CD34+细胞自身移植治疗儿童难治型系统性红斑狼疮

目的探讨治疗儿童难治型系统性红斑狼疮(SLE)积极、有效的方法.方法对2例病程分别为5年和7年,狼疮肾Ⅲ级和Ⅳ级,主要表现为持续性血小板减少、蛋白尿和浆膜炎的患儿进行CD34+细胞分选的自身干细胞移植.首先经惠尔血动员、CS-3000血细胞分离机获取单个核细胞,通过CliniMACS CD34+细胞分选仪分别得到了1.7×106/kg及1.0×106/kg CD34+细胞,采集物中分别尚存2×105/kg和1×104/kg的CD3+细胞.用CTX 50 mg/kg·d×4 d+ATG(Fresennius S 5 mg/kg·d×3 d)预处理.结果两患者分别于+9 d和+7 d获粒细胞重建,自+15 d起血小板维持于正常水平.现已分别随访13月和6月,原发病症状完全消失,自身免疫相关抗体全部转阴,但细胞免疫功能仍未恢复,CD4细胞仍处于低水平.结论CD34+细胞分选的自身干细胞移植治疗儿童难治型红斑狼疮近期疗效满意.     

纯化的CD34+细胞移植治疗移植后复发的系统性红斑狼疮

1997年意大利学者Ｍａｒｍｏｎｔ等[1] 应用自体骨髓移植(ＡＢＭＴ)治疗了 1例病程长、病情严重的系统性红斑狼疮(ＳＬＥ)患者 ,疗效显著。国内欧阳建等[2 ] 2 0 0 1年 4月报道了以ＡＢＭＴ治疗 3例重症ＳＬＥ的结果 ,疗效令人鼓舞。椐欧洲造血干细胞移植治疗自身免疫病登记组的资料 ,至 2 0 0 2年 8月已有 5 3例患者接受此项治疗 ,但迄今已有近半数患者复发[3 ] 。对复发的患者常规抗风湿治疗仍有效 ,但对重症患者仍缺乏满意的治疗手段。 2 0 0 1年 5月我们对一例接受自体骨髓移植后复发的重症ＳＬＥ患者施行了第 2次造血干细胞移植 (纯化…     

纯化的自体CD34+细胞移植治疗多发性骨髓瘤的临床观察

目的采用CD34+细胞体外分选技术对多发性骨髓瘤患者进行自体CD34+细胞移植,以降低自体移植后肿瘤复发率.方法对1例多发性骨髓瘤患者采用CliniMACS临床型细胞富集仪,利用磁性分选技术收集CD34+细胞,患者于预处理后,输注分选后的CD34+细胞.结果 CD34+细胞体外纯化富集可使回输CD34+细胞中位数达3.9×106/kg,CD34+细胞回收率为35%,纯度达到97.6%;移植后,患者于+14 d时,中性粒细胞数＞0.5×109/L,+35 d时血小板＞20×109/L,提示造血重建.结论 CD34+细胞移植后获得迅速、稳定的造血重建.体外CD34+细胞纯化富集后移植可望提高多发性骨髓瘤患者自体移植疗效.     

自体纯化CD34+细胞移植治疗难治性自身免疫性溶血性贫血

造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)首先应用于血液恶性肿瘤的治疗,近几年在难治性自身免疫性疾病的治疗中逐渐得到应用[1].我们自体外周血CD34 细胞移植治疗继发于系统性红斑狼疮(SLE)的难治性重度自身免疫性溶血性贫血(AIHA)1例,现报道如下.     

