血管内皮细胞生长因子基因转染皮肤成纤维细胞的实验研究

为改善人工复合皮在临床上的应用效果 ,构建人血管内皮细胞生长因子 16 5 (hVEGF165)基因重组载体pcDNA3,并转染成纤维细胞。检测转基因细胞培养上清液VEGF浓度 ;用转基因细胞培养上清液刺激人脐静脉血管内皮细胞 ,观察内皮细胞增殖速度 ;通过Miles实验检测VEGF的生物学活性。结果显示 ,转基因成纤维细胞能够表达一定浓度的VEGF,且具有加速体外培养人脐静脉血管内皮细胞 (HUVEC)生长和增强血管通透性的生物学活性。提示转hVEGF165基因成纤维细胞可修饰人工皮的真皮面。     

瘢痕疙瘩周围皮肤成纤维细胞凋亡的实验研究

探讨瘢痕疙瘩周围皮肤是否存在异常成纤维细胞,以期进一步了解瘢痕疙瘩的发展机制.体外培养瘢痕疙瘩及其周围皮肤成纤维细胞,运用流式细胞仪比较无血清培养条件下和FasMcAb作用下瘢痕疙瘩及其周围皮肤成纤维细胞凋亡率的差异.结果显示,无血清培养条件下瘢痕疙瘩周围皮肤(距瘢痕疙瘩边缘0.5cm范围内)成纤维细胞凋亡增长率介于瘢痕疙瘩和正常皮肤之间.FasMcAb作用下,瘢痕疙瘩周围皮肤成纤维细胞凋亡率增加,与正常皮肤比较差异有显著性意义(P<0.01),但总体上与瘢痕疙瘩差异无显著性意义(P>0.05).研究表明,瘢痕疙瘩周围皮肤至少有部分成纤维细胞不能正常凋亡.     

碱性成纤维细胞生长因子促进肌皮瓣神经恢复的实验研究

目的研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对肌皮瓣营养神经再恢复的作用. 方法 30只Wistar大白鼠,随机分为bFGF实验组、等渗盐水对照组、bFGF全身用药组.建立腓肠肌皮瓣模型,保留动静脉带,离断支配神经,再将神经断端行端端吻合.实验组术后从肌皮瓣基底留置硅管注射200 U/ml的bFGF,0.1 ml,1次/d,连续2周,同时等渗盐水组从硅管内注入0.1 ml等渗盐水,bFGF全身用药组从健侧肌肉内注射等量的bFGF 200 U/ml,12周后行腓肠肌皮瓣及再生神经的组织学检查及肌皮瓣肌肉、皮肤内神经组化染色检查. 结果实验组肌肉及皮肤组织内神经末梢灰度、数密度、面密度各项与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),而等渗盐水组与全身用药组比较,差异无统计学意义(P>0.05). 结论 bFGF持续局部用药明显促进周围神经再生、肌皮瓣肌肉营养及皮肤感觉功能的恢复.     

牛皮肤成纤维细胞体外培养系统的建立

本研究用组织块培养法和冷消化培养法对牛皮肤成纤维细胞进行原代培养和传代培养,并探讨了传代的方法,结果表明建立的方法可用于牛皮肤成纤维细胞的建系。     

外源性碱性成纤维细胞生长因子促进腮腺创伤修复的实验研究

目的 :观察外用重组碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)对腮腺创伤修复的促进作用。方法 :采用宏观、体视学、显微镜图象分析方法 ,对外用重组bFGF对大鼠腮腺创伤修复的影响进行动态分阶段分析研究。结果 :外用重组bFGF明显促进了肉芽组织和毛细血管的增生 ,增强了创伤性炎症增生反应 ,同时无促进腺泡细胞增生和涎液分泌的作用。结论 :外用重组bFGF促进腮腺创伤的愈合 ,减少腮瘘并发证的发生 ,对腮腺创伤的治疗有重要的临床意义     

碱性成纤维细胞生长因子与血脑屏障的实验研究

血脑屏障（ＢＢＢ）能否让碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）通过并发挥其神经营养因子作用其机制尚不明确。本文采用１２５Ｉ－标记ｂＦＧＦ经动物腹腔注射后２５ｍｉｎ检测实验动物全身各组织放射活度,计算各组织ｂＦＧＦ的含量。结果：脑ｂＦＧＦ含量在成年鼠组为（１７．３６±８．３０）ｐｇ／ｍｇ．新生鼠组为（３１．９６±１０．１１）ｐｇ／ｍｇ,新生鼠缺氧组为（５６．６８±１５．７９）ｐｇ／ｍｇ,各组相差具有显著意义（Ｐ＜０．０５～０．０１）;以同一时相血液ｂＦＧＦ含量为参照,成年鼠组脑ｂＦＧＦ含量占全血ｂＦＧＦ含量的（６．５１±３．８０）％,在新生鼠组为（１４．０９±３．１２）％,在新生鼠缺氧组为（２６．２４±１１．８３）％,各组相差具有显著意义（Ｐ＜０．０５～０．００５）。结果提示：ｂＦＧＦ可通过血脑屏障。新生鼠组及其在缺氧状态下应用ｂＦＧＦ,可使脑内ｂＦＧＦ含量较成年鼠组显著增多,故ｂＦＧＦ可能起保护作用。     

