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1.
2.
不同价态砷对DNA和砷甲基转移酶的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
目的观察不同价态、不同剂量砷染毒大鼠肝脏中DNA甲基转移酶和砷甲基转移酶mRNA的表达情况,寻找两者间的相关性及不同价态砷(iAs3+和iAs5+)体内甲基化间的差异。方法将35只健康清洁级Wistar雄性大鼠按体重随机分为7组,分别为正常对照(去离子水)组和低剂量(1/45 LD50,2.33 mg/kg)、中剂量(1/15 LD50,6.67 mg/kg)、高剂量(1/5LD50,20.00 mg/kg)砷酸氢钠(iAs5+)染毒组以及低剂量(2.33 mg/kg)、中剂量(6.67 mg/kg)、高剂量(20.00 mg/kg)亚砷酸钠(iAs3+)组,每组5只。采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒90 d。采用实时荧光定量PCR法测定肝脏中DNA甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A、DNMT3B)和砷甲基转移酶(As3MT)mRNA的表达情况。结果与对照组相比,各染毒组大鼠肝脏中As3MT mRNA的表达量较高,DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达量较低,高、低剂量亚砷酸钠染毒组和高剂量砷酸氢钠染毒组DNMT1 mRNA的表达量均较高,中剂量亚砷酸钠染毒组和低剂量砷酸氢钠染毒组DNMT1 mRNA的表达量均较低,差异有统计学意义(P<0.05)。随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,大鼠肝脏中As3MT mRNA的表达量呈上升趋势,DNMT3A、DNMT3B mRNA的表达量呈下降趋势;随着砷酸氢钠染毒剂量的升高,大鼠肝脏中As3MT mRNA的表达量呈下降趋势,DNMT3A、DNMT3B、DNMT1 mRNA的表达量呈上升趋势。As3MT的表达量与DNMT3A和DNMT3B表达量呈负相关(P<0.01);与DNMT1表达量无相关关系(P>0.01)。结论长期亚慢性暴露iAs3+和iAs5+均可促进As3MT的表达,抑制DNMT3A及DNMT3B的表达,但iAs3+和iAs5+间在剂量-效应关系上呈反向性;机体As3MT表达上调与DNMT3A和DNMT3B表达抑制间具有协同效应,并可导致基因低甲基化。  相似文献   

3.
目的探索氢醌(hydroquinone,HQ)致DNA整体低甲基化的分子机制。方法以磷酸盐缓冲液(PBS)溶解HQ,以PBS处理组为对照组,分别以2.5、5.0、10.0和20.0μmo/lL HQ染毒TK6细胞为处理组。应用实时荧光定量-聚合酶链反应检测DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的表达水平。结果与对照组相比,DNMT1、DNMT3a和DNMT3b的mRNA表达量在各HQ处理组细胞中均下降,其中以20.0μmo/lL组细胞的下降最为明显,分别下降46%(P0.05)、83%(P0.05)和48%(P0.05),且DNMT1和DNMT3a的表达量随着HQ剂量的增加而下降。结论 HQ致DNA整体低甲基化下调机制可能与DNMT1、DNMT3a和DNMT3b表达异常有关。  相似文献   

4.
目的 研究小鼠植入前胚胎DNA甲基转移酶(Dnmt)1和3b的表达模式及体外培养对其表达的影响.方法 应用荧光免疫细胞化学法检测在体内和体外培养的小鼠植入前胚胎Dnmt1、Dnmt3b的表达.结果 Dnmt1、Dnmt3b在体内组2、4、8细胞胚胎和桑椹胚的胞浆内均呈高表达,在囊胚期则为胞浆内低表达,而核内均无明显表达;Dnmt1、Dnmt3b在体外组囊胚期前胚胎的表达模式均与体内组相似,为胞浆内高表达,而囊胚期则为胞核内低表达.结论 体外培养改变了小鼠囊胚期Dnmt1、Dnmt3b的表达模式,影响基因的表达水平和表达模式.  相似文献   

