BACTEC MGIT 960用于结核分枝杆菌快速培养的初步评价

目的评价BACTEC MGIT 960系统快速分离结核分枝杆菌及药敏试验的效果。方法对临床拟诊结核病患者痰样本,采用直接涂片萋-尼法抗酸染色显微镜检、BACTEC MGIT 960和改良罗氏(L-J)培养法进行检测,并对分离到的结核分枝杆菌进行药敏试验。比较其分离的阳性率、培养及药敏所需的时间。结果共对634例拟诊结核病患者痰样本进行了检测,MGIT960培养的阳性率(51.7%)明显高于L-J法(37.7%),直接涂片法阳性率最低(14.7%)。MGIT960和L-J法的污染率分别为4.9%和4.4%。MGIT960和传统的L-J法的检出时间分别为12.0 d和32.0 d。MGIT960和L-J法对异烟肼、利福平、链霉素和乙胺丁醇的药物敏感性检出时间分别为9.0 d和36.5 d。结论 BACTEC MGIT 960可以明显提高分离培养阳性率、缩短培养和药敏试验的时间。     

BACTEC MGIT960分枝杆菌分析系统结果分析

目的评价美国BD公司生产的BACTECMGIT960分枝杆菌分析系统（960）快速分离分枝杆菌效果。方法采用BACTECMGIT960分枝杆菌分析系统对临床标本进行分析，同时用《结核病诊断细菌学检验规程》规定的中性改良罗氏培养基法（L—J法）进行平行对照，比较其对不同来源的样本中分枝杆菌的分离率、阳性报告时间。结果对1449份标本用960和传统的中性改良罗氏培养基进行平行接种，960培养的阳性率为32．9％（482／1449），传统的L—J法培养的阳性率为25．5％（370／1449），前者明显高于后者（X^2=61．65，P〈0．005）。960的污染率为2．3％，L—J法的污染率为6．5％，前者明显小于后者（X^2=29．42，P〈0．005）。阳性报告时间方面，14d内支纤镜提取物（BF液）晚于其它标本；而对链霉素（STR）、异烟肼（INH）、利福平（RIF）和乙胺丁醇（EMB）全耐药菌株早于其它耐药菌株。结论应用BACTEC MGIT960系统分离培养分枝杆菌可以明显提高分离分枝杆菌的阳性率和减少污染。     

结核分枝杆菌实验室检测方法的结果差异分析及临床诊断评估

目的 分析常见结核分枝杆菌实验室检测结果,并探讨各个检测方法的临床诊断价值。 方法 采用痰涂片抗酸染色、BD BACTEC MGIT 960分枝杆菌快速培养法(BD-960)、实时荧光定量PCR法( TB-DNA检测方法),对357例痰标本进行检测,并对其结果进行组合分析。 结果 痰涂片抗酸染色法、BD-960培养法、TB-DNA检测的阳性率分别为14.3％、40.9％、30.5％(χ²=62.9,P<0.05)。在146例培养(+)标本中,TB-DNA阳性率为68.5%;在211例培养(-)中,TB-DNA阳性率为4.3%;在培养(+)DNA(+)菌株中,痰涂片阳性率为48.0%;在培养(+)DNA(-)菌株中,痰涂片阳性率为4.3%;在培养(-)DNA(-)菌株中,痰涂片阳性率为0;在培养(-)DNA(+)菌株中,痰涂片阳性率11.1%。 结论 BD-960培养法的结核分枝杆菌检测阳性率、准确率高,仍是确诊肺结核的金标准,但结合其他检测方法,可进一步提早、提高检测的准确率。     

BACTEC MGIT^TM960全自动分枝杆菌培养鉴定／药敏仪基本原理及其应用

BACTEC MGIT^TM960全自动分枝杆菌培养鉴定／药敏仪，能大大缩短分枝杆菌的检测时间，该仪器自动化程度高，无放射性污染，可进行药敏学动态研究。     

浅介全自动分枝杆菌检测系统BD BACTEC MGIT 960

1BACTECMGIT960SYSTEM概况及检测原理BACTECMGIT960SYSTEM是集分枝杆菌快速生长培养、检测及药敏技术为一体的全自动分枝杆菌培养仪。该仪器容量为960孔,平均分布于三个相对独立的培养箱,每个培养箱可垂直放置320个内置荧光显示剂的MGIT分枝杆菌生长指标培养管。以培养周期为6周计算,每周可检测154个样本。以培养周期为8周计算,每周可检测115个样本。通过连续检测接种标本的培养管所显示的荧光强度的变化从而判断是否有分枝杆菌生长。若接种的MGIT培养管中有分枝杆菌生长,管中的营养成分和氧气将不断地被消耗,MGIT培养管…     

