磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法

用磷脂酰肌醇特异性磷脂酶C水解磷脂酰肌醇激酶催化产生的磷脂酰肌醇-4-磷酸,产物1,4-二磷酸肌醇再经碱性磷酸酶水解后,测定磷的含量,建立了磷脂酰肌醇激酶的非同位素酶解测定法。该法回收率可达91％,CV=6.5％。     

豚鼠精子顶体反应期间卵透明带诱导激活磷酸脂酶A2活性

目的 为了探讨HA是否参与ZP诱发的AR，它的激活是否依赖于Ca^2 的存在以及HA在豚鼠精子AR过程中的信号转导通路。方法 将豚鼠精子悬浮在最小获能培养基(MCM-LCa^2 ，23μM／LCa^2 )中预培养1h后，用[^11C]氯化胆碱或[^11C]花生四烯酸(AA)标记精子，并持续获能培养5h。经间断percoll密度梯度(30％～55％～85％)离心、洗涤。并将精子重新悬浮于MCM—LCa^2 培养其中。然后暴露于1mM/LCa^2 和／或ZP、百日咳毒素(PIX)、PLA2抑制剂、EGTA和甘油二脂激酶抑制剂(DAGKI),15分钟。精子膜脂类的提取、分离和鉴定采用Roldan和Varquer（1996)所报道方法。同时部分精子用相差显微镜检测AR百分率。结果获能精子Ca^2 ／ZP合并应用后，可进一步加速AA释放和溶血磷脂酰胆碱(LysoPC)产生。同时伴有磷脂酰胆碱减少(这些变化是PLA2活性的指征)。Ca^2 ／ZP的刺激亦导致精子AR率的增高；上述效应可被PLA2抑制剂马兜铃酸所阻断；采用PIX(G蛋白抑制剂)作用于已获能精子。结果发现由ZP引起AA和LysoPC含量升高以及AR率增加的效应均可被PIX抑制；23μMCa^2 存在下。精子虽不发生AR，但AA释放和LySoPC生成仍维持于较低的水平，而加入2mMEGTA(Ca^2 螫合剂)或250μMCa^2 (Ca^2 通道阻滞剂)可抑制HA的激活，导致AA和LySoPC的生成降低。DAG激酶抑制剂及K59022可加速AA及LySoPC产生,并促进口激发的AR。结论 上述结果表明，PLA2在四诱发豚鼠精子AR过程中起着关键作用,其激活仅需要低钙参与,同时PLA2活性受DAG和G蛋白介导信号转导通路的调控。     

细胞膜磷脂酰肌醇4,5-二磷酸对TRP通道功能的调节作用

TRP 离子通道超家族可分为7个亚族,其功能受多方面因素的调节。最近的研究证明磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸(PIP2)对多个家族的TRP通道功能均有调节作用,而且调节的结果既可以是激活也可以是抑制,作用比较复杂,涉及的机制和因素较多。本文综述了PIP2对几种不同家族TRP通道的调节作用及其病理生理学意义。     

大豆磷脂的保健功能

大豆磷脂是指以大豆为原料所制成的一种混合磷脂,它是由卵磷脂(学名:磷脂酰胆碱,简称PC,高等级为PPC)、脑磷脂(学名:磷脂酰乙醇胺,简称PE)、肌醇磷脂(学名:磷脂酰肌醇,简称PI)和丝胺酸磷脂(又称磷脂酰丝胺酸,简称PS)等组成,还含有胆碱、肌醇、维生素E和生物素等成分,其中最典型的为前三种,是组成人体细胞(细胞膜、核膜、质体膜)的基本成分,为人体生理功能所必需的物质,具有很高营养价值和保健功能,与蛋白质、维生素并列称为"第三营养素".大豆磷脂究竟有哪些保健功能呢? 1、改善脑功能,增强记忆力 磷脂代谢与脑的机能状态有关,随着年龄增长,人的记忆力会减退,这与乙酰胆碱含量不足有一定关系.     

