丙型肝炎病毒抗体、丙型肝炎病毒RNA联合丙氨酸氨基转移酶检测用于丙型肝炎诊断的临床分析

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)抗体、HCVRNA和丙氨酸氨基转移酶(ALT)联合检测用于丙型肝炎诊断的临床价值.方法 采用夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定HCV抗体、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测HCV RNA和酶法测定ALT含量.通过三者联合检测可获知患者的丙型肝炎发生情况,并探讨三者之间的关系.结果 在252例HCV抗体阳性患者中,157例(62.30％)患者HCV RNA显示阳性；而在157例HCV RNA阳性患者中,有98例(62.42％)患者ALT异常,且随着HCV RNA水平的升高,其ALT水平升高；在95例HCV RNA阴性患者中,有32例(33.68％)患者ALT异常.HCV RNA阳性患者的ALT异常率明显高于HCV RNA阴性患者,差异有统计学意义(P＜ 0.05)；HCV RNA水平与ALT含量有一定的相关性(r=0.9506).结论 HCV抗体、HCV RNA和ALT均有一定的缺陷,三者联合检测可提高丙型肝炎的诊断率.     

丙型肝炎病毒抗体阳性者血清病毒载量与丙氨酸转氨酶相关性研究

目的对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)阳性者血清进行病毒载量和转氨酶的检测,研究其相关性,为临床诊断和治疗丙型肝炎提供一定依据。方法选择2009—2011年济南市中心医院医学实验诊断中心感染免疫实验室和济南市传染病医院检验科免疫室收集的抗-HCV阳性血清162例,应用荧光定量聚合酶链式反应(FQ-PCR)检测丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV RNA),应用全自动生化分析仪检测丙氨酸转氨酶(ALT)。异常率与平均值采用Sperman等级相关分析,阳性率比较用χ2检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 162例抗-HCV阳性者血清共检出HCV RNA阳性(≥80拷贝/ml)110例(67.9%),HCV RNA阴性52例(32.1%);ALT异常者93例(57.4%),ALT正常者69例(42.6%)。对HCV RNA水平进行分级,发现ALT异常率随HCV RNA水平的增高而增加,两者呈正相关(r=0.943,P<0.05),而与ALT水平高低无相关性(r=0.486,P>0.05)。ALT异常组中,ALT在40～80 U/L范围内HCV RNA阳性只有12例(40%)阴性18例(60%),ALT>80 U/L中HCV RNA阳性有59例(93.7%)阴性4例(6.3%),两者统计学分析有显著性差异(χ2=32.390,P<0.05)。结论 ALT异常率随HCVRNA水平的增高而增加,两者呈正相关,而与ALT水平高低无相关性;某些未知的干扰因素使得ALT处于低水平异常状态,此时HCV RNA并不显示阳性,表明此时并非处于病毒复制状态,因此在诊断尤其在治疗丙型肝炎时,HCV RNA的定量检测依然占有无法替代的优势。     

慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV和HCV-RNA与肝功能指标变化的临床意义

目的分析慢性丙型肝炎患者血清抗-丙型肝炎病毒(HCV)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)及肝功能指标的变化特点与临床意义。方法选择2012年1月-2017年4月玉环市人民医院收治的慢性丙型肝炎感染患者87例为研究对象,均留取外周静脉血,测定血清抗-HCV、HCV-RNA及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰基转移酶(GGT)水平的变化,并采用Pearson相关性分析分析HCV-RNA、抗-HCV与ALT、AST、GGT变化的关系。结果 87例慢性丙型肝炎患者抗-HCV阳性91.95%(80/87),HCV-RNA阳性66.67%(58/87);HCV-RNA低水平,中水平和高水平组ALT、AST、GGT分别为(56.21±20.53)U/L、(48.93±16.51)U/L、(45.74±6.52)U/L,(78.51±15.43)U/L、(60.73±9.82)U/L、(56.81±10.74)U/L和(104.61±30.82)U/L、(73.52±10.23)U/L、(57.92±11.31)U/L均高于HCV-RNA阴性组(P<0.05);HCV-RNA中水平组ALT、AST、GGT高于低水平组(P<0.05),HCV-RNA高水平组ALT、AST、GGT高于HCV-RNA中水平组(P<0.05);随着HCV-RNA载量的提升,抗-HCV S/CO≥1.0所占比例上升,但差异无统计学意义(P=0.085);抗-HCV检查结果S/CO≥1.0患者ALT、AST、GGT为(80.72±20.93)U/L、(65.23±10.64)U/L、(55.42±12.21)U/L均高于S/CO<1.0者(P<0.001);抗-HCV、HCV-RNA均与慢性丙型肝炎患者ALT、AST呈正相关(P<0.05)。结论慢性丙型肝炎患者血清抗-HCV、HCV-RNA阳性率较高,且均与患者肝功能指标AST、ALT的变化呈正相关,可作为反映患者肝组织损伤情况的重要依据,具有一定的临床意义。     

