高等植物体细胞突变体离体筛选技术及其在林木抗盐育种上的应用

高等植物体细胞突变体离体筛选技术及其在林木抗盐育种上的应用李周岐（西北林学院）ＡＲＥＶＩＥＷＯＮＴＨＥＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＯＦＳＥＬＥＣＴＩＯＮＩＮＶＩＴＲＯＯＦＭＵＴＡＮＴＯＦＳＯＭＡＴＩＣＩＮＨＩＧＨＥＲＰＬＡＮＴＳＡＮＤＩＴ＇ＳＡＰＰＬＩＣＡＴ...     

果树离体诱变育种研究进展

对果树的离体物理、化学以及理化复合诱变技术、突变体的筛选和鉴定技术进行了综述,并提出了今后果树离体诱变育种的研究方向。     

瓜叶菊耐热无性系Z1-1-1的离体筛选与初步鉴定

以瓜叶菊增殖期的愈伤组织和丛生芽为材料,用高温胁迫和羟脯氨酸 (HYP)分别作为直接和间接选择压,进行瓜叶菊耐热无性系的离体筛选.结果表明:1) 40℃ 16～20h胁迫处理可以作为瓜叶菊耐热无性系离体直接筛选的适宜选择压,30 mmol·L-1 HYP 可以作为瓜叶菊耐热无性系离体间接筛选的适宜浓度;2) 经过高温间隔胁迫多代筛选获得了与其母株相比耐热性有了很大提高的无性系Z1-1-1;3) Z1-1-1 和其对照母株Z1的30 d移栽苗在叶片厚度、气孔指数、栅栏组织厚度/海绵组织厚度方面存在显著差异,另外,成年植株Z1-1-1 和Z1在花的育性上差异明显,Z1结实率85%以上,而Z1-1-1的结实率在人工授粉的情况下也仅1.0%;4) 在40℃ 24h胁迫后,Z1-1-1的热害指数、细胞丙二醛(MDA)含量、电解质伤害性外漏率远远低于其对照母株,而POD、SOD活性明显高于其对照母株,存在显著性差异.     

拟南芥晚花突变体的筛选

在植物的生命周期中从营养生长到开花是发育过程的重要转折。花启动的时机对生殖生长的成功至关重要。植物开花时间突变体的获得,在揭示植物花发育的奥秘中起了十分重要的作用。本研究以模式植物拟南芥(A rabid op sis tha liana)为材料,将野生型拟南芥(Co lum b ia生态型)的种子用甲基黄酸乙酯(EM S)诱变处理,将经诱变处理的种子M1播种收获M2种子用于突变体筛选。以初生莲座叶片数作为筛选指标,筛选出一株晚花突变体,命名flx(flow ering locus x)。     

毛棉杜鹃组培苗的生长基质筛选研究

毛棉杜鹃(Rhododendron moulmainenseJ.D.Hooker)是极具观赏价值的常绿杜鹃花类小乔木。以泥炭、黄心土、珍珠岩或河沙等为基础材料,设置了5种基质配方,比较研究了毛棉杜鹃组培幼苗在5种基质上的生长与根系发育。结果表明:以泥炭∶河沙∶珍珠岩体积比为3∶2∶1作为基质进行炼苗,移栽成活率最高,可达80%。以泥炭∶黄心土体积比为1∶1作为栽培基质效果最好;6个月后的平均苗高最佳,根系活力最大。该研究结果可为毛棉杜鹃育苗提供基质参考。     

照白杜鹃离体快繁体系建立及种质试管保存

以照白杜鹃新生嫩芽为外植体,应用均匀设计法筛选其最适合的嫩芽基部直接再生芽苗、生根及种质试管保存的培养基,结果表明,最适合的基部直接再生芽苗诱导培养基为:DR ZT 3.00 mg.L-1,诱导率达96%以上;生根培养基:MS(改良) IAA0.50 mg.L-1 IBA 0.10 mg.L-1 KT 0.20 mg.L-1,生根率达98%以上;试管保存培养基:N-68 B92.30 mg.L-1 根皮苷1.50 mg.L-1,保存时间可达36个月以上.并对再生植株进行了快繁,35 d为一个周期,增殖倍数平均达60倍以上.常温条件下,采取"矮化延缓生长"的方法可在试管内保存种质资源.     

大兴安岭野生蓝莓离体快繁关键技术

利用大兴安岭野生蓝莓优良种源的茎段为外植体,对野生蓝莓离体培养所需的最佳灭菌方法、最适的增殖和生根培养基及培养条件进行研究的结果表明:野生蓝莓离体快繁最佳的灭菌方法为0.1％升汞浸泡3min;最适增殖培养基为WPM(改良)+ZT0.5mg/L,分化率可高达90％左右;最适生根培养基为1/2WPM(改良)+IBA 1 mg/L,接种后首先放置于暗培养室中暗培养20d,然后转移到光照下培养,生根率可高达65％以上.     