CD34+细胞分选在异基因造血干细胞移植中的应用

CD34^ 细胞分选可有效去除T细胞，显著降低急慢性移植物抗宿主病（GVHD）的发生率及严重程度，对于植入率及疾病复发率无不良影响。随着CD34^ 细胞生物学特性研究的深入及其分离纯化技术的成熟，CD34^ 细胞分选和移植的应用日益广泛，在拓宽供体来源（HLA不全相合或半相合移植）以及提高无关供体移植安全性等方面有良好的应用前景，但也存在着不少问题。本文就有关CD34^ 细胞移植中免疫活性细胞数量与移植效果、G－CSF（GM－CSF）和供体淋巴细胞输注的应用、移植并发症以及HLA半相合CD34^ 细胞移植等问题作一综述。     

脐血CD34+细胞高效分选技术的建立及应用

CD34+细胞包括造血干细胞和早期的祖细胞,在造血干细胞移植、体外扩增培养及基因治疗等方面都有广泛的应用,但其仅占正常成人外周血的0.05%～0.2%、骨髓的0.5%～3%和脐血的0.1%～0.5%,因此CD34+细胞分选技术越来越重要.通过长时期的摸索,本实验室建立了一套高效的脐血CD34+细胞分选富集技术,并成功地分选了180份脐血样本.     

系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+T细胞亚群的初步研究

目的研究系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血中CD4+CD25+T细胞亚群的比率改变.方法采用微量全血三色标记法,以流式细胞技术检测SLE患者外周血CD4+、CD4+CD25+、CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群,分析阳性细胞百分率和平均荧光强度(Mean fluorescence intensity,MFI).结果SLE患者外周血中CD4+T细胞百分率,活动期(29.29%±8.86)%和非活动期(29.55±8.96)%均低于正常对照(37.41±3.29)%(P均＜0.05);CD4+CD25+T细胞百分率SLE活动期(10.30±5.60)%显著高于正常对照(5.39±1.43)%(P＜0.05),非活动性SLE病人组(5.63±2.49)%和正常组差异无显著性(P＞0.05);CD4+CD25+CD45RO+T细胞百分率SLE活动期(3.96±3.51)%显著高于正常对照(1.39±0.63)%,非活动期(0.75±0.66)%显著低于正常对照(P均＜0.05).平均荧光强度分析表明SLE患者组和正常组的CD25和CD45RO抗原密度差异并无显著性(P均＞0.05).结论SLE患者外周血中存在CD4+CD25+及CD4+CD25+CD45RO+T细胞亚群比率异常增高,且与病情活动性相关.     

富集CD34^＋细胞作干细胞移植的临床初步探索

目的 观察富集ＣＤ３４＾＋的造血干／祖细胞做肿瘤患者同种异基因造血干细胞移植（Ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ０的自体移植的临床疗效。观察输注纯化ＣＤ３４＾＋细胞患者的预后情况。方法 采用磁分选临床型细胞富集仪将表面包被有ＣＤ３４单抗的磁性微球体系与细胞共同培养,特异性结合ＣＤ３４＾＋细胞。在磁场作用下分别收集ＣＤ３４＾＋和ＣＤ３４＾－组分。完成２０例患者ＣＤ３４＾＋细胞体外纯化富集。其中ＨＬＡ半相合移植５例,     

脐血CD+34细胞体外扩增新进展

造血干细胞(hematepoietic stein cell，HSC)是各种血细胞和免疫细胞的始祖，具有极重要的生理功能。脐带已经成为近年来研究的热点，但单份脐血中造血干细胞理论上不少，但实际上数量往往不足以支持成人的造血重建，需要体外加以扩增。影响脐血CD34^ 细胞体外扩增的因素有很多，现就几种关键因素对脐血CD34^ 细胞体外扩增作用的研究新进展综述如下。     

纯化CD34+造血干细胞治疗多发性骨髓瘤的进展

多发性骨髓瘤（MM）是一种克隆增殖性疾病,占血液系统肿瘤的10％,全身恶性肿瘤的1％。主要病理特征是异常浆细胞浸润骨骼和软组织,产生M蛋白,引起骨骼破坏,贫血,肾功能损坏和免疫功能异常。此病多发于中老年,男性多见。近年来随着     