MGIT960法和绝对浓度法对耐多药结核杆菌药敏检测结果比较

目的评价MGIT960法和L-J绝对浓度法在耐多药结核杆菌(MDR-TB)药敏实验中的临床应用价值,确定一种快速准确的药敏检测方法。方法收集兰溪市2010-2011年间痰培养阳性,经菌种鉴定和异烟肼、利福平药敏试验确定为耐多药的结核杆菌菌株,采用MGIT960法和L-J绝对浓度法对一线抗结核药物链霉素(SM)、乙胺丁醇(EMB)和二线抗结核药物卷曲霉素(CPM)、卡那霉素(KM)、氧氟沙星(OFX)和乙硫异烟胺(ETH)进行药物敏感性检测,比较两种检测方法的一致性。结果 212例阳性标本中分离出耐药菌株118例,经一线药敏试验确定为耐多药的菌株80例,占总耐药率的67.8%。MGIT960法和L-J绝对浓度法进行药物敏感性检测,符合率除ETH以外均在80%以上,以绝对浓度法为金标准,MGIT960法的敏感度和特异度分别是SM 100%和93%,EMB 86%和81%,OFX 93%和88%,KAM 92%和94%,ETH 100%和56%,CPM 88%和87%。结论 MGIT960法与L-J绝对浓度法对耐多药结核杆菌药敏检测结果除了ETH以外均具有很好的一致性,为耐多药患者一/二线药敏检测提供快速有效的诊断方法。     

BACTEC MGIT960培养结合INNO—LIPA^TMRIF.TB DNA探针新技术快速诊断结核病

目的通过MGIT960培养系统结合国外最新的INNO-LIPATMRIF.TB(LIPA)DNA探针技术的应用,探讨其快速诊断结核病的可行性.方法应用BACTECMGIT960系统进行临床疑似结核病例标本的培养,筛选了70例结核分枝杆菌,35例非结核分枝杆菌,用LIPA探针技术诊断是否为结核分枝杆菌.结果用LIPADNA方法在70例结核分枝杆菌中获得阳性69例,占98.6%;35例非结核分枝杆菌均为阴性.与单纯消化纯化后涂片的82.9%(58/70)的阳性率相比增加了15.7个百分点,两者在统计学上差异有显著性(P<0.05).BactecMGIT960培养结合LIPADNA探针与传统诊断方法4～8周相比,整个过程只需6～37天,平均15天(2周).结论LIPADNA探针是一种具有高度敏感性和特异性、能够简便、快速、准确地诊断结核病的新技术.同时还能鉴定rpoβ基因位点的突变,诊断耐利福平(RMP)性结核,有望适用于结核分枝杆菌耐RMP性结核的快速检测,进一步为结核病快速准确的治疗提供理论依据.     

BACTEC MGIT-960结核菌快速培养800例分析

目的了解BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法在临床中的应用。方法应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养结核菌,并与改良罗氏培养法进行比较。结果 800例临床标本应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养阳性496例,阳性报告平均时间15d,优于改良罗氏培养法。结论应用BACTEC MGIT-960结核菌快速培养法培养结核分枝杆菌可以提高阳性率和缩短培养时间,能有效的服务于临床。     

结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性试验分析

[目的]探讨结核分枝杆菌对左氧氟沙星（Lvlx)的敏感性。[方法]对437株结核分枝杆菌进行敏感性试验。[结果]对Lvlx，有2株（0.6%)初治菌株耐药，5株复治菌株耐药，说明Lvlx对绝大部分初治（99.4%)和复治（94.7%)肺结核患者有效。[结论]结核杆菌对Lvlx耐药率低，故可作为耐多药肺结核治疗上的一个可选择药物之一。     

