β_1整合素在生后不同年龄阶段小鼠睾丸生精细胞分布的研究

目的　观察 β1 整合素在出生后不同年龄阶段小鼠睾丸生精细胞中的免疫组化定位。方法　用免疫组织化学观察 β1 整合素在生后 1d、4d、7d、1 1d、2周、3周、4周、5周、6周和成年昆明小鼠睾丸生精细胞中的分布。结果　出生后 1～ 1 0d的小鼠睾丸生精小管上皮细胞未见 β1 整合素的表达 ;出生后 1 1d到成年小鼠的不同年龄阶段均可检测到 β1 整合素在睾丸生精小管上皮细胞中的表达。在生后 1 1d到 4周小鼠 ,β1整合素主要表达于增殖能力旺盛的精原细胞的胞膜 ,5周后 β1整合素主要表达于精原细胞和拉长期精子细胞头部细胞膜。结论　β1 整合素是生后 1 1d～ 4周小鼠精原细胞的表面标志     

凋亡生精细胞的观察

用瑞－姬法观察凋亡生精细胞的各种形态，即凋亡的初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞，并观察了凋亡的前列腺上皮细胞的形态，就生精细胞凋亡原因进行了分析。     

实验性肺纤维化大鼠组织整合素α5β1和转化生长因子—β的表达

目的 研究纤维连接蛋白受体整合蛋白受体整合素α５β１在大鼠肺纤维化中的作用。方法 用免疫组化方法观察实验性大鼠肺纤维化纤维连接蛋白及其受体整合素α５β１和转化生长因子－β表达的动态变化：用Ｎｏｒｔｈｅｍ印迹杂交和免疫细胞化学方法观察ＴＧＦ－β对体外培养的大鼠肺成纤维细胞整合素α５β１ ｍＲＮＡ和 白表达的影响。结果 （１）实验组１￣３天,病灶内上皮细胞和骨皮细胞整合素α５β１表达明显增强,炎细胞及     

生精细胞的凋亡与调控

生精细胞凋亡是近年来生殖生物学的研究热点之一 ,动物的不同发育阶段 ,年龄差异 ,激素水平尤其FSH是影响生精细胞凋亡的重要因素。本文重点对生精细胞凋亡的影响因素及其基因调控机制进行综述。     

睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的关系

睾丸的生精上皮具有高度增殖能力,生精过程中细胞增殖与凋亡的动态平衡,对于维持精子的生成的数量和质量具有重要的作用。外来化学毒物可以直接引起睾丸损伤,导致生精细胞过量凋亡,从而导致精子生成减少。生精细胞凋亡时细胞骨架蛋白改变的研究成为一个热点,睾丸波形蛋白表达发生了异常改变,但睾丸波形蛋白表达与生精细胞凋亡的相关性还需进一步研究。     

整合素α5β1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达.结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P＜0.05),与患者年龄无相关性(P＞0.05).结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关.采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标.     

染砷大鼠睾丸生精细胞凋亡的变化

目的观察不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对成年大鼠生精细胞凋亡的影响。方法40只健康雄性SD大鼠随机分成4组，分别为0．375mg／kg、0．75mg／kg、1．5mg／kg3个染毒组和对照组，灌胃法连续给药16周后对各组大鼠进行睾丸脏器系数、精子头计数，并计算每日精子生成量（DSP）。采用甲基绿—派诺宁染色法和TUNEL原位细胞杂交方法检测大鼠生精细胞凋亡情况。结果①中剂量组（0．75mg／kg）和高剂量组（1．5mg／kg）睾丸精子头计数和DSP均低于对照组（P〈0．05）；②与对照组相比，中剂量组和高剂量组生精细胞凋亡指数（AI）均显著升高（P〈0．01）；③生精细胞凋亡指数与每日精子生成量呈负相关（r=-0．563，P〈0．01）。结论一定剂量的As2O3可通过促进生精细胞凋亡而导致精子生成量的减少，产生生殖毒性。     

砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子表达及生精细胞凋亡的影响

目的:探讨砷染毒对大鼠睾丸凋亡诱导因子(AIF)表达及生精细胞凋亡的影响。方法:雄性SD大鼠被随机分为对照组和染砷组。采用自由饮用方式进行连续染毒6个月。采用免疫印迹及实时荧光定量PCR检测AIF表达水平;采用TUNEL法观察生精细胞凋亡的情况。结果:免疫印迹及实时荧光定量PCR结果显示,与对照组比较,染砷组大鼠睾丸内AIF蛋白及mRNA表达水平均显著增高。TUNEL法检测结果显示与对照组比较,染砷组生精上皮凋亡细胞平均灰度值显著增高。结论:砷染毒时AIF介导的非caspase依赖性凋亡途径可能参与了大鼠生精细胞凋亡。     

大鼠后肢侧支动脉生成过程中整合素α5β1和纤维连接蛋白的表达

目的:探讨侧支动脉生成过程中平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)移动增殖的机制。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中整合素α5β1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达。并在体外实验中检测了不同的细胞外基质对SMC表达整合素α5β1的影响。结果:侧支血管整合素α5β1和FN的表达分别是对照侧的1.9倍和2倍;而LN的表达是对照侧的1／3。种植在FN上的SMC高表达整合素α5β1;种植在LN上的表达较低;而种植在三维Matrigel基膜成分胶里的SMC几乎不表达整合素α5β1。结论:在侧支血管发育过程中,整合素α5β1、FN和LN的表达变化,有助于侧支血管生长发育过程中SMC的迁移和增殖。     

SB203580对大鼠隐睾生精细胞凋亡的影响

目的:探讨SB203580对大鼠隐睾所致生精细胞凋亡过程中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为隐睾组、隐睾 SB203580(p38MAPK抑制剂)组、隐睾 溶媒组、假手术组。复制单侧隐睾模型,术后分别腹腔内注射溶媒或SB203580。7 d后快速断颈椎处死,TUNEL原位末端标记法结合流式细胞术(FCM)检测各组右侧睾丸生精细胞凋亡,免疫组化观察各组右侧睾丸磷酸化p38MAPK蛋白表达的变化。结果:FCM及TUNEL法均显示隐睾 SB203580组生精细胞凋亡指数低于隐睾组和隐睾 溶媒组,同时磷酸化p38MAPK蛋白表达减少。结论:SB203580能降低p-p38MAPK蛋白表达并抑制热压诱导的生精细胞凋亡。     

内皮细胞对血管平滑肌细胞整合素β1表达的影响

目的:探讨内皮细胞(endothelial cells,Ecs)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)整合素β1(β1-integrin)表达的影响,为研究血管壁细胞功能提供理论依据.方法:应用血管ECsVSMCs联合培养系统.以Western Blot和细胞免疫荧光技术,检测与Ecs联合培养12 h后VSMCs的β1-integrin表达和分布变化.结果:与Ecs的联合培养.能明显增强VSMCs的β1-integrin蛋白表达,同时诱导VSMCs表面β1-integfin的激活.结论:Ecs可能通过调节VSMCs的β1-integrin表达,从而影响VSMCs的功能.     

α5和β1整合素亚基在肺腺癌细胞系凋亡中的作用

整合素作为细胞外基质蛋白(ECM)的受体,参与细胞的生长、增殖及凋亡的调节。当其被ECM激活后,则可刺激细胞产生生存信号并抑制细胞凋亡。如果整合素与ECM的结合导致细胞内原癌基因的持续激活,肿瘤细胞则可不需要黏附于ECM而生长,因此,其与肿瘤细胞的侵袭性生长及转移等密切相关[1]。为探讨α5、β1整合素亚基对体外培养的人肺腺癌细胞系GLC-82凋亡的作用,研究中我们以α5、β1整合素亚基,观察了GLC-82细胞的凋亡。1材料和方法1.1材料人肺腺癌细胞株GLC-82引自中国医学科学院肿瘤研究所。鼠抗人抗α5整合素亚基mAb1956Z购于CHEMI…     

