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同时抽提DNA和RNA的简便方法 总被引:1,自引:0,他引:1
同时抽提DNA和RNA的简便方法刘定干(中国科学院上海生物化学研究所,200031)关键词DNARNA抽提在研究工作中,常同时需要培养细胞的DNA和RNA,从同一样品中同时提取DNA和RNA。目前,已有好几种同时抽提DNA和RNA的方法[1~4]。作... 相似文献
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一种高效提取猕猴桃DNA和RNA的方法 总被引:1,自引:0,他引:1
在总核酸提取方法(PS法)的基础上,经多次实践改进,得出一种以高盐低pH的HAc-NaAc缓冲体系提取总核酸的简便方法,可以从富含多糖、多酚时猕猴桃叶片和花蕾中提取同时含有DNA和RNA的总核酸.所得的总核酸在LiCl溶液中选择性沉淀RNA,从而有效地分离出DNA和RNA样品.紫外分光光度法和琼脂糖凝胶电泳分析表明,所提取的DNA和RNA具有较高的纯度和完整性.通过样品DNA的PCR和样品RNA的RT-PCR,认为所提取的DNA样品和RNA样品能够满足分子生物学试验的基本要求. 相似文献
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一种提取银杏中DNA的方法 总被引:19,自引:1,他引:19
对改进的SDS和CrAB两种提取DNA的方法进行了比较试验,通过DNA浓度和纯度测定及琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示,用改进的SDS法可从银杏幼叶和愈伤组织中获得DNA,其浓度分别为0.867μg·μ 相似文献
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一种简便的海藻DNA提取方法 总被引:9,自引:0,他引:9
把包裹缠绕在大量粘性多糖中的海藻DNA提取出来是一个十分困难的。研究表明,DNA样品中的酸性多糖会抑制限制性酶切反应和PCR扩增,而海藻组织中主要的碳水化合物是硫多糖和羧酸多糖,而且比陆生植物的中性多糖更易水溶,使溶液高度粘稠,在DNA提取中很难去除... 相似文献
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元宝枫叶片总DNA提取方法的优化 总被引:3,自引:0,他引:3
由于元宝枫叶片细胞含有大量的多糖、单宁、色素和酚类物质,严重影响基因组DNA的提取,在提取元宝枫叶片总DNA的过程中,对常用的CTAB法进行了大胆的革新.结果表明,采用细胞核裂解前加入不溶性聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和将加入RNase A消化RNA的步骤改在最后进行等技术,可以从元宝枫叶片快速提取高质量DNA,该研究为从富含多糖、单宁、色素和酚类物质的植物中提取基因组DNA,提供了可行的分析方法. 相似文献
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一种提取野生苎麻总DNA的方法 总被引:9,自引:0,他引:9
用CTAB法提取野生苎麻总DNA ,结合野生苎麻中酚类、黄酮类等次生代谢物质多的特点 ,加入一定浓度的PVP、β—巯基乙醇 ,可以获得高分子量DNA ,经实验鉴定 ,其纯度符合分子遗传实验要求。 相似文献
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改良尿素-氯化锂方法提取成熟小麦种子总RNA 总被引:22,自引:0,他引:22
为了分离提取成熟小麦种子总RNA,去除多糖等杂质的严重干扰,本实验对尿素氯化锂分离RNA的方法做了三个方面的改进:一、去除成熟种子的胚(含大量麦胚凝集素等糖蛋白),发现裂解物的黏稠度明显下降;二、在裂解粗提物中加入CTAB至终浓度为02%,可去除大部分多糖;三、异丙醇沉淀RNA之后,充分溶解,离心去除残留的不溶性多糖等杂质。结果表明:所提取的成熟小麦种子RNA的纯度和产率都有明显提高 。 相似文献
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CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒提取食用菌DNA 总被引:3,自引:1,他引:3
目的:为探索从食用菌子实体中快速分离和纯化DNA的方法.方法:以三种栽培的食用菌为材料,采用CTAB结合DNA凝胶回收试剂盒进行基因组DNA的分离和纯化.结果:与对照相比,结合法提取DNA样品的电泳条带更规则、清晰,并且DNA的酶切效率显著高于对照.结论:该结合法是一种快捷、高效提取纯化食用菌子实体DNA的方法. 相似文献
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苎麻总DNA提取的CTAB法优化方案 总被引:17,自引:0,他引:17
根据苎麻组织自身含有较多的本分类,粘状物及黄酮类等次生代谢物质的特点,对CTAB法进行优化后用于提取苎麻组织总DNA。在研磨过程中加入抗氧化剂PVP,提取缓冲液加入终浓度6%的PVP和4%的β-巯基乙醇,可防止整个提取过程中溶液变褐;在第2次用氯仿/异戊醇抽提时,加入10%的CTAB和4%的NaCl高盐溶液,以除去多糖。经几种改良方案提取总DNA的ISSR-PCR扩增结果验证,以同时加入抗氧化剂和高盐溶液的CTAB-4法效果最好。 相似文献
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一种简单高效的食用真菌总RNA提取方法 总被引:5,自引:0,他引:5
以金针菇为材料,建立了一种适合于富含RNase、多酚、多糖和糖蛋白的食用真菌RNA的提取方法,此方法在高浓度变性剂存在的条件下2次用苯酚-氯仿-异戊醇进行抽提去除DNA、蛋白质,并用异丙醇和乙酸钠选择性沉淀RNA、去除多糖,得到完整、均一的RNA样品。
Abstract:With Flammulina velutipes material,an improved method was developed for extracting total RNA from domestic fungus that are rich in RNase,polyphenols,polymeric carbohydrates and proteoglycans..Phenol-chloroform-isoamyl alcohol were used twice to clear DNA and protein under higher concentration of denaturing solution and isopentanol,sodium acetate were used to precipitate RNA selectively.Pure and intact RNA can be effectively prepared by this method. 相似文献
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一种快速提取小麦叶片总RNA的方法 总被引:17,自引:0,他引:17
从植物组织中提取高质量的RNA是进行植物分子生物学研究的必要前提和关键.同种植物不同器官的组织由于组成分的差异,提取RNA的方法也存在不同的难点.在苯酚法和氯化锂沉淀法的基础上,改进并提出了一种适合小麦叶片总RNA的快速提取方法,消除了蛋白质、DNA、多糖、多酚等污染.该方法提取的小麦叶片总RNA,完整性好、纯度高,可用于RT-PCR、N orthern杂交、RACE等实验操作,而且简单经济、快速、实验结果稳定,重复性好,还适合富含多糖和脂质的植物组织总RNA的提取. 相似文献