改良脊髓缺血后处理对兔缺血/再灌注损伤脊髓的保护作用

目的 建立兔改良脊髓缺血后处理模型,研究缺血后处理对脊髓缺血,再灌注(I/R)损伤的作用.方法 选取48只雄性日本大耳白兔随机分为4组,每组12只,假手术对照组(s组),缺血,再灌注损伤组(C组),经典缺血后处理组(PA组),改良缺血后处理组(PB组).分别监测缺血前、再灌注时及再灌注10 min后的平均动脉压(MBP)、心率(HR)及动脉血气pH值、动脉血氧分压(Pa02)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、乳酸(Lac值);采用Tarlov法分别于术后1,3,7,28 d对兔后肢运动功能进行评分;计数脊髓前角正常神经元数;羟胺法测定脊髓组织超氧化物歧化酶(SOD)含量,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量.结果 各组间各个时点MAP、HR、PaO:、PaC02、Lac变化及术中体温差异均无统计学意义(P>O.05);缺血再灌注后1,3,7,28 d,PA、PB组Tarlov评分明显高于C组(P<0.05);PA、PB组正常神经元计数明显高于c组(P<0.05);C组脊髓MDA含量明显增加,SOD含量明显降低(P<0.05).结论 改良缺血后处理模型建立成功,两种缺血后处理法均可以显著减轻缺血再灌注后脊髓的神经功能损害.     

利多卡因经兔腹主动脉局部灌注减轻脊髓损伤的作用及剂量

 目的 探讨利多卡因（lidocaine）经兔腹主动脉局部灌注减轻脊髓缺血再灌注损伤（ischemia-reperfusion injury,IRI）的作用及最佳保护剂量。方法 新西兰大耳白兔40只,随机分为5组（n=8）：生理盐水对照组（NS组）、利多卡因10 mg/kg组（L₁₀组）、利多卡因20 mg/kg组（L₂₀组）、利多卡因40 mg/kg组（L₄₀组）和利多卡因80 mg/kg组（L₈₀组）。全麻下开腹阻断左肾动脉远端的腹主动脉及双侧髂总动脉30 min,构建脊髓缺血模型,自缺血即刻起分别向阻断的腹主动脉段内灌注生理盐水（NS组）和不同剂量的利多卡因溶液（L₁₀~L₈₀组）,持续30 min后停止,同时开放腹主动脉及双侧髂总动脉行再灌注,观察血液动力学变化,并于动物清醒即刻、再灌注6、24和48 h按Tarlov标准进行神经行为学评分。全麻下取出L₄~L₆脊髓,光镜下观察脊髓前角组织形态并计数正常运动神经元。结果与NS组比较,利多卡因组神经行为学评分及脊髓前角正常运动神经元计数均增高,其中L40组最高（P<0.05）。L80组有2例动物在腹主动脉开放后出现心率显著减慢。与其他各组比较,L80组再灌注期间平均动脉压降低（P<0.05）。结论 利多卡因经腹主动脉局部灌注可减轻兔脊髓IRI,其保护作用与剂量密切相关。利多卡因80 mg/kg将导致严重并发症,我们认为最佳保护剂量为40 mg/kg。     

葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的：研究葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用。方法：20只雄性新西兰大白兔随机分成缺血组（A组,n=10）及葛根素组（B组,n=10),夹闭腹主动脉肾下段20min,建立兔脊髓腰尾段血模型,B组于夹闭前10min静脉注射葛根素30mg.kg^-1,A组则静脉注射生理盐水,测定夹闭前、后及再灌注后血浆中丙二醛（MDA）浓度及超氧化物歧化酶（SOD)活性,再灌注4,8,12,24及48h分别对动物后肢运动功能评分;再灌注48h后,处死动物,制作切片,观察其组织病理变化。结果缺血及再灌注后B组MDA值明显低于A组（P＜0．05）,而OD活性明显高于A组（P＜0．05）;再灌注后4,8,12,24及48h时的神经功能评分B组明显高于A组（P＜0．05）;光镜下,与A组相比,B组脊髓组织损伤显著减轻,形态基本正常的前角细胞较多。结论葛根素对兔脊髓缺血再灌注损伤有显著的保护作用。     