碱性成纤维细胞生长因子的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)是成纤维细胞生长因子蛋白(fibroblast growth factors,FGFs)家族中的一员。目前已发现至少22种FGF,其中FGF-1(aFGF)、FGF-2(bFGF)及FGF-7的研究较为深入。bFGF是哺乳动物和人体中一种非常微量的活性物质,因其具有     

碱性成纤维细胞生长因子治疗皮肤创面65例

我们自 1999年 4月～ 8月应用碱性成纤维细胞生长因子 (ｂＦＧＦ)治疗伴表皮糜烂及溃疡的皮肤疾病 6 5例 ,取得较为满意的效果。报告如下。资料与方法　 6 5例为皮肤性病门诊及住院部病人。男 44例 ,女 2 1例 ;年龄 15～ 6 2岁 ,病程 1ｄ～ 8年。疾病种类 :(1)糜烂性、大疱性皮肤病 31例中 :天疱疮 3例 ,类天疱疮 4例 ;药疹 :重症多形红斑 2例 ,大疱性表皮坏死松解型 2例 ;皮肤外科手术后创面 :皮肤磨削痤疮后遗瘢痕 10例 ,白癜风表皮移植术后 7例 ,酒渣鼻切割术后 3例。 (2 )溃疡性疾病 34例中白塞综合征 3例 ,静脉曲张综合征 7例 ,生殖器…     

c-ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响

目的 研究原癌基因c—ski对大鼠皮肤成纤维细胞抗辐射作用的影响，并探讨其可能的机理。方法 采用Annexin—V—FITC—PI标记的方法。通过流式细胞仪检测2—8Gy的软X线照射对培养的大鼠皮肤成纤维细胞凋亡的影响；观察转染c—ski基因后细胞凋亡的变化；并采用Western blot检测c—ski对凋亡蛋白Bax、Bcl-2表达的影响。结果 软X线照射以剂量依赖的方式增加细胞凋亡，并且随着时间的延长进一步增加，大约在36h时达到峰值。转染c—ski基因使4Gy照射24h后的成纤维细胞凋亡率显著下降。转染c—ski基因48h后，Bax的表达和对照组差异无统计学意义，而Bcl-2的表达显著增加。结论 c—ski可降低成纤维细胞的辐射敏感性，促进Bcl-2的表达可能是其机理之一。     

不同温度保存的山羊皮肤成纤维细胞的培养

为了丰富获取山羊成纤维细胞的途径．本研究将采集到的幼山羊耳廓皮肤组织在4℃和20℃下保存一段时间后,进行原代和传代培养其成纤维细胞,并将传代培养的成纤维细胞经冷冻一复苏后进行继代培养。其结果显示。与对照组（新鲜皮肤1成纤维细胞在原代培养时的贴壁需要2d和达到80％汇合需要8d相比,皮肤在20℃下保存12h和24h后,其成纤维细胞的原代培养贴壁时间（3-6d）和80％汇合时间（12～14d）有所延迟;而皮肤在4℃下保存24h和48h后,其成纤维细胞的贴壁所需要时间为3d,达到80％汇合所需要时间为10d;与对照组传代培养达到80％;12合所需要的时间f3d）相比,源于在20℃和4℃下保存的皮肤原代成纤维细胞．经传代培养后,其继1代和继2代成纤维细胞可在第3d或4d达到约80％汇合;与对照组传代培养的成纤维细胞经冷冻一复苏后进行继代培养时,达到80％i12合所需要的时间（4d）相比,源于在20℃和4℃下保存的皮肤传代培养成纤维细胞,无论保存时间长短,均可在开始培养后第4或第5d达到约80％;12合。上述结果表明,山羊死亡后在4—20℃下即使保存1-2d,仍能利用其皮肤获得与源于新鲜皮肤的成纤维细胞相似的正常的成纤维细胞。     