高灵敏度HCV RNA检测在慢性丙型肝炎患者中的诊断及治疗检测应用

目的探讨高灵敏度HCV RNA检测在慢性丙型肝炎患者中的诊断及治疗评价方面的临床意义。方法收集本院就诊的130例未经治疗的丙肝抗体阳性的初治患者(初治组)和既往曾经抗病毒治疗、结束时用普通试剂检测结果低于检测下限(<1 000 IU/mL)且达到停药标准的148例患者(停药组),同时采用普通检测方法(检测值下限为1 000 IU/mL)和高灵敏度检测方法(检测值下限为20 IU/mL)检测HCV RNA并进行对比;另外收集46例丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)基因分型为1b型的慢性丙型肝炎初治患者,予患者抗病毒治疗,同时使用2种方法检测患者治疗前和治疗后2、4、12周的HCV RNA结果,进行对照分析。结果初治组普通方法检测阳性125例,阴性5例,高灵敏度检测方法阳性126例,阴性为4例,2者对比差异无统计学意义(P>0.05),停药组普通方法检测阳性6例,阴性为142例,高灵敏度方法检测阳性16例,阴性为132例,后者阳性率高于前者(P<0.05)。1b型的慢性丙型肝炎治疗2周后普通方法检测组6例(13%)阳性,高灵敏度方法组42例(91.3%),4周时普通检测方法组阳性为0例,高灵敏度方法组为4例(8.7%),12周普通检测方法组HCV RNA阳性率为0,高灵敏度方法组为1例(2.2%);高灵敏度方法组在治疗2周后检测HCV RNA阳性率明显高于普通方法组(P<0.05),治疗前、治疗4周、12周2组对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论高灵敏度检测法用于监测和评价慢性丙型肝炎患者的疗效灵敏性更高,可用于指导慢性丙型肝炎的疗效评估。     

丙型肝炎病毒感染患者血清肝特异性自身抗体的检测及临床研究

目的了解丙型肝炎患者血清中肝特异性自身免疫性抗体的检出率,探讨自身免疫在丙型肝炎(HCV)感染中的意义。方法采用间接免疫荧光法,对220例丙型肝炎病毒感染者血清进行肝特异性自身抗体的检测;应用聚合酶链反应定量检测血清HCV-RNA含量,HCV抗体的检测用ELISA法;回顾性分析HCV-RNA病毒、AST、ALT、ALP和r-GT与自身抗体检出的关系。结果220例丙型肝炎患者总自身抗体检出率为32.73%;HCV-IgG单阳性(HCV-IgG( )HCV-RNA(-))的检出率为29.57%;HCV-IgG( )HCV-RNA( )自身抗体检出率为40.59%,HCV-IgG( )HCV-RNA(-)与HCV-IgG( )HCV-RNA( )组比较差异有统计学意义(P<0.01)。各组与正常对照比较差异均有统计学意义(P<0.01);自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体。自身阳性的检出与性别无关(P>0.05)与年龄关系密切(P<0.01)。自身抗体阳性丙型肝炎患者的血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)及γ-球蛋白均高于自身抗体阴性患者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论HCV在感染过程中可诱导自身免疫反应,使感染者体内产生多种自身抗体,自身抗体检出率与年龄关系密切且与病毒的复制有关。自身抗体以低滴度为主,主要为抗核抗体。自身抗体可能是HCV感染后肝组织损伤的重要因素,应引起重视。     

Sanger测序法分析兰州地区112例丙型肝炎患者基因亚型

目的探讨兰州地区HCV感染者基因亚型分布及其临床价值。方法选取了112例HCV感染者血清标本,测定HCV RNA病毒载量、Sanger测序法检测HCV基因亚型分布、ALT、AST等肝功能相关指标。结果 112例标本中血清学分型率为80. 4%,其中1b型占39. 3%,2a型占35. 7%,3a型占3. 6%,6a型占0. 9%,6g型占0. 9%,未检出组占19. 6%。基因1b型、2a型、3a型与未检测组HCV RNA病毒载量比较,差异有统计学意义(P <0. 05);其中1b型、2a型和3a型与未检出组ALT水平比较,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论兰州地区HCV感染以1b型为主,其次为2a型、3a型、6a型、6g型。且HCV基因亚型与ALT、AST等肝功能指标及HCV RNA病毒载量具有一定的相关性,为该地区丙型肝炎的预防和治疗提供部分理论依据。     