高氧液对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用

目的 :研究高氧液对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用 .方法 :雄性新西兰大白兔 2 0只 ,随机分成对照组 (C组 ,n =10 )及高氧液组 (H组 ,n =10 ) .夹闭腹主动脉肾下段 2 0min ,建立兔脊髓腰尾段缺血模型 .H组于缺血前 2 0min持续以 2 0mL·kg-1·h-1恒速静脉输入高氧液 ,直到再灌注后 2 0min ;C组则采用同种方法静脉输入等容量生理盐水 .测定缺血前 2 0min、缺血后 10min及再灌注 2 0min后 ,血浆中血栓素B2 (TXB2 )、6 酮 前列腺素F1α(6 keto PGF1α)的含量 ;再灌注 4 ,8,12 ,2 4 ,4 8h分别对动物后肢运动功能评分 ;再灌注4 8h后 ,处死动物 ,观察组织病理学变化 .结果 :再灌注 2 0min后 ,与C组相比 ,H组TXB2 值明显降低 ,6 keto PGF1α明显增高 (P <0 .0 1) ;再灌注后 4 ,8,12 ,2 4及 4 8h时的神经功能评分H组明显高于C组 (P <0 .0 1) .光镜下 ,与C组相比 ,H组脊髓组织损伤显著减轻 ,形态基 p本正常的前角细胞较多 .结论 :高氧液对兔脊髓缺血再灌注损伤有显著的保护作用 .     

雌激素对兔脊髓缺血再灌注损伤保护作用的机制研究

研究雌激素对脊髓缺血再灌注损伤保护作用的机制。方法按随机数表字法把成年的新西兰大白兔分为A～E 5组,每组9 只。钳夹肾下腹主动脉20 min恢复再灌注;B 组,接受与A 组同样的麻醉和手术准备,但不行缺血/ 再灌注损伤;C 组,再灌注开始时从兔耳的缘静脉注射200μg/kg 雌激素;D 组,再灌注开始时从兔耳的缘静脉注射400μg/kg 雌激素;E 组,再灌注开始时从兔耳的缘静脉注射800μg/kg 雌激素。再灌注48 h后根据Tarlov 法对下肢的神经功能进行评分,然后取脊髓组织苏木素- 伊红染色法（HE）进行病理分析。结果Tarlov 评分中雌激素组的神经功能评分高于A组,与A 组比较有统计学意义（p <0.05）。组织病理表明脊髓的前角运动神经元出现凋亡,有显著坏死。A 组脊髓的前角运动神经元计数少于雌激素组,两者比较差异有统计学意义（p < 0.05）。结论雌激素可明显改善兔脊髓缺血再灌注的下肢神经功能,使脊髓的前角正常运动神经元的数量增加,减小缺血再灌注的损伤。     

依托咪酯对兔脊髓缺血再灌注损伤的作用

目的 观察依托咪酯对兔缺血再灌注损伤脊髓的保护作用.方法 60只新西兰大白兔,随机分为3组:假手术组(A组,n=8)不阻断腹主动脉血流;缺血再灌注组(B组,n=26)阻断腹主动脉血流30min;实验组(C组,n=26)经腹主动脉阻断远端持续泵注依托咪酯3mg/kg.记录复灌48h后兔神经行为学评分并取L4～6节段脊髓组织计数脊髓前角正常神经元.复灌0 h及2 h分别取L4～6节段脊髓组织测定IL-6水平.结果 复灌后48 h,C组截瘫率低于B组;C组脊髓前角正常神经元计数较B组增加.复灌后2 h,B、C两组脊髓组织内IL-6水平均高于复灌0h.复灌后0h和2 h,B组脊髓组织内IL-6水平均高于A、C两组;而复灌后0 h,C组与A组比较差异无统计学意义.结论 依托咪酯腹主动脉灌注可以减轻脊髓缺血再灌注损伤,可以抑制局部炎症反应.     

兔脊髓缺血再灌注损伤的病理特征变化

目的探讨不同程度缺血再灌注损伤脊髓的病理变化特征及其意义。方法40只成年家兔随机均分为假手术组、缺血30min组、缺血45min组和缺血60min组,以肾下腹主动脉阻断法制备脊髓缺血再灌注模型,术后2 d时,采用免疫组织化学法和苏木精-伊红染色观察腰髓病理学改变。结果缺血时间越长,再灌注脊髓病理损伤程度越重,伤后2 d时可见受损脊髓发生出血、水肿、变性坏死,白细胞浸润以及NF-κBp65I、CAM-1表达增加。结论该模型具有重复性好,能较好地反映分级缺血再灌注损伤脊髓的病理变化特点。     

白细胞介素8在兔缺血再灌注脊髓损伤中的作用

目的 探讨兔缺血再灌注脊髓组织中白细胞介素8（IL-8）趋化诱导中性粒细胞（PMNL）的作用。方法 分非抗IL-8抗体组和抗IL-8抗体组，采用免疫组化和组织病理学方法，观察抗IL-8抗体使用前后再灌注脊髓组织中IL-8的表达及PMNL浸润情况。结果 再灌注12h，脊髓组织中IL-8呈强阳性表达并可见大量PMNL浸润，使用抗IL-8抗体后，组织中IL-8被清除，PMNL浸润明显减少。结论 缺血再灌注脊髓损伤中，IL-8可强烈地趋化诱导PMNI。在组织中的浸润，其在炎症反应引起的继发性损伤中发挥重要作用。     