5.
目的研究砷暴露对不同发育阶段小鼠仔鼠海马N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)水平的影响,探讨砷暴露引起学习记忆能力损伤的可能机制。方法建立不同发育阶段小鼠仔鼠砷暴露模型,砷暴露浓度分别为0、15、30和60 mg/L,记录体重,分别于仔鼠出生后(postnatal day,PND)10、20、40 d取脑组织并分离海马,采用RT-PCR检测NMDAR亚单位NR1、NR2A和NR2B m RNA水平。结果 60 mg/L砷暴露组仔鼠PND20的体重低于对照组和15 mg/L组,30、60 mg/L砷暴露组仔鼠PND40的体重低于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。各浓度砷暴露组仔鼠PND20的海马NR1和NR2B m RNA水平均低于对照组,60 mg/L砷暴露组仔鼠PND20的海马NR2A水平低于对照组;60 mg/L砷暴露组仔鼠PND40的海马NR1、NR2A和NR2B m RNA水平低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论砷暴露可使仔鼠海马NMDAR亚单位的水平降低,进而可能影响仔鼠的学习记忆能力。  相似文献   

6.
目的观察三价砷甲基转移酶[As(Ⅲ)MT]mRNA在砷中毒患者、病区对照和非病区对照人群中的表达及其与尿砷甲基化水平的关系。方法选取饮水型砷中毒中重度患者、轻度患者、病区对照和非病区对照各6例,采用实时定量RT-PCR技术测定研究对象的淋巴细胞中三价砷甲基转移酶As(Ⅲ)MTmRNA表达,采用原子荧光AFS-9130、形态分析SAP-10检测尿无机砷(iAs)、一甲基胂酸(MMA)、二甲基胂酸(DMA)、总砷(TAs)含量。按PMI=(MMA+DMA)/TAs,SMI=DMA/(MMA+DMA)分别计算一甲基化指数和二甲基化指数。结果中重度组,轻度组、病区对照组人群iAs、MMA、DMA、Tas、PMI、As(Ⅲ)MTmRNA均显著高于非病区对照人群(P<0.05);As(Ⅲ)MTmRNA分别与MMA%(r=0.485,P=0.041)和PMI(r=0.476,P=0.046)呈显著正相关。结论砷暴露可能促进As(Ⅲ)MTmRNA高表达进而引起PMI水平增高导致MMA产生过多。  相似文献   

7.
《临床医学工程》2016,(11):1462-1463
目的观察中波紫外线(UVB)照射下的角质形成细胞(Ha Ca T细胞)中DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达情况。方法体外培养人永生化Ha Ca T细胞,分别用0 m J/cm2、10 m J/cm2、20 m J/cm2、40 m J/cm2 UVB照射,24 h后收集细胞采用Western blot方法测定细胞中DNMT1的蛋白水平。结果 UVB照射的Ha Ca T细胞内的DNMT1蛋白表达水平明显高于未照射细胞(P<0.05)。结论 UVB照射Ha Ca T细胞会导致DMNT1表达增加,在皮肤光老化可能起重要作用。  相似文献   

8.
砷对大鼠海马超微结构和NMDAR表达影响   总被引:2,自引:2,他引:2  
目的 观察饮水砷暴露后大鼠海马超微结构和N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)亚基mRNA表达的变化,探讨砷致学习记忆损害的分子机制.方法 将48只雄性健康断乳SD大鼠随机分为4组,每组12只.对照组饮用自来水,砷暴露组分别饮用2.72,13.6和68 mg/L亚砷酸钠溶液.饲养3个月后.测定脑砷,用透射电镜观察海马超微结构,用RT-PCR检测海马组织NMDA受体亚基mRNA表达.结果 脑砷值随饮水砷浓度升高而升高,13.6和68 mg/L组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).电镜下,染砷组大鼠海马神经细胞肿胀,线粒体肿胀.脊减少或无脊,粗面内质网扩张,血管内皮细胞肿胀.与对照组相比,各砷暴露组NR2A mRNA表达量明显降低(P<0.05).结论 大鼠砷暴露可致海马神经细胞和血管内皮细胞的损伤,降低NR2A mRNA表达量,进而可能影响学习记忆功能.  相似文献   