肌醇磷脂代谢与输精管平滑肌收缩之间的关系

对牛精子中分离的一种蛋白激酶C(PKC)大分子抑制剂对大白鼠输精管平滑肌肌醇磷脂代谢的影响进行了研究。大白鼠输精管平滑肌细胞放入Lock's液中孵育1h,用~(32)P(无载体)标记磷脂,加入去甲肾上腺素后,在不同的时间终止反应。磷脂分析的结果显示去甲肾上腺素使磷脂的代谢增强;如在加入去甲肾上腺素的同时加入牛精子中分离的大分子抑制剂或氯丙嗪,则肌醇磷脂和磷脂酰胆碱的代谢都受到抑制     

四种植物多糖对S_（180）细胞膜磷脂酰肌醇转换的影响

将茯苓多糖（ＰＰＳ）、刺五加多糖（ＡＳＰＳ）、银耳多糖（ＴＦ）、香菇多糖（Ｌｅｎｔｉｎａｎ）与Ｓ＿１８０细胞膜、（γ－￣３２Ｐ）ＡＴｐ－同温育，抽提并分离肌醇磷脂进行放射自显影和液闪计数。结果表明茯苓多糖，刺五加多糖对Ｓ＿１８０细胞膜网脂酰肌醇（ＰＩ）转换有显著抑制作用，刺五加多糖对其抑制作用与剂量呈正相关。银耳多糖、香菇多糖对ＰＩ转换无影响。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝癌早期诊断中的研究进展

肝癌是一种常见的消化道肿瘤,其发病率有明显的地区差异,非洲撒哈拉沙漠以南地区和远东地区是肝癌的高发地区。我国是肝癌发病率较高的国家之一,因此对肝癌早期治断的研究有特殊意义。最近,磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)作为一种新的肝癌肿瘤标记物被国外许多作者提出,现综述如下:1分子结构磷脂酰肌醇蛋白聚糖(glypicans,GPC)是一类分布在细胞膜表面的蛋白聚糖,是通过一个糖基化磷脂酰肌醇(glycosylphos-phatidylinositlo,GPI)连接在细胞膜上的,到目前为止在哺乳动物中已经发现了六个家族成员(GPC1～6)。蛋白聚糖是一类由核心蛋白和糖胺聚…     

多烯磷脂酰胆碱雾化吸入对豚鼠实验性哮喘的预防作用

目的 评价多烯磷脂酰胆碱雾化吸入在豚鼠哮喘预防中的价值.方法 将诱喘初筛合格的30只豚鼠随机分成生理盐水对照组(A组)、稀释多烯磷脂酰胆碱治疗组(B组)及多烯磷脂酰胆碱治疗组(C组).3组豚鼠分别雾化吸入生理盐水、50g/L葡萄糖稀释一倍的多烯磷脂酰胆碱注射液及多烯磷脂酰胆碱注射液120 s.给药0.5 h(第1天)、1 h(第2天)、2 h(第3天)、3 h(第4天)后,再给豚鼠雾化吸入0.8%磷酸组织胺溶液10 s诱喘,记录豚鼠出现Ⅲ度哮喘的潜伏期.结果 稀释多烯磷脂酰胆碱治疗组及多烯磷脂酰胆碱治疗组给药0.5,1,2,3 h后的诱喘潜伏期较正常对照组明显延长(P＜0.01).多烯磷脂酰胆碱治疗组给药2 h后的诱喘潜伏期较稀释多烯磷脂酰胆碱治疗组明显延长(P＜0.05),两组给药0.5,1,3 h后的诱喘潜伏期间差异无显著性(P＞0.05).结论 多烯磷脂酰胆碱雾化吸入对豚鼠组织胺诱喘作用有明显的预防作用.     

磷脂酰肌醇3(PI3K)激酶信号途径对血小板源生长因子促肝星状细胞增殖与Ⅰ型胶原表达的影响

目的 观察磷脂酰肌醇3激酶特异性抑制剂（LY294002），对血小板源生长因子（PDGF-BB）促大鼠肝星状细胞（HSC）增殖与Ⅰ型胶原表达的影响，并探讨其作用机制。方法用不同浓度的PDGF-BB和LY294002对大鼠肝星状细胞株（HSC-T6）进行处理，MTT法检测细胞的增殖，逆转录聚合酶链反应方法（RT-PCR）检测HSC-T6内Ⅰ型胶原mRNA的表达。结果PDGF-BB在浓度1～10ng／ml时呈剂量依赖性地促进HSC细胞增殖（P〈0．05），当浓度大于10ng／ml时处理组间无显著差异（P〉0．05），其促增殖作用达到饱和。5μmol／L、10μmol／L、25μmol／L的LY294002均能显著且剂量依赖性地抑制PDGF-BB刺激的HSC-T6增殖（P〈0．001）。PDGF-BB能促进HSCI型胶原mRNA表达，24h、48h时相对于对照组的表达量为112．2％。182．5％。LY294002能显著抑制PDGF-BB促Ⅰ型胶原表达，24h、48h时相对表达量为76．4％，52．6％。结论磷脂酰肌醇3激酶信号途径是调节血小板源生长因子促肝星状细胞增殖与分泌胶原的重要通道，抑制该通路可以抑制肝星状细胞增殖和胶原表达，具有抗肝纤维化的作用，对防治肝纤维化有一定的意义。     