亚低温对脊髓缺血再灌注损伤的保护及机制的研究

目的研究亚低温对兔脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法(1)采用腰动脉阻断法制作脊髓缺血动物模型。20只兔均分为常温和亚低温组,缺血40min后于再灌注0.5、4、8、12、24、48h6个时段观察神经功能变化并进行评级和评分。(2)兔18只,假手术组2只,常温和亚低温组各8只,常温和亚低温组在缺血40min后于再灌注4、8、12、24h4个时段采集损伤节段脊髓组织HE染色,光镜下观察。结果(1)缺血40min后,均出现下肢瘫痪,恢复血供后有部分恢复。随着再灌注时间的延长,神经功能逐渐恶化,并与再灌注时间成正比。亚低温组神经功能明显优于常温组(P<0.05)。(2)随着再灌注时间的延长,脊髓损伤的组织病理变化逐渐加重,但在各再灌注时间段,亚低温组脊髓损伤均较常温组为轻。结论脊髓神经功能的恶化与再灌注时间的延长成正相关。31℃-33℃系统亚低温能够明显改善缺血再灌注后神经功能的恶化,是保护脊髓缺血再灌注损伤较好的方法。减少IL-8在脊髓组织中的表达,抑制再灌注后继发炎症反应是其可能机制。     

兔缺血再灌注脊髓损伤节段病理变化的定位研究

目的 观察并比较两种动物模型中脊髓各节段病理变化。方法 采用腰动脉阻断法和腹主动脉阻断法造成兔脊髓缺血再灌注损伤，然后对损伤脊髓各节段标记定位，进行病理学观察。结果 腰动脉阻断法中以L3、4节段损伤员重，其近侧及远侧节段损伤逐渐减轻；腹主动脉法中从L2至脊髓末端均有严重损伤；T4节段变有轻度病理改变。结论 腰动脉阻断法中脊髓末端仍存在血供，损伤范围小；腹主动脉法中则没有血供，损伤范围大；严重的脊髓缺血再灌注损伤可波及到非缺血区组织。     

电针预处理对脊髓缺血再灌注损伤后血脊髓屏障的影响

目的 研究电针预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后血脊髓屏障的影响.方法 SD大鼠90只,随机分为3组,每组30只:假手术组(S组)、脊髓缺血再灌注损伤组(IR组)、电针预处理组(E组).IR组和E组大鼠阻断胸主动脉造成缺血再灌注损伤模型,S组只开胸暴露胸主动脉但不阻断,E组在夹闭胸主动脉前行电针刺激预处理.观察记录术后48 h大鼠神经运动功能评分,依文思兰荧光法测定血脊髓屏障通透性,Western blot检测脊髓组织中AQP-4表达情况.结果 与S组比较,IR组神经功能评分明显降低,血脊髓屏障通透性明显增加,AQP-4表达明显增多(P<0.05).与IR组比较,E组神经功能评分增高,血脊髓通透性降低,AQP-4表达减少(P<0.05).结论 电针预处理可以明显抑制脊髓缺血再灌注损伤后AQP-4的表达,降低血脊髓屏障通透性,进而减轻脊髓缺血再灌注损伤.     

乳化异氟烷延迟相预处理对缺血再灌注损伤兔心肌的作用

目的探讨乳化异氟烷静脉输注是否具有延迟相心肌保护的作用。方法30只兔随机分为三组,每组10只,分别给予生理盐水、脂肪乳、乳化异氟烷。各组在给药后24h建立缺血再灌注模型,采用红四氮唑染色法测定心肌梗死范围。采用末端标记技术(TUNEL)检测心肌凋亡指数,免疫组化方法(SABC)检测Bcl-2和Bax的蛋白表达。结果脂肪乳组心肌梗死范围(45.27%±3.03%)与对照组(44.32%±2.15%)相比无显著差异;乳化异氟烷组(26.76%±2.23%)显著低于对照组、脂肪乳组(P<0.01);乳化异氟烷组心肌凋亡明显减少(P<0.01),Bcl-2蛋白表达增加(P<0.01),Bax蛋白表达降低(P<0.01)。结论乳化异氟烷静脉输注具有降低缺血再灌注后心肌梗死范围和抗凋亡的作用。     