全身放射损伤对皮肤伤口成纤维细胞增殖的影响

目的 研究合并全身放射损伤时创伤局部成纤维细胞数量减少与细胞增殖的关系。方法 采用组织学和免疫组化方法检测大鼠皮肤伤口局部成纤维细胞数量变化及与细胞增殖密切相关的增殖性细胞核抗原（PCNA）、细胞周期素E（Cyclin E)及细胞周期素依赖性激酶4（CDK4）含量变化。结果 合并全身放射损伤时皮肤伤口局部成纤维细胞数量在伤后5、7和10d显著少于单纯创伤组，并显著延迟高峰期；伤口局部PCNA和CDK4含量在务后3、5和7d显著低于单纯创伤组，伤口局部Cyclin E含量在伤后3、5、7和10d也显著低于单纯创伤组。结论 全身放射损伤可抑制伤后早期细胞周期G1期到S期的转变，抑制细胞增殖，从而使伤口局部成纤维细胞数量减少，这可能是合并全身放射损伤时创伤难愈的重要原因。     

CD44分子在正常皮肤和银屑病表皮的表达

采用免疫组化染色研究正常人皮肤的CD44表达情况，发现CD44有选择性地存在于皮肤的不同部位，表皮中基底细胞及棘细胞表面有CD44，而颗粒层及角质层均无CD44。真皮组织无CD44，而毛囊外根鞘，皮脂腺毛囊口及外分泌汗腺均有CD44表达，测定了银屑病患者表皮的CD44，结果是损害处表皮的棘细胞及基底细胞表面CD44比无损害的治愈后的表皮要显著得多，用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）分析CD44的类型，结果为CD44的标准型。     

寻常型、关节病型银屑病患者红细胞和血小板参数临床意义的初步分析

目的：观察寻常型和关节病型银屑病患者外周血红细胞和血小板参数的变化,并对其临床意义进行初步分析。方法利用全自动流式血细胞分析仪检测关节病型银屑病（关节病型组）患者51例、寻常型银屑病（寻常型组）患者51例和正常对照者（对照组）51名外周静脉血中红细胞和血小板参数。结果①寻常型组红细胞计数明显低于对照组（P=0.000）和关节病型组（P=0.007）;红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白含量和红细胞平均血红蛋白浓度均明显高于对照组（P=0.000）和关节病型组（P＜0.05）;红细胞体积分布宽度明显小于对照组（P=0.000）,与关节病型组比较,差异无统计学意义（P=0.671）。②关节病型组血小板计数和血小板压积明显高于对照组（P=0.000）和寻常型组（P=0.001）;寻常型组血小板平均体积明显小于对照组（P=0.000）和关节病型组（P=0.000）,血小板分布宽度明显大于对照组（P=0.000）和关节病型组（P=0.000）。结论银屑病患者红细胞和血小板的生成和功能存在异常,关节病型与寻常型之间亦存在明显差异,其中的临床意义值得进一步研究和探索。     

Survival of human diploid skin fibroblasts from normal individuals after X-irradiation

The cytotoxic effect of X-rays was measured by a colony formation assay in multiple experiments with fibroblast cell strains derived from 24 presumably normal individuals, received as 65 different coded and blinded samples. Each strain was received on two or more occasions at different times and bearing different codes. The means and standard deviations of the survival curve parameters for the 24 strains were: D0 = 123 +/- 23; D10 = 273 +/- 42 cGy. The D0 ranged from 89 to 175 and the D10 from 196 to 372 cGy. The degree of interexperimental variation, though generally minimal, differed considerably among cell strains. There was no systematic effect of passage level, cloning efficiency, serum lot, age or sex of the donor on X-ray survival. These results confirm that the intrinsic radiosensitivity varies significantly among skin fibroblasts isolated from clinically normal individuals, apparently owing to as yet unidentified genetic factors.     

MRI of the hand in psoriatic and rheumatical arthritis

Magnetic resonance imaging (MRI) of the hand in patients with psoriatic arthritis (PA) was evaluated and compared with MRI of the hand in patients with rheumatoid arthritis (RA). Both MRI and X-ray examinations of the hands were performed in 28 PA patients and 18 RA patients.The MRI showed a PA pattern characterized by a more pronounced soft tissue swelling as compared with RA patients. Diffuse and pronounced periarticular oedema that spread to the subcutis was evident in 24 (85.7 %) PA patients. Subchondral changes were characteristic of PA patients, and were observed in 12 of 28 PA patients (42.8 %). In these cases, conventional X-ray examination failed to show any bone change. These two changes were not seen in RA patients. Our preliminary results indicate that MRI might play a role in differential diagnosis between PA and RA especially in the early phase of the disease in which conventional radiological examination is negative.     