蛋白激酶C对内向整流钾离子通道的调节机制

内向整流钾离子(Kir)通道是在很多组织中广泛分布的一种钾离子通道,在维持钾离子平衡电位、调节细胞兴奋性和胰岛素分泌等方面发挥着重要的作用。Kir通道是众多调节因素作用的靶点,这些因素包括：K+、Mg2+、pH、ATP、G蛋白偶联受体（GPCR）,磷脂酰肌醇4,5二磷酸（PIP2）、蛋白激酶A（PKA）、蛋白激酶C(PKC)、花生四烯酸(AA)等。由于很多细胞外信号是通过PKC信号转导通路来调控Kir通道的,多年来为了更好地界定PKC在调控Kir通道功能中所扮演的角色及机制,人们进行了大量而深入的研究。本文对PKC调节Kir通道机制的研究进展及目前提出的一些新观点进行综述。     

输精管平滑肌中肌醇磷脂代谢与去甲肾上腺素作用间关系的研究

在大白鼠输精管中，去甲肾上腺素可促进肌醇磷脂代谢，而双丁酰ｃＡＭＰ和８－溴ｃＧＭＰ则对去甲肾上腺素所促进的肌醇磷脂代谢，有明显的抑制作用。这提示，很可能在输精管平滑肌中，由去甲肾上腺素所促进的肌张力，能被ｃＡＭＰ和ｃＧＭＰ所抑制。本文还观察到Ａ２３１８７亦能促进肌醇磷脂代谢，而酚苄明（一种肾上腺素能α受体阻断荆）和ＥＧＴＡ则对肌醇磷脂代谢起抑制作用。     

Wortmamin对哮喘Th1/Th2失衡的影响

目的：研究磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）特异性抑制剂Wortmannin对哮喘患者Th1/Th2失衡的影响。方法：采用ELISA法测定正常人和哮喘患者经不同浓度组Wortmannin处理的PBMC培养上清液中IFN-γI、L-4水平。结果：哮喘患者PBMC培养上清液IFN-γ水平低下I、L-4水平升高,与正常对照组比较差异均有显著性（P〈0.05或P〈0.01）;同时加入不同浓度Wort-mannin共培养后,实验发现浓度依赖性地抑制了哮喘组及对照组IL-4的产生（P〈0.05或P〈0.01）,而同组不同浓度梯度组间比较IFN-γ产生差异无显著性。结论：哮喘患者急性发作期存在Th1/Th2失衡,Wortmannin可能通过抑制Th2细胞IL-4的产生而在一定程度上纠正Th1/Th2的失衡。     

抗磷脂抗体和狼疮性肾炎

1 抗磷脂抗体及抗磷脂综合征 1．1 抗磷脂抗体(Antiphospholipid antibody,aPL) aPL是一族针对带负电荷磷脂或带负电荷磷脂与蛋白的复合物的异质性自身抗体的总称,是诊断抗磷脂综合征 (Antiphospholipid Syndrome,APS)的条件之一。目前已知的aPL的靶抗原有三大类:①磷脂:心磷脂、磷脂酰丝氨酸、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇;②磷脂-蛋白复合物:β2糖蛋白Ⅰ(β2-GP Ⅰ)、凝血酶     

Glypican-3与肝癌关系的研究进展

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3是硫酸乙酰肝素糖蛋白家族中的一员,它参与调控细胞增殖、分化、黏附和迁移等过程。研究表明,它在肝癌组织中特异性高表达,与肝癌的发生相关,且在肝癌的诊断方面具有较高的敏感性,有望成为肝癌诊断新的肿瘤标志物。现就磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的结构特点、与肝癌发生及其在肝癌临床诊断和治疗中的作用做一综述。     