周期性压力对兔软骨细胞整合素α3β1的影响

观察周期性压力对兔关节软骨细胞增殖及其分泌整合素α3β1的影响。通过体外分离培养胎兔关节软骨细胞,取第3代细胞接种于6孔板,分别设置无干预对照组（A组）、周期性压力组（B组压力25PSI,频率2Hz）,持续性压力组（C组压力25PSI,持续加压）。压力干预每天2 h,连续干预3 d后,以WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒检测各组软骨细胞增殖情况（OD值）,并以ELISA法检测各组培养上清中整合素α3β1含量。细胞OD值A组为1.16±0.08,B组为1.52±0.12,C组为1.36±0.13,三组间两两比较OD值差异均有统计学意义（P〈0.05）。A组整合素α3β1水平为3.64±0.15 pg/ml,B组为4.03±0.19 pg/ml,C组为3.77±0.14 pg/ml,三组间两两比较整合素α3β1差异有统计学意义（P〈0.05）。周期性压力刺激兔软骨细胞,能增加软骨细胞的增殖作用和整合素的含量,其作用比持续性压力更强。     

谷胱甘肽对染锰大鼠生精细胞凋亡与增殖的影响

目的:研究谷胱甘肽(GSH)对染锰大鼠生精细胞凋亡与增殖的作用及机制。方法:雄性SD大鼠48只随机分为6组,各组给锰途径为腹腔注射。采用TUNEL法检测生精细胞凋亡指数(AI);免疫组织化学法检测生精细胞增殖细胞核抗原(PCNA)表达。结果:与空白对照组比较,GSH对照组和15mg/kg GSH组生精细胞AI与生精细胞PCNA增殖指数(PI)均无显著性差异;与各自对应的单纯染锰组比较,15mg/kg GSH组和30mg/kg GSH组生精细胞AI均显著降低而PI均显著升高;30mg/kg组与15mg/kg组比较,生精细胞AI显著升高而PI显著降低;各组大鼠生精细胞AI和PI呈负相关。结论:15mg/kg和30mg/kg氯化锰可诱发大鼠睾丸生精细胞凋亡,两者存在剂量-效应关系;各组大鼠睾丸生精细胞AI和PI呈显著负相关;GSH对锰诱发大鼠生精细胞凋亡具有拮抗作用;GSH可能拮抗锰对大鼠生精细胞增殖的抑制作用。     

α3β1整合素在糖尿病大鼠肾脏的表达及其与足细胞减少的关系

目的动态观察1型糖尿病大鼠肾小球足细胞及粘附分子α3β1整合素表达的时相变化,探讨α3β1整合素与足细胞减少,蛋白尿发生的关系。方法以1型糖尿病大鼠为动物模型,于第2,4,6,8,12周以肾小球足细胞表面标志物肾母细胞瘤抑制基因(Wilm’stumor1,WT1)水平检测足细胞密度变化,同时以免疫比浊法检测大鼠24h尿微量白蛋白水平,及RT-PCR法测定各组大鼠肾皮质α3β1整合素mRNA的表达水平。结果与对照组相比,糖尿病大鼠从2周起出现明显的足细胞密度减低,24h尿量和尿微量白蛋白增加,4周开始出现血尿素氮升高,8周开始出现血清肌酐升高,并且随着病程进展,足细胞密度和24h尿微量白蛋白水平变化更加明显。α3β1整合素mRNA水平从第2周起比正常对照组明显降低,而在4周、8周和12周并没有呈现持续的减少。结论在糖尿病肾病早期,α3β1整合素水平降低可能是导致足细胞减少和蛋白尿发生的主要原因,而随着糖尿病病程进展,可能有其他机制参与,从而导致了糖尿病肾病足细胞减少、蛋白尿发生和肾小球损伤的进展。     

整合素α4、β1 mRNA在着床前小鼠子宫内膜及胚卵的表达

目的 观察着床前小鼠子宫内膜及胚卵整合素α4、β1mRNA的表达。方法 用原位杂交技术检测妊娠1～4d小鼠子宫内膜及胚卵整合素α4、β1mRNA的表达。结果 整合素α4、β1mRNA主要表达在子宫内膜腔上皮，腺上皮，表达强弱不等。妊娠3d基质细胞出现阳性信号，4d增强；胚卵整合素α4、β1mRNA仅在Ⅱ细胞期弱表达，在其他时期表达较强。结论 妊娠1～4d小鼠子宫内膜及胚卵持续表达整合素α4、β1mRNA，提示它们可能参与小鼠胚泡的着床过程。     

