RASSF1A基因启动子区甲基化在胃癌组织中的检测

目的:检测胃癌组织中RASSF1A基因启动子区甲基化状况,并探讨其与临床病理特征的关系.方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specific PCIL MSP)检测39例胃癌组织,及相应癌旁组织和30例对照组织中RASSF1A基因启动子区甲基化水平.结果:胃癌组织中RASSF1A基因启动子区甲基化率显著高于癌旁组织甲基化率及对照组(64.1%vs 7.7%,0%,均P＜0.01).胃癌组织中不同年龄、性别、分化程度及淋巴结转移与否的RASSF1A基因甲基化率的差异均无统计学意义.结论:RASSF1A基因启动子区甲基化与胃癌的发生密切相关,MSP法是一种快速、敏感的基因甲基化检测方法,可用于胃癌的辅助诊断.     

胃癌患者血清RASSF1A基因启动子区甲基化检测

Ras相关结构域家族1A（RASSF1A）基因是近年发现的新型抑癌基因，其启动子区甲基化可能与胃肠道肿瘤的发生、发展密切相关。目的：检测胃癌患者血清RASSF1A基因启动子区甲基化情况，探讨其在胃癌早期诊断和预后评估中的可能作用。方法：以甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）检测47例胃腺癌患者、30例胃良性病变患者和30名健康对照者的血清RASSF1A基因启动子区甲基化情况，其中16例胃腺癌患者同时留取手术切除癌组织、癌旁组织标本以及术前、术后血标本行对照研究。结果：胃腺癌患者血清RASSF1A基因启动子区甲基化率为34．0％（16／47），显著高于胃良性病变患者（3.3％，1／30）和健康对照者（0％）（P〈0．01）。16例胃腺癌组织中5例（31．2％）检测到RASSF1A基因启动子区甲基化，其中4例（80．0％）术前、术后血清标本均检测到RASSF1A基因启动子区甲基化。血清RASSF1A基因启动子区甲基化与胃癌患者性别、年龄、肿瘤分化程度、有无转移以及血清癌胚抗原（CEA）水平均无相关性。结论：血清RASSF1A基因启动子区甲基化检测可望为胃癌的早期诊断和预后判断提供依据。     

胃癌组织RASSF1基因启动子区甲基化的意义

目的:探讨抑癌基因RASSF1A启动子在胃癌组织及胃良性病变中甲基化的发生情况及与临床特征的关系.方法:采用甲基化特异性聚合酶链反应(MS- PCR)方法检测32例胃癌组织及32例相应的癌旁组织,以及46例胃良性病变中RASSF1A基因甲基化发生情况.结果:在32例胃癌DNA标本中,RASSF1A基因甲基化发生率为62.5%(20/32).而在32例癌旁组织中,只有1例存在甲基化,占3.1%(1/32),二者之间比较差异有统计学意义(P<0.05).在胃良性病变,浅表性胃炎和萎缩性胃炎中甲基化发生频率分别为3.3%和37.5%.RASSF1A基因甲基化发生率与胃癌分化程度、肿瘤大小及淋巴结转移之间无显著相关性.结论:RASSF1A基因启动子区甲基化在胃癌的发生发展中起重要作用.     

骨肉瘤组织中RASSF1A基因启动子区甲基化状态观察及意义

目的 观察骨肉瘤组织中Ras相关区域家族1A(RASSF1A)基因启动子区域的甲基化状态,并探讨其临床意义.方法 应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测30例骨肉瘤组织及瘤旁组织中RASSF1A基因启动子区域的甲基化状态.结果 骨肉瘤组织中RASSF1A基因启动子区域发生甲基化14例(46.7％),瘤旁组织中4例(13.3％),两者比较,P＜0.05.RASSF1A基因启动子区甲基化与骨肉瘤患者的性别、年龄及血清碱性磷酸酶水平有关(P均＜0.05).结论 骨肉瘤组织中RASSF1A基因启动子区甲基化发生率高,其可能在骨肉瘤的发生发展中发挥重要作用.     