丙型肝炎患者HCV RNA载量与HCV-cAg及SOD、FFA相关性分析

目的探究丙型病毒性肝炎患者血清中丙肝病毒RNA(HCV RNA)载量与丙型肝炎核心抗原(HCV-cAg)及超氧化物歧化酶(SOD)、游离脂肪酸(FFA)的相关性。方法对2015年1月至2019年2月105例HCV RNA定量检测为阳性的临床标本,同时检测其HCV-cAg及SOD、FFA的含量。结果 HCV RNA载量与HCV-cAg、SOD、FFA水平有显著相关性,随着患者体内HCV RNA载量的升高,HCV-cAg阳性率也随之升高,差异有统计学意义(P<0.05),两者呈正相关;HCV RNA载量不同组间SOD水平比较差异有统计学意义(P<0.05),SOD水平随着患者体内HCV-RNA载量的升高而降低,两者呈负相关关系;低、中载量组间FFA水平比较差异无统计学意义(P>0.05),而均与高载量组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HCV-cAg与HCV RNA有良好的相关性,出现时间早且适合基层推广,SOD和FFA在一定程度上可以反映病情进展情况,联合检测在丙型肝炎的早期诊断和监测治疗效果上有重要的临床意义。     

血清HCV RNA载量、HCV抗体及ALT相关性研究

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染者血液中HCV RNA载量、HCV抗体及丙氨酸氨基转移酶(ALT)检测结果的相互关系。方法经ELISA法检测的HCV抗体阳性血样,采用胶体金法检测HCV抗体,同时用荧光RT-PCR检测血清HCV RNA载量,用全自动生化仪定量检测ALT。结果 255份ELISA检测为HCV抗体阳性样本中,154份胶体金法阳性,139份HCV RNA阳性,59份ALT结果异常。HCV抗体高值组(S/CO值≥10)中HCV RNA阳性率为85.49%,胶体金阳性率为96.95%,ALT异常率35.88%,均显著高于S/CO低值组(1S/CO5)和S/CO中值组(5≤S/CO10)。胶体金阳性样本,HCV RNA阳性率(74.03%)显著高于胶体金阴性样本的HCV RNA阳性率(24.75%),二者差异有统计学意义(P0.05)。胶体金阳性样本的ALT异常率(32.47%)显著高于胶体金阴性样本的ALT异常率(8.91%),二者差异有统计学意义(P0.05)。HCV RNA阳性者的ALT异常率(35.50%)显著高于HCV RNA阴性者的ALT异常率(8.57%),二者差异有统计学意义(P0.05)。ALT异常率随着HCV RNA载量的增高而升高,有一定相关性(r=0.975,P=0.001),而ALT变化与HCV RNA载量无相关性(r=-0.26,P=0.63)。结论对人群HCV感染的筛查,可在ELISA法检测HCV抗体基础上,对S/CO高值人群进行HCV RNA的检测,提高检出率的同时最大程度地降低成本。     

血清谷丙转氨酶（ALT）升高者中丙型肝炎的感染率

本对56名血清ALT水平升高进行了抗-HVC抗体以及HBsAg、HBeAg的检测。HBsAg阳性16人(28．6％),抗-HCV抗体阳性9人(16．1％),HBV和HCV双重感染4人。HCV在ALT升高中的感染率显高于正常人群,且双重感染血清中ALT水平也显高于单纯HBV感染。由此说明：今后有重点地针对肝功能异常的体检进行抗-HCV抗体检测是预防丙型肝炎传播的重要手段之一。     