整合素α_4β_1及其配体与大鼠肝肿瘤周边肥大细胞募集的关系

目的 :研究整合素α4 β1(VLA 4)及其配体VCAM 1(vascularcelladhesionmolecular 1)和FN(fibronectin)与肝肿瘤周边肥大细胞 (mastcell,MC)募集的关系。方法 :根据肝肿瘤周边肥大细胞数量 ,将 18只雄性Wistar大鼠移植肝肿瘤模型进行分组 ,8只正常雄性Wistar大鼠作对照。用间接免疫荧光和流式细胞术检测各组大鼠腹腔肥大细胞整合素VLA 4分子的表达水平 ,同时用免疫组化研究肿瘤周边肝组织血管内皮细胞和肝窦内皮细胞表面VCAM 1和肿瘤周边FN的表达。结果 :不同肝肿瘤大鼠肿瘤周边浸润肥大细胞数量有明显差异。各组大鼠腹腔MC表达整合素VLA 4分子均呈阳性 ,肿瘤周边肥大细胞浸润较多组 ,其整合素α4 β1表达水平也较高。肿瘤周边血管内皮和窦内皮细胞表达VCAM 1阳性。肿瘤周边沉积大量呈阳性表达的FN与肥大细胞紧密相联。结论 :整合素α4 β1及其配体VCAM 1和FN在肝肿瘤周边肥大细胞募集中起重要作用 ;整合素α4 β1的表达水平与肿瘤周边MC数呈平行关系     

整合素β1对人体滋养层细胞黏附和迁移行为的影响

在体内,滋养层细胞是通过何种方式到达子宫螺旋动脉血管并对其基础结构进行重构的机制目前尚不清楚,但这一过程涉及到了细胞在血管内黏附和迁移的行为。采用微管吸吮技术和平行平板流动腔系统对整合素β1在滋养层细胞黏附和迁移中的作用进行检测。将滋养层细胞分别培养在I型鼠尾胶原和血管内皮细胞上,进行细胞黏附力测量和剪切应力加载,实验分为整合素β1抗体阻断组、非特异性抗体阻断组和正常对照组。结果显示:整合素β1抗体阻断组可显著降低细胞的黏附力和抵抗流体剪切应力引起位移的能力,而非特异性抗体组的结果与对照组差异不显著;内皮细胞可显著增强滋养层细胞的黏附力和抵抗流体剪切应力引起位移的能力。结果表明,整合素β1参与了滋养层细胞与血管内皮细胞间的黏附并调控了流体剪切应力作用下滋养层细胞的迁移行为。     

葛根素减轻乙醇导致大鼠生精细胞的凋亡

目的 观察乙醇导致大鼠生精细胞的凋亡及葛根素的干预。方法 将大鼠30 只,随机均分为对照组、乙醇组及葛根素干预组。于实验第40天免疫组织化学法（SABC）检测左侧睾丸各组Bcl-2、Bax 蛋白在生精细胞的表达; RT-PCR检测右侧睾丸各组Bcl-2及Bax mRNA的表达;TUNEL 法检测生精细胞的凋亡。结果 醇组平均每个生精小管断面中Bcl-2 蛋白阳性细胞数和A值低于对照组(P<0.01),而平均每个生精小管断面中Bax 蛋白的阳性细胞数和A值高于对照组(P<0.01);乙醇组Bax mRNA表达较葛根素干预组及对照组强（P<0.05）,而Bcl-2 mRNA表达较葛根素干预组及对照组弱（P<0.05）;乙醇组每个生精小管横切面中的凋亡细胞数目高于对照组(P< 0.01),葛根素干预组显著缓解上述变化。结论 根素对乙醇导致的大鼠生精细胞凋亡有干预作用。