胃癌RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化与DNMT1表达的意义

目的探讨RAS相关区域家族1A（RASSF1A）基因启动子CpG岛甲基化和DNA甲基转移酶1（DN-MT1）的表达与胃癌发生的关系。方法运用甲基化特异性聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测胃癌癌旁正常组织和癌组织RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化发生率及DNMT1的表达情况。结果癌旁正常组织中RASSF1A基因启动子CpG岛甲基化发生率、DNMT1阳性表达率显著低于相应癌组织（P均〈0.01）。RASSF1A启动子CpG岛甲基化患者DNMT1阳性表达率与非甲基化患者比较无统计学差异（P〉0.05）。结论RASSF1A基因启动子区CpG岛甲基化和DNMT1的高表达可能与胃癌发生有一定关系。     

抑癌基因RASSF1启动子甲基化在肿瘤中的研究进展

肺癌和其它一些肿瘤中普遍存在人3号染色体短臂的杂合型丢失（loss of heterozygosity,LOH）,2000年Dammann等通过酵母双杂交技术从3p21.3分离鉴定出抑癌基因RASSF1A（rasassociation domain family 1A）。在许多人类肿瘤中存在RASSF1A启动子区域高甲基化,导致基因表观遗传失活。RASSF1A启动子区高甲基化可以作为肿瘤早期诊断和评价预后的一个候选分子标志。     

RASSF1A基因启动子区甲基化在贲门腺癌、食管下段鳞癌组织中的变化及临床意义

目的:比较RASSF1A基因甲基化在贲门腺癌、食管下段鳞癌不同病理阶段组织中的共性和差异.方法:33例贲门腺癌和36例食管下段鳞癌手术切除标本纳入本研究,每例标本选取癌组织,癌旁不典型增生组织(距癌3-5 cm),癌旁正常组织(距癌>5 cm)组织各1块,采用甲基化特异性PCR检测RASSF1A基因启动子区的甲基化情况...     

老年肺癌患者血清RASSF1A基因启动子异常甲基化检测及其临床意义

目的探讨老年肺癌患者血清RASSF1A基因启动子区域的甲基化状态及其临床意义。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应（MSP）技术，检测45例老年肺癌患者、20例肺部良性病变患者及15例健康志愿者血清RASSF1A基因启动子区域的甲基化状态，并分析其与临床病理参数之间的相关性。结果45例老年肺癌患者血清RASSF1A基因启动子区域异常甲基化15例，检出率为33．3％，而20例肺部良性疾病患者及15例健康志愿者中检出率均为0，差异有统计学意义（均为P〈0．01）。RASSF1A启动子异常甲基化在小细胞肺癌（SCLC）中有更高的检出率，但不同病理类型的非小细胞肺癌（NSCLC）异常甲基化的频率无明显差异。RASSF1A启动子异常甲基化与患者的性别、年龄、分化、分期和治疗干预无显著相关。结论RASSF1A启动子异常甲基化在老年肺癌患者血清中有着较高的检出率，可能成为肺癌诊断的分子标记。     

结肠癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化状态、mRNA表达变化及意义

目的观察结肠癌组织中RAS相关区域家族1A（RASSF1A）基因启动子甲基化状态、mRNA表达变化,并探讨其意义。方法分别采用甲基化特异性PCR（MSPCR）和RT-PCR技术检测80例结肠癌及癌旁正常结肠组织中RASSF1A基因启动子甲基化、mRNA。结果 80例正常结肠组织中RASSF1A基因启动子未见甲基化,80例结肠癌组织中RASSF1A基因启动子出现甲基化者58例,两者相比,P〈0.05。正常结肠组织均可检测到RASSF1A基因mRNA,结肠癌组织中RASSF1A基因启动子甲基化者未检测到RASSF1A基因mRNA、未甲基化者可检测到RASSF1A基因mRNA。RASSF1A基因启动子甲基化与结肠癌病理分型、淋巴结转移、远处转移和Dukes分期有关（P均〈0.05）。RASSF1A基因mRNA的表达与结肠癌Dukes分期有关（P〈0.05）。结论结肠癌组织中RASSF1A基因启动子出现甲基化,RASSF1A基因启动子甲基化者RASSF1A基因mRNA表达缺失,这可能与结肠癌的发生发展及转移有关。     

RASSF1A在胃癌组织中的表达及临床意义

目的研究Ras相关结构域家族（RASSF）1A抑癌基因mRNA在胃癌组织中的表达及其与临床病理参数的关系。方法应用RT-PCR法检测胃癌和癌旁组织中RASSF1A mRNA的表达情况,并以正常胃黏膜组织作对照。结果 RASSF1A mRNA在胃癌组织中的表达缺失率为45.0%（27/60）,高于癌旁组织1.7%（1/60）和正常胃黏膜组织0（0/20）,P均〈0.01;RASSF1A mRNA表达缺失与胃癌TNM分期、浸润深度和淋巴结转移相关,而与年龄、性别、肿瘤大小和分化程度无关。结论胃癌组织中RASSF1A mRNA表达缺失与胃癌发生、进展和转移相关,可作为胃癌诊疗和预后评估的分子标志。     

胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义

目的探讨胃癌组织中E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化的临床意义。方法采用甲基化特异性PCR方法,检测64例胃癌患者（胃癌组）病变组织及15例胃溃疡患者（对照组）正常胃组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化,分析二者与胃癌生物学特征的关系。结果胃癌组E-cadherin基因启动子区甲基化38例（59.38%）,S100A2基因启动子区甲基化36例（56.25%）;对照组分别为2、2例（13.3%、13.3%）。在胃癌不同大体分型、分化程度及淋巴结转移患者中,E-cadherin、S100A2基因启动子区甲基化率均有统计学差异（P〈0.05或〈0.01）。结论胃癌组织中的E-cadherin、S100A2基因启动子区呈高甲基化状态,甲基化状态与胃癌的分化、转移、侵袭有关。     

RUNX3、RASSF1A启动子高甲基化与胃癌进展转移的关系

目的:探讨胃癌RUNX3、RASSF1A基因启动子甲基化在胃癌进展转移中的作用及意义.方法:RT-PCR和MSP检测62例胃癌标本及56例正常胃黏膜组织RUNX3、RASSF1A基因mRNA表达及甲基化状况,免疫组织化学检测VEGF在RUNX3、RASSF1A甲基化与非甲基化胃癌组织及20例正常组织中的表达,并分析RUNX3、RASSF1A甲基化与VEGF表达的关系.结果:胃癌组织RUNX3与RASSF1A表达较正常组织均明显降低(0.629±0.461 vs 0.893±0.543,0.653±0.476 vs 0.858±0.581,均P<0.05),且RUNX3与RASSF1A甲基化率均高于正常组织(69.4%VS 26.8%,66.1%vs 23.2%.均P<0.01).胃癌组织中RUNX3、RASSF1A甲基化组mRNA表达量较非甲基化组明显降低(0.545±0.299 vs 0.736±0.291,0.562±0.208 vs 0.674±0.185,均P<0.05).RASSF1A甲基化与肿瘤TNM分期及浸润深度相走RUNX3甲基化与肿瘤淋巴结转移、血管侵犯及TNM分期相关(P<0.05).RUNX3甲基化组胃癌组织VEGF蛋白表达高于非甲基化组(86.0%vs57.9%),RUNX3甲基化与VEGF表达相关(P<0.05).结论:RUNX3、RASSF1A启动子高甲基化可能是导致其表达降低的原因,并与胃癌进展演变相关.RUNX3甲基化可能参与胃癌血管、淋巴管转移.     

宫颈癌C-33A细胞RASSF1A基因启动子CG位点甲基化及其临床意义

目的检测宫颈癌C-33A细胞RASSF1A基因启动子CG位点甲基化状态及mRNA,并探讨其临床意义。方法提取正常健康人宫颈上皮细胞和宫颈癌C-33A细胞总DNA和RNA,分别进行重亚硫酸氢盐测序（BSP）和RT-PCR扩增,检测RASSF1A基因启动子CG位点甲基化状态和RASSF1A基因mRNA。结果 C-33A细胞RASSF1A基因启动子CG位点呈现高甲基化状态,显著高于正常宫颈上皮细胞（P〈0.01）;C-33A细胞RASSF1A mRNA表达量明显低于正常宫颈上皮组织（P〈0.01）。结论宫颈癌C-33A细胞RASSF1A基因启动子CG位点呈高度甲基化状态,其RASSF1A mRNA表达明显受到抑制。RASSF1A基因启动子CG位点甲基化在宫颈癌发生过程中发挥重要作用。     

肝癌患者血液RASSF1A基因甲基化的检测及其临床意义

目的:探讨原发性肝细胞癌(HCC)患者血清中RASSF1A甲基化状况及RASSF1A甲基化作为一种新的肿瘤分子标志物在HCC早期无创性诊断中的意义和价值.方法:应用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测35例HCC患者血清和10例健康对照血清中RASSF1A启动子区甲基化状况.结果:35例HCC患者血清中RASSF1A启动子区甲基化阳性率为40%, 10份健康对照血清中未出现RASSF1A基因甲基化. RASSF1A基因甲基化与HCC患者性别、伴肝硬化、乙肝表面抗原、甲胎蛋白、肿瘤大小、有无包膜、有无门静脉癌栓及病理分级等临床病理参数无关.结论:RASSF1A基因甲基化在HCC的发生中起重要作用, RASSF1A基因甲基化可能是HCC新的肿瘤分子标志物.     

