动物粪便中肠道出血性大肠杆菌PCR检测方法的建立

【目的】建立一种能够快速检测动物源性肠道出血性大肠杆菌的PCR方法。【方法】按照华大基因公布的检测肠道出血性大肠杆菌的方法,应用PCR的方法检测腹泻动物粪便中分离到的大肠杆菌Stx2-2基因和AFF-I-2基因。【结果】在分离到的45株大肠杆菌中,Stx2-2基因阳性菌株有7株,AFF-I-2基因阳性菌株有22株,其中2种基因阳性菌株有2株,其血清型分别为O142和O127:K63。【结论】成功建立了快速检测动物源性肠道出血性大肠杆菌的PCR方法。     

3种改良B族链球菌检测方法的检测效果比较

目的比较3种改良B族链球菌(GBS)检测方法的检测效果。方法纳入300例妊娠35～37周妇女,采集其阴道-直肠分泌物。分别用细菌培养法、免疫层析法、实时荧光定量PCR法直接检测样本GBS,并对样本进行增菌18～24 h、36～48 h后的浓缩菌液进行GBS检测。比较同一方法增菌前后的阳性检出率,以及增菌前和增菌18～24 h后3种方法的阳性检出率。结果增菌前、增菌18～24 h和36～48 h后,细菌培养法对GBS的阳性检出率分别为2.33%、9.33%、10.67%,免疫层析法的阳性检出率分别为5.33%、13.67%、14.67%,PCR法的阳性检出率分别为9.00%、12.67%、14.00%。各种方法增菌18～24 h、36～48 h后的阳性检出率均高于直接检测(均P<0.05),而增菌18～24 h、36～48 h后的阳性检出率差异无统计学意义(均P>0.05)。增菌前PCR法阳性检出率高于培养法(P<0.05),而增菌18～24 h后3种方法的阳性检出率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论检测前增菌18～24 h能提高细菌培养法、免疫层析法、P...     

霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条的应用

今年，我们试用了江苏省疾控中心推广使用的霍乱弧菌系列胶体金标记免疫层析快速检测试剂条(下称金标法)，并与国标法进行了分析比较，报告如下。     

一种快速检测甲型流感病毒的方法

目的 开发一种快速、简便的基于胶体金免疫层析法（GICA）的试剂盒，以用于对甲型流感病毒的检测。方法以柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒，标记抗甲型流感病毒内部抗原的单克隆抗体。硝酸纤维素膜上包被两种抗甲型流感病毒单克隆抗体的混合液，制成免疫层析试纸。待测样品中的甲型流感病毒首先与胶体金标记抗体结合，后移动至硝酸纤维素上与固定的单克隆抗体发生反应，形成肉眼可见的红色带。结果GICA试纸条与甲1型和甲3型流感病毒共16种毒株均能发生特异性反应，与乙型流感病毒、副流感病毒、腺病毒和呼吸道合胞病毒无交叉反应。用三种不同甲型流感病毒毒株的不同浓度标本与美国同类经过FDA批准的产品比较，灵敏度相同。结论GICA试纸条灵敏度能够达到临床使用的要求，并具有简便快速、无需特殊仪器设备等优点，对甲型流感的诊断和流行病学调查具有十分重要的应用价值。     

三种沙眼衣原体检测方法的对比评价

目的:探讨聚合酶链反应(PCR)、免疫层析法(C-C快速法)和糖原试验检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染的诊断价值。方法:用三种方法分别对102例送检标本进行平行检测。结果:以PCR法作参比,免疫层析法敏感性为86.7%,转异性为97.7%;糖原试验敏感性为80.0%,特异性为96.6%。结论:PCR法有较高灵敏度,免疫层析法有一定灵敏度和专一性,基层医院可以采用。     

肠道菌群与肠道疾病的研究进展

人体消化道存在大量细菌,肠道菌群调节着人体肠道免疫系统的成熟,其功能状态的改变与人体多种免疫性疾病、代谢性疾病等的发生、发展、转归密不可分,在宿主健康和疾病的发生、发展中起重要作用。该文总结肠道菌群的研究进展与现状,简介肠道菌群的构成以及生理功能,探讨肠道菌群与肠道疾病的之间的关系。     

胶体金免疫层析法快速检测霍乱弧菌的初步应用

目的 为检验胶体金免疫层析法(GICA)试纸条检测霍乱弧菌(VC)的灵敏性及其实际应用意义。方法 以VC菌株模拟标本检验GICA的检测灵敏度,并与培养法平行检测流行期间的霍乱标本进行比较。结果 GICA检测纸条检出VC的下限为10^5cfu/ml,比培养法灵敏度低,但已达到检测条原定技术指标;实际应用检出率比培养法稍低,其差异无显性意义。结论 应用GICA试纸条检测VC的方法具有快速、简便、特异和适合基层单位使用的优点。     