深低温冻存对SLE患者外周血CD34+ 阳性细胞活性的影响

目的探讨深低温冻存对系统性红斑狼疮（SLE）患者外周血CD34^＋细胞活性的影响。方法ClinMACS磁性分选系统分选CD34^＋细胞。采用5％二甲基亚砜,6％羟乙基淀粉和4％人血白蛋白作冷冻保护剂,-80℃直接冻存。观察不同时相复温后的细胞台盼兰拒染率、CFU—GM计数以及移植后造血恢复时间。结果SLE患者与正常人脐血CD34^＋细胞冻存后1～90d,细胞活性无明显差异。SLE患者与非自身免疫性疾病患者同样方法冻存造血干细胞,移植后造血恢复特征相似。结论-80℃深低温保存对SLE患者造血干细胞活性无影响。     

白芍总苷辅助治疗SLE对患者外周血CD4＋CD25＋T细胞表达的影响

目的：探讨白芍总苷（TGP）辅助治疗系统性红斑狼疮（SLE）对患者外周血CD4＋CD25＋T细胞表达水平的影响。方法采用流式细胞术检测健康对照组、常规组、TGP组外周血CD4＋CD25＋T细胞比率。结果SLE患者CD4＋CD25＋T细胞表达率为（6．15±1．21）％,健康对照组CD4＋CD25＋T细胞表达率为（12．30±1．78）％。活动期SLE患者与健康对照组CD4＋CD25＋T细胞表达率比较,差异有统计学意义（t＝22．03,P＜0．05）;常规组治疗前后外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平差异有统计学意义（t＝－12．30,P＜0．05）;TGP组治疗前后外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平差异也有统计学意义（t＝－16．68,P＜0．05）。常规组外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平为（9．34±1．37）％,TGP组外周血CD4＋CD25＋T细胞的表达水平为（11．49±1．14）％,两组差异有统计学意义（t＝－6．46,P＜0．05）。结论活动期SLE患者CD4＋CD25＋T细胞表达率水平显著低于健康对照组;SLE患者经过TGP辅助治疗后CD4＋CD25＋T细胞表达率显著提高。TGP治疗可能作用于CD4＋CD25＋T细胞。     

自体外周血干细胞移植治疗系统性红斑狼疮的研究进展

自体外周血干细胞移植为治疗严重的系统性红斑狼疮（SLE）开辟了新途径,就自体外周血干细胞移植治疗SLE的机制、动物实验、病例选择、方法、疗效和存在的问题等进行综述.     

自体外周血干细胞移植物中单个核细胞计数与CD34+细胞的相关性

目的探讨自体外周血干细胞移植物中的单个核细胞(MNC)计数和CD34+细胞计数之间的关系. 方法行自体外周血干细胞移植(APBSCT)的患者16例,采用化疗联合粒细胞集落刺激因子(G-CSF)或粒单细胞集落刺激因子(GM-CSF)动员,用血细胞分离机进行外周血MNC分离,对每份采集物计数MNC和流式细胞仪计数CD34+细胞,进行直线相关分析. 结果 16例患者的MNC为0.10×108～2.62×108/kg,CD34+细胞为0.50×106～35.25×106/kg,移植物中的MNC计数和CD34+细胞计数呈正相关(r=0.694,P<0.001). 结论 MNC计数和CD34+细胞计数均能可靠预测自体外周血干细胞移植后的造血重建.     