依达拉奉对肺缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的：通过建立兔在体肺热缺血再灌注模型,探讨依达拉奉对兔实验性肺缺血再灌注损伤的影响及作用机制。方法：采用兔肺原位热缺血再灌注损伤模型进行研究。24只大白兔随机分为三组：①　对照组(C组, n=8),开胸后不阻断肺门,静脉缓慢推注生理盐水5ml/kg; ②　缺血再灌注组(I/R组, n=8),左肺接受60min的缺血,然后接受60min再灌注,于缺血前5min静脉缓慢推注生理盐水5ml/kg;③　依达拉奉干预组(E组, n=8),于缺血前5min静脉缓慢推注依达拉奉10mg/kg（5ml/kg）,左肺接受60min的缺血,然后接受60min再灌注。120min实验结束时,留取各组动物血液标本,测定血浆丙二醛（MDA）含量及超氧化物歧化酶（SOD）活性;收集支气管肺泡灌洗液（BALF）,检测支气管肺泡灌洗液中白细胞计数、中性粒细胞百分比及肺通透性指数;留取肺组织标本,测定肺组织湿、干重量,计算干／湿重比（D/ W）及行肺组织病理检查。结果：I/R组血浆丙二醛含量、支气管肺泡灌洗液中蛋白含量、支气管肺泡灌洗液中WBC总数及中性粒细胞百分比明显高于C组及E组（P＜0.01）,E组与C组比较,无统计学意义(P＞0.05); I/R组血浆SOD活性、血清蛋白含量及肺组织干／湿重比（D/W）较C组及E组显著降低（P＜0.05）,E组与C组比较,无统计学意义(P＞0.05);肺通透指数I/R组明显高于E组与C组（P＜0.01）,E组显著高于C组（P＜0.05）;肺组织病理显示,E组肺泡内出血、炎性细胞浸润、渗出及间质水肿均较I/R组为轻。结论：依达拉奉通过清除氧自由基、抑制脂质过氧化,对兔肺原位热缺血再灌注损伤有一定保护作用。     

Functional protection of pentoxifylline against spinal cord ischemia/reperfusion injury in rabbits: necrosis and apoptosis effects

Background Little is known about neuronal death mechanisms following spinal cord ischemia. The present study aimed to investigate the protective effect of pentoxifylline （PTX） against spinal cord ischemia/reperfusion （I/R） injury.
Methods Rabbits sustained spinal cord ischemia following 45 minutes cross-clamping of the infrarenal aorta. Experimental groups were as follows： the first group of animals （sham, n=-8） underwent laparotomy alone and served as the sham group; the second group （I/R, n=20） received carrier （3 ml saline solution） and served as the control group; the third group （PTX-A, n=20） received PTX intravenously 10 minutes prior to ischemia; and the fourth group （PTX-B, n=20） received PTX intravenously at the onset of reperfusion. Rabbits were evaluated for hind-limb motor function with the Tarlov scoring system at 48 hours. Serum was assayed with enzyme-linked immunosorbent assay for tumor necrosis factor α （TNF-α） and spinal cords were harvested for myeloperoxidase （MPO） activity, histopathological analysis, terminal deoxynucleotidyl transferase （TdT）-rnediated dUTP nick end labeling staining, platelet/endothelial ceU adhesion molecule-1 （PECAM-1） and caspase-3 immunohistochemistry, and the number of necrotic and apoptotic neuron were counted and data analyzed at 12, 24, 48 and 72 hours of reperfusion. Spinal cords were studied by electron microscopy.
Results Improved Tarlov scores were seen in PTX-treated rabbits as compared with ischemic control rabbits at 48 hours. A significant reduction was found in TNF-α in serum, activity of MPO and immunoreactivity of the PECAM-1 and caspase-3 in PTX-treated rabbits. There were fewer apoptotic neurons than necrotic neurons （P 〈0.05）. A significant decrease in both necrotic and apoptotic neurons was observed in the PTX-treated groups （PTX-A and PTX-B） compared with the I/R group （P 〈0.05）. Both necrotic and apoptotic neurons were found with the electron microscope.
Conclusions PTX may indu     