应用流式细胞仪检测结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性

目的利用流式细胞仪检测结核分枝杆菌对左氧氟沙星的敏感性。方法利用结核分枝杆菌水解FDA的特点,用FDA标记经过左氧氟沙星作用后的标准菌株H37RV和临床分离菌株,利用流式细胞仪检测标记了FDA的菌株的荧光强度,并与比例法结果进行比较。结果 40株结核分枝杆菌的流式细胞仪所得药敏试验结果与比例法基本一致(p>0.05)。结论流式细胞仪检测结核分枝杆菌药敏实验的方法极大地缩短了获得药敏结果的时间,可以考虑作为常规项目开展。     

BACTEC MGIT960全自动分枝杆菌培养鉴定药敏仪应用及常见故障

本文简单介绍了分枝杆菌培养鉴定药敏仪的工作原理,例举了一些常见故障,分析了故障原因及解决办法。     

BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种初步鉴定及药敏中的应用

目的评价BACTEC MGIT 960系统在分枝杆菌属菌种鉴定及药敏中的应用价值。方法显微镜观察BACTEC MGIT 960系统分离的162株分枝杆菌在液体培养基中的形态,传统生化和核酸检测法同时鉴定分枝杆菌属菌种,分析细菌形态与菌种之间的关系;应用BACTEC MGIT 960系统对分离的141株结核分枝杆菌进行药敏试验。结果 162株分枝杆菌属在MGIT液体培养基中呈索条状、分枝状、点粒状和分散状4种形态;呈索条状132株分枝杆菌属均为结核分枝杆菌,呈点粒状10株和分散状6株分枝杆菌属均为非结核分枝杆菌;对链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇的耐药率分别为9.9%、14.2%、9.2%和6.4%,总耐药率18.4%,同时耐利福平和异烟肼的为8.5%;药敏平均检测时间为9.3 d。结论 BACTEC MGIT 960系统可快速将分枝杆菌属初步鉴定为结核分枝杆菌和非结核分枝杆菌,能快速准确获得临床一线抗结核药物的药敏结果。     

PCR线性杂交酶显色法与BD960液体法在耐多药结核杆菌药敏结果的对比分析

目的评价PCR-线性杂交酶显色法(以下称显色法)与BD960液体法检测结核杆菌对INH及RFP耐多药结核杆菌药敏试验结果的对比分析。方法随机选取疑似结核病患者痰标本680例中得到的涂片阳性标本180例,其中结核分枝杆菌耐药分离株88例(分离株),以BD960液体法为金标准,采用显色法与BD960液体法对INH及RFP耐药性检测,比较两种方法的药敏结果的相符性。结果分离得到耐药结核杆菌菌株88例,显色法测得单耐INH79株、单耐RFP68株,同时耐INH和RFP61株。BD960液体法测得单耐INH80株、单耐RFP67株,同时耐INH和RFP61株;单耐INH两法测定相符74例,相符率为84.09%(74/88);单耐RFP两法测定相符65例,相符率为73.9%(65/88)(P<0.05),因而两种方法之间差异有统计学意义。结论显色法与BD960法,两者具有很好的一致性。前者为耐多药患者对INH和RFP药敏检测提供更为快速有效的诊断方法。     

荧光判读仪快速培养结核分枝杆菌方法的应用效果评价

目的评价荧光判读仪对结核分枝杆菌快速培养法在结核病诊断中的应用价值。探讨建立一种经济、快速、有效的结核菌的培养方法。方法对43例活动性肺结核确诊病人的痰液进行快速结核分枝杆菌培养,同时以改良的罗氏培养基对其进行结核分杆杆菌慢速培养作对照。对这2种方法所用时间、培养阳性率进行比较。结果采用荧光判读仪快速培养法比罗氏培养法出结果提前15d左右,培养阳性率高8.7%。结论荧光判读仪测定法比常规结核分支杆菌培养方法用时短,阳性率高,相对于其他快速培养经济实用,适合基层结核病院使用推广,应用。     