9.
目的研究常用近交系品系C57BL/6J(B6)和129X1/SvJ(129)小鼠急性砷暴露后肝脏全基因组DNA甲基化的差异。方法将健康成年清洁级雄性野生型B6和129小鼠各18只按体重随机分别分为3组,分别为对照组(生理盐水,24 h),亚砷酸钠(5 mg/kg)染毒后6 h、24 h组,每组各6只。采用一次性灌胃方式进行染毒,采用ELISA法检测肝脏中全基因组DNA甲基化水平,采用Western blot法检测肝脏中DNA甲基转移酶DNMT1、DNMT3a、DNMT3b以及砷甲基化相关酶亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)、甲硫氨酸合成酶(methionine synthetase,MTR)、砷甲基转移酶(CYT19)蛋白的表达水平。结果与对照组相比,亚砷酸钠处理后6 h的129小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平降低,亚砷酸钠处理后24 h的B6小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平升高,差异均有统计学意义(P0.05)。在基础水平下,129小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平高于B6小鼠,差异有统计学意义(P0.05);亚砷酸钠处理后24 h时,129小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平低于B6小鼠,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,亚砷酸钠染毒后24 h的B6小鼠肝脏中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平均较高,而亚砷酸钠染毒后6 h的129小鼠肝脏中DNMT1、DNMT3a的蛋白表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05)。基础水平下的129小鼠肝脏中DNMT1、DNMT3a、DNMT3b的蛋白表达水平及亚砷酸钠染毒后24 h的129小鼠肝脏中DNMT3b的蛋白表达水平均高于B6小鼠,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,仅亚砷酸钠染毒后24 h的B6小鼠肝脏中MTHFR、MTR的蛋白表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05);而亚砷酸钠染毒129小鼠肝脏中MTHFR、MTR、CYT19的蛋白表达水平均无明显变化。基础水平下的129小鼠肝脏中MTHFR、MTR的蛋白表达水平及亚砷酸钠染毒后6 h的129小鼠肝脏中MTHFR的蛋白表达水平均高于B6小鼠,差异有统计学意义(P0.05)。结论急性亚砷酸钠染毒可升高B6小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平以及DNA甲基转移酶和砷甲基化相关酶蛋白的表达,而降低129小鼠肝脏中全基因组DNA甲基化水平以及DNA甲基转移酶和砷甲基化相关酶蛋白的表达。  相似文献   

10.
目的观察不同剂量锌干预对铅暴露小鼠学习记忆能力和海马组织中脑源性神经营养因子(BDNF)信使RNA(mRNA)表达量的影响,研究锌对铅暴露小鼠认知损伤的干预作用及可能机制。方法60只健康小鼠随机分为空白对照组,铅暴露组和低、中、高剂量3个锌干预组,每组各12只。分别饮用双蒸水、1.0g/L醋酸铅溶液、0.2g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液、0.4g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液、0.6g/L醋酸锌溶液+1.0g/L醋酸铅溶液。以Morris水迷宫测定小鼠的学习记忆能力。8周后,测定血和海马中铅和锌的浓度并检测海马组织中BDNF mRNA的表达量。结果铅暴露组、低剂量锌干预组的平均逃避潜伏期高于空白对照组(P<0.01);中、高剂量锌干预组的平均逃避潜伏期低于铅暴露组和低剂量锌干预组(P<0.01),而与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。BDNF mRNA在铅暴露组海马中的表达量最低,空白对照组海马中的表达量最高,与锌干预剂量呈正相关,各剂量锌干预组表达量高于铅暴露组(P<0.01)。结论适量补锌可拮抗慢性铅暴露所致的血和海马中铅的含量升高及血和海马中锌的含量降低,提高海马中BDNF mRNA的表达水平,可减轻铅暴露对小鼠学习记忆能力的损伤。  相似文献   

11.
12.
目的探讨亚急性砷暴露对小鼠海马各区星形胶质细胞的影响。方法将昆明种小鼠随机分为对照组及低、中和高剂量染毒组。以自由饮水方式饮含砷水,对照组小鼠饮蒸馏水。染毒8周后,心脏灌流固定,取大脑,进行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫组化染色,分析砷对小鼠海马各区GFAP表达情况,判断其对星形胶质细胞的影响。结果雌鼠海马CA1、CA3和DG区的GFAP积分光密度(IOD)值均先升高而后下降;在海马CA1和DG区,低剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组,而高剂量组的IOD值则显著低于对照组;但在海马CA3区,低、中剂量组的IOD值均显著高于对照组,以中剂量组的IOD值最高,而高剂量组则显著低于对照组。雄鼠海马CA1和DG区GFAP的IOD值也先升高而后下降,中剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组;但在海马CA3区,IOD值随染砷剂量的增加不断增高,高剂量组的IOD值最高,并显著高于对照组。结论低水平砷暴露可使小鼠海马星形胶质细胞活化,而高水平砷暴露会损伤海马星形胶质细胞;雌鼠海马星形胶质细胞对砷作用比雄鼠敏感;而无论雌、雄鼠,其海马CA1和DG区星形胶质细胞对砷的作用比CA3区敏感。 更多还原  相似文献   