VEGF及其受体在脊髓缺血再灌注损伤中的表达及Bosentan干预的研究

目的观察内皮素受体阻断剂Bosentan对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCIRI)后血管内皮因子(VEGF)及其两个受体表达的变化和意义。方法成年SD大鼠120只建立SCIRI模型,随机分为正常组、假手术组、单纯缺血组、生理盐水对照组(NS)、Bosentan干预组(Bos),NS组和Bos组按照再灌注(IR)时间分为6、12、24h和3、5、7d组,测定血清VEGF含量,采用逆转录-Real-time PCR、免疫组织化学染色检测Bosentan干预后Flk及Flt的表达变化。结果①IR后各时间点血浆VEGF含量均显著升高(P<0.05或P<0.01),以24h最高(P<0.01),同时间点Bosentan干预组较IR血浆VEGF含量均显著增高(P<0.05)。②Bosentan干预后各时间点VEGF、FLK、FLT的蛋白表达均较NS组显著增强(P<0.05或P<0.01),以24h最明显(P<0.05或P<0.01)。VEGF不仅在脊髓前角神经元表达,在Bosen-tan干预12、24h和3d时胶质细胞中亦有表达。FLK、FLT的蛋白仅在神经元胞浆中表达。③Bosentan干预后各组VEGF mRNA、FLK mRNA(7d除外)、FLT mRNA(7d除外)含量均较IR生理盐水对照组显著增高(P<0.05或P<0.01),以24h最为显著(P<0.05或P<0.01)。结论缺血再灌注损伤本身可诱导VEGF及其受体的表达,内皮素受体阻断剂Bosentan可使VEGF及其受体的表达增加,改善脊髓病理形态,对SCIRI过程的改善可能有益。     

F波评估兔不同程度永久性腰髓缺血损伤动物模型的价值

目的 探讨兔胫后神经F波对不同水平永久性腰髓缺血动物模型的评估作用.方法 30只新西兰大白兔采用完全随机方式分为6组,1组为对照组,其余5组为实验组.对照组(n=5)用于确定最佳刺激强度,并用于排除麻醉和手术对F波的影响,实验组(n=5)分别结扎左肾动脉和动脉分叉间不同水平的腰动脉,腰动脉结扎后2h和2d记录F波,分别在麻醉清醒后和手术后2d进行运动功能评分,分析实验各组术后2hF波波幅变化与下肢运动功能的相关性,2 d后取缺血中心区标本进行HE染色,观察缺血区病理变化.结果 F波的波幅在1根组和2根组结扎前后没有明显的变化(P>0.05),结扎前后不同时间点经方差分析,差异均无统计学意义(P>0.05),;结扎3根组、4根组和5根组血管后的F波的波幅下降,各组结扎前后不同时间点波幅经方差分析,差异均有统计学意义(P<0.05);F波的潜伏期在1根组和2根组结扎前后没有明显的变化(P>0.05),在3根组、4根组和5根组随着缺血程度的增加逐渐延长,各组潜伏期结扎前后不同时间点经方差分析,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 兔下肢胫后神经F波的潜伏期不能量化反映腰髓缺血损伤程度,但严重缺血后潜伏期也可延长;F波波幅能够反映腰髓缺血损伤程度并且能够预测脊髓的功能.     

虎杖甙在兔肺缺血再灌注损伤中的保护作用

目的:探讨虎杖甙(polydatin,PD)对兔肺缺血再灌注损伤的保护作用.方法:采用在体兔单肺原位缺血再灌注损伤模型.30只日本大耳兔,随机均分为三组:假手术组(S组),缺血再灌注组(I/R组)和缺血再灌注 PD组(PD组).实验末测血清SOD活力和MDA含量,肺湿干重比和肺泡损伤数比值,观察肺超微结构变化.结果:①I/R组与S组相比,SOD活力下降,MDA含量、湿干重比及肺泡损伤数比值增加(P均＜0.01).PD组与I/R组相比,S0D活力增加,MDA含量降低,湿干重比及肺泡损伤数比值下降(P均＜0.01).②电镜显示I/R组有明显的肺超微结构损伤,而PD组损伤不明显.结论:PD对肺缺血再灌注损伤有明显的保护作用.     

胆必清颗粒对兔肠缺血/再灌注肺损伤的保护作用

目的:探讨胆必清颗粒对兔肠缺血/再灌注所致肺损伤的保护作用及其机制。方法:大耳白兔随机分为对照组(假手术组)、模型组、胆必清用药组。采用夹闭肠系膜上动脉(时间60 min)技术复制肠道缺血/再灌注(I/R)损伤模型。观察各组家兔血浆内毒素及组织中丙二醛(MDA)、髓过氧化酶(MPO)的含量变化;并观察小肠、肺的病理变化。结果:制模后家兔血浆内毒素及组织中的MDA及MPO含量与对照组相比显著升高(P<0.01);胆必清颗粒组内毒素及组织中的MDA及MPO含量与模型组相比均有所下降(P<0.05)。胆必清颗粒组小肠及肺的病理学变化明显优于模型组。结论:胆必清颗粒对兔肠缺血/再灌注所致肺损伤有保护作用。