系统性红斑狼疮患者自体外周血纯化造血干细胞移植后免疫功能的变化

[目的]研究自体外周血纯化造血干细胞移植对系统性红斑狼疮患者免疫功能的影响。[方法]16例接受自体外周血纯化造血干细胞移植的系统性红斑狼疮患者列入研究。应用四色荧光分析技术动态监测移植前及移植后3、6、12个月的CD3^＋、CD45RA^＋CD4^＋、CD45RA^＋CD8^＋、CD45RO^＋CD4^＋表达的变化情况。[结果]移植后3个月CD3^＋、CD45RA^＋CD4^＋、CD45RA^＋CD8^＋、CD45RO^＋CD4^＋的表达均低于移植前,其中CD3^＋、CD45RA^＋CD8^＋、CD45RO^＋CD4^＋的表达水平差异具有显著性意义（P〈0.05）。移植后6个月CD3^＋、CD45RA^＋CD8^＋、CD45RO^＋CD4^＋的表达均低于移植前（P〈0.05）。CD45RA^＋CD4^＋的表达水平高于移植前和移植治疗后3个月的,与移植后3个月的表达水平差异具有显著性意义（P〈0.05）。移植后1年CD45RO^＋CD4^＋的表达水平低于移植前（P〈0.05）。CD45RA^＋CD4^＋的表达水平高于移植前和移植后3个月和6个月,与移植后3个月的表达水平差异具有显著性意义（P〈0.05）。[结论]自体外周血纯化造血干细胞移植后存在免疫功能缺陷,可持续1年之久。通过流式细胞仪检测患者外周血CD3^＋、CD45RA^＋CD4^＋、CD45RA^＋CD8^＋、CD45RO^＋CD4^＋表达情况可相对定量地检测患者的胸腺再生输出功能,并通过测量新生T细胞的合成来监视胸腺功能在免疫重建中的作用,为临床干细胞移植提供有力的理论依据。     

CD34+造血干细胞移植在大鼠缺氧缺血性脑病中的神经保护机制

目的探讨CD34~+造血干细胞移植在大鼠缺氧缺血性脑病中的神经保护作用和机制。方法建立体外人造血干细胞(CD34~+)增殖模型并进行体外扩增,分析其生物学活性。选取90只SD大鼠构建大鼠缺氧缺血动物模型并随机分为三组(每组30只):对照组、模型组和治疗组;给予治疗组大鼠造血干细胞(CD34~+)移植3 d后,处死大鼠并观察脑组织病理改变;采用TUNEL法检测神经细胞凋亡的发生;采用免疫组织化学法检测脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)和血清神经生长因子(nerve growth factor,NGF)蛋白的表达。结果与对照组相比,模型组和治疗组动物行为学异常明显加重,凋亡细胞数明显增多,细胞内BDNF和NGF含量显著下降(P0.05);与模型组相比,治疗组动物行为学异常明显减轻,凋亡细胞数明显减少,细胞内BDNF和NGF含量显著上升(P0.05)。结论 CD34~+造血干细胞移植对大鼠缺氧缺血性脑病中具有显著的神经保护作用,可以有效促进脑内神经营养相关因子的表达。     

动员的外周血干/祖细胞中P21的表达与CD34+细胞的相关性

目的检测动员的外周血干/祖细胞中P21的表达及与CD34+细胞的相关性,探讨其在动员过程中的变化及意义.方法选取异基因外周血干细胞移植正常供者9例和自体外周血干细胞移植者(急性白血病患者)6例,运用流式细胞术检测动员的外周血干/祖细胞中CD34+细胞及其亚群,用免疫细胞化学的方法检测外周血动员前后P21的表达.结果动员的外周血干/祖细胞中P21的表达明显高于动员前,二者间差异有统计学意义(P<0.05);动员的外周血干/祖细胞中CD34+细胞比例与P21的表达率呈正相关(r=0.553).结论外周血干/祖细胞动员过程中P21表达增高,可能与其促进祖细胞增殖、调控分化过程及抗凋亡活性有关.     

儿童外周血造血干细胞移植的护理

目的：分析总结13例儿童自体外周血造血干细胞移植治疗的护理经验。方法：2001年3月～2003年5月采用自体外周血干细胞移植治疗儿童白血病和淋巴瘤13例，进入层流室后实施心理护理，预处理阶段护理，化疗的毒副作用护理及严格无菌护理操作外，对急性反应加强对症支持治疗。结果：全部患儿均安全渡过移植极期，均成功重建造血功能，无1例因护理原因中断治疗或治疗失败。结论：自体外周血造血干细胞移植(APBSCT)是比较安全、有效的儿童恶性血液病的治疗方法，预处理后的护理是APBSCT护理工作中的重点。