AFP两种检测方法的实验观察

目的:探讨甲胎蛋白(AFP)两种检测方法(酶免法和免疫层析法)的临床实用价值。方法:随机采集临床血液样本460份,分别用EIA(酶免法)和IND(免疫层析法)检测AFP,经统计学分析,计算其敏感性、临床符合率和影响因素,评价两种方法的临床实际应用价值。结果:460例患者临床血液样本两法检测AFP结果,灵敏度(最低可检出限浓度)均为20μg/L。可测范围EIA法为20μg/L~10000μg/L,IND法为20μg/L~30000μg/L,均可满足临床诊断要求。临床阴性符合率:EIA法为96.3%,IND为100%;临床阳性符合率:EIA法为89.1%,IND为97.3%,两者比较差异有显著性(P<0.05)。两法对0μmol/L~684μmol/L胆红素均无交叉反应。结论:IND法与EIA比较,具有操作简便,快速(10min~15min出结果)等优点,更符合临床实际推广应用。     

一种快速诊断呼吸道合胞病毒感染的方法

应用引物设计原则，选择呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）基因组中高度保守的Ｆ基因作为扩增靶序列，独立设计合成了两对引物，建立了一个逆转录套式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测ＲＳＶＲＮＡ的方法。结果：对引物进行敏感度实验，其检测敏感度为每ｍｌ１０ＴＣＩＤ５０ｓ（５０％ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｉｎｆｅｃｔｉｖｅｄｏｓｅ）的病毒量；用副流感病毒１型、甲型流感病毒、乙型流感病毒、新城疫病毒、腮腺炎病毒和腺病毒２型作对照，均无预期扩增产物出现，证实了设计引物的特异性；用建立的逆转套式ＰＣＲ方法对５例急性下呼吸道感染患儿的鼻咽部分泌物标本进行检测，发现３例阳性，２例阴性；同时用病毒培养法检测，结果完全相同。提示：该方法具有快速、敏感、特异和观察结果客观等优点。     

快速免疫层析法检测生殖道沙眼衣原体的评价及临床应用

目的　评价快速免疫层析法检测生殖道沙眼衣原体的应用价值及临床意义。方法　对681例皮肤性病科门诊和妇科门诊病人用不同的方法留取标本,同时采用快速免疫层析法和FQ -PCR法进行生殖道沙眼衣原体检测。结果　在女性第一种和第二种留取标本方法中,快速免疫层析法沙眼衣原体检出的灵敏度和特异性分别为84.2 1%、98.18%和82 .5 2 %、98.2 5 % ;男性分别为80 .82 %、97.72 %和72 .60 %、91.5 2 %。结论　快速免疫层析法检测生殖道沙眼衣原体,如果留取标本得当,具有特异、敏感、快速、简便,不需要特殊仪器设备等优点,对沙眼衣原体感染的快速诊断和治疗具有重要的临床意义。     

一种快速聚合酶链式反应方法的探究和法医学应用

目的 优化和建立一套快速聚合酶链式反应(PCR)扩增体系和程序,缩短扩增时间,提高短串联重复序列分型的速率和办案效率.方法 运用AmpFLSTR(R) Identifiler(R) Plus试剂盒和7种快速扩增酶进行筛选和优化,最后对筛选出的酶优化其扩增体系和扩增程序,并对几种常规检材中提取的DNA进行扩增和检测,然后对其分型结果进行验证和讨论.结果 最终优化的扩增程序由常规的3h左右缩短至24 min,DNA检验结果与常规方法一致.结论 应用优化后的快速PCR扩增体系可以成功准确扩增DNA样本,显著提高DNA分型速率.     

结核病实验室3种快速检测方法的评价

用聚合酶链反应技术建立的扩增结核杆菌复合体特异重复序列ＩＳ９８６基因的方法和用单克隆抗体ＴＢ１５－Ｃ３经酶联免疫吸附测定夹心法检测结核杆菌特异性抗原决定簇，以及用抗酸染色的方法，对１０种抗酸杆菌，２种非分枝杆菌进行检测。     

两种方法检测乙型肝炎表面抗原的效果评价

由于免疫技术的快速发展,乙型肝炎表面抗原（HBsAg）的检测方法越来越多,从常规的酶免法（ETA）到胶体金免疫层析法（GICA）的应用,极大地提高了HBsAg的检测效率。本文将GICA法和EIA法同时用于孕产妇HBsAg的检测,对检测结果进行了比较分析,现报告如下。     