13.
目的探讨饮水型砷暴露地区人体外周血淋巴细胞DNA的损伤。方法应用彗星试验,检测54例地砷病区有皮损患者(病例组)和51名无皮损者(对照组)外周血淋巴细胞DNA损伤水平。采集研究对象的尿液检测尿砷水平。调查研究对象年龄、性别、吸烟、饮酒、农药接触史等。结果病例组和对照组彗星尾长分别为(12.34±5.22),(7.35±3.67)μm,差异有统计学意义(P0.05);2组尿砷分别为(1.61±0.41),(1.52±0.55)ng/1 000 g肌酐,差异无统计学意义(P0.05);Logistic回归分析结果显示,吸烟和饮水年限为DNA损伤的危险因素。未发现饮酒对淋巴细胞DNA的损伤有影响。结论吸烟和饮水年限是DNA损伤的危险因素,彗星试验可作为砷污染地区人群健康监测的早期指标。  相似文献   

14.
目的通过研究妊娠期至性成熟期亚砷酸钠暴露对子代小鼠海马组织中蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element-binding protein,CREB)mRNA水平的影响,探讨砷暴露引起仔鼠学习记忆能力损伤的可能机制。方法将24只SPF级妊娠昆明小鼠随机分为对照(蒸馏水)组和15、30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组,每组6只;从妊娠第1天至断乳前[出生后(postnatal day,PND)20 d],采用自由饮水方式进行染毒。仔鼠自断乳后至PND40继续染毒。采用水迷宫实验检测PND40仔鼠的学习记忆能力,分别于PND10、PND20、PND40,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法检测海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平。结果与对照组相比,训练第4天时60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠及训练第5天时各浓度亚砷酸钠染毒组仔鼠寻找平台的潜伏期均延长,仅60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠的停留时间缩短,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,仔鼠寻找平台的潜伏期均呈延长趋势,停留时间呈缩短趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20及PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均呈逐渐下降趋势。与对照组相比,60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平呈逐渐下降趋势。结论妊娠期至性成熟期砷暴露可使仔鼠海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平降低,进而影响仔鼠的学习和记忆能力。  相似文献   

15.
新型饮水对子代小鼠抗疲劳和学习记忆影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
张明  樊福成  谷鹏  陶勇 《中国公共卫生》2007,23(12):1453-1454
目的 研究生态水、活化水、碱性离子水、纯水4种新型饮水对小鼠抗疲劳和学习记忆机能的影响。方法 120只昆明小鼠分为4组,分别饮4种新型饮水。3个月后进行雌雄交配繁殖,各组均得到子代小鼠,继续饮用与亲代小鼠同样的新型饮水。子代小鼠生长至20周龄时,对雌性子代小鼠进行负重游泳实验,并测定血清尿素氮含量;同时进行子代雄性小鼠避暗箱实验。2个实验分别用于测定子代小鼠的抗疲劳和学习记忆机能。结果 活化水、碱性离子水组小鼠的游泳时间明显长于纯水组,其中碱性离子水组小鼠游泳后血清尿素氮水平明显低于纯水组;各组之间小鼠的学习记忆机能差异无统计学意义。结论 碱性离子水对子代小鼠有一定的抗疲劳作用,但新型饮水对子代小鼠学习记忆机能无明显影响。  相似文献   