橡胶树胚珠离体培养与体胚植株再生的研究

对8个品种橡胶树未授精胚珠离体培养试验结果,8个品种都诱导出愈伤组织,其中6个品种诱导出胚状体,3个品种获得体胚植株。试验结果表明:不同品种橡胶树未授精胚珠在诱导愈伤组织、继代增殖、胚分化和植株再生培养存在很大差异,热研8-79、云研73-46愈伤组织的诱导率高,但未能分化出胚状体;云研73-477、RRII105等品种,愈伤组织的诱导率低,但继代增殖培养时能诱导出新鲜的胚性愈伤组织,获得体胚植株;云研77-2、云研77-4诱导出的是畸形胚,未获体胚植株,但其胚状体诱导率比用花药诱导的高,有希望通过进一步研究,优化培养方法、培养条件,最终构建出这两个抗寒高产优良品种的体胚植株再生体系。     

榛子的离体培养研究

对杂交榛子(代号80-11)进行了离体培养研究。试验结果表明,外植体的选取是离体培养的关键,最佳外植体为:休眠后的基生枝条在室内用营养液培养后萌发的嫩梢。通过最佳培养基组合试验,萌发率可达90%以上,增长系数可达2.2±0.5。诱导阶段的培养基为DKW+BA5mg/L+IBA0.01mg/L+GA30.2~0.3mg/L+葡萄糖30g/L+琼脂6g/L。继代培养时调整BA为3~4mg/L、GA3为0.1mg/L。根据在继代过程中出现的内生菌污染问题,试验采用在培养基中加500倍的百菌清来解决。     

灰背杜鹃菌根真菌的分离与鉴定及DGGE的应用

应用传统的培养方法分离菌根真菌,应用ITS rDNA分子生物学手段,进行了菌株的分类鉴定,并结合DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术对菌根真菌进行检测。传统培养得到了2种与杜鹃花菌根真菌亲缘关系十分密切的真菌,分别为Phialocephala fortinii和Epacris pulchella root associated fungus。DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术检测到1种菌根真菌为Rhizoscyphus ericae。     

墨西哥落羽杉离体培养及再生体系的建立

以墨西哥落羽杉的幼苗为起始外植体,研究其离体培养及再生体系的建立.结果表明:幼苗在DCR BA0.5 mg·L-1 IBA 0.2 mg·L-1培养基上诱导分化效果最好,分化频率80%以上,平均每个外植体产芽2～5个;诱导的丛生芽转入DCR Gln 500 mg·L-1培养基中伸长效果最佳;生根培养基为3/4DCR 0.05?,生根率在75%以上.     

墨西哥落羽杉耐盐能力及其无性系之间的差异

墨西哥落羽杉耐盐能力可达5g/L,在该浓度下大多能正常生长。同时,试验还比较了复选出的11个墨西哥落羽杉无性系在5g/LNaC l浓度下的生长量、生长势、成活率以及电导率4个指标,结果显示该4个性状在参试的无性系间差异均达显著水平,表明开展墨西哥落羽杉耐盐无性系选育是可行的。     

墨西哥落羽杉优良单株无性系苗期测定

以897个墨西哥落羽杉优良单株无性系(包括速生型、奇特株型和金叶类型)为试验材料,开展无性系苗期比较试验。方差分析结果显示,苗高、地径无性系间差异均达到极显著水平,苗高、地径的广义遗传力分别为0.267 3和0.202 9,表明开展速生型无性系选择是可行的。通过构建包括地径、苗高两生长性状的选择指数,以10%的入选率,复选出墨西哥落羽杉速生型无性系77个,奇特株型无性系8个,叶色金黄型无性系5个。     

红掌离体培养

本文以红掌叶片、叶柄为外植体,从无菌系建立,进行增殖、复壮、生根培养,驯化炼苗等环节进行试验研究,探寻出一整套红掌组织培养快繁技术。能在较短的时间内,建立大量无菌系苗。     

现代郁金香离体培养与快速繁殖

以现代郁金香的内层鳞片、幼茎和茎尖为外植体进行了离体培养与快速繁殖试验,筛选出最佳培养基;（1）诱导鳞片产生丛芽为MS＋0．4～1．0mg／LBA＋0．4mg／LNAA;（2）茎尖诱导培养为MS＋2mg／LBA＋0．1mg／LNAA;（3）茎段诱导培养为MS＋1．0mg／LBA＋0．2mg／LNAA）（4）丛芽增殖培养为MS＋0．4mg／LBA＋0．2mg／LNAA和MS＋0．4mg／LBA＋0．2mg／LIAA;（5）生根诱导培养为1／2MS＋0．4mg／LKT和0．1～1．0mg／LNAA。     

芳樟的离体繁殖

建立了芳樟离体繁殖体系。采用0.1%HgCl_2溶液对芳樟新生嫩茎进行消毒,适宜的消毒时间为10min。1mm茎尖的成苗率达到85.3%,在附加BA0.5mg/L、GA_30.2mg/L、IBA0.2mg/L的MS培养基上,芳樟的增殖系数可达15,试管苗大规模移栽的成活率达90%以上。     

核桃茎段器官离体再生培养

以核桃(Juglans regia)茎段为外植体,对核桃茎段器官离体再生培养技术进行研究。结果表明:4—5月采集的核桃茎段,通过系列表面消毒后,0.1%升汞灭菌10min,效果最佳。在附加1.0mg/L6-BA的DKW诱导培养基中,萌芽率为60%以上。通过SH+0.5mg/LBA+0.1mg/L IBA进行增殖培养,芽增值系数为4.32。以1/2SH+8.0mg/LIBA进行不定根诱导,生根率为63.18%,根数2~3条。