三种免疫学方法检测结核病可行性分析

目的 :探讨三种免疫学方法联合检测肺结核病的诊断价值。方法 :采用金标法 (TB DOT)、PPDIgGELISA法(TB Ab)和一步免疫层析法 (TB CHECK)三种免疫学检测方法 ,对 3 4例菌阳肺结核、46例菌阴肺结核、3 0例非结核肺部疾病及 2 1例复强反应阴性健康人进行检测 ,并对其结果进行分析。结果 :单项检测的敏感性和特异性分别为TB DOT 88 2 %、99 2 % ;TB Ab 79 4%、98 1% ;TB CHECK 85 3 %、94 1%。单项检测菌阳和菌阴肺结核的阳性率分别为TB DOT 88 2 %、5 8 3 % ;TB Ab 79 4%、47 8% ;TB CHECK 85 3 %、45 6%。联合方法检测菌阳、菌阴肺结核阳性率二联分别为 91 2 %、65 9% ;三联分别为 94 1%、69 6% ,比单项检测明显提高 ,但特异性稍有降低。菌阳和菌阴肺结核联合检测 ,二联法同时阳性的阳性率分别为 85 3 %和 5 6 5 %。联合检测同时阳性比单独法检测低或相当 ,但特异性提高了 ,可达 98% ,若以健康对照组 ,可达 10 0 %。结论 :采用这三种联合检测方法 ,由于提高了特异性 ,且操作方法简便 ,经济实用 ,因此 ,更易于普及推广     

输血前血液5项传染性疾病指标的检测分析

现今输血后感染引起的医疗纠纷呈不断上升趋势,给医院工作和临床治疗带来一定的影响.为了明确血源疾病的原因,划清疾病传播的责任,我院于2001年开始对申请输血的病人在输血前进行传染性疾病指标检测,现将结果报告如下.     

三种检测沙眼衣原体方法的比较

目的：比较沙眼衣原体感染的三种实验室检测方法。方法：用Giemsa染色直接细胞学检查法、衣原体抗原快速免疫层析法（ICA）和实时荧光定量聚合酶链反应法（FQ-PCR）同时检测157例非淋菌性泌尿生殖道感染者和100例非泌尿生殖道感染的门诊病人。结果：Giemsa染色法I、CA法和FQ-PCR法的灵敏度和特异性分别为54.5%和100%、100%和98.2%、100%和92.0%。结论：ICA法具有较高的灵敏度和特异性,推荐基层单位使用ICA法。     

测乙肝两对半两种方法比较

各种检测乙肝两对半的方法，各有优缺点，此文介绍本室两种测定乙肝两对半的方法，同时寻求一种国家认证并质量可靠的测定乙肝两对半的方法。     

应用PCR技术快速检测结核杆菌

本文应ＰＣＲ技术检测疑为结核病人的痰、脑脊液、血。ＰＣＲ法检测结核杆菌比痰涂片法敏感和特异，比传统的结核杆菌培养和菌型鉴定期限（３￣６周）。可大大缩短时间，只需５个小时出结果，ＰＣＲ法有快速，简便易行的特点，可在临床中推广。     

两种方法检测血清肌钙蛋白Ⅰ比较

目的:比较两种方法对290份临床血清标本进行肌钙蛋白I检测效果。方法:用微粒子化学发光酶免疫法、免疫层析法检测临床标本,根据化学发光免疫法测定的定量结果分成<0.04μg/L组、0.04～0.50μg/L组、>0.50μg/L组,与免疫层析法的定性结果进行比较。结果:免疫层析结果与化学发光免疫法测定的<0.04μg/L组、>0.50μg/L组完全一致;与0.04～0.50μg/L组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:化学发光免疫法敏感度高,是检测心肌受损的有效方法,快速定性法在验证心肌梗死患者时起重要辅助作用。     

两种方法检测血清肌钙蛋白I比较

目的：比较两种方法对290份临床血清标本进行肌钙蛋白I检测效果。方法：用微粒子化学发光酶免疫法、免疫层析法检测临床标本,根据化学发光免疫法测定的定量结果分成〈0．04ug／L组、0．04-0．50ug／L组、〉0．50ug／L组,与免疫层析法的定性结果进行比较。结果：免疫层析结果与化学发光免疫法测定的〈0．04ug/L组、〉0．50ug/L组完全一致;与0．04-0．50ug／L组相比差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：化学发光免疫法敏感度高,是检测心肌受损的有效方法,快速定性法在验证心肌梗死患者时起重要辅助作用。