第二信使cAMP浓度变化对结核菌异烟肼药敏的影响

目的比较增加和减少环磷酸腺苷(c AMP)时结核菌药物敏感性的变化情况。方法采用刃天青染色法检测结核分枝杆菌对异烟肼的药物敏感性,设置异烟肼浓度为0. 2～0. 00156μg/m L和c AMP/布比卡因浓度为1、0. 5、0. 25、0. 125、0. 0625 mmol/L的不同浓度组,通过各组颜色变化评价各组结核菌的药物敏感性。结果增加c AMP浓度对结核菌药物敏感性无影响,但加入布比卡因0. 0625 mmol/L时能增加结核菌的敏感性且对不同接种量的结核菌作用相同。结论 c AMP浓度的减少会影响结核菌对异烟肼的药敏结果。     

BACTEC MGIT 960培养结合INNO-LIPA~(TM) RIF.TBDNA探针新技术快速诊断结核病

目的通过MGIT960培养系统结合国外最新的INNO -LIPATM RIF.TB(LIPA)DNA探针技术的应用 ,探讨其快速诊断结核病的可行性。方法应用BACTECMGIT960系统进行临床疑似结核病例标本的培养 ,筛选了70例结核分枝杆菌 ,35例非结核分枝杆菌 ,用LIPA探针技术诊断是否为结核分枝杆菌。结果用LIPADNA方法在70例结核分枝杆菌中获得阳性69例 ,占98.6 % ;35例非结核分枝杆菌均为阴性。与单纯消化纯化后涂片的82.9 % (58/70)的阳性率相比增加了15.7个百分点 ,两者在统计学上差异有显著性(P<0.05)。BactecMGIT960培养结合LIPADNA探针与传统诊断方法4～8周相比 ,整个过程只需6～37天 ,平均15天 (2周 )。结论LIPADNA探针是一种具有高度敏感性和特异性、能够简便、快速、准确地诊断结核病的新技术。同时还能鉴定rpoβ 基因位点的突变 ,诊断耐利福平 (RMP)性结核 ,有望适用于结核分枝杆菌耐RMP性结核的快速检测 ,进一步为结核病快速准确的治疗提供理论依据。     

河南省第二轮结核病耐药监测药敏试验质量控制分析

目的评价河南省第二轮结核病耐药监测药敏试验工作质量。方法西太区跨国参比室（SRL）——韩国国家结核病研究所参比室对河南省结核防治研究所参比室(PRL）进行了4次药敏试验质量控制。其中3次同时对其他国家参比室(NRL）进行了同步质量控制。试验菌株为含耐药和敏感的结核分支杆菌临床分离菌株、试验的4种药物为链霉素、异烟肼、利福平和乙胺丁醇，采用L—J培养基和比例法。结果4种药一致性均达到95．0％或以上；异烟肼平均敏感性明显高于其平均特异性(100．0％比88．0％，P=0．0298)；3次同步质量控制中，河南省PRL利福平平均特异性、一致性明显低于同步质量控制NRL相应平均值(分别为91．0％比98．0％，P=0．0154和93．0％比98．0％．P=0．02981。结论河南省第二轮结核病耐药监测药敏试验工作质量符合《世界卫生组织(WHO)／国际肺部疾病联合会(IUATLD)结核病耐药监测指南》(1997)及WHO专家要求：以该质量控制结果评价该次耐药监测结果．在某种程度上可能会过高估计异烟肼的耐药率和多耐药率．     

Discordant results between genotypic and phenotypic assays (Xpert MTB/RIF vs. BACTEC MGIT 960 system) for detection of RIF-resistant Mycobacterium tuberculosis isolates in a high burden region

Clinical isolates with discordant phenotypic and genotypic results were submitted to DNA sequencing to identify which were genuinely resistant to rifampin and determine the frequency of silent and disputed mutations in our region. We present the retrospective analysis of all the culture-proven TB cases tested with the Xpert®MTB/RIF assay at the Tuberculosis Clinic and Laboratory of the Tijuana General Hospital, Mexico. Clinical isolates showing a discrepancy between phenotypic and molecular tests were analyzed by DNA sequencing. Thirteen isolates tested as rifampin susceptible on the MGIT system were rifampin-resistant according to Xpert®MTB/RIF assay. DNA sequencing showed that seven (53.8%) isolates had a silent (P514P) mutation; three isolates showed different missense (L511P, D516Y, and S531L) mutations. Three isolates showed no mutations.The existence of heteroresistance and silent or disputed mutations warrants that all rifampin-resistance cases diagnosed with the Xpert®MTB/RIF should be referred to specialized centers for DNA sequencing.