Caveolin-2基因甲基化状态在胃癌组织中的检测

目的:探讨Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化与胃癌发生发展的关系.方法:运用甲基化特异性PCR(MSP)技术检测33例胃癌组织及5例距肿瘤5 cm以上的癌旁正常胃组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化状态.结果:5例正常胃组织Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛均为甲基化阴性.33例胃癌组织中29例甲基化阳性,甲基化率为87.9%(29/33),其中20 例癌组织(60.6%)表现为完全甲基化,9例癌组织(27.3%)表现为部分甲基化.4例癌组织(12.1%)表现为甲基化阴性.统计学结果显示癌组织中Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率显著高于正常组织.结论:胃癌组织中存在较高的Caveolin-2基因启动子区域5'CpG岛甲基化率,甲基化可能与胃癌的发生有关.     

胃癌组织RASSF1A甲基化对其mRNA及蛋白表达的影响

目的研究RASSF1A基因启动子区甲基化对胃癌组织中RASSF1AmRNA及蛋白表达的影响。方法RT-PCR方法检测54例胃癌及癌旁正常组织RASSF1AmRNA表达,甲基化特异性PCR方法检测RASSF1A启动子区CpG岛甲基化状态;Westernblot方法检测20例胃癌及癌旁正常组织中RASSF1A蛋白表达。结果(1)RASSF1AmRNA和蛋白表达水平在胃癌组织中明显低于癌旁正常组织(A值分别为0·2589±0·2407比0·5448±0·2971,P<0·0001;0·1874±0·0737比0·6654±0·2201,P<0·0001);(2)RASSF1A在胃癌组织和正常组织中的甲基化频率分别为66·7%和14·8%,差异有统计学意义(P<0·0001);(3)在胃癌组织中,甲基化组RASSF1AmRNA的表达明显低于非甲基化组(0·1384±0·1142比0·5018±0·2463,P<0·0001)。结论胃癌组织RASSF1AmRNA和蛋白表达缺失或低下,与其启动子甲基化程度增高显著相关。     

抑癌基因APC、RASSF1A、WIF-1启动子区域甲基化与消化系肿瘤

消化系统肿瘤是常见的人类恶性肿瘤,目前研究认为抑癌基因启动子区域的异常甲基化与肿瘤的形成有关。在此综述APC、RASSF1A、WIF-13种抑癌基因启动子区域的异常甲基化与消化系统肿瘤的关系。     

LMXlA基因启动子甲基化以及在胃癌发展中的临床意义

目的通过检测胃癌癌旁距离原发灶不同距离组织及胃癌原发灶LMXlA基因启动子区甲基化状态的差异,分析正常胃组织、癌前病变及癌组织中该基因甲基化的动态变化以及LMXlA基因甲基化与胃癌原发灶病理学的关系,探讨LMXlA基因启动子区甲基化在胃癌阶段性发生及进展中的作用及临床意义。方法采用甲基化特异性PCR法（MSP）检测距胃癌癌灶边缘1、3、5cm组织及胃癌原发灶组织中LMXlA基因甲基化状态。结果LMXlA基因启动子区甲基化发生率在胃癌组织及距胃癌灶边缘1、3、5cm组织中分别为46．0％（23／50）、22．O％（11／50）、8．0％（4／50）和4．0％（2／50）,从距癌灶边缘5cm胃组织至胃癌原发灶组织中的表达中随距癌灶边缘距离的减少呈上升趋势,原发灶中甲基化阳性率显著高于距原发灶边缘3cm和5cm组织（x^2=15．42,P〈0．05;x^2=12．63,P〈0．01）。LMXlA基因启动子区甲基化发生率在正常胃组织、癌前病变组织及胃癌原发灶中分别为O％（0／25）、16．0％（4／25）和46．O％（23／50）,三者之间的差异具有统计学意义（×^2=24．85,P〈0．01）。LMXlA基因甲基化发生率在胃癌患者透浆膜组57．6％（19／33）显著高于未透浆膜组14．8％（4／27）（X^2=16．50,P〈0．05）;在转移淋巴结数大于7枚以上组52．9％（9／17）显著高于小于7枚组37．5％（6／16）（X^2=12．74,P〈0．05）。LMXlA基因甲基化在性别、年龄、不同大体类型、生长方式及分化程度上胃癌患者间差异无统计学意义。结论LMXlA基因启动子区异常甲基化可能与胃癌的临床进展有一定的相关性。