a morphological characterization of a population of Pseudourostyla nova Wiackowski 1988 from an estuarine habitat. The main events during binary fission of P. subtropica sp. nov. and the Chinese population of P. nova are also revealed to be conservative. The morphological, ontogenetic, and phylogenetic analyses based on the SSU rDNA sequences corroborate the monophyly of Pseudourostyla Borror, 1972, which corresponds well with previous research. The phylogenetic analyses also show that Pseudourostyla and Hemicycliostyla Stokes, 1886, both of which are assigned to the family Pseudourostylidae based on morphological and morphogenetic data, in fact fall into separated clades. The approximately unbiased tests, however, do not reject the possibility that the family Pseudourostylidae is a monophyletic lineage.     

Morphology and Molecular Phylogeny of a New Hypotrich Ciliate,Pseudourostyla guizhouensis sp. nov. from Southern China,with Notes on a Chinese Population of Hemicycliostyla franzi (Foissner, 1987) Paiva et al., 2012 (Ciliophora,Hypotricha)

The morphology and molecular phylogeny of a soil hypotrich ciliate, Pseudourostyla guizhouensis sp. nov., collected from southern China, were investigated. Pseudourostyla guizhouensis sp. nov. has an elongate elliptical body measuring 180–310 × 65–85 μm in vivo; invariably two right and three or four left marginal rows; six or seven dorsal kineties; adoral zone consisting of 57–70 membranelles; 12–16 frontal cirri, one buccal cirrus, 13–20 midventral pairs, two frontoterminal cirri, two pretransverse cirri, and five to seven transverse cirri. Morphogenesis during physiological regeneration indicates that the marginal rows of each side originate from a common anlage that differentiates into several rows. Molecular phylogenetic analysis based on SSU rDNA sequence data reveals that P. guizhouensis sp. nov. clusters with the type species P. cristata (Jerka‐Dziadosz, 1964) Borror, 1972 and that the genus Pseudourostyla is monophyletic. The morphological characters of another soil hypotrich ciliate, Hemicycliostyla franzi (Foissner, 1987) Paiva et al., 2012, are also described based on a Chinese (Guizhou) population.     

镰游仆虫腹面皮层细胞骨架的扫描电镜观察

应用非离子去垢剂抽提和扫描电镜样品制备、观察相结合的方法，显示了镰游仆虫的腹面皮层细胞骨架，详细描述了处于毛基体和毛基体下水平的口围带、口侧膜、额腹横棘毛骨架，以及口围带小膜托架、口侧膜托架、额腹横棘毛托架的主要附属纤维和非纤毛区表膜下皮层骨架的立体图形。作者据所述各种纤毛器托架附属纤维的定位和分布特征推测，这些附属结构可能与细胞内各种纤毛器间的联系，以及包括纤毛器运动在内的整个细胞运动的协调等有关。     

异毛虫形成包囊过程中细胞皮层及纤毛结构分化的扫描电镜观察

在纤毛虫无性生殖中,生命活动受阻时经常会发生形成包囊的现象。研究纤毛虫的包囊现象,已成为揭示真核细胞的结构与功能、细胞模式形成与控制机理的一个重要方面。目前,对腹毛目纤毛虫中游仆虫类包囊的形态及其生理生化特征已进行了较系统的研究,积累了较多的资料,但对其他类