16.
目的 研究慢性铝暴露对大鼠记忆能力及海马组织中天然免疫关键蛋白Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)蛋白及其mRNA表达的影响.方法 将80只断乳后21 d清洁级雄性Wistar大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和暴露于2、4和6 mg/ml氯化铝的染毒组,每组20只.采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒3个月.采用Morris水迷宫试验测定大鼠的记忆能力,采用Western Blot法和逆转录PCR(RT-PCR)法分别检测海马组织中TLR2蛋白及其mRNA的表达水平.结果 与对照组比较,各浓度氯化铝染毒组大鼠穿越平台次数和在原平台象限搜索距离占总距离的百分比均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与2mg/ml组比较,6mg/ml氯化铝染毒组大鼠穿越平台次数和在原平台象限搜索距离占总距离的百分比均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,各浓度氯化铝染毒组大鼠海马组织中TLR2蛋白及其mRNA表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);与2 mg/ml组比较,4和6 mg/ml氯化铝染毒组大鼠海马组织中TLR2蛋白及其mRNA表达水平均较高,差异有统计学意义(P<0.05);随着氯化铝染毒浓度的升高,大鼠海马组织中TLR2蛋白及其mRNA表达水平呈先升高后降低的趋势.结论 慢性铝暴露可损伤大鼠的记忆能力,这可能与海马组织中TLR2蛋白及其mRNA的表达增高有关.  相似文献   

17.
目的研究饮水砷暴露对大鼠学习与记忆能力的影响。方法将48只雄性健康断乳SD大鼠随机分为4组,每组12只。对照组饮用自来水,砷暴露组分别饮用2.72、13.6和68mg/L亚砷酸钠溶液。饮水砷暴露12周后,用Morris水迷宫检测大鼠的学习记忆能力,水迷宫实验完成后用氢化物发生一原子荧光光谱法测定大鼠血砷和脑砷含量。结果血砷含量随饮水砷浓度升高而升高.与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。脑砷含量随饮水砷浓度升高而升高,13.6mg/L和68mg/L组与对照组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。在定向航行实验中,与对照组相比,68mg/L组大鼠逃逸潜伏期显著延长(P〈0.05)。在空间探索实验和可视平台实验中,各组问差异没有统计学意义。结论相对较高剂量的饮水砷暴露能降低大鼠的学习能力。  相似文献   

18.
乳腺癌组织中O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶的表达   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
采用原位杂交方法检测30例乳腺癌组织O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)表达水平。结果显示,MGMT阳性率为93.4%(28/30),其中高表达28.6%(8/28),中、低表达71.4%(20/28)。乳腺癌组织MGMT的表达与临床分期无关。  相似文献   

19.
目的 探讨DNA甲基转移酶1A(DNMT1)在妊娠期滋养细胞肿瘤中的表达及意义.方法 取2015年8月-2019年6月妊娠期滋养细胞肿瘤58例为观察对象,其中完全性葡萄胎25例,部分性葡萄胎18例,绒毛膜癌15例.抽取相应患者住院时未进行任何药物治疗时空腹肘静脉血4~5 ml后分离血浆,手术后获得相应患者肿瘤组织.采用...  相似文献   

20.
目的探讨铅暴露对仔鼠学习记忆能力及发育早期各阶段海马组织中N-甲基-D天门冬氨酸(NMDA)亚单位表达的影响。方法将24只清洁级妊娠昆明小鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组及0.5、1.0、2.0 g/L铅暴露组,每组6只。采用自由饮水方式进行染毒,母鼠从妊娠第1天起开始饮用含铅水,仔鼠于出生后(PND)21天断乳,继续饮含铅水至实验结束。水迷宫测定PND 40仔鼠学习记忆能力;并分别于PND10、PND20和PND40,测定海马组织中NMDA各受体亚单位(NR1、NR2A、NR2B)蛋白和m RNA的表达水平。结果与对照组比较,各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平均较低,除PND 10的0.5 g/L乙酸铅暴露组外,差异有统计学意义(P0.05);且随着乙酸铅暴露剂量的升高,仔鼠海马组织中NR1和NR2A蛋白及m RNA的表达水平呈下降趋势。与对照组比较,PND 10时各剂量乙酸铅暴露组及PND 20时1.0、2.0 g/L乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而PND 40时各剂量乙酸铅暴露组仔鼠海马组织中NR2B蛋白的表达水平均无明显改变。且随着乙酸铅暴露剂量的升高,PND 10、PND 20时仔鼠海马组织中NR2A蛋白的表达水平均呈下降趋势。各剂量乙酸铅暴露不同发育阶段仔鼠海马组织中NR2B m RNA的表达水平与对照组比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论发育早期铅暴露可损伤仔鼠的学习记忆能力,并且抑制仔鼠海马组织中NMDA受体各亚单位的表达。  相似文献   

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