重组核心蛋白多糖对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞增及生物学活性的影响

目的　观察重组核心蛋白多糖 (Decorin)对人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞体外增殖和生物学活性的影响 ,以探讨Decorin在增生性瘢痕形成和成熟中的作用。　方法　分离培养人正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞 ,分别加入不同质量浓度 (0 .0 1,0 .1,2 ,10 μg/ml)的重组Decorin ;培养 12 ,2 4 ,4 8h用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐 (MTT)法测定细胞增殖速度 ;培养 4 8h用流式细胞仪检测细胞周期和凋亡 ;收集细胞培养上清 ,ELISA法检测TGF - β1蛋白水平 ,放射免疫方法检测Ⅰ、Ⅲ型前胶原蛋白 (PCⅠ、PCⅢ )含量。　结果　 2 ,10 μg/ml的Decorin可有效抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,明显增加两种细胞处于G1期的百分比(P <0 .0 1) ;并抑制细胞分泌转化生长因子 (TGF) - β1和PCⅠ、PCⅢ ,下调PCⅠ /PCⅢ比值。实验组和对照组 (未加重组Decorin)均未检测到终末期凋亡细胞。　结论　Decorin可抑制正常皮肤和增生性瘢痕成纤维细胞的增殖及其生物学活性 ,可能在预防增生性瘢痕形成和促进瘢痕成熟中起一定的作用。     

In vitro differentiation characteristics of human skin fibroblasts: correlations with radiotherapy-induced breast fibrosis in patients

PURPOSE: To determine whether there is an association between dermal fibroblast differentiation characteristics in vitro and breast fibrosis developing in patients following radiotherapy for breast cancer. MATERIALS AND METHODS: Three hundred and eighty-five patients had been characterized for the degree of breast fibrosis and the level of clinical risk factors for fibrosis as established by logistic regression. Early-passage fibroblasts from 79 patients with a high (HR) or low (LR) level of risk factors were studied in vitro. The percentage differentiated cells (%DC) 7 days after 0 and 8 Gy was scored, and unirradiated colonies were scored for the ratio of early:late fibroblast differentiation stages (E:L ratio). RESULTS: %DC: For the 0 Gy data there was a significant interpatient variation (CoV = 55%, p = 0.0001). HR patients with breast fibrosis had a higher %DC compared with patients without (p = 0.017). E:L ratio: for HR patients there was a significant interpatient variation (82%, p = 0.0030) and a lower E:L ratio for patients with fibrosis compared with those without (p = 0.086), but for LR patients this relationship was reversed (p = 0.079) CONCLUSIONS: There was a true interpatient variation in the in vitro parameters of fibroblast differentiation but insufficient correlation with observed fibrosis after radiotherapy for use as a predictive test.     

模拟失重环境碱性成纤维细胞生长因子对人牙周膜成纤维细胞增殖的影响

目的 探讨在模拟失重环境下碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对人牙周膜成纤维细胞(hPDLF)增殖的影响. 方法 试验分对照组、模拟失重组和模拟失重加hPDLF组3组.采用酶消化组织块培养法分离、培养原代hPDLF.应用噻唑蓝比色法,检测模拟失重条件下,不同时间和不同浓度的bFGF对hPDLF增殖的影响. 结果 在模拟失重12h、24h组hPDLF增殖较对照组没有显著差别,在48h、72h模拟失重组较对照组显著降低,差异有统计学意义(t=7.303、8.668,P<0.01).模拟失重48 h时bFGF浓度在50～100μg/L范围内加bFGF组hPDLF增殖高于模拟失重组,差异有统计学意义(P<0.05),而bFGF浓度为1～10μg/L时,两组没有显著差别. 结论 模拟失重在48 h、72 h对hPDLF的增殖有抑制作用,模拟失重环境bFGF浓度在50～100μg/L范围内具有促进hPDLF增殖的效应.     

EGF对增生性瘢痕和正常皮肤成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成的影响

增生性瘢痕是皮肤损伤后遗留的高出于周围皮肤、发红、坚硬的病理结构。如何预防增生性瘢痕一直是整形外科医生面临的一个主要问题。以往的研究发现表皮细胞生长因子 (ＥｐｉｄｅｒｍａｌＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ,ＥＧＦ)可以促进上皮再生 ,加快创伤愈合 ,而新生的上皮组织具有防止增生性瘢痕形成的作用[1] 。ＥＧＦ还可以直接抑制创面肉芽组织成纤维细胞合成胶原蛋白的能力[2 ] 。单纯应用ＥＧＦ对鼠的ＮＲＫ细胞 (一种成纤维细胞 )合成胶原蛋白的能力没有明显的影响 ,但ＥＧＦ可以拮抗ＴＧＦ- β使ＮＲＫ细胞合成胶原能力增加的作用[3] …