锂离子对淋巴细胞丝裂原反应的影响

本文通过使用肌醇-1-磷酸酶抑制剂-锂离子(Li~+)及~3H-TdR掺合法研究了4,5-二磷酸-磷脂酰肌醇(PIP_2)代谢对正常人以及不同病人淋巴细胞丝裂原诱导的增殖反应的影响。在未经Li~+处理的外周血淋巴细胞经丝裂原刺激后迅速增殖分化,以对植物血凝素(PHA)的反应最强,经用Li~+处理后淋巴细胞的增殖反应明显减弱或抑制。结果提示:肌醇-1-磷酸酶的活性受抑可减弱或抑制丝裂原诱导的淋巴细胞增殖反应。     

胆道闭锁患儿肝组织中GPC3和α-SMA表达与肝功能指标的相关性分析

探讨胆道闭锁（BA）患儿磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）和α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达,并阐明其与肝功能指标的相关性。     

微RNA-126介导磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2及磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B信号与肿瘤关系的新进展

磷脂酰肌醇3-激酶调节亚基2(PIK3R2)是磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)的家庭成员之一,通过PI3K/蛋白激酶B(Akt)信号通路参与血管的形成、维护以及改造的调控,是组织器官正常发育、损伤以及肿瘤发生的一个重要的基因调控靶目标。不同类型的肿瘤,微RNA(miRNA)126介导的PIK3R2调控水平及趋势存在差异,可能与肿瘤的发生存在联系,是肿瘤研究中有前景的调控靶目标之一。     

IA型磷脂酰肌醇3-激酶和其下游分子蛋白激酶在大肠癌中的表达研究

目的探讨IA型磷脂酰肌醇3-激酶和其下游分子蛋白激酶（PI3K/Akt）在大肠癌中的表达情况,为大肠癌基因治疗的研究发现新的靶点。方法将40只小鼠随机分为正常组和大肠癌组,采用细胞免疫荧光标记法对正常组和大肠癌组小鼠的大肠粘膜上皮组织的蛋白免疫荧光标记物进行测定。结果正常组20例正常大肠组织中有5例FI〈1.0,阳性表达率为75.0%;大肠癌组20例均FI〉1.0,阳性表达率为100.0%,且FI均比正常组高。两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。正常组平均FI=1.1±0.3,大肠癌组平均FI=1.4±0.2,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论在大肠癌的发生发展过程中存在PI3K蛋白的异常表达,IA型磷脂酰肌醇3-激酶和其下游分子蛋白激酶（PI3K/Akt）信号通路在大肠癌癌变过程中有重要作用。     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3对原发性肝细胞癌的诊断价值评价

目的：探讨血清磷脂酰肌醇蛋白聚糖3（GPC3）对原发性肝细胞癌的诊断价值。方法：应用酶联免疫法测定35例肝细胞癌（HCC）、26例肝硬化和50例健康人血清GPC3和甲胎蛋白（AFP）水平,并分析比较两者对原发性HCC的诊断价值。结果：HCC组、肝硬化组和健康对照组血清GPC3分别为（4．16±2．35）、（3．13±1．19）和（1．92±1．23）ng·ml^-1,HCC组明显高于肝硬化组和健康对照组,差异有统计学意义（分别P=0．018和P〈0．001）。对于诊断HCC,GPC3的ROC曲线下面积为0．789,AFP为0．803;GPC3的敏感性为82．8％,特异性为56．5％;AFP的敏感性为62．8％,特异性为78．9％。GPC3与AFP联合应用诊断HCC则敏感性为91．4％,特异性为45．6％。对于I期和Ⅱ期HCC,GPC3的阳性比例（11／14）高于AFP（4／14）,差异有统计学意义（P=0．021）。结论：GPC3是一个敏感且特异的HCC标志物,检测血清GPC3有助于HCC的诊断与研究。     

脑室预注射Wortmannin对沙土鼠海马缺血耐受的影响

目的：探讨磷脂酰肌醇-3(羟基)激酶(PI-3K)与沙土鼠海马缺血耐受的关系。方法：沙土鼠24只，随机分为A(2min缺血组)、B(5min缺血组)、C(2min缺血 5min缺血组)、D(假手术组)、E(脑室预注射PBS组)、F(脑室预注射Wortmannin组)6组。每组4只。TUNEL法检测海马CA1区锥体细胞凋亡。结果：B组锥体细胞凋亡数较A、C、E3组显著增多，F组凋亡细胞数较C组明显增多。D组未见明显凋亡细胞。结论：脑室预注射Wortmannin可抑制海马CA1区的缺血耐受现象，PI-3K可能参与介导了沙土鼠海马缺血耐受。