艾滋病合并乙型肝炎患者CD_4~+T淋巴细胞及血浆病毒载量与肝功能的相关性分析

目的分析艾滋病合并乙型肝炎患者CD_4~+T淋巴细胞水平及血浆病毒载量与肝功能的相关性。方法选取2013年5月-2018年6月遂宁市中心医院收治的艾滋病合并乙型肝炎患者84例为研究组,未合并乙型肝炎的单纯艾滋病患者100例为对照组,分析患者CD_4~+T淋巴细胞水平、HIV RNA载量、肝功能指标:谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)、白蛋白(ALB)水平,分析CD_4~+T淋巴细胞、病毒载量与肝功能的相关性。结果研究组CD_4~+T淋巴细胞数、ALB水平低于对照组,而HIV RNA载量、ALT、AST、TBIL水平高于对照组(P<0.05);随着CD_4~+T淋巴细胞数增加,HBV DNA载量、HIV RNA载量及ALT、AST、TBIL水平逐渐下降,ALB逐渐升高,差异均有统计学意义(P<0.05);随着HBV DNA拷贝数增加,CD_4~+T淋巴细胞数、ALB逐渐降低,而HIV RNA载量、ALT、AST、TBIL逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05);艾滋病合并乙型肝炎患者CD_4~+T淋巴细胞数与ALB呈正相关,与HBV DNA载量、HIV RNA载量、ALT、AST、TBIL呈负相关(P<0.05),HBV DNA载量与HIV RNA载量呈正相关(P<0.05)。结论艾滋病合并乙型感染患者CD_4~+T淋巴细胞、血浆病毒载量及肝功能存在明显相关性,随CD_4~+T淋巴细胞数减少,病毒载量上升,肝功能受损更严重,同时两种病毒可能有相互促进作用,加重患者肝损伤与免疫缺陷。     

丙型肝炎病毒结构蛋白对病毒细胞间传播的影响

目的 探究丙型肝炎病毒（Hepatitis C Virus, HCV）结构蛋白对病毒细胞间传播的影响。方法 分别以HCV基因组电转后的Huh7.5.1细胞和未经电转的Huh7.5.1细胞作为供体细胞和受体细胞,同时加入中和抗体,建立HCV细胞间传播检测系统,应用已建立好的细胞间传播检测系统探究病毒结构蛋白对病毒细胞间传播的影响。结果 在HCV细胞间传播检测系统中,野生型病毒可进行正常的细胞间传播,结构蛋白缺失的缺陷型病毒不能进行细胞间传播。结论 HCV的结构蛋白对HCV进行细胞间传播至关重要。     

血清中HCV抗体与HCV-RNA检测在临床中的应用

目的探讨丙型肝炎病毒抗体与RNA在临床中的应用价值。方法用ELISA法检测934例丙型肝炎可疑患者病毒抗体,用实时荧光定量PCR检测379例丙型肝炎可疑患者病毒RNA。结果934例患者HCV抗体阳性率为19.16%,379例HCV-RNA阳性率为43.01%。53例为两者均做的病人,RNA和Ab均阳性的占52.8%(28/53),均阴性占15.1%(8/53),两者的一致率达67.9%,Ab的阳性率为81.1%(43/53),RNA的阳性率为56.6%(30/53)。结论HCV抗体联合HCV-RNA检测对丙型肝炎的临床诊断有一定的价值。     

HCV genotyping by combination of the Cobas Amplicor HCV 2.0 test and the reverse hybridization Versant HCV Genotype Assay

Genotyping of hepatitis C virus (HCV) is of relevance to scheduling the treatment of patients with chronic hepatitis C (VHC), making their prognosis and monitoring the treatment efficacy. A set of 62 sera testing HCV RNA positive in Cobas Amplicor HCV 2.0 test (CA) were genotyped using Versant HCV Genotype Assay (LiPA) Bayer, i.e. the reverse hybridization method, with the CA amplified product being directly used in the assay. Fifty-six out of 57 samples reactive in reverse hybridization (92%) were genotyped. One sample showed a profile differing from any genotype, five samples were not reactive and one sample was not tested within this study design. Two out of five non-reactive sera and one non-tested serum could be genotyped by nested PCR based reverse hybridization. It can be concluded that the CA product resulting from one-step HCV RNA amplification is suitable for use in genotyping by reverse hybridization. The CA product based genotyping procedure is easier to perform, less time-consuming and less costly. The nested PCR based procedure could be used for typing of sera with lower HCV concentrations nontypeable with the combination of CA and Versant HCV Genotype Assay. Forty-eight selected samples were typed not only by reverse hybridization but also by a serological kit Murex HCV Serotyping 1-6 Assay (Abbot Murex). Thirty-seven (77%) of these sera, including all of three sera negative in reverse hybridization, appeared typeable by this kit. Although less sensitive, serotyping may be of relevance to typing of sera with low HCV levels or not containing detectable viral NA which are nontypeable by reverse hybridization. Thirty-three sera appeared genotypeable by both of the methods tested with the results being in good agreement. In two cases only the serotyping method revealed one more type of virus (mixed genotype) compared to the reverse hybridization.     

HCV的垂直传播

目前丙型肝炎病毒传播已成为危害公众健康的主要问题之一 ,自从 90年代初对血液制品进行抗 HCV筛查以来 ,母婴垂直传播已成为HCV的主要传染方式。但其具体传播机制尚不清楚 ,可能与母乳喂养和分娩方式等有关。对HCV感染的早期诊断 ,包括对高危孕妇的筛查 ,有利于疾病的治疗和预后     

丙型肝炎病毒抗体阴性献血人群中丙型肝炎病毒核心抗原检测的研究

目的观察丙型肝炎病毒(HCV)抗体阴性献血人群HCV核心抗原的流行情况,初步评估经HCV抗体检测后输血传播HCV的潜在风险. 方法 抗HCV抗体和HCV核心抗原检测采用ELISA试剂盒,丙氨酸氨基转移酶检测采用速率法,HCV RNA检测采用实时荧光PCR检测试剂盒. 结果在抗HCV检测阴性的1 758份无偿献血者标本中,HCV核心抗原检测有3份阳性,阳性率为0.17%;HCV核心抗原阳性的3份样本HCV RNA检测为阴性. 结论结果提示抗HCV检测后,经血液传播HCV的潜在风险已经很低.     

丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝检测中的应用分析

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原在丙肝感染诊断中的临床应用价值。方法采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对162例疑似HCV感染者血清进行HCV RNA检测,同时用ELISA法对其进行HCV核心抗原和抗-HCV检测。结果 162例样本中,抗-HCV阳性率64.20%(104/162),HCV RNA阳性率51.85%(84/162),HCV核心抗原阳性率35.19%(57/162);HCV RNA和HCV核心抗原均阳性样本57例,二者符合率为67.86%;HCV核心抗原和HCV RNA阳性而抗-HCV阴性者1例。结论 HCV核心抗原是HCV早期感染的标志之一,检测HCV核心抗原有利于HCV感染的早期诊断。     

凉山州HIV/HCV共感染人群中HCV分子流行病学研究

目的 分析凉山州HIV/HCV共感染人群中的亚型特点和流行规律,为预防提供科学依据.方法 2011-2012年从四川省凉山州某县彝族地区25岁以下HIV-1感染人群中采集抗凝血浆标本127份.提取病毒核酸,并扩增HIV pol区,进行序列测定和分析,确定HIV基因型.同时用ELISA法进行抗HCV的检测,经初筛和复检的抗HCV阳性的血浆,进一步用巢式PCR(nested-PCR)分别扩增HCV 5'NCR-core、E1-E2和NS5B 3个基因片段,并进行序列测定和分析,确定HCV基因亚型.结果 凉山州HIV-1的人群中合并感染HCV感染率为53.5％.该地区HIV-1以CRFD7-BC为主(95％),另外发现3例B亚型的毒株(5％).而合并感染的HCV亚型较为复杂,包括18(2例,4％);1b(3例,6％);3a(8例,17％);3b(14例,29％);6a(1例,2％);6U(19例,40％),6n(1例,2％).结论 凉山州某县彝族地区25岁以下人群中存在较高的HIV-1/HCV共感染率,且HCV亚型分布主要以3b和6U型为主,这与中国大陆以1b、2a型为主的流行特征有较大区别,提示该地区HCV的流行与云南地区吸毒人群的传播相关.     

HCV transmission in family members of subjects with HCV related chronic liver disease

To investigate the risk of sexual and intrafamilial transmission of HCV, 220 family members of 76 patients (index cases) with chronic type C viral liver disease were tested for serological markers of HCV Of the family members, 129 were offspring, 64 sexual partners, 15 parents and 12 siblings of the index cases. Anti-HCV was tested in all the household contacts; HCV-RNA was tested in antibody positive samples. The serologic markers of HCV were tested in a control group of 168 family members of 81 patients with chronic hepatitis unrelated to HCV. The overall prevalence of anti-HCV was 8.2% compared to 0.6% in the control group (p < 0.001). Sexual partners were anti-HCV positive more frequently than the other contacts (20% vs 2.2%; p < 0.001), without any difference in males or females. No correlation was observed between the occurrence of HCV infection in contacts and age, severity of liver disease or risk factor for the acquisition of HCV in the index cases. Seven of the 18 (39%) anti-HCV positive family contacts had biochemical evidence of chronic liver disease, histologically confirmed in the 6 patients who underwent a liver biopsy. Liver chemistry was normal in all the HCV-negative contacts. Ten of the 18 anti-HCV positive contacts (55%) were HCV-RNA positive. Genotypes were the same (lb) in 4 of the 7 viremic couples of subjects: in 3 of the 6 couples of sexual partners and in the only mother/son couple. These data suggest the occurrence of intraspousal transmission of HCV, while intrafamiliar acquisition of HCV in non-sexual